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Science China Chemistry 1984年第10期27卷 1015-1022页

作者：方荣祥蔡发兴田颖川卜明奚仲兴莽克强 Institute of Microbiology Beijing Academia Sinica

The genomie DNA of camv （Xinjiang isolate） was mapped on the virion DNA with anumber of restriction endonueleases by double digestions and partial digestions of one-endP-labelled fragments. It contained the unique sites of BglI, SalI and XhoI. BamHI andHhaI each cut it at two sites, EeoRI at five sites （three of which were located）, Hpa Ⅱ atseven sites, BglⅡ at eight sites, and HaeⅢ at ten sites. The sites of all the enzymes usedabove, as well as HindⅢ which cut at ton sites were also mapped on the cloned camvDNA. Virion DNA and cloned viral DNA gave the same results in the number and locationof cleavage sites of the restriction enzymes tested on both DNAs. Like most of the otherisolates, camv-Xinjiang isolate has three single-stranded discontinuities. From the diges-tion patterns of SalI, XhoI, EcoRI and HhaI, it is concluded that the restriction map ofcamv-XJ genome is closely related to that of BKMV isolate from East Germany.

关键词： camv STUDY ON THE GENOME OF CAULIFLOWER MOSAIC VIRUS RESTRICTION MAPPING OF VIRION AND CLONED VIRAL DNA

TRANSGENIC TOBACCO PLANTS RESISTANT TO INFECTION OF BOTH TOBACCO MOSAIC VIRUS AND CUCUMBER MOSAIC VIRUS

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Chinese Science Bulletin 1991年第6期36卷 524-526页

作者：方荣祥田颖川王桂玲秦晓峰杨毛周李太元许丙寅莽克强张振臣周汝鸿王凤龙赵钢韩晓东 Institute of Microbiology Chinese Academy of Sciences Beijing 100080 PRC Institute of Plant Protection Henan Provincial Academy of Agricultural Sciences Institute of Tobacco Chinese Academy of Agricultural Sciences

Transgenic plants resistant to infection of viruses such as tobacco mosaic virus (TMV),

关键词： tobacco Transgenic mosaic breeding transgenic camv transformed normally Promoter inoculation

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PCR法检测食品和动物饲料中的转基因成分

卫生研究 2005年第6期34卷 732-735页

作者：周建嫦杨明杰杨杏芬黄俊明凌文华广东省疾病预防控制中心毒理实验所广州510300 中山大学公共卫生学院营养学系

目的初步调查广州市场上含大豆及玉米原料的食品和饲料中转基因成分的存在情况。方法通过PCR检测camv35S启动子和nos终止子,筛选食品中是否含转基因成分,并进一步通过PCR检测RoundUpReadyTMSoybean(RRS)、Bt176Maximaizer和Mon810YieldG... 详细信息

目的初步调查广州市场上含大豆及玉米原料的食品和饲料中转基因成分的存在情况。方法通过PCR检测camv35S启动子和nos终止子,筛选食品中是否含转基因成分,并进一步通过PCR检测RoundUpReadyTMSoybean(RRS)、Bt176Maximaizer和Mon810YieldGard的特异DNA片段,判断是否含这三种成分。结果从22份市售食品和3份动物饲料,检测出1份玉米汤和2份鲜黄豆样品、1份薯条、及1份大鼠和1份豚鼠饲料中含转基因成分;其中的阳性鲜黄豆和饲料样品含有RRS,而阳性玉米汤和饲料样品中未检测到Bt176Maximaizer和Mon810YieldGard。结论部分未标识市售食品和动物饲料中含转基因成分。

关键词： camv 35S启动子 nos终止子 RoundUp Ready^TM Soybean Bt176 Maximaizer Mon810 YieldGard

抗除草剂棉花LLCOTTON25的多重PCR检测方法

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棉花学报 2016年第1期28卷 11-17页

作者：尹全李忆宋君王东张富丽刘文娟常丽娟雷绍荣刘勇四川省农业科学院分析测试中心四川成都610066 四川民族学院四川康定626001 四川省农业科学院植物保护研究所四川成都610066

为了建立1种抗除草剂棉花LLCOTTON25多重PCR检测方法,根据抗除草剂棉花LLCOTTON25分子特征,同时选择棉花内源参照基因(SADI)、花椰菜花叶病毒启动子(P-Ca MV 35S)、根癌农杆菌终止子(T-NOS)和目的基因(bar)4个基因作为多重PCR(Polymeras... 详细信息

为了建立1种抗除草剂棉花LLCOTTON25多重PCR检测方法,根据抗除草剂棉花LLCOTTON25分子特征,同时选择棉花内源参照基因(SADI)、花椰菜花叶病毒启动子(P-Ca MV 35S)、根癌农杆菌终止子(T-NOS)和目的基因(bar)4个基因作为多重PCR(Polymerase chain reaction)检测基因,参照国家相关标准中的特异性引物序列,通过对反应条件的优化以及方法特异性和灵敏度测试,建立了可同时检测除内源基因外的3种外源目的基因的多重PCR检测体系。利用已知样品对本体系验证,抗除草剂棉花LLCOTTON25能被同时检出SADI、P-Ca MV 35S、T-NOS、bar等4个基因,而其他样品均不能被同时检出这4个基因。结果表明此体系可运用于抗除草剂棉花LLCOTTON25检测。

关键词：棉花 LLCOTTON25 多重PCR 检测 camv 35S T-NOS

重组des-pGlu1-Brazzein基因植物表达载体的构建及对人参果的遗传转化

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分子植物育种 2016年第6期14卷 1470-1481页

作者：王克婧张金文张菲菲乔岩王志伟卢晶甘肃省作物遗传改良与种质创新重点实验室兰州730070 甘肃省干旱生境作物学重点实验室兰州730070 甘肃农业大学生命科学技术学院兰州730070 甘肃农业大学农学院兰州730070

本研究通过对茄科植物的E8基因的非编码区DNA序列进行亲缘关系及功能元件保守性分析,发现E8基因的非编码区包含ERE,茉莉酸和低温干旱应答等基序并存在较高的保守性,表明利用果实特异性E8启动子改善同属茄科茄属的人参果果实风味更具特异... 详细信息

本研究通过对茄科植物的E8基因的非编码区DNA序列进行亲缘关系及功能元件保守性分析,发现E8基因的非编码区包含ERE,茉莉酸和低温干旱应答等基序并存在较高的保守性,表明利用果实特异性E8启动子改善同属茄科茄属的人参果果实风味更具特异性;利用密码子偏爱性优化设计甜蛋白Brazzein,采用亚克隆技术成功获得甜蛋白des-pGlu1-Brazzein基因和E8启动子基因,经Blast对比均与GenBank中已报道的序列高度同源,并利用2KGQ模型分析des-pGlu1-Brazzein基因的空间结构特性;以中间载体pHANNIBAL及植物表达载体pCEPSP为基础,分别构建由E8启动子及35S启动子驱动的兼具重组甜蛋白及除草剂抗性的植物表达载体,并通过农杆菌介导法进行人参果的遗传转化,获得转化再生植株54株,经检测从中筛选出15株阳性植株,初步确定已经完成目的基因整合到人参果基因组中。

关键词：人参果 des-pGlu1-Brazzein E8启动子 camv 35S启动子植物表达载体遗传转化

几种基于pCAMBIA系列多用途新型植物表达载体的改建及优化

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吉林大学学报（理学版） 2014年第2期52卷 371-375页

作者：李敬涛孙新华余刚贾承国杜茜李启云潘洪玉吉林大学植物科学学院长春130062 吉林省农业科学院长春130124

以pCHF3,pCAMBIA1301,pCAMBIA3300和pCAMBIA3301载体为骨架,构建camv 35S和rd29A启动子驱动多克隆位点(MCS:SacⅠ,KpnⅠ,SmaⅠ,BamHⅠ,XbaⅠ,SalⅠ,PstⅠ)的通用型重组植物双元表达载体,得到两种启动子驱动下MCS与eGFP融合的应用型亚细... 详细信息

关键词：植物双元表达载体 camv 35S rd29A 多克隆位点增强型绿色荧光蛋白

大豆抗病相关基因SR1正反义植物表达载体的构建及遗传转化研究

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大豆科学 2005年第2期24卷 90-94页

作者：林世锋张淑珍杨秀红陈庆山杨庆凯李文滨东北农业大学大豆科学研究所哈尔滨150030

实验构建了camv35S启动子控制下的大豆抗病相关基因SR1的正反义植物双元表达载体pBISR1(+)和pBISR1(-)。通过根癌农杆菌叶盘转化法,将正义和反义SR1 基因导入烟草Ha vana 425,经卡那霉素筛选,获得了抗性植株。经PCR和PCR-Southern印迹分... 详细信息

实验构建了camv35S启动子控制下的大豆抗病相关基因SR1的正反义植物双元表达载体pBISR1(+)和pBISR1(-)。通过根癌农杆菌叶盘转化法,将正义和反义SR1 基因导入烟草Ha vana 425,经卡那霉素筛选,获得了抗性植株。经PCR和PCR-Southern印迹分析,证明抗性植株中整和了SR1基因,RT-PCR分析进一步表明正义和反义基因皆能转录为完整的mRNA,经疫霉根腐接种及抗病性鉴定表明,转反义基因株系和未转基因株系均轻微感病,而转正义基因株系始终没有出现感病症状。

关键词：抗病相关基因反义植物表达载体遗传转化构建大豆双元表达载体 35S启动子抗性植株反义基因 PCR分析抗病性鉴定 camv 基因导入卡那霉素 mRNA 正义基因转化法株系转基因感病根癌烟草接种根腐疫霉

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对引进的美国大豆品种进行转基因成分的检测

大豆科学 2005年第2期24卷 116-120页

作者：宋扬吴存祥侯文胜韩天富中国农业科学院作物科学研究所北京100081

利用田间表型鉴定和PCR检测相结合的方法,对从美国引进的46 个大豆品种进行了转基因成分的检测。实验过程中,首先通过喷洒草甘膦对待测材料进行表型鉴定,然后通过PCR分子检测分析camv35S启动子和NOS终止子的有无,初步判定引进材料是否... 详细信息

利用田间表型鉴定和PCR检测相结合的方法,对从美国引进的46 个大豆品种进行了转基因成分的检测。实验过程中,首先通过喷洒草甘膦对待测材料进行表型鉴定,然后通过PCR分子检测分析camv35S启动子和NOS终止子的有无,初步判定引进材料是否为转基因大豆,最后对目的基因CP4-EPSPS进行检测,进一步确定所测材料是否为抗草甘膦转基因大豆。大豆本身的凝集素基因作为PCR检测的内置检测标准,有效排除了由于DNA质量、实验操作等因素对检测结果的影响。结果表明,在所检测的46个引进品种中,5个是抗草甘膦转基因品种,41个是非转基因品种,它们可作为我国大豆新品种选育的亲本材料。

关键词：转基因成分大豆品种美国转基因大豆转基因品种 NOS终止子 35S启动子抗草甘膦 PCR检测凝集素基因新品种选育实验过程 camv 检测分析目的基因检测标准检测结果实验操作引进品种亲本材料 DNA 鉴定表型田间

我国大豆主产区黑龙江省田间种植大豆的转基因成分检测

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科学通报 2005年第10期50卷 987-991页

作者：姜海燕王建华武鹏李永春王国英中国农业大学种子科学系农业生物技术国家重点实验室北京100094

采集黑龙江省不同地区田间210份大豆检测样品,利用定性PCR技术分析检测其中是否含有转基因成分(camv35S启动子、NOS终止子和CP4-EPSPS基因).结果表明,210份样品中均未检测到camv35S启动子成分;在13个样品中虽扩增出类似CP4-EPSPS的条带... 详细信息

采集黑龙江省不同地区田间210份大豆检测样品,利用定性PCR技术分析检测其中是否含有转基因成分(camv35S启动子、NOS终止子和CP4-EPSPS基因).结果表明,210份样品中均未检测到camv35S启动子成分;在13个样品中虽扩增出类似CP4-EPSPS的条带,但对PCR产物的进一步酶切鉴定表明,所有扩增结果为假阳性.利用巢式PCR对样品0x1的进一步分析表明,该样品中不含有转基因大豆(roundupready)成分.对0x1样品用CP4-EPSPS引物扩增得到的片段进行了测序.序列分析表明,该片段与CP4-EPSPS基因的同源性仅有81%,再次证明它不是转基因大豆的CP4-EPSPS基因.

关键词：黑龙江省成分检测田间种植 EPSPS基因主产区 35S启动子转基因大豆 NOS终止子转基因成分 PCR技术 PCR产物巢式PCR 检测样品分析检测 camv 酶切鉴定分析表假阳性同源性片段

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植物遗传工程

生物技术通报 1994年第1期10卷 95-108页

940312稳定转化的植物细胞中骨架连接区增强报道基因表达〔英〕/Allen,G.C.…/Plant Cell一1993,5(6)一603~613〔译自DBA,1993,12(17),93一09903〕酿酒酵母自主复制片段ARS一1含有一个能离体与植物核骨架结合的骨架连接区(S AR)。为了... 详细信息

940312稳定转化的植物细胞中骨架连接区增强报道基因表达〔英〕/Allen,G.C.…/Plant Cell一1993,5(6)一603~613〔译自DBA,1993,12(17),93一09903〕酿酒酵母自主复制片段ARS一1含有一个能离体与植物核骨架结合的骨架连接区(S AR)。为了试验对基因表达的效应,将一个位于该片段侧翼的、在camv 355启动子调控下的,GUS基因的构建物通过微轰击转送到烟草NT一1悬浮细胞中。在稳定转化的细胞系中,含两个侧翼SAR构建物的GUS活性比缺少SAR的对照平均高12倍。表达水平不与基因拷贝数成比例。而在某些含多基因拷贝的转化体中,该片段似乎是减少对

关键词：植物基因根癌土壤杆菌转座因子体细胞杂种 camv 启动子调控拟南芥属瞬时表达田桂英孟宪学