检索结果-南通市图书馆

苎麻根有效活性成分槲皮素对caco-2细胞增殖迁移的影响及其作用机制的研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

苎麻根有效活性成分槲皮素对Caco-2细胞增殖迁移的影响及其作用机...

作者：王舒谕锦州医科大学

学位级别：硕士

目的运用网络药理学技术和体外细胞学实验探讨苎麻根主要活性成分槲皮素对caco-2细胞的增殖、迁移的影响及相关作用机制,为后续动物实验及临床应用提供理论依据。方法1、网络药理学及分子对接:通过TCMSP与Gene Cards获取苎麻根有效活性... 详细信息

目的运用网络药理学技术和体外细胞学实验探讨苎麻根主要活性成分槲皮素对caco-2细胞的增殖、迁移的影响及相关作用机制,为后续动物实验及临床应用提供理论依据。方法1、网络药理学及分子对接:通过TCMSP与Gene Cards获取苎麻根有效活性成分靶点以及结肠癌的相关靶点,基于韦恩图获取结肠癌靶点与活性成分靶点的交集;使用Cytoscape 3.7.1进行“药物-成分-靶点-疾病”的网络图构建,筛选关键活性成分;使用STRING数据库构建PPI网络选取核心靶点;将关键活性成分同核心靶点进行分子对接验证结合能力;通过R语言对搜集的靶点蛋白进行基因本体(GO)富集分析;应用DAVID数据库进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析。2、体外实验验证:caco-2细胞经不同浓度槲皮素(0.01μg/μL、0.1μg/μL、0.25μg/μL、0.5μg/μL、1μg/μL)作用6 h、18 h、24 h后采用CCK8法检测细胞存活率;以浓度为0.5μg/μL的槲皮素处理caco-2细胞0 h、12 h、24 h、36 h、48 h进行划痕实验检测细胞迁移情况;caco-2细胞经浓度为0.1、0.5和1μg/μL的槲皮素作用18 h后采用实时荧光定量PCR法及Western blot法检测PI3K/Akt信号通路相关基因与蛋白表达量。结果1、网络药理学与分子对接部分:通过筛选共获取苎麻根所含有的5种潜在化学活性成分及与活性成分密切相关的186个潜在靶点,这些潜在靶点中与结肠癌相关的共有104个;PPI网络分析得出苎麻根与结肠癌相互作用的关键节点主要有AKT1、JUN、EGFR、CASP3、IL6等;Cytoscape 3.7.1软件构建药物活性成分-靶点和结肠癌疾病-靶点的可视化网络图得出苎麻根治疗结肠癌中起主要作用成分为槲皮素;分子对接结果显示槲皮素与AKT1蛋白质、Jun蛋白质、EGFR蛋白质、CASP3蛋白质以及IL6蛋白质的结合能分别为-9.5 kcal/mol、-5.7kcal/mol、-8.9 kcal/mol、-7.7 kcal/mol、-7.3 kcal/mol;基因本体(GO)富集分析发现其在体内起作用的生物过程主要包括对脂多糖的反应、活性氧反应等;应用DAVID数据库进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路与基因功能富集分析,共筛选出143条苎麻根治疗结肠癌的潜在信号通路(Pcaco-2细胞对细胞存活率几乎无影响,18 h时,0.1、0.25、0.5和1μg/μL槲皮素使caco-2细胞存活率呈下降趋势(Pcaco-2细胞存活率显著降低(P细胞caco-2增殖、迁移的的抑制作用,从而表现出对结肠癌的治疗作用,验证了前期网络药理学的准确性。

关键词： caco-2细胞苎麻根槲皮素 PI3K/Akt信号通路

凉粉草多糖对硫酸葡聚糖钠诱导的caco-2细胞损伤及小鼠溃疡性结肠炎的缓解作用机制

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

凉粉草多糖对硫酸葡聚糖钠诱导的Caco-2细胞损伤及小鼠溃疡性结肠...

作者：卢汉宇南昌大学

学位级别：硕士

凉粉草(Mesona chinensis Benth)是唇形科的一年生草本植物,可药食两用,在我国南方省份多有分布。多糖是凉粉草中主要的活性成分之一,研究表明凉粉草多糖具有抗氧化、调节免疫、降血糖等生物活性,但凉粉草多糖对结肠炎的改善作用及其机... 详细信息

凉粉草(Mesona chinensis Benth)是唇形科的一年生草本植物,可药食两用,在我国南方省份多有分布。多糖是凉粉草中主要的活性成分之一,研究表明凉粉草多糖具有抗氧化、调节免疫、降血糖等生物活性,但凉粉草多糖对结肠炎的改善作用及其机制的研究却鲜有报道。本文以凉粉草多糖(Mesona chinensis Benth polysaccharide,MBP)为研究对象,通过在体外构建硫酸葡聚糖钠(DSS)诱导的caco-2细胞炎症损伤模型,初步探究MBP干预对于细胞凋亡、氧化应激状态及肠道屏障完整性的影响;然后通过建立DSS诱导的溃疡性结肠炎小鼠模型,探究MBP干预对于小鼠的病理指标、肠道屏障通透性、与MAPK/NF-κB有关的肠道炎症、肠道菌群及其代谢物短链脂肪酸(SCFAs)、肝脏氧化应激水平的影响,揭示MBP对DSS诱导的caco-2细胞损伤及小鼠结肠炎的缓解作用和分子机制。本文所得主要结论如下:1、建立DSS诱导caco-2细胞炎症损伤模型及单层细胞模型,研究MBP对肠道细胞状态及肠道屏障的影响。细胞活力实验及LDH实验结果表明DSS对于caco-2细胞有较强的毒性作用,而MBP干预能增强caco-2细胞的活力,减少LDH的产生。其次,DSS使得细胞氧化应激状态失调,而MBP干预可以通过增强SOD活性、降低ROS含量、减少炎症因子TNF-α和IL-6的分泌和降低COX-2蛋白的表达以改善失调现象。此外,细胞周期、细胞凋亡及蛋白印迹实验结果表明MBP干预可以使得细胞生长周期恢复正常,同时通过Caspase-3/Bcl-2/Bax途径减轻DSS造成的细胞凋亡情况。进一步通过构建caco-2单层细胞模型,发现MBP干预可以增强caco-2单层细胞屏障的完整性,增加TEER值,降低荧光黄的渗透率,同时促进紧密连接蛋白(TJs)如ZO-1,Occludin,Claudin的表达。综上结果初步表明MBP能减轻DSS诱导的肠道细胞损伤,恢复体外模拟的肠道屏障功能,为后续进行体内实验的研究提供参考。2、建立DSS诱导小鼠溃疡性结肠炎模型,研究MBP对结肠炎小鼠病理特征及肠道炎症指标的影响。结肠炎小鼠相较于正常小鼠的肠道会显现出明显的病理特征如结肠缩短、体重减轻、便血和腹泻情况,切片结果分析表明其肠道隐窝及绒毛的结构被破坏、出现炎症细胞过度浸润等现象,而MBP干预可以显著提升疾病活动指数(DAI),缓解了结肠缩短的现象,降低了髓过氧化物酶(MPO)的活性,有效保护了肠道结构的完整性。同时,DSS诱导结肠组织中炎症因子的分泌情况变得紊乱,而MBP干预回调了炎症因子的产生,通过抑制TLR4/MAPK/NF-κB信号通路相关蛋白的过度表达,有效地改善了肠道炎症的水平。综上结果表明MBP干预能有效缓解结肠炎小鼠肠道的炎症状态,这可能与调节TLR4/MAPK/NF-κB信号通路以恢复肠道炎症因子的水平相关。3、基于溃疡性结肠炎小鼠的模型,研究MBP对结肠炎小鼠肠道屏障及肝脏氧化应激状态的影响。蛋白印迹实验及免疫荧光实验结果表明MBP干预能显著提高结肠炎小鼠肠道TJs蛋白和黏蛋白MUC-2的表达,提升凋亡相关蛋白Bcl-2/BAX的比例,增强了肠道屏障的完整性。同时恢复了血清中内毒素(ET)和内毒素结合蛋白(LBP)的水平,进而使得肝脏氧化应激状态回归平衡。综上结果表明MBP干预可以恢复结肠炎小鼠肠道屏障的完整性及肝脏的氧化失调状态。4、基于小鼠溃疡性结肠炎的模型,研究了MBP对结肠炎小鼠肠道菌群及其代谢产物SCFAs的影响。结果表明,MBP干预可以显著促进结肠炎小鼠肠道内SCFAs特别是乙酸盐和丙酸盐的产生。16S r RNA高通量测序结果表明DSS诱导使得小鼠肠道菌群严重失调,表现为Firmicutes与Bacteroidetes的比值显著升高且多样性降低。而MBP干预可以恢复结肠炎小鼠肠道菌群组成结构的变化,降低了多种致病菌如Clostridiaceae＿Clostridium、Helicobacter和Prevotella的相对丰度,同时MD组中Lactobacillus和Coprococcus的相对丰度显著上升;HD组中Bifidobacterium和Oscillospira等有益菌的相对丰度显著上升,同时HD组的菌群多样性结果与正常组相似。LEf Se分析结果显示MC组中的优势菌种为Turicibacter、Acinetobacter和Clostridium;而LD、MD、HD组的标志菌分别为Coprococcus,Akkermansia和Sphingomonas,Blautia和Dysgonomonas。综上所述,本研究先从体外建立DSS诱导caco-2细胞炎症损伤模型及单层细胞模型,初步验证了MBP能减轻DSS对肠道细胞及细胞

关键词：凉粉草多糖 caco-2细胞肠道炎症肠道屏障肠道菌群

caco-2细胞模型快速培养法的建立与评价

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

现代食品科技 2016年第3期32卷 265-270页

作者：马美湖黄晶华中农业大学食品科技学院湖北武汉430070

caco-2细胞模型可用于预测各种途径的食品营养物质吸收,被普遍用于营养物质开发的早期快速筛选过程中。传统caco-2单层细胞模型的建立通常需要培养21 d,本研究建立一种快速培养caco-2单细胞层的方法以缩短实验周期、降低成本。采用向标... 详细信息

caco-2细胞模型可用于预测各种途径的食品营养物质吸收,被普遍用于营养物质开发的早期快速筛选过程中。传统caco-2单层细胞模型的建立通常需要培养21 d,本研究建立一种快速培养caco-2单细胞层的方法以缩短实验周期、降低成本。采用向标准培养基中添加生长因子的方法培养caco-2细胞,分别研究细胞模型跨膜电阻值(TEER)、亲水标志物的渗透性、关键蛋白基因的表达、细胞膜特征形态等评价模型的完整性。表明快速培养法(9 d)获得的caco-2模型跨膜电阻值(TEER)>220Ω·cm2;漏出标志物荧光黄表观分配系数为(0.39±0.15)×10-6 cm/s;肠腔侧(apical,AP)/基底侧(Basolateral,BL)碱性磷酸酶活力比值为5.481±0.5304,单细胞层极性分化明显;q RT-PCR检测细胞单层关键蛋白质(P-gp、MRP2)的m RNA表达量快速法同标准培养法无显著差异。此法仅需9 d即可形成完整caco-2细胞模型。结论是向标准培养基中添加生长因子的caco-2细胞模型快速培养法可推广。

关键词： caco-2细胞转运药物渗透跨膜电阻

基于胃肠模拟研究加减异功散颗粒对老年脾虚犬肠道菌群与caco-2细胞屏障功能的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

基于胃肠模拟研究加减异功散颗粒对老年脾虚犬肠道菌群与Caco-2细...

作者：鲍琳杰山西农业大学

学位级别：硕士

本实验旨在研究加减异功散颗粒对老年脾虚犬肠道菌群以及肠道上皮黏膜屏障功能的影响。采集老年脾虚犬粪样,经涡旋、过滤、离心、扩增后得到犬粪菌孵育液,建立体外胃肠模拟体系,体外模拟加减异功散胃肠物理、化学消化与微生物代谢。利用... 详细信息

本实验旨在研究加减异功散颗粒对老年脾虚犬肠道菌群以及肠道上皮黏膜屏障功能的影响。采集老年脾虚犬粪样,经涡旋、过滤、离心、扩增后得到犬粪菌孵育液,建立体外胃肠模拟体系,体外模拟加减异功散胃肠物理、化学消化与微生物代谢。利用16S r DNA测序法,检测模拟体系菌群的多样性与结构变化。取胃肠模拟产物,经乙酸乙酯萃取、减压蒸发、冷冻干燥、DMSO溶解,过滤膜,用于肠黏膜屏障功能研究。建立caco-2肠上皮黏膜屏障模型,利用LPS对caco-2细胞进行炎性损伤,细胞实验分四组,空白组、给药组、致炎自复组、致炎给药组。致炎24h后进行荧光素钠通透性测定,RT-PCR检测Claudin-1、Occludin与ZO-1 m RNA的相对表达量。实验结果表明,加减异功散能显著增加肠道菌群chao1指数与shannon指数(P0.05)。另外,加减异功散能显著降低厚壁菌门与拟杆菌门比值。在属水平,加减异功散能显著增加布劳特氏菌属、柯林斯菌属、瘤胃球菌属相对丰度(Pcaco-2细胞黏膜荧光素钠通透性,同时促进caco-2细胞Claudin-1、Occludin与ZO-1 m RNA表达,并且能减小Claudin-1与Occludin m RNA表达量比值。综上所述,加减异功散可显著提高脾虚犬肠道菌群多样性,并改善肠道菌群结构,该结果提示,加减异功散有望用于老年犬脾胃虚弱的预防与治疗。

关键词：加减异功散犬胃肠模拟肠道菌群 caco-2细胞肠道屏障

基于caco-2细胞模型研究婴配奶粉中AAAOPs吸收及诱导氧化应激的机制

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

基于Caco-2细胞模型研究婴配奶粉中AAAOPs吸收及诱导氧化应激的机...

作者：白雅婷西北农林科技大学

学位级别：硕士

婴幼儿配方奶粉(婴配奶粉)是母乳最好的替代品,含有婴幼儿生长发育所必需的营养物质。然而,生产加工时的热处理及其他因素会导致婴配奶粉中蛋白质发生氧化修饰,影响蛋白质功能结构和营养价值。有研究表明,婴配奶粉(尤其是蛋白水解奶粉)... 详细信息

婴幼儿配方奶粉(婴配奶粉)是母乳最好的替代品,含有婴幼儿生长发育所必需的营养物质。然而,生产加工时的热处理及其他因素会导致婴配奶粉中蛋白质发生氧化修饰,影响蛋白质功能结构和营养价值。有研究表明,婴配奶粉(尤其是蛋白水解奶粉)中的芳香族氨基酸氧化产物(aromatic amino acid oxidation products,AAAOPs)含量较高,能部分被caco-2单层细胞膜转运吸收,但其吸收转运机制尚不明确。同时,膳食摄入的氧化蛋白质和氨基酸会降低机体抗氧化防御能力,加剧机体内氧化应激反应,并危害机体健康,但AAAOPs诱导细胞产生氧化应激损伤的潜在分子机制尚未阐明。因此,本研究以普通婴配奶粉和蛋白水解婴配奶粉两种类型奶粉(各4种)为研究对象,分析其中蛋白质的氧化程度以及AAAOPs的含量,主要包括:间酪氨酸(meta-Tyrosine,m-Tyr)、犬尿氨酸(Kynurenine,Kyn)、3-羟基犬尿氨酸(3-Hydroxykynurenine,3OHKyn)和双酪氨酸(di-Tyrosine,di-Tyr)。并利用caco-2单层细胞膜模型探究AAAOPs的吸收和转运机制;在此基础上,探究AAAOPs诱导caco-2细胞氧化应激损伤的分子机制。主要研究内容与结果如下:(1)蛋白水解奶粉中蛋白质羰基平均含量(2.76 nmol/mg protein)高于普通婴配奶粉(2.40 nmol/mg protein),巯基含量的平均值(10.34 nmol/mg protein)低于普通婴配奶粉(13.38 nmol/mg protein),蛋白水解奶粉中蛋白质的氧化程度高于普通婴配奶粉;蛋白水解奶粉中3OHKyn和di-Tyr的平均含量显著高于普通婴配奶粉(p0.05),Kyn未检出(低于LC/MS检测限10 nmol/L);婴配奶粉中蛋白分子量集中在13 k Da～70 k Da,水解奶粉中的蛋白分子量2)caco-2细胞单层膜的跨膜电阻值(TEER)在第21 d达到400?·cm左右,顶侧(Apical side,AP)碱性磷酸酶活力是底侧(basolateral side,BL)的2.83倍(pcaco-2细胞已经形成致密的、出现显著极性分化的膜结构。吸收试验结果显示,m-Tyr和Kyn在caco-2细胞模型中的吸收率分别为1.01±0.20%和0.81±0.05%,且两种物质的吸收率无显著性差异(pcaco-2细胞吸收转运通路相关促进剂和抑制剂研究发现,m-Tyr、Kyn和3OHKyn主要通过氨基酸转运载体途径被吸收转运,di-Tyr依赖于Pep T1载体蛋白被caco-2细胞吸收转运。(3)当caco-2细胞暴露于AAAOPs 24 h时,细胞代谢活力被抑制,而孵育48h后又会刺激细胞代谢和增殖(1μmol/L和10μmol/L);AAAOPs可以诱导细胞内活性氧(ROS)含量上升,且呈浓度依赖关系;AAAOPs会抑制细胞内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、谷还原型谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH)的表达,导致丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量升高、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放率上升;AAAOPs(除di-Tyr)孵育caco-2细胞48 h会导致Nrf2基因表达水平不同程度下调,同时造成下游相关抗氧化酶血红素加氧酶(HO-1)、谷氨酸半胱氨酸连接酶(GCLM)和NADP(H)醌氧化还原酶(NQO1)的基因表达水平不同程度升高;AAAOPs处理组的Nrf2蛋白表达水平相比对照组下降,与RT-PCR结果一致,然而相关抗氧化酶HO-1、NQO1、GCLM的表达水平变化趋势与RT-PCR结果存在差异。

关键词：婴配奶粉芳香族氨基酸氧化产物 caco-2细胞氧化应激吸收转运

caco-2细胞模型构建及抗高血压肽VPP和IPP小肠吸收机制研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

食品科学 2014年第15期35卷 226-231页

作者：祝倩郭宇星潘道东曾小群孙杨赢周慧敏南京师范大学金陵女子学院江苏南京210097 宁波大学海洋学院浙江宁波315211

caco-2细胞模型为小肠内皮细胞转运模型,本实验构建caco-2细胞模型并研究抗高血压肽Val-Pro-Pro(VPP)和Ile-Pro-Pro(IPP)的小肠吸收机制。从细胞形态、电阻值和荧光素钠透过率等方面验证了caco-2细胞模型;通过转运时间、肽浓度、吸收抑... 详细信息

caco-2细胞模型为小肠内皮细胞转运模型,本实验构建caco-2细胞模型并研究抗高血压肽Val-Pro-Pro(VPP)和Ile-Pro-Pro(IPP)的小肠吸收机制。从细胞形态、电阻值和荧光素钠透过率等方面验证了caco-2细胞模型;通过转运时间、肽浓度、吸收抑制剂和促进剂比较了VPP和IPP的小肠转运途径及外排机制。结果表明:构建的caco-2细胞模型可用于VPP和IPP的模拟小肠吸收机制研究;VPP和IPP的小肠转运途径是旁路转运,VPP和IPP都存在外排泵的作用,IPP外排作用没有VPP大,所以生物利用度高于VPP。

关键词：抗高血压肽 Val-Pro-Pro Ile-Pro-Pro caco-2细胞转运

caco-2细胞与肠道菌共培养初建体外肠道共生模型

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中山大学学报（医学科学版） 2012年第1期33卷 121-126页

作者：陈晓清焦红程树军易敏英刘静宇许龙岩刘超中山大学公共卫生学院广东广州510080 广东出入境检验检疫局．广东广州510623 ．广东检验检疫技术中心食品实验室．广东广州510623

【目的】构建体外模拟肠道共生系统,用于评价食源性抗菌药及其耐药菌作用于肠道菌群时对人体健康造成的危害风险。【方法】21 d体外培养构建caco-2细胞三维肠上皮,分成无菌对照组、混合的正常菌群组、沙门菌组、混合菌群-沙门菌组4组,... 详细信息

【目的】构建体外模拟肠道共生系统,用于评价食源性抗菌药及其耐药菌作用于肠道菌群时对人体健康造成的危害风险。【方法】21 d体外培养构建caco-2细胞三维肠上皮,分成无菌对照组、混合的正常菌群组、沙门菌组、混合菌群-沙门菌组4组,制备混悬液,各组分别单独和混合培养4 h,荧光定量PCR法测试共培养前后各菌16SrDNA菌量变化,电阻仪测试跨膜上皮电阻(TEER)数量;免疫荧光染色观察紧密连接蛋白ZO-1变化,评价三维肠上皮屏障功能的改变。【结果】在体外共培养模型内,4种肠道菌混合培养4 h后同单独培养组间比较,细菌量增长无统计学差异(P>0.05));需氧菌的增长速度明显高于厌氧菌(Pcaco-2细胞三维肠上皮无明显破坏,侵入性沙门氏菌可显著降低TEER值,并观察到模型的ZO-1结构受到破坏。这种破坏作用在混合肠道菌群加沙门菌群组较轻。【结论】caco-2细胞三维肠上皮同乳双歧杆菌、植物乳酸杆菌、大肠杆菌和粪肠球菌组成的混合菌群体外共培养能建立稳定的体外肠上皮模型,并具有生物学活性;正常肠道菌群对侵入性沙门菌有拮抗作用。该模型可进一步完善作为食源性抗菌药、耐药菌与肠道系统相互作用研究模型的基础。

关键词： caco-2细胞体外肠道模型食源性耐药菌:16S rDNA

caco-2细胞模型评估金属人体生物有效性的研究进展

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

生态毒理学报 2014年第6期9卷 1027-1034页

作者：王振洲崔岩山张震南王姣姣尹乃毅中国科学院大学资源与环境学院北京100049

随着环境重金属污染的加剧和营养学的发展,人们越来越重视对重金属元素及营养金属元素肠道吸收过程的探讨及其生物有效性影响因素的研究。caco-2细胞模型能有效的模拟人体小肠上皮细胞的转运与吸收过程,可结合基因技术、分子技术等手段... 详细信息

随着环境重金属污染的加剧和营养学的发展,人们越来越重视对重金属元素及营养金属元素肠道吸收过程的探讨及其生物有效性影响因素的研究。caco-2细胞模型能有效的模拟人体小肠上皮细胞的转运与吸收过程,可结合基因技术、分子技术等手段用于研究人体肠道吸收物质的机制和影响因素。首先,总结了近年来利用caco-2模型对镉、铬、铅、砷等多种重金属及铜、铁、锌、钙等多种营养金属在小肠内的吸收、转运方式、代谢机制及影响吸收、转运过程的各类条件等的研究工作,然后对caco-2细胞模型研究方法及其在未来评估金属人体生物有效性的应用进行了展望。

关键词： caco-2细胞金属体外试验生物有效性转运与吸收健康风险评估

caco-2细胞模型研究痰热清方配伍对黄芩苷摄取与转运的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国医药工业杂志 2016年第9期47卷 1188-1193页

作者：郑勇凤何雨薇庞亮谢忠意刘绍勇张小利傅超美王建新成都中医药大学四川成都611137 复旦大学药学院上海201203 上海凯宝药业有限公司上海201401

利用caco-2细胞模型,考察痰热清方药物配伍对黄芩苷摄取及转运的影响。结果显示全方配伍及君臣佐配伍均能显著提高黄芩苷的摄取量(P<0.05);在一定时间内,全方配伍能显著增加黄芩苷的吸收(_(Papp AP→BL))(P<0.05)并显著减少其分泌(P_(ap... 详细信息

利用caco-2细胞模型,考察痰热清方药物配伍对黄芩苷摄取及转运的影响。结果显示全方配伍及君臣佐配伍均能显著提高黄芩苷的摄取量(Pcaco-2细胞中的吸收。

关键词：痰热清方黄芩苷 caco-2细胞药物配伍细胞摄取分泌