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复方天麻蜜环菌制剂对大鼠脑缺血再灌注后神经细胞凋亡的影响

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中国医院药学杂志 2008年第7期28卷 514-517页

作者：刘振华冯建利杜怡峰山东省立医院神经内科山东济南250021

目的:观察复方天麻蜜环菌制剂对大鼠脑缺血再灌注后大脑皮质缺血灶周围区caspase-3蛋白、凋亡诱导因子时相表达及神经细胞凋亡的影响。方法:应用线栓法建立Wistar大鼠大脑中动脉阻塞再灌注模型,TTC染色观察梗死灶的分布,应用原位末端标... 详细信息

目的:观察复方天麻蜜环菌制剂对大鼠脑缺血再灌注后大脑皮质缺血灶周围区caspase-3蛋白、凋亡诱导因子时相表达及神经细胞凋亡的影响。方法:应用线栓法建立Wistar大鼠大脑中动脉阻塞再灌注模型,TTC染色观察梗死灶的分布,应用原位末端标记(TUNEL)和免疫组化技术分别观察模型组、复方天麻蜜环菌制剂治疗组和对照组(生理盐水干预组)大脑中动脉栓塞90min再灌注6,24,72h时缺血灶周围脑区caspase-3蛋白、凋亡诱导因子和TUNEL阳性细胞的时相表达。结果:(1)脑缺血再灌注后在缺血灶周围区均出现三者的表达,且表达有几乎一致的规律性。(2)栓塞90min再灌注24,72h,复方天麻蜜环菌制剂治疗组与其他两组比较,caspase-3、凋亡诱导因子阳性细胞和TUNEL染色阳性细胞的数量均明显减少(Pcaspase-3参与了局灶性脑缺血后神经细胞的凋亡过程。(2)复方天麻蜜环菌制剂可以减少凋亡诱导因子(AIF)、caspase-3蛋白的表达,减轻迟发性神经元死亡,对缺血性脑组织有保护作用。

关键词：脑缺血再灌注细胞凋亡凋亡诱导因子 caspas-3 复方天麻蜜环菌制剂

蛭龙活血通淤胶囊对大鼠急性脑梗塞缺血/再灌注后神经细胞凋亡及相关基因表达的影响

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时珍国医国药 2010年第10期21卷 2691-2692页

作者：罗钢白雪杨思进泸州医学院附属中医医院四川泸州646000

目的探讨蛭龙活血通淤胶囊对大鼠急性脑梗塞缺血/再灌注后神经细胞凋亡及相关基因表达的影响。方法采用线拴法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,将40只雄性SD大鼠随机分为观察组(蛭龙活血通淤胶囊)10例,对照组(步长脑心通)10例、模型... 详细信息

目的探讨蛭龙活血通淤胶囊对大鼠急性脑梗塞缺血/再灌注后神经细胞凋亡及相关基因表达的影响。方法采用线拴法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,将40只雄性SD大鼠随机分为观察组(蛭龙活血通淤胶囊)10例,对照组(步长脑心通)10例、模型组10例及假手术组10例,用药7d,应用TUNEL法和免疫组织化学法检测各组大鼠脑组织凋亡细胞的分布及bcl-2、caspase-3蛋白的表达。结果实验证实了急性脑梗塞缺血再灌注损伤凋亡细胞的存在,模型组脑神经细胞凋亡数量显著高于假手术组(P0.05)。模型组脑神经细胞bc1-2和caspase-3基因蛋白表达均显著高于假手术组(Pcaspase-3基因蛋白表达(P0.05)。结论蛭龙活血通淤胶囊对急性脑梗塞引起的神经细胞凋亡有明显抑制作用。其机制可能与上调bcl-2,抑制caspase-3有关。

关键词：蛭龙活血通淤胶囊急性脑梗塞缺血性中风细胞凋亡 bcl-2 caspas-3

龟羚帕安丸对PD大鼠中脑黑质caspase-3、SYN表达及行为学的影响

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中华中医药学刊 2016年第11期34卷 2673-2675,I0001,I0002页

作者：张良芝常学辉宁亚红河南中医药大学基础医学院中医诊断学科河南郑州450008 河南中医药大学第二临床医学院脑病科河南郑州450002

目的:观察龟羚帕安丸对帕金森病(PD)大鼠病理学、行为学及中脑黑质突触核蛋白(SYN)、caspase-3表达的影响。方法:采用6-OHDA注射法建立PD大鼠模型,造模成功大鼠随机分为模型组、美多芭组、龟羚帕安丸大、中、小剂量组(4、2、1 g·kg^(-1... 详细信息

目的:观察龟羚帕安丸对帕金森病(PD)大鼠病理学、行为学及中脑黑质突触核蛋白(SYN)、caspase-3表达的影响。方法:采用6-OHDA注射法建立PD大鼠模型,造模成功大鼠随机分为模型组、美多芭组、龟羚帕安丸大、中、小剂量组(4、2、1 g·kg^(-1)),同时设立假手术组,假手术组、模型组给予等容积生理盐水,连续灌胃给药4周。观察各组大鼠旋转行为、中脑黑质细胞病理学及caspase-3、SYN表达情况。结果:与假手术组比较,模型组大鼠神经细胞变性坏死明显增多,旋转圈数多,SYN、caspase-3表达明显升高(Pcaspase-3表达显著低于模型组(均Pcaspase-3、SYN表达可能是其治疗帕金森病的机制之一。

关键词：龟羚帕安丸帕金森病行为学突触核蛋白 caspas-3

淫羊藿苷对HCY诱导增殖血管平滑肌细胞的促凋亡作用

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中药药理与临床 2010年第1期26卷 21-23页

作者：魏晏陈芳沈晓君河南中医学院第三附属医院河南450008 华中科技大学同济医学院附属协和医院武汉430030

目的:研究淫羊藿苷(icariin,ICA)对同型半胱氨酸(homocysteinemia,HCY)诱导增殖血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)的促凋亡作用。方法:建立HCY诱导的兔VSMC增殖模型,与不同浓度的淫羊藿苷共同培养48h后,用MTT法检测细... 详细信息

目的:研究淫羊藿苷(icariin,ICA)对同型半胱氨酸(homocysteinemia,HCY)诱导增殖血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)的促凋亡作用。方法:建立HCY诱导的兔VSMC增殖模型,与不同浓度的淫羊藿苷共同培养48h后,用MTT法检测细胞增殖能力;流式细胞仪Annexin/PI双染法检测凋亡率;比色法测半胱天冬蛋白酶3(caspas-3)活性。结果:与空白组相比较,模型组OD值显著升高(Pcaspas-3酶的活性而抑制VSMC凋亡;与模型组相比,高、中、低浓度ICA组caspas-3酶活性显著升高(Pcaspase-3这一凋亡效应酶可能是其机制之一。

关键词：淫羊霍苷同型半胱氨血管平滑肌细胞细胞凋亡 caspas-3

丹参对肝脏缺血再灌注不同时限胰岛素样生长因子-Ⅰ（IGF-Ⅰ）表达的影响

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丹参对肝脏缺血再灌注不同时限胰岛素样生长因子-Ⅰ（IGF-Ⅰ）表...

作者：王直南方医科大学

学位级别：硕士

研究背景在肝外伤、肝切除、肝移植以及多器官功能衰竭救治领域中,肝脏缺血再灌注损伤是造成肝功能损害的重要因素,其损伤机理及脏器保护研究始终是肝脏外科、创伤外科,移植外科的重要方向。缺血再灌注损伤是一个受多因素调节和影响的... 详细信息

研究背景在肝外伤、肝切除、肝移植以及多器官功能衰竭救治领域中,肝脏缺血再灌注损伤是造成肝功能损害的重要因素,其损伤机理及脏器保护研究始终是肝脏外科、创伤外科,移植外科的重要方向。缺血再灌注损伤是一个受多因素调节和影响的过程。复氧过程中活性氧的产生,Kupffer细胞、淋巴细胞和中性粒细胞的活化,引起一系列损害性的细胞反应,继而导致炎性反应和细胞凋亡。同时,由于肝窦内皮细胞的损害,产生微循环障碍,进一步加重了肝脏的局部缺血。在缺血再灌注过程中,许多细胞因子和激素的表达水平都发生了改变,并在其中发挥不同的作用,如一氧化氮(NO)、热休克蛋白(HSP)、内皮素(ET)、缺氧诱导因子-Ⅰ(HIF-Ⅰ)、胰岛素样生长因子-Ⅰ等。其中,胰岛素样生长因子(insulin-like growth factor,IGF)的作用得到了越来越多的重视。IGF是一类既有胰岛素样合成代谢作用,又有促生长作用的多肽,它们在机体组织细胞的增殖、分化和转化及抑制细胞凋亡中起重要作用,是许多组织生长和分化的重要调节因子,它还对不同的代谢产物、糖和氨基酸转运过程起胰岛素样作用。近年来,IGF-Ⅰ在肝外伤、肝脏手术以及多器官功能衰竭中的异常表达开始引起人们的关注,而关于IGF-Ⅰ与肝脏缺血再灌注损伤的关系,它在肝脏缺血再灌注期表达的时空分布特点及其作用意义,尚未能最后阐明。丹参为我国传统活血祛瘀中药,已有诸多研究表明丹参对重要脏器组织缺血再灌注损伤有较好的保护作用,这一原理主要为两方面,其一是改善微循环灌注不足及抗氧自由基作用,其二是可以降低肝细胞内的游离钙离子浓度,减轻由于钙超载引起的细胞损伤。而丹参的这些对肝脏的保护作用与IGF-Ⅰ是否有一定内在联系,还无人知晓。本课题在以往前期研究工作基础上进一步进行肝缺血再灌注期IGF-Ⅰ表达的研究,整体实验工作分为两部分:第一部分通过建立大鼠肝脏缺血再灌注模型,观察肝缺血再灌注不同时限中IGF-Ⅰ及caspase-3的表达特点,了解肝脏缺血再灌注IGF-Ⅰ与肝脏功能及细胞凋亡的关系,探讨其时空表达特点及作用意义。第二部分通过对比分析丹参预处理组与未处理组IGF-Ⅰ、caspase-3表达的不同特点,研究丹参对肝脏缺血再灌注损伤不同时限胰岛素样生长因子-Ⅰ表达的影响及意义。研究工作的目的旨在了解肝脏缺血再灌注期IGF-Ⅰ表达的时空特点及作用意义,以及国药丹参对肝脏缺血再灌注时IGF-Ⅰ表达的影响,从而为肝缺血再灌注损伤的防治探索新的方向。第一章胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)在大鼠肝缺血再灌注不同时限的表达及意义目的建立大鼠肝脏缺血再灌注损伤模型,观察肝缺血再灌注不同时限中IGF-Ⅰ及caspase-3的表达特点并了解IGF-Ⅰ在肝缺血再灌注损伤时的时空分布特点及作用意义。方法1.健康纯系SD大鼠75只随机分为3组,正常组(n=25只),假手术组(n=25只)及缺血再灌注组(n=25只),各组内又根据再灌注后不同时间(0h、3h、12h、24h、72h)分为5个亚组,每组5只。2.术前禁食12h,自由饮水。腹腔麻醉生效后,常规备皮、消毒,正常组进腹后直接切取肝组织待测,假手术组仅解剖肝门;缺血再灌注组在肝十二指肠韧带远心端安置无损伤动脉钳钳夹肝蒂45min,于不同复流时间(0h、3h、12h、24h、72h)切取肝组织制备免疫组化及光镜、电镜观察标本,肝上下腔静脉取血测定生化指标。***—Ⅰ及caspase-3免疫组化检测依说明书进行。胞浆呈胞浆内出现棕黄色颗粒为阳性反应。每张切片在400倍光学显微镜下随机选取5个视野,每个视野统计100个细胞中的阳性细胞数。血清ALT和AST采用全自动生化分析仪检测。用光学显微镜和电子显微镜观察肝组织细胞及细胞器病理形态学变化。4.用SPSS13.0进行分析。采用重复测量方差分析,组间比较用单因素方差分析,多重比较用LSD法。P＜0.05认为差异有显著性。结果正常组及假手术组各时限点IGF-Ⅰ表达无显著性差异(P＞0.05)。损伤组再灌注0h时IGF-Ⅰ表达下降,3h下降较明显,其在小叶中央静脉及汇管区的表达明显较肝实质内致密,阳性表达至12h时达到最低点,24h时开始回升。caspase-3在正常组及假手术组各时限点无显著性差异(P＞0.05),而在损伤组缺血后再灌注0h表达即开始增强,在再灌注24h组表达水平达峰值,至72h后回复到基线水平(P＞0.05)。肝缺血再灌注后外周血清ALT、AST浓度升高,再灌注0h、3h、12h、24h损伤组较同期正常组及假手术组高(P＜0.01),24h时浓度开始下降,至72h时恢复正常。光镜下损伤组再灌注0h时细胞

关键词：缺血再灌注 IGF-I 肝功能 caspase-3 丹参缺血再灌注 IGF-I caspas-3 肝脏

蛭龙活血通瘀胶囊治疗急性脑梗塞的临床及实验研究

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蛭龙活血通瘀胶囊治疗急性脑梗塞的临床及实验研究

作者：罗钢泸州医学院

学位级别：硕士

目的:蛭龙活血通瘀胶囊治疗急性脑梗塞有效性及安全性临床研究,并初步探讨其对大鼠缺血再灌注脑梗塞区神经细胞凋亡的影响。方法:1临床部分采用随机、对照、平行试验研究。将符合纳入标准的研究对象按随机数字表1:1随机分入观察组和对... 详细信息

目的:蛭龙活血通瘀胶囊治疗急性脑梗塞有效性及安全性临床研究,并初步探讨其对大鼠缺血再灌注脑梗塞区神经细胞凋亡的影响。方法:1临床部分采用随机、对照、平行试验研究。将符合纳入标准的研究对象按随机数字表1:1随机分入观察组和对照组进行研究。符合病例选择标准共计60例,其中观察组30例,对照组30例。中医诊断、分型标准参照《中药新药治疗中风病的临床研究指导原则》的标准。西医诊断标准参照1995年第4次全国脑血管病学术会议修订的“各类脑血管疾病诊断要点”中有关脑梗死的诊断标准。中医辨证属中风中经络型中的风痰瘀阻型。观察组采用基础治疗加蛭龙活血通瘀胶囊4粒tid,对照组采用基础治疗,2周为一疗程。观察中医证候、中国脑卒中临床神经功能缺损评分(CSS)、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、日常生活活动能力量表Barthel指数(BI)评分、实际完成日常生活活动的量表改良Rankin量表(MRS)评分、血脂、血液流变学、血管内皮细胞分泌功能检测及药物安全性监测。2实验部分采用线拴法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,将40只雄性SD大鼠随机分为观察组(蛭龙活血通瘀胶囊)10例、对照组(步长脑心通)10例、模型组10例及假手术组10例,用药7天,应用TUNEL法和免疫组织化学法检测各组大鼠脑组织凋亡细胞的分布及bcl-2、caspase3蛋白的表达。结果:1临床研究(1)治疗后观察组总有效率93.33%,对照组总有效率76.67%,两组有着显著差异(P3)整个观察过程中未发现明显不良事件。2动物实验(1)实验证实了急性脑梗塞缺血再灌注损伤凋亡细胞的存在,模型组脑神经细胞凋亡数量显著高于假手术组(P0.05)。(2)免疫组化法检测细胞凋亡基因bcl-2及caspase3蛋白表达的表达。模型组脑神经细胞bc1-2和caspase-3基因蛋白表达均显著高于假手术组(Pcaspase-3基因蛋白表达(P0.05)。结论:1蛭龙活血通瘀胶囊治疗急性脑梗塞疗效较为满意,能有效改善神经功能缺损评分、中医证候疗效,降低血脂、改善血液流变学指标和改善血管内皮分泌功能失调。2蛭龙活血通瘀胶囊对急性脑梗塞引起的神经细胞凋亡有明显抑制作用。其机制可能与上调bcl-2,抑制caspase-3有关。

关键词：蛭龙活血通瘀胶囊急性脑梗塞缺血性中风细胞凋亡 bcl-2 caspas-3

蛭龙活血通瘀胶囊对大鼠急性脑梗死缺血/再灌注后神经细胞凋亡及相关基因表达的影响

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