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caspase蛋白在肝脏缺血再灌注损伤中的研究进展

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国际外科学杂志 2013年第4期40卷 261-264页

作者：朱世春刘歆农张培建扬州大学第二临床医学院普通外科研究室扬州225001

caspase蛋白在促进细胞凋亡过程中发挥关键作用，在肝脏缺血再灌注损伤和对细胞凋亡过程的实验研究时，常可检测到caspase蛋白。现就caspase蛋白在肝脏缺血再灌注损伤中的研究进展作一综述。

关键词：缺血再灌注损伤肝 caspase蛋白

蛴螬提取物对人肺癌A549细胞caspase蛋白表达的影响

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广东医学 2011年第23期32卷 3040-3041页

作者：崔春爱孙抒延边大学基础医学院解剖学教研部吉林延吉133002

目的观察蛴螬提取物对人肺癌A549细胞凋亡时caspase蛋白表达的影响。方法采用MTT法检测蛴螬提取物对A549细胞增殖的抑制率,透射电子显微下观察凋亡细胞的超微结构改变,运用S-P免疫细胞化学试剂盒检测caspase3、caspase8和caspase9的表... 详细信息

目的观察蛴螬提取物对人肺癌A549细胞凋亡时caspase蛋白表达的影响。方法采用MTT法检测蛴螬提取物对A549细胞增殖的抑制率,透射电子显微下观察凋亡细胞的超微结构改变,运用S-P免疫细胞化学试剂盒检测caspase3、caspase8和caspase9的表达情况。结果蛴螬提取物对A549细胞具有明显的增殖抑制作用,并出现典型的凋亡形态变化;加药组细胞caspase3、caspase8和caspase9表达均增强。结论蛴螬提取物诱导A549细胞凋亡过程中,激活了caspase家族。

关键词：蛴螬提取物人肺癌A549 caspase蛋白细胞凋亡

线粒体融合素基因-2对肝癌细胞caspase蛋白表达的影响及意义

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广州医药 2009年第4期40卷 3-5页

作者：王尧陈艳红陈宏郭志刚广东省中山市人民医院普外三科 528403 广东省中医院 510120

目的研究外源性线粒体融合素基因-2(mitofusin-2 gene,mfn2)对肝癌细胞caspase蛋白表达的影响及意义。方法用脂质体2000将质粒pEGFPmfn2、空质粒pEGFP-N2分别转染肝癌细胞株HepG2,分别检测转染后48h HepG2细胞mfn2 mRNA的表达、蛋白表... 详细信息

目的研究外源性线粒体融合素基因-2(mitofusin-2 gene,mfn2)对肝癌细胞caspase蛋白表达的影响及意义。方法用脂质体2000将质粒pEGFPmfn2、空质粒pEGFP-N2分别转染肝癌细胞株HepG2,分别检测转染后48h HepG2细胞mfn2 mRNA的表达、蛋白表达及凋亡特异性蛋白酶caspase3、caspase 9及procaspase 9蛋白表达的变化。结果经脂质体2000转染后,HepG2细胞基因组中存在有目的基因特异性片段,转染后细胞中有Mfn2蛋白表达;转染pEGFPmfn2组细胞中caspase 3、caspase 9表达明显增加(Pcaspase 9的表达明显减少(Pcaspase 3、caspase 9,进而激活细胞凋亡信号通路,这可能是mfn2基因诱导肝癌细胞凋亡的可能机制。

关键词：线粒体基因肝癌细胞细胞转染 caspase蛋白

DH332通过激活caspase家族蛋白抑制B细胞淋巴瘤

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DH332通过激活caspase家族蛋白抑制B细胞淋巴瘤

作者：高攀新乡医学院

学位级别：硕士

背景去氢骆驼蓬碱是β咔林类生物碱的一种,主要是从植物骆驼蓬里提取出来的种生物碱,多年的研究表明其具有较好的抗肿瘤效应,但是也伴随着较强的神经毒性,所以限制了其临床应用。目的本课题的目的在于研究人工合成的β咔林类生物碱衍生... 详细信息

背景去氢骆驼蓬碱是β咔林类生物碱的一种,主要是从植物骆驼蓬里提取出来的种生物碱,多年的研究表明其具有较好的抗肿瘤效应,但是也伴随着较强的神经毒性,所以限制了其临床应用。目的本课题的目的在于研究人工合成的β咔林类生物碱衍生物DH332的抗肿瘤机制以及安全性,主要从体内和体外两个方面进行研究。方法通过CCK-8(细胞计数试剂盒-8)试剂盒研究DH332对于人源的和鼠源的B淋巴瘤细胞的抗肿瘤作用,流式细胞术(PI/AnnexinV染色)用于DH332诱导细胞凋亡的研究。Western blotting用于检测凋亡蛋白caspase-3和caspase-8的变化。动物实验主要用于检测DH332的神经毒性和体内抗肿瘤效果。结果我们的实验结果表明,DH332的神经毒性大大低于去氢骆驼蓬碱,对于人源和鼠源两种肿瘤细胞系(RAMOS RA.1和J558)都有明显的作用,而且半数抑制浓度(IC50)都很低。另外,DH332可以剂量依赖地抑制这两种细胞的增殖,同时也可以诱导它们的凋亡。western blot的结果说明DH332主要是激活了caspase信号通路从而启动凋亡的。体内试验表明DH332可以抑制J558荷瘤小鼠肿瘤的生长。结论DH332在体内和体外都有很好的抗肿瘤效应,可能会成为临床治疗淋巴瘤的一个很有效的候选药物。

关键词：凋亡 B淋巴瘤 caspase蛋白化疗去氢骆驼蓬碱

锂-匹罗卡品致痫大鼠海马结构nNOS、iNOS及活化caspase-3蛋白表达的动态变化

同方学位论文库评论

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同方学位论文库

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山东大学学报（医学版） 2010年第11期48卷 50-53页

作者：陈立光刘滨范海涛贾践博庞琦山东省医学影像学研究所济南250021 山东大学附属省立医院神经外科济南250021

目的探讨大鼠癫痫持续状态(SE)后海马结构神经型一氧化氮合酶(nNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及活化caspase-3蛋白表达的动态变化及其相互关系。方法采用锂-匹罗卡品腹腔注射建立大鼠SE模型,用免疫组织化学及免疫印迹法在2h、6h、3d... 详细信息

目的探讨大鼠癫痫持续状态(SE)后海马结构神经型一氧化氮合酶(nNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及活化caspase-3蛋白表达的动态变化及其相互关系。方法采用锂-匹罗卡品腹腔注射建立大鼠SE模型,用免疫组织化学及免疫印迹法在2h、6h、3d及7d不同时相点检测大鼠海马nNOS、iNOS及活化caspase-3蛋白的表达。结果大鼠海马nNOS的蛋白表达在SE后2h开始迅速增高,在6h时达到高峰,之后逐渐降低,但在3、7d时仍显著高于对照组(P均蛋白的表达在SE后6h时开始持续增高(Pcaspase-3蛋白的表达在3d开始增高(Pcaspase-3的表达均有不同程度的增高,提示一氧化氮合酶的反应产物一氧化氮可能与癫痫发作后海马结构内的神经元受损有关,而神经元受损与凋亡之间的关系亦密不可分。

关键词：癫痫持续状态模型,动物海马 caspase蛋白一氧化氮合酶细胞凋亡大鼠,Wistar

柔嫩艾美尔球虫caspase-3同源蛋白的发现

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柔嫩艾美尔球虫Caspase-3同源蛋白的发现

天花粉蛋白抑制胃癌细胞生长及其分子机制研究

中国毒理学会兽医毒理学与饲料毒理学学术讨论会暨兽医毒理专业委员会第4次全国代表大会会议

作者：王丛丛张可煜郑文丽王霄旸费陈忠李涛薛飞群中国农业科学院上海兽医研究所兽药安全评价与兽药残留研究重点开放实验室

【目的】作为引起鸡球虫病的病原体中,毒力最强的一种寄生虫,柔嫩艾美耳球虫,给全球养禽业造成了巨大的经济损失。目前对于该球虫病的预防和治疗措施主要依靠化学药物,但随着柔嫩艾美尔球虫对现有药物耐药性的增强,迫切需要研发新的抗... 详细信息

【目的】作为引起鸡球虫病的病原体中,毒力最强的一种寄生虫,柔嫩艾美耳球虫,给全球养禽业造成了巨大的经济损失。目前对于该球虫病的预防和治疗措施主要依靠化学药物,但随着柔嫩艾美尔球虫对现有药物耐药性的增强,迫切需要研发新的抗球虫药,而药物靶标的鉴定是其中一个重要策略。前期工作中,我们发现柔嫩艾美尔球虫中存在细胞凋亡现象,然而介导该细胞凋亡途径的球虫相关蛋白,尚未见国内外有相关报道。本试验通过柔嫩艾美尔球虫细胞凋亡途径相关蛋白的发现,为抗球虫药物的研制提供新的药物靶标。【方法】通过SEM电镜扫描,观察柔嫩艾美尔球虫经地克珠利处理后,亚细胞结构变化,确定球虫是否存在细胞凋亡现象;利用caspase不同抗体检测试剂盒,确定经地克珠利诱导后,所引发的细胞凋亡通路;通过NCBI BLAST工具,设计PCR保守引物,扩增序列;通过原核表达体系,表达扩增序列,检测该重组蛋白是否具有caspase活性。【结果】在透射电镜下,对照组***第二代裂殖子细胞核双层核膜结构完整,染色质均匀附着在核膜内侧面,且细胞内没有大的空泡。药物处理组***第二代裂殖子细胞核染色质明显减少、发生异染色质化,染色质固缩边集在核膜四周呈新月状小体,胞质中出现了大量的空泡,出现了类似多细胞生物的凋亡特征。使用Promega,不同caspase活性检测试剂盒,我们发现,地克珠利处理后,相对对照组,caspase-3活性提高了5倍以上,而caspase-8活性两组基本相同。通过PCR,我们扩增得到680bp片段,该片段与刚体弓形虫caspase同源蛋白具有很高的同源性。利用大肠杆菌表达体系,我们得到了该片段的重组蛋白,经检测,该重组蛋白具有很高的caspase-3活性。【结论】我们首次在球虫研究中,发现了caspase-3同源蛋白,为研制抗球虫药物提供了新的药物靶点。

关键词：球虫柔嫩艾美尔球虫 caspase蛋白

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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中国中西医结合杂志 2018年第8期38卷 958-962页

作者：邓心燕杨玉胡仁豪尹雪戈雨桐董小耘扬州大学医学院江苏225000

目的观察天花粉蛋白(trichosanthin,TCS)对人胃癌细胞SGC7901诱导凋亡的作用及机制。方法应用荧光显微镜观察0、7、14、28μmol/L TCS对SGC7901细胞形态学的影响及细胞计数。应用流式细胞仪测定各浓度TCS对SGC7901细胞周期及凋亡的作用... 详细信息

目的观察天花粉蛋白(trichosanthin,TCS)对人胃癌细胞SGC7901诱导凋亡的作用及机制。方法应用荧光显微镜观察0、7、14、28μmol/L TCS对SGC7901细胞形态学的影响及细胞计数。应用流式细胞仪测定各浓度TCS对SGC7901细胞周期及凋亡的作用。应用Western Blot法观察SGC7901caspase-9、caspase-3、PARP、pERK、ERK蛋白表达。结果 TCS处理后的SGC7901出现了皱缩、变形,对SGC7901细胞的生长有明显的抑制作用,并且阻滞于S期。TCS诱导SGC7901发生凋亡,呈浓度依赖性(r=0.901,Pcaspase-9、caspase-3、PARP蛋白表达降低,呈浓度依赖性(r=-0.984,r=-0.991,r=-0.951,P<0.05)。并且随着TCS浓度的升高,ERK表达降低,呈药物浓度依赖性(r=-0.957,P<0.05),TCS处理(7μmol/L和14μmol/L)激活ERK,磷酸化ERK升高(P<0.05)。结论 TCS可以抑制SGC7901细胞的生长,诱导细胞凋亡,其机制与ERK信号通路有关。

关键词：胃癌细胞天花粉蛋白细胞凋亡 caspase蛋白

基于MCU离子通道银杏内酯K对脑缺血再灌注损伤保护作用

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中国药学杂志 2019年第18期54卷 1497-1503页

作者：马舒伟刘兴艳殷华峰辛杨王国康浙江医药高等专科学校浙江宁波315100 宁波职业技术学院浙江宁波315800 中国药科大学中药制药系南京210009 齐齐哈尔大学化学与化学工程学院黑龙江齐齐哈尔161006

目的探讨银杏内酯K(ginkgolide K,GK)对中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)损伤大鼠的脑损伤保护作用是否依赖于线粒体Ca2+单向转运体(mitochondrial calcium uniporter,MCU)的作用机制。方法成年健康SD大鼠,随机分成5大组:假手术组、模型组、GK+钌红(ruthenium red,RR,MCU拮抗剂)组、GK组和GK+精胺(spermine,SM,MCU兴奋剂)组。采用栓线法制备脑中动脉缺血2 h再灌注22 h的大鼠脑损伤模型;采用Zea Longa 5分制对各组大鼠进行行为学评分;重量法测定脑含水量;2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色测定脑梗死面积;利用酶联免疫吸附法(ELISA)测定超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、一氧化氮(nitric oxide,NO)含量、一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)活性;采用荧光法检测线粒体内[Ca2+]i浓度;采用苏木精-伊红(HE)染色观察损伤脑组织形态学的改变;利用Western blot法检测caspase-3/8/9蛋白的表达水平。结果与GK组相比,联合GK+RR组中大鼠神经缺损评分、脑含水量、脑梗死面积比显著降低(P caspase-3/8/9蛋白表达显著降低,然而,联合GK+SM组与GK+RR组药理作用相反。结论 RR能够提高GK对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用,而SM能够减弱GK对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用,其GK作用机制可能与RR或者SM竞争性调节MCU转运能力来抑制线粒体Ca2+内流有关。

关键词：脑缺血再灌注银杏内酯K 线粒体Ca2+单向转运体 caspase蛋白

稳定过表达人MGST1基因抑制肺腺癌细胞SPC-A-1的凋亡

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中国肿瘤生物治疗杂志 2017年第6期24卷 608-614页

作者：曾宝真葛春蕾付桥粉张志伟宋鑫黄文华南方医科大学基础医学院人体解剖国家重点学科广东广州510515 昆明医科大学第三附属医院暨云南省肿瘤医院肿瘤生物治疗中心云南昆明650100

目的:建立稳定过表达微粒体谷胱甘肽S转移酶1(microsomal glutathione S-transferase 1,MGST1)基因的肺腺癌SPC-A-1细胞系,探讨MGST1在肺腺癌中的作用及其机制。方法:重组质粒pcDNA3-MGST1和空载体pcDNA3以脂质体介导的方法转染至SPC-A-... 详细信息

目的:建立稳定过表达微粒体谷胱甘肽S转移酶1(microsomal glutathione S-transferase 1,MGST1)基因的肺腺癌SPC-A-1细胞系,探讨MGST1在肺腺癌中的作用及其机制。方法:重组质粒pcDNA3-MGST1和空载体pcDNA3以脂质体介导的方法转染至SPC-A-1细胞中,经过G418筛选稳转细胞系,标记为pcDNA3-MGST1细胞和空载体pcDNA3细胞。实时荧光定量PCR及Western blotting鉴定稳转细胞中MGST1 mRNA和蛋白的表达情况。MTS法检测稳转细胞的活力;流式细胞仪和Western blotting检测H_2O_2诱导下稳转细胞的凋亡率和下游凋亡相关蛋白水平变化。结果:酶切鉴定和测序结果显示pcDNA3-MGST1重组质粒构建成功,并获得具有G418抗性的稳转细胞株。pcDNA3-MGST1细胞中MGST1在mRNA和蛋白水平表达均显著升高(P蛋白caspase 9、caspase 3、PARP表达增多,cleaved-caspase 9、cleaved-caspase 3、cleaved-PARP表达明显减少。结论:本研究成功构建了稳定过表达MGST1的SPC-A-1肺腺癌细胞系,MGST1可能通过调节caspase凋亡通路抑制肺腺癌细胞的凋亡。

关键词：肺腺癌微粒体谷胱甘肽S转移酶1 基因克隆稳定过表达 caspase蛋白凋亡