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Chemical Research in Chinese Universities 2010年第4期26卷 662-666页

作者： ZANG Jun-ting Qi Xin Li Shu-qiang Li Dong-song GONG Yu-bao YANG Chen XU Feng LiU Jian-guo Department of Bone and Joint Surgery First Hospital of Jilin University Changchun 130021 P R. China

A novel scaffold containing collagen-i/polylactic acid（PLA）/nanohydroxyapatite（nHA） was prepared via co-electrospinning method. Different target substrates were used to improve the collection efficiency of this scaffold. The properties of the novel scaffold were compared with those of conventionally prepared ones. Compared to con- ventional method, the modified method was more efficient in producing the scaffold. Moreover, the porosity, thickness, and morphology of the novel scaffold were better than those of scaffolds prepared by conventional methods. The properties of collagen-i, collagen-i/PLA and collagen-i/PLA/nHA scaffolds were also compared. Diameters of the electrospun fibers ranged from 180 to 405 nm, and roughness was present on the surface of the fibers due to the deposition of crystals of nHA along the long axis of the fibers. The fibers of the collagen-i/PLA/nHA scaffold and the fibers of natural bone tissue had similar structure.

关键词： Electrospinning collagen-i PLA Nanohydroxyapatite

50Hz正弦交变磁场对体外培养大鼠成骨细胞分化及BMP-2和collagen-i基因表达的影响

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中国医学物理学杂志 2010年第5期27卷 2173-2177页

作者：周建李雪雁陈克明李志锋程国政明磊国韩桂秋朱瑞请兰州理工大学生命科学与工程学院甘肃兰州730050 兰州军区兰州总医院骨科研究所甘肃兰州730050

目的:研究频率为50 Hz不同强度正弦交变电磁场(electromagnetic fields,EMFs)对体外培养成骨细胞(Osteoblasts,OB)分化的影响。方法:体外分离培养大鼠颅骨成骨细胞,传代后随机分为9组,分别用频率50 Hz,磁场强度为0 mT(对照组)、0.9 mT、... 详细信息

目的:研究频率为50 Hz不同强度正弦交变电磁场(electromagnetic fields,EMFs)对体外培养成骨细胞(Osteoblasts,OB)分化的影响。方法:体外分离培养大鼠颅骨成骨细胞,传代后随机分为9组,分别用频率50 Hz,磁场强度为0 mT(对照组)、0.9 mT、1.2 mT、1.5 mT、1.8 mT、2.1 mT、2.4 mT、2.7 mT和3.0 mT的正弦交变磁场处理,30 min/次/d。倒置相差显微镜下观察细胞形态;第3 d、6 d、9 d测定钙含量;第10 d茜素红钙化结节染色;RT-PCR法检测BMP-2和collagen-i基因的表达。结果:磁场处理了3 d以后成骨细胞呈漩涡样分布;第9 d磁场组钙盐沉淀量普遍高于对照组,尤以1.8 mT显著高于对照(Pcollagen-i基因表达水平高于对照组,其中1.8 mT和2.1 mT组表达量明显较高。结论:本实验所用50 Hz,0.9 mT^3.0 mT的正弦交变磁场能促进体外培养成骨细胞分化成熟,并提高BMP-2和collagen-i的基因表达水平,其中以1.8 mT效果最为明显。

关键词：成骨细胞电磁场 collagen-i BMP-2

Monocyte-derived fibrocytes elimination had little contribution on liver fibrosis

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Hepatobiliary & Pancreatic Diseases international 2019年第4期18卷 348-353页

作者： Yoshinori Ozono Kotaro Shide Fumiyo Toyoshima Yuuka Takaishi Mai Tsuchimochi Ayako Kamiunten Takuro Kameda Kenichi Nakamura Tadashi Miike Kazunori Kusumotoa Hisayoshi iwakiri Satoru Hasuikea Kenji Nagata Akira Sawaguchi Kazuya Shimoda Department of Gastroenterology and Hematology Faculty of MedicineUniversity of Miyazaki5200 KiharaKiyotakeMiyazaki 889-1601Japan Department of Anatomy Ultrastructural Cell BiologyFaculty of MedicineUniversity of Miyazaki5200 KiharaKiyotakeMiyazaki 889-1601Japan Department of Liver disease University of Miyazaki HospitalMiyazakiJapan

Background:Monocyte-derived fibrocytes play an important role in the progression of fibrosis in the skin,lungs,heart and ***,the contribution of fibrocytes to liver fibrosis is *** aim of this study was to investigate whether fibrocytes contributed to fibrosis progression in the livers of carbon tetrachloride(CCl 4)-treated ***:C57BL/6J mice were divided into 4 groups:normal control group,CCl 4-treated group,CCl 4+control liposome-treated group,and CCl 4+clodronate liposome-treated *** the elimination of systemic monocyte and monocyte-derived fibrocyte,one group was treated with clodronate liposome,and another group with control liposome as a *** 4 weeks of treatment,hepatic mononuclear cells were subjected to immunofluorescent(iF)staining and fluorescence-activated cell sorter(FACS)analysis to detect *** of collagen-positive Sirius red stained area and collagen-i mRNA expression in the liver were performed to evaluate the degree of liver fibrosis ***:in the liver of the CCl 4-treated and CCl 4+control liposome-treated groups,the number of fibrocytes,the area positive for Sirius red staining and collagen-i mRNA expression significantly increased compared with those in the normal control *** the liver of the CCl 4+clodronate liposome-treated group,few fibrocytes was observed as in the normal control group,but Sirius red staining positive area and collagen-i mRNA expression were increased and equivalent to the CCl 4-treated and CCl 4+control liposome-treated ***:Monocyte-derived fibrocytes play a minimal role in CCl 4-induced liver *** other than fibrocytes such as hepatic stellate cells play a central role in liver fibrosis.

关键词： Fibrocytes Liver fibrosis Carbon tetrachloride Clodronate collagen-i

NF-κB信号通路在金黄色葡萄球菌诱导奶牛乳腺成纤维细胞转分化中的作用

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中国兽医学报 2017年第9期37卷 1699-1704页

作者：杨彬徐丹丹孙志鹏王建发单旭菲张安武瑞黑龙江八一农垦大学动物科技学院黑龙江大庆163319

用热灭活金黄色葡萄球菌(0,104,105,106,107和108 CFU/mL)刺激奶牛乳腺成纤维细胞,24h后采用Real time-PCR方法检测TNF-α、iL-1β、iL-6和TGF-β1mRNA的表达量,Western blot方法检测α-SMA、collagen-i及pNF-κB p65蛋白的表达量。使用NF-κB通路抑制剂PDTC预处理细胞,再用105 CFU/mL热灭活金黄色葡萄球菌刺激细胞,24h后采用Real time-PCR方法检测TNF-α、iL-1β、iL-6和TGF-β1 mRNA的表达量,Western blot方法检测α-SMA、collagen-i及p-NF-κB p65蛋白的表达量,免疫荧光法检测α-SMA及collagen-i蛋白的表达量。结果显示,不同浓度热灭活金黄色葡萄球菌处理细胞的TGF-β1mRNA的表达量显著升高(PiL-1β、iL-6mRNA的表达量也逐渐升高(Pcollagen-i蛋白的表达量均能显著升高(Pcollagen-i蛋白的表达量最高。抑制剂PDTC能够显著抑制TNF-α、iL-1β、iL-6和TGF-β1 mRNA的表达量(Pcollagen-i及p-NF-κB p65蛋白的表达量(P<0.05)。结果提示,NF-κB信号通路在金黄色葡萄球菌诱导奶牛乳腺成纤维细胞转分化为肌成纤维细胞过程中发挥重要作用,本研究为揭示金黄色葡萄球菌性乳腺炎发生硬化的机制奠定基础。

关键词：金黄色葡萄球菌奶牛乳腺成纤维细胞 α-SMA collagen-i NF-κB

放疗联合重组人血管内皮抑制素致大鼠心肌纤维化的机制

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放疗联合重组人血管内皮抑制素致大鼠心肌纤维化的机制

作者：万艳贵州医科大学

学位级别：硕士

目的:建立实验动物模型研究放射性心脏损伤心肌纤维化的作用机制探讨内皮抑制素可通过TGF-β1（Transforming growth factor beta1,TGF-β1）、Smad2/3信号通路加重放射性心肌纤维化的过程。方法:90只SD成年雄性大鼠随机分为25Gy照射组... 详细信息

目的:建立实验动物模型研究放射性心脏损伤心肌纤维化的作用机制探讨内皮抑制素可通过TGF-β1（Transforming growth factor beta1,TGF-β1）、Smad2/3信号通路加重放射性心肌纤维化的过程。方法:90只SD成年雄性大鼠随机分为25Gy照射组、内皮抑制素6mg/kg组、内皮抑制素12mg/kg组、25Gy照射+内皮抑制素6mg/kg组、25Gy照射+内皮抑制素12mg/kg组和空白对照组6个实验组,分别在照射及给药后1、3和6个月每组随机处死5只大鼠取心肌组织完成HE染色了解病理学改变,Masson染色了解纤维化程度,q PCR及Western Blot检测TGF-β1、Smad2/3及collagen-i基因和蛋白的表达。组间比较采用独立样本t检验。结果:照射及给药后1个月,25Gy照射组、25Gy照射+内皮抑制素（6mg/kg、12mg/kg）组与空白对照组比较,TGF-β1基因及蛋白的表达差异无统计学意义（P＞0.05）。照射及给药后3个月,Masson染色发现25Gy照射组、25Gy照射+内皮抑制素（6mg/kg、12mg/kg）组与空白对照组比较,心肌小血管周围及部分间质胶原纤维增多;25Gy照射组与对照组比较TGF-β1基因及蛋白表达增加（P＜0.05）,Smad2基因表达增加（P＜0.05）,25Gy照射+内皮抑制素（6mg/kg、12mg/kg）组与25Gy照射组比较collagen-i蛋白表达增加（P＜0.05）。照射及给药后6个月,25Gy照射组、25Gy照射+内皮抑制素（6mg/kg、12mg/kg）组与空白对照组比较,Masson染色发现大鼠心肌间质弥漫性纤维化的改变;TGF-β1和Smad2基因及蛋白的表达增加（P＜0.05）,25Gy照射+内皮抑制素12mg/kg与25Gy照射组比较,collagen-i蛋白表达增加（P＜0.05）。内皮抑制素（6mg/kg、12mg/kg）组在给药后1个月、3个月和6个月未观察到大鼠心肌组织有明显病理学改变,纤维化相关蛋白collagen-i的表达与空白对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。结论:给予大鼠心脏总剂量为25Gy的照射后3个月可观察到早期心肌纤维化改变;射线所致心肌纤维化的过程至少可持续至放疗后6个月;重组人血管内皮抑制素可加重射线损伤后心肌纤维化的过程,而对血管结构正常的心肌组织没有毒性作用;TGF-β1/Smad2通路可能是辐射致心肌纤维化损伤的信号通路,该通路可能成为治疗放射性心肌纤维化的关键靶点。

关键词：放射性心脏损伤心肌纤维化重组人血管内皮抑制素 TGF-β1 Smad2/3 collagen-i

转化生长因子β1对A549细胞晚期糖基化终产物受体与细胞外基质表达的影响

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国际呼吸杂志 2013年第6期33卷 415-419页

作者：丁辉冯艳陈如华宜兴市人民医院呼吸内科 214200

目的研究转化生长因子Bl（transforminggrowthfactorbeta1，TGF-β1）对人A549细胞的晚期糖基化终产物受体（receptorforadvancedglycationend—products，RAGE）和胶原-i、a-平滑肌肌动蛋白（a-smoothmuscleactin，d—SMA）表达的作用。方法体外培养人A549细胞，以不加TGF-[31刺激为对照组，不同终浓度TGF-β1（2μg／L、5,ag／L、10／μg／L）处理A549细胞为实验组，RT-PCR和Westernblotting法检测TGF-β1刺激12h、24h、36h后对照组和实验组RAGEmRNA和RAGE、胶原-i及a—SMA的蛋白表达。结果①随着TGF-β1，浓度的增加，刺激时间的延长，A549细胞的RAGEmRNA和蛋白的表达逐渐降低，呈时间-浓度依赖关系。②与对照组相比，A549在TGF-β1（5μg／L）刺激24h后，RAGEmRNA的表达明显降低（0．387±0．088VS1．345±0．132，P〈0．01）。RAGE蛋白表达较对照组明显降低（O．174±0．061VS1．229±0．112，P〈0．01）。③TGF-β1（5μg／L）刺激24h后，A549的胶原-i及d—SMA蛋白表达（0．916±0．071和0．899±0．022）分别较对照组（0．295±0．041和0．134±0．028）升高3．1和6．7倍，差异有统计学意义（P〈O．01）。④相关分析显示，A549的RAGE蛋白表达与胶原-i（r=-0．843，P〈0．05）、n—SMA蛋白的表达（r=-0．897，P〈0．05）呈负相关。结论TGF-β3。下调A549细胞RAGE的mRNA和蛋白表达，与胶原-i及a—SMA蛋白表达上调呈负相关，提示RAGE的表达下调可能与肺纤维化的发生和发展有关。

关键词： Transforming growth factor beta 1 Receptor for advanced glycation end—products d—smooth muscle actin collagen-i

金黄色葡萄球菌对奶牛乳腺成纤维细胞TGF-β1/Smad信号通路及其转分化的影响

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金黄色葡萄球菌对奶牛乳腺成纤维细胞TGF-β1/Smad信号通路及其转...

NF-κB信号通路在金黄色葡萄球菌诱导奶牛乳腺成纤维细胞转分化中的作用

中国畜牧兽医学会动物解剖及组织胚胎学分会第十九次学术研讨会

作者：杨彬徐丹丹孙志鹏赵佳琦闫博巍李晓婷武瑞黑龙江八一农垦大学动物科技学院

为探索金黄色葡萄球菌(***)对奶牛乳腺成纤维细胞(BMFB)TGF-β1/Smad信号通路及其转分化的影响。本研究用热灭活金黄色葡萄球菌(0、104、105、106、107、和108 CFU·mL)刺激BMFB,24 h后采用Real time-PCR方法检测TGF-β1、α-SMA和colla... 详细信息

为探索金黄色葡萄球菌(***)对奶牛乳腺成纤维细胞(BMFB)TGF-β1/Smad信号通路及其转分化的影响。本研究用热灭活金黄色葡萄球菌(0、104、105、106、107、和108 CFU·mL)刺激BMFB,24 h后采用Real time-PCR方法检测TGF-β1、α-SMA和collagen-i mRNA的表达量,Western blot方法检测α-SMA、collagen-i及p-Smad2/3蛋白的表达量。使用TGF-β1受体特异性抑制剂SB-431542预处理细胞,再用105 CFU·mL热灭活金黄色葡萄球菌刺激细胞,24 h后采用Real time-PCR方法检测α-SMA和collagen-imRNA的表达量,Western blot方法检测α-SMA、collagen-i及p-Smad2/3蛋白的表达量,免疫荧光法检测collagen-i蛋白的表达量。结果显示,不同浓度热灭活金黄色葡萄球菌处理细胞的TGF-β1 mRNA的表达量显著升高(pcollagen-i及p-Smad2/3的表达量均能显著升高(pcollagen-i及p-Smad2/3的表达量最高。抑制剂SB-431542能够显著抑制α-SMA、collagen-i及P-Smad2/3的表达量(P<0.01)。结果提示,金黄色葡萄球菌能够通过TGF-β1/Smad信号通路诱导奶牛乳腺成纤维细胞转分化为肌成纤维细胞,本研究为揭示金黄色葡萄球菌性乳腺炎发生硬化的机制奠定基础。

关键词：金黄色葡萄球菌奶牛乳腺成纤维细胞 α-SMA collagen-i p-Smad2/3

来源： cnki会议评论

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NF-κB信号通路在金黄色葡萄球菌诱导奶牛乳腺成纤维细胞转分化中...

原儿茶醛靶向调节胶原蛋白改善小鼠心肌纤维化作用研究

中国畜牧兽医学会动物解剖及组织胚胎学分会第十九次学术研讨会

作者：杨彬徐丹丹孙志鹏王建发单旭菲张安武瑞黑龙江八一农垦大学动物科技学院

为探索NF-κB信号通路在金黄色葡萄球菌(***)诱导奶牛乳腺成纤维细胞(BMFB)转分化中的作用。本研究用热灭活金黄色葡萄球菌(0、104、105、106、107、和108 CFU/mL)刺激BMFB,24 h后采用Real-time PCR方法检测TNF-α、iL-1β、iL-6和TGF-... 详细信息

为探索NF-κB信号通路在金黄色葡萄球菌(***)诱导奶牛乳腺成纤维细胞(BMFB)转分化中的作用。本研究用热灭活金黄色葡萄球菌(0、104、105、106、107、和108 CFU/mL)刺激BMFB,24 h后采用Real-time PCR方法检测TNF-α、iL-1β、iL-6和TGF-β1 mRNA的表达量,Westem blot方法检测Cα-SMA、collagen-i及p-NF-κB p65蛋白的表达量。使用NF-κB通路抑制剂PDTC预处理细胞,再用105 CFU/mL热灭活金黄色葡萄球菌刺激细胞,24 h后采用Real-time PCR方法检测TNF-α、iL-1β、iL-6和TGF-β1mRNA的表达量,Western blot方法检测α-SMA、collagen-i及p-NF-κB p65蛋白的表达量,免疫荧光法检测α-SMA及collagen-i蛋白的表达量。结果显示,不同浓度热灭活金黄色葡萄球菌处理细胞的TGF-β1 mRNA、α-SMA及collagen-i蛋白的表达量显著升高(pcollagen-i蛋白的表达量最高。随着热灭活金黄色葡萄球菌浓度的升高,p-NF-κB p65蛋白的表达量及TNF-α、iL-1β、iL-6 mRNA的表达量逐渐升高(piL-1β、iL-6、TGF-β1 mRNA及α-SMA、collagen-i、p-NF-κB p65蛋白的的表达量(p<0.01)。结果提示,NF-κB信号通路在金黄色葡萄球菌诱导奶牛乳腺成纤维细胞转分化为肌成纤维细胞过程中发挥重要作用,本研究为揭示金黄色葡萄球菌性乳腺炎发生硬化的机制奠定基础。

关键词：金黄色葡萄球菌奶牛乳腺成纤维细胞 α-SMA collagen-i NF-κB

来源： cnki会议评论

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原儿茶醛靶向调节胶原蛋白改善小鼠心肌纤维化作用研究