检索结果-南通市图书馆

检索条件"主题词=Chalkophomycin"

共 1 条记录，以下是1-10 订阅

全选清除本页清除全部题录导出标记到"检索档案"

详细简洁

排序：

新型铜载体chalkophomycin生物合成的初步研究及其产量提升

新型铜载体chalkophomycin生物合成的初步研究及其产量提升

引用

作者：李苗中南大学

学位级别：硕士

目的:chalkophomycin(CHM)是课题组前期从链霉菌CB00271中分离得到的一个新型铜载体天然产物,含有罕见的与二价铜离子配位的二醇二氮烯鎓官能团。该化合物或其配体有被开发为抗肿瘤药物或治疗铜超载等疾病如威尔逊疾病的潜力。链霉菌天... 详细信息

目的:chalkophomycin(CHM)是课题组前期从链霉菌CB00271中分离得到的一个新型铜载体天然产物,含有罕见的与二价铜离子配位的二醇二氮烯鎓官能团。该化合物或其配体有被开发为抗肿瘤药物或治疗铜超载等疾病如威尔逊疾病的潜力。链霉菌天然产物的生物合成研究将为我们发现CHM衍生物和提高其产量提供帮助。因此,本论文对CHM的生物合成及产量提升进行了初步研究。具体内容如下:新型铜载体chalkophomycin生物合成的初步研究。方法与结果:本课题组前期已经通过生物信息分析和基因缺失其核心聚酮合成酶(PKS)/非核糖体肽合成酶(NRPS)基因,确定了CB00271中负责CHM生物合成的基因簇(chm)。同时,链霉菌CB00271也产生rubromycins系列芳香聚酮天然产物,本实验室构建了缺失rubromycin生物合成聚酮核心基因的CB00271-DΔks菌株,其代谢背景更加干净。我们进一步对该基因簇中的其它基因的功能进行了Blast P预测。结合CHM的结构特点,我们选择了编码二醇二氮烯鎓中N-N键合成酶基因orf19、N-OH合成酶基因orf20,甲基转移酶合成基因orf23,黄素还原酶基因orf24以及乙酰辅酶A脱氢酶基因orf13这五个基因,在CB00271-DΔks菌株中利用基于同源重组的双交换敲除进行了基因缺失实验。我们发现在敲除orf20和orf23的突变株中,CHM消失;利用p SET152载体,我们可以成功回补orf20和orf23,说明其参与了CHM的生物合成。敲除orf19的突变株中CHM产量下降,同时CHM类似物的产量增加,为可能的中间体。敲除orf13的突变株不再产生CHM,而orf24对CHM的产量没有影响,但也没有其它代谢产物的变化。我们过表达orf7和orf8调控基因后,发现CHM的产量大幅度降低,说明它们是负调控因子;过表达编码转运蛋白合成基因orf6或敲除编码几丁质合酶基因orf25均对CHM产量没有影响。CB03629中chalkophomycin的发现及其产量提升。方法与结果:我们首先通过对典藏的放线菌菌种的发酵后发现链霉菌CB03629可以高产CHM,其原始产量约为22 mg/L,约为CB00271或CB00271-DΔks的2倍。我们进一步通过单因素优化和响应面分析法对CB03629的培养基进行优化,将CHM的产量提升至219±21.27 mg/L,约为原始产量的11倍。随后我们对CB03629进行了种属分析与全基因组测序,并在CB03629的基因组中发现了负责CHM生物合成的基因簇;生物信息分析发现,这两个菌株中的chm基因簇高度相似。结论:本文在CB00271-DΔks中构建了6个基因敲除菌株,3个过表达突变株以及2个回补菌株,不仅确定了orf13、orf20、和orf23对CHM的生物合成的必要性,并发现了ORF7和ORF8是CHM生物合成的负调控因子。另外,我们通过培养基优化,将CHM的产量在CB03629中提高到219±21.27 mg/L。上述研究不仅为后续CHM的功能研究提供了较多的化合物,也初步揭示了CHM的生物合成机制,为后续研究CHM奠定了基础。图46幅,表24个,参考文献192篇

关键词： chalkophomycin 二醇二氮烯鎓产量提升生物合成链霉菌铜载体

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

全选清除本页清除全部题录导出标记到“检索档案”

共1页 << < 1 > >>

回到顶部

执行限定条件

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：