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中国药科大学学报 2000年第6期 42-42页

塔斯品碱在caco-2细胞模型中的吸收机制研究

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青海医学院学报 2010年第4期31卷 220-224页

作者：王嵘苏晓灵龙启福耿排力赵延礼朱德锐顾存林青海大学医学院生化教研室青海省人民医院心血管科

目的研究塔斯品碱在caco-2细胞模型中的吸收机制。方法用caco-2细胞单层模型研究塔斯品碱的双向转运,考察时间、药物质量浓度对塔斯品碱吸收的影响。采用高效液相色谱法检测塔斯品碱的质量浓度,计算其表观渗透系数(Papp)。结果塔斯品碱... 详细信息

目的研究塔斯品碱在caco-2细胞模型中的吸收机制。方法用caco-2细胞单层模型研究塔斯品碱的双向转运,考察时间、药物质量浓度对塔斯品碱吸收的影响。采用高效液相色谱法检测塔斯品碱的质量浓度,计算其表观渗透系数(Papp)。结果塔斯品碱在caco-2细胞模型中,从单层细胞层顶端到基底端的转运与基底端到顶端的转运大致相同。结论塔斯品碱在caco-2细胞模型中的吸收主要是被动转运。

关键词：塔斯品碱 caco-2 吸收转运

20（S）-人参皂苷Rh2对人结直肠癌caco-2和HT-29细胞增殖的影响

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20（S）-人参皂苷Rh2对人结直肠癌Caco-2和HT-29细胞增殖的影响

JBP485在caco-2细胞中的转运和摄取

2010年中国药学大会暨第十届中国药师周

作者：李秋影颜璐璐张莉华张兰兰马晓慧郭治昕天津中医药大学天津天士力研究院药理毒理所

目的本实验探讨20（S）-人参皂苷Rh2对人结直肠癌caco-2和HT-29细胞增殖及凋亡的影响。方法采用荧光微孔法测定20（S）-人参皂苷Rh2对体外培养的人结直肠癌caco-2、HT-29细胞增殖的影响,并计算抑制率;利用显微镜观察给药后细胞形态变化... 详细信息

目的本实验探讨20（S）-人参皂苷Rh2对人结直肠癌caco-2和HT-29细胞增殖及凋亡的影响。方法采用荧光微孔法测定20（S）-人参皂苷Rh2对体外培养的人结直肠癌caco-2、HT-29细胞增殖的影响,并计算抑制率;利用显微镜观察给药后细胞形态变化。结果 20（S）-人参皂苷Rh2对caco-2、HT-29细胞生长有抑制作用,并呈剂量依赖性;20（S）-人参皂苷Rh2作用48h后HT-29、caco-2细胞达到半数抑制浓度（IC50）为20.66、27.18ug·mL-1;显微镜显示HT-29细胞经25ug/ml20（S）-人参皂苷Rh2作用后细胞之间互相脱离,成多边形状,细胞破碎。结论 20（S）-人参皂苷Rh2可以抑制caco-2、HT-29细胞生长并导致其凋亡。

关键词： 20(S)-人参皂苷Rh2 HT-29 caco-2 细胞凋亡

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JBP485在Caco-2细胞中的转运和摄取

塞来昔布抑制人结肠癌细胞caco-2细胞增生的分子机制

中国药理学会第十次全国学术会议

作者：刘志浩王长远刘琦孟强郭鑫金苍健张健刘克辛大连医科大学药学院

目的观察口服抗肝炎化学合成二肽JBP485在caco-2细胞中的转运和摄取,考察JBP485是否为寡肽转运体PEPT1的底物。方法(1)建立LC-MS/MS法检测细胞转运、摄取过程中JBP485药物含量。(2)将caco-2细胞在transwell小室中培养21天,利用细胞电阻... 详细信息

目的观察口服抗肝炎化学合成二肽JBP485在caco-2细胞中的转运和摄取,考察JBP485是否为寡肽转运体PEPT1的底物。方法(1)建立LC-MS/MS法检测细胞转运、摄取过程中JBP485药物含量。(2)将caco-2细胞在transwell小室中培养21天,利用细胞电阻仪测得细胞单层的TEER值,取TEER值大于250Ω·cm 2的细胞单层进行细胞转运实验。考察了JBP485在caco-2细胞中AP-BL以及BL-AP侧转运速率。(3)将caco-2细胞在24孔板中培养15天,待细胞单层形成后,观察了另一口服抗肝炎化学合成二肽JBP923、?内酰胺类抗生素头孢氨苄以及PEPT1典型底物Gly-Sar对JBP485的转运以及摄取的影响。同时考察了JBP485、JBP923、,头孢氨苄在caco-2细胞中对Gly-Sar摄取的影响。结果JBP485在caco-2细胞中AP-BL侧转运速率显著高于BL-AP侧,且JBP485在caco-2细胞中转运和摄取均能被JBP923、头孢氨苄以及Gly-Sar明显抑制,其抑制速率常数Ki值分别为0.45 mM、0.15 mM和9.90 mM。同时PEPT1典型底物Gly-Sar在caco-2细胞单层中的摄取均能被JBP485、JBP923、头孢氨苄不同程度的抑制。结论JBP485在caco-2细胞中的转运是一个主动转运介导的过程,因为其他PEPT1的底物可明显抑制JBP485的转运,因此推测JBP485可能是寡肽转运体PEPT1的底物。

关键词： JBP485 caco-2 PEPT转运体转运

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国际外科学杂志 2013年第10期40卷 655-658页

作者：张谦郭东来韩振魁斯坎德尔·努尔买买提肖柯·吐尔迪李鹏新疆维吾尔自治区人民医院胃肠外科新疆830000

目的研究塞来昔布在体外对人结肠癌细胞caco-2生长增生及其抗肿瘤的相关分子机制。方法体外培养人结肠癌细胞caco-2，MTY法检测塞来昔布在相同浓度下，不同时间对于结肠癌细胞增生的影响，并计算Ic。值；RT—PCR法检验COX-2、Survivin的... 详细信息

目的研究塞来昔布在体外对人结肠癌细胞caco-2生长增生及其抗肿瘤的相关分子机制。方法体外培养人结肠癌细胞caco-2，MTY法检测塞来昔布在相同浓度下，不同时间对于结肠癌细胞增生的影响，并计算Ic。值；RT—PCR法检验COX-2、Survivin的mRNA的表达影响。结果MTF结果显示：相同干预浓度塞来昔布抑制人结肠癌细胞增生，其24h，48h，72h的Ic。分别为：（99．519±10．355）μmol／L、（71．546±6．446）μmol／L、（59．622±15．999）μmol／L；RT-PCR结果显示：人结肠癌细胞caco-2正常对照组及塞来昔布干预组COX-2mRNA灰度值分别为：0．808±0．021、0．101±0．002（t=19．037，P=0．000）；Survivin mRNA灰度值分别为：0．798±0．031、0．190±0．002（t=18．987，P=0．002）。结论塞来昔布抑制结肠癌细胞增生，塞来昔布抗肿瘤机制可能是通过抑制COX-2及Survivin的mRNA的表达来实现的。

关键词：人结肠癌细胞 caco-2 癌细胞增生塞来昔布分子机制 COX-2mRNA Survivin RT-PCR

千金子素致caco-2细胞毒性的转录组分析

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千金子素致Caco-2细胞毒性的转录组分析

具有抑制肠道致病菌和黏附caco-2细胞作用的益生性乳酸菌的筛选及鉴定

中国毒理学会中药与天然药物毒理与安全性评价第四次（20...

作者：朱安高亚东赵经纬王旗北京大学公共卫生学院毒理学系国家中医药管理局中药配伍减毒重点研究室食品安全毒理学研究与评价北京市重点实验室

目的:千金子是大戟科植物续随子的干燥成熟种子,具泻下逐水功效,但兼具胃肠道毒性。千金子素（EF）是其主要毒性成分,其毒性机制尚不明确。本研究通过RNA-seq高通量测序,分析EFL1和EFL2对人结肠腺癌细胞caco-2转录组的影响,筛选差异表达... 详细信息

目的:千金子是大戟科植物续随子的干燥成熟种子,具泻下逐水功效,但兼具胃肠道毒性。千金子素（EF）是其主要毒性成分,其毒性机制尚不明确。本研究通过RNA-seq高通量测序,分析EFL1和EFL2对人结肠腺癌细胞caco-2转录组的影响,筛选差异表达的miRNA和mRNA,并进行生物信息学分析。方法:（1） 0、50、100、200 u M EF处理caco-2细胞72 h,CCK-8法测定细胞存活率。（2）设置溶剂对照组、200μM EFL1组、200μM EFL2组,分别处理caco-2细胞72h。进行3次独立重复实验,分别提取9个样本的总RNA并进行质检。（3）采用IlluminaNovaSeq高通量二代测序,建立miRNA、mRNA转录组文库,对测序结果进行比对分析和质量评估。（4）以FC＞1.5或＜0.67,P＜0.05为条件筛选差异表达基因（DEG）,然后对DEG进行功能注释和COG、GO、KEGG富集。（5）采用String数据库对mRNA进行蛋白互作网络（PPI）分析。（6）采用RT-qPCR验证关键基因。结果:（1） 200μMEF1、EFL2分别处理caco-2细胞72h后,细胞存活率分别为77.9%、73.1%。（2）琼脂糖凝胶电泳显示各样品总RNA条带清晰,28/23S亮度大于18/16S。RNA完整度结果显示RIN值≥8.0。OD260/280≥1.9,OD260/230≥1.5,总量满足转录组建库需求。（3） miRNA和mRNA的GC含量约50%,Q20＞98%,文库构建质量较高。获得注释的miRNA 2170个、mRNA58884个。（4）与对照组比较,EFL1组差异表达miRNA16个（上调10个,下调6个）;差异表达mRNA 154个（上调88个,下调66个）。EFL2组差异表达miRNA 47个（上调24个,下调23个）;差异表达mRNA 1101个（上调406个,下调695个）。miRNA靶基因COG富集显示胞内转运、分泌和囊泡转运受损严重;GO富集显示腺苷酸环化酶和RNA聚合酶活性异常;KEGG富集显示肾上腺素能受体通路、MAPK、Ras通路异常。mRNA的COG富集显示转运异常;GO富集显示组胺受体活性、转运功能、细胞间连接异常;KEGG富集显示丙酮酸代谢、糖酵解、cAMP通路异常。（5） PPI结果显示:EFL1组有57个基因节点,144条边界,聚类系数0.34;EFL2组有77个基因节点,200条边界,聚类系数0.67。（6） RT-qPCR共验证10个miRNA、14个mRNA的相对表达量,其表达趋势与测序结果基本一致。结论:千金子素可致caco-2细胞的miRNA和mRNA表达谱发生改变,其细胞毒性可能与转运功能、能量代谢、细胞间连接等的异常有关。

关键词：千金子素 caco-2 转录组测序 mRNA miRNA

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食品工业科技 2019年第20期40卷 133-139,153页

作者：张汝京胡亚凡海丹赵梦娜陆兆新吕凤霞赵海珍张充别小妹南京农业大学食品科学技术学院

为了筛选具有肠道益生特性的乳酸菌,进一步开发益生菌资源,本文研究采用牛津杯、人工模拟胃肠液及体外黏附caco-2细胞等方法,以鼠李糖乳杆菌GG(Lactobacillus rhamnosus GG,LGG)为对照菌株,对实验室保藏15株乳酸菌的益生特性进行筛选与... 详细信息

为了筛选具有肠道益生特性的乳酸菌,进一步开发益生菌资源,本文研究采用牛津杯、人工模拟胃肠液及体外黏附caco-2细胞等方法,以鼠李糖乳杆菌GG(Lactobacillus rhamnosus GG,LGG)为对照菌株,对实验室保藏15株乳酸菌的益生特性进行筛选与评估。实验结果表明:15株乳酸菌对两株沙门氏菌都具有一定抑制效果,抑菌圈直径为10.95~22.06 mm;乳酸菌C174、D24、D599、C37、D512具有较好的耐酸耐胆盐能力,在人工胃液3 h内存活率达到60%以上,人工肠液4 h内存活率达到80%以上;在黏附试验中,C174对caco-2细胞具有较强黏附能力,黏附数量为740 CFU/100细胞,略高于对照菌株鼠李糖乳杆菌(543 CFU/100细胞);通过对具有高黏附性的菌株C174进行生理生化和16S rRNA分子测序鉴定,结果表明菌株C174为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum),命名为Lactobacillus plantarum ZJ-174。Lactobacillus plantarum ZJ-174的抑菌能力强、能够耐酸耐胆盐,并具有很强的黏附能力,是一株潜在的益生菌,具有治疗或预防人和动物肠道疾病等应用价值。

关键词：益生菌抑菌性人工模拟胃肠液 caco-2 细胞植物乳杆菌黏附性

P-糖蛋白对两性霉素B在caco-2细胞模型中上皮转运的影响Oseitwum JA等

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中国医药工业杂志 2014年第7期45卷 640-640页

作者：王盈

采用ABCB1敲除的caco-2细胞模型确定两性霉素B（AmB）的无毒浓度范围为1～5μg/ml。AmB对P-糖蛋白ATP酶活性的刺激作用采用含人重组P-糖蛋白的膜来考察，结果在考察的浓度范围内，

关键词： caco-2 P-糖蛋白细胞模型两性霉素B 转运上皮 ATP酶活性浓度范围

EGF和受体FLT-1、FLK-1在大肠癌中的表达及siRNA沉默VEGF基因对大肠癌细胞系caco-2、HT29、HCT116生物学特性的影响

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安徽医科大学学报 2010年第6期45卷 836-836页

作者：吴文清张洪福安徽医科大学基础医学院

目的研究VEGF和受体FLT-1、FLK-1在大肠癌组织中的表达和临床病理因素之间的关系;观察siRNA干扰VEGF基因对不同分化人大肠癌细胞系生物学特性的影响。方法应用免疫组织化学S-P法,检测82例大肠癌及14例大肠正常黏膜组织中VEGF和FLT-1、FL... 详细信息

目的研究VEGF和受体FLT-1、FLK-1在大肠癌组织中的表达和临床病理因素之间的关系;观察siRNA干扰VEGF基因对不同分化人大肠癌细胞系生物学特性的影响。方法应用免疫组织化学S-P法,检测82例大肠癌及14例大肠正常黏膜组织中VEGF和FLT-1、FLK-1的表达,分析大肠癌组织中FLT-1、FLK-1的表达与大肠癌临床病理参数之间的关系;以脂质体lip-2000为载体,用针对VEGF特异靶点的siRNA转染入3种不同分化人大肠癌细胞系caco-2、HT29、HCT116后,免疫细胞化学S-P法、WesternBlot检测VEGF蛋白表达变化,MTT法检测对细胞增殖的影响;流式细胞技术检测细胞凋亡。结果①大肠癌组织VEGF和受体FLT-1、FLK-1阳性表达率显著高于正常大肠组织(Pcaco-2、HT29、HCT116细胞后,免疫细胞化学结果显示:3种大肠癌细胞系的正常对照组,脂质体对照组及阴性错配对照组VEGF表达均呈深棕黄色强阳性表达,3组无明显差别;转染VEGF-siRNA组阳性细胞数均无明显减少,阳性细胞细胞浆呈浅棕黄色弱阳性表达。Westernblot结果显示:caco-2、HT29、HCT116细胞VEGF-siRNA组细胞的蛋白条带亮度均明显低于正常对照组、脂质体对照组和阴性错配对照组,3种细胞的VEGF-siRNA组VEGF蛋白表达均较对照组明显下降。③MTT检测结果:与阴性对照组相比,3种细胞的VEGF-siRNA组细胞生长出现明显的抑制(P24h、48h、72h)肿瘤细胞增殖抑制率之间差异有统计学意义(Pcaco-2、HT29、HCT116)的VEGF-siRNA组的抑制率之间差异有统计学意义(P2、HT29、HCT116细胞的VEGF-siRNA组,均出现明显亚二倍体峰,三种大肠癌细胞系VEGF-siRNA组的凋亡率显著高于正常对照组,两者比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论 VEGF和受体FLT-1、FLK-1与大肠癌的发生密切相关,VEGF与大肠癌的预后有关。siRNA干扰VEGF基因能有效抑制人大肠癌细胞系VEGF蛋白表达,细胞增殖能力减弱,促进细胞凋亡。以VEGF基因为靶点,利用siRNA技术进行基因治疗有可能成为一种新的有效手段。

关键词： HCT116细胞受体FLT-1 siRNA干扰大肠癌细胞系 VEGF基因 caco-2 FLK-1 HT29

应用caco-2型单细胞层系统作为体外模型研究细菌-肠道细胞的相互作用以及细菌易位

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国际骨科学杂志 1995年第2期16卷 109-109页

作者：孟凡寅

肠粘膜的一重要功能就是作为一个局部防御屏障阻止肠腔内正常所含有的细菌和内毒素扩散到远隔部位。但在特定环境下,细菌和内毒素能够穿越肠粘膜屏障播散到肠系膜淋巴结和全身脏器,这一过程称为细菌易位。越来越多的证据表明肠道屏障功... 详细信息

肠粘膜的一重要功能就是作为一个局部防御屏障阻止肠腔内正常所含有的细菌和内毒素扩散到远隔部位。但在特定环境下,细菌和内毒素能够穿越肠粘膜屏障播散到肠系膜淋巴结和全身脏器,这一过程称为细菌易位。越来越多的证据表明肠道屏障功能障碍和细菌易位在

关键词：细菌易位 caco-2 表皮细胞