检索结果-南通市图书馆

南方农业学报 2024年第1期55卷 47-56页

作者：王敏席东莫正海张仕杰朱灿灿江苏省中国科学院植物研究所江苏南京210095 上海市农业科学院园艺研究所上海201403 上海市青浦区农业技术推广服务中心上海201700

【目的】克隆薄壳山核桃SQUAMOSA启动子结合蛋白(SPL)转录因子基因cispl2,并对其进行亚细胞定位及表达分析,为探究该基因在薄壳山核桃雌花发育过程的分子机制提供理论依据。【方法】根据薄壳山核桃基因组数据,采用RT-PCR方法克隆cispl2... 详细信息

【目的】克隆薄壳山核桃SQUAMOSA启动子结合蛋白(SPL)转录因子基因cispl2,并对其进行亚细胞定位及表达分析,为探究该基因在薄壳山核桃雌花发育过程的分子机制提供理论依据。【方法】根据薄壳山核桃基因组数据,采用RT-PCR方法克隆cispl2基因编码区(CDS)序列,利用生物信息学软件分析其序列特征和蛋白理化性质,构建pCAMBIA1300-cispl2-GFP融合表达载体,瞬时转化烟草后观察荧光信号确定亚细胞定位情况。基于转录组数据和实时荧光定量PCR检测cispl2基因在不同组织及不同雌花芽分化时期的表达模式。【结果】薄壳山核桃cispl2基因CDS长度为1398 bp,共编码465个氨基酸残基,相对分子量为51.78 kD,理论等电点(p I)为8.28,不稳定系数为49.89,脂肪酸氨基酸指数为64.62,平均亲水性平均值(GRAVY)为-0.617,为不稳定的亲水性蛋白,含有SBP结构域(位于第183~257位氨基酸),亚细胞定位于细胞核。cispl2蛋白的二级结构主要由α-螺旋(17.42%)、延伸链(13.55%)、β-转角(1.72%)和无规则卷曲(67.31%)组成。薄壳山核桃cispl2蛋白与核桃JrSPL2蛋白氨基酸序列的相似性最高,为95.05%,其次是光皮桦BlSPL2蛋白,相似性为70.83%。cispl2蛋白与核桃JrSPL2蛋白亲缘关系最近。cispl2基因启动子中含有植物激素响应、干旱胁迫响应和分生组织表达元件。cispl2基因在雌花和果实中的表达水平显著高于其他组织(Pcispl2基因含有SPL转录因子家族典型的SBP保守结构域,推测其参与调控薄壳山核桃雌花芽分化和发育过程。

关键词：薄壳山核桃 cispl2基因系统发育分析亚细胞定位基因表达

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