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A novel missense mutation, GGC（Arg454） → TGC（Cys）, of cyp11b1 gene identified in a Chinese family with steroid 11β-hydroxylase deficiency

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Chinese Medical Journal 2010年第10期123卷 1264-1268页

作者： YE Zheng-qin ZHANG Man-na ZHANG Hui-jie JIANG Jing-jing LI Xiao-ying ZHANG Ke-qin Department of Endocrinology First Affiliated Hospital of Nanjing Medical University Nanjing Jiangsu 210029 China Shanghai Institute of Endocrinology and Metabolism Rui Jin Hospital Shanghai Jiao Tong University School of Medicine Shanghai 200025 China

background Steroid 11β-hydroxylase deficiency （11β-OHD）, an autosomal recessive inherited disease, accounts for 5%-8% of congenital adrenal hyperplasia. It was scarcely reported in China. This article reports two Chinese girls with 11β-OHD. Methods The two patients were sisters and presented with hypertrichosis, skin pigmentation, laryngeal prominence and virilization of external genitalia. The patients were followed up for their clinical symptoms and signs, hormone profile, and adrenal image. The genomic deoxyribonucleic acids of the patients and their parents were isolated. 11β-hydroxylase gene （cyp11b1） was amplified by polymerase chain reaction and directly sequenced. Results Hormone tests showed that serum cortisol was in the low limit of normal range, whereas the concentrations of adrenocorticotropic hormone, testosterone and progesterone were much higher than those of normal adult females. There were obvious adrenal hyperplasia and advance of bone age. After 11 months of treatment with dexamethasone, the skin pigment became regressed; the breast, uterus and ovary gradually developed and normal menstrual cycle started while the manifestations of virilization did not change. A single point mutation of cyp11b1 （R454C, GGC → TGC） in all the members of this family was detected. The sisters were homozygous and their parents were heterozygous. Conclusions The clinical manifestation of 11β-OHD is complicated. The manifestation of virilization could not regress after treatment with dexamethasone. The novel missense mutation of cyp11b1 （R454C, GGC → TGC） is the pathogenesis of 11β-OHD at least in some Chinese patients.

关键词： 11 beta-hydroxylase cyp11b1 congenital adrenal hyperplasia

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葶苈子对压力负荷大鼠心肌cyp11b1、cyp11b2及TGF-β_1 mRNA表达的影响

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中药材 2008年第11期31卷 1691-1695页

作者：郭娟陈长勋杜军顾伟梁沈云辉上海中医药大学药理教研室上海201203

目的:研究葶苈子水提液对压力负荷大鼠心肌cyp11b1、cyp11b2及TGF-β1 mRNA表达的影响。方法:腹主动脉不完全结扎法(AAb)制作大鼠心肌肥厚、心室重构模型。药物干预30d后,称重法测定心脏指数(HW/bW)、左室重量指数(LVW/bW),Real-Time PC... 详细信息

目的:研究葶苈子水提液对压力负荷大鼠心肌cyp11b1、cyp11b2及TGF-β1 mRNA表达的影响。方法:腹主动脉不完全结扎法(AAb)制作大鼠心肌肥厚、心室重构模型。药物干预30d后,称重法测定心脏指数(HW/bW)、左室重量指数(LVW/bW),Real-Time PCR反应技术,以Rat 18S为内参照,测定心肌cyp11b1,cyp11b2,TGF-β1 mRNA的表达水平。结果:模型组大鼠心脏指数增高,醛固酮合成基因和转化生长因子β1表达增强。葶苈子水提液能改善心肌肥厚指数,降低大鼠心肌醛固酮合成基因cyp11b1、cyp11b2及TGF-β1的mRNA表达水平。结论:葶苈子水提液可能通过抑制心肌醛固酮合成相关基因cyp11b1、cyp11b2 mRNA表达水平,降低转化生长因子β1的合成而抑制心室重构的发生。

关键词：葶苈子醛固酮 cyp11b1 cyp11b2 TGF—β1 mRNA表达

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cyp11b1基因新突变致11β-羟化酶缺陷症1例家系研究

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山东大学学报（医学版） 2017年第9期55卷 85-89页

作者：刘贺刘福强侯新国陈丽山东大学齐鲁医院内分泌科山东济南250012

目的分析1例经典型11β-羟化酶缺乏症患者的临床表现及其家系基因型特点。方法分析2016年3月9日诊断的1例经典型11β-羟化酶缺乏症患者的临床特征、诊疗结果、随访情况及基因测序,并结合文献进行回顾性分析。结果患者,男,29岁,发作性四... 详细信息

目的分析1例经典型11β-羟化酶缺乏症患者的临床表现及其家系基因型特点。方法分析2016年3月9日诊断的1例经典型11β-羟化酶缺乏症患者的临床特征、诊疗结果、随访情况及基因测序,并结合文献进行回顾性分析。结果患者,男,29岁,发作性四肢麻痹20余年,当地医院检查发现低钾血症伴高血压,查体示身高155 cm,全身皮肤颜色较黑,自幼较同龄人生长发育迅速,8岁后身高增长不明显。CT示双侧肾上腺占位,实验室检查血浆促肾上腺皮质激素301.70 pg/mL、17-羟孕酮23.83 ng/mL、血清睾酮997.04 ng/dL、硫酸去氢表雄酮921.70μg/dL、雄烯二酮>10.30 ng/mL、立位肾素活性1.90μIU/(mL·h)、醛固酮/肾素活性0.72。使用地塞米松0.75 mg/d(睡前服用)联合复方利血平氨苯喋啶片可有效抑制ACTH、雄激素水平及控制血压。cyp11b1基因分析示患者存在新纯合剪接突变c.595+1G>A,其母亲、姐姐为该突变携带者,生物学父亲未见异常。结论糖皮质激素联合利血平氨苯喋啶片可用于经典型11β-羟化酶患者治疗。基因型c.595+1G>

关键词：先天性肾上腺增生 11β-羟化酶缺陷症 cyp11b1 基因突变

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丹参酮ⅡA对自发性高血压大鼠心脏醛固酮合成及其相关基因cyp11b1和cyp11b2mRNA表达的影响

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中国药学杂志 2005年第1期40卷 31-34页

作者：占成业陶秀良韩少杰郑智华中科技大学同济医学院附属同济医院急诊科湖北武汉430030 华中科技大学同济医学院附属同济医院中医药研究室湖北武汉430030

目的　研究丹参酮ⅡA对心脏局部醛固酮合成及其相关基因mRNA表达的作用。方法　雄性自发性高血压大鼠 (SHR)和WKY大鼠共 30只 ,分为 3组 :对照组、高血压组、丹参酮ⅡA组。丹参酮ⅡA组经腹腔注射丹参酮ⅡA治疗 12周。采用放射免疫法和... 详细信息

目的　研究丹参酮ⅡA对心脏局部醛固酮合成及其相关基因mRNA表达的作用。方法　雄性自发性高血压大鼠 (SHR)和WKY大鼠共 30只 ,分为 3组 :对照组、高血压组、丹参酮ⅡA组。丹参酮ⅡA组经腹腔注射丹参酮ⅡA治疗 12周。采用放射免疫法和逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)技术测定各组心肌组织醛固酮含量及醛固酮合成相关基因cyp11b1,cyp11b2的mRNA表达量。结果　与WKY大鼠相比较 ,SHR心肌醛固酮含量及cyp11b1,cyp11b2基因的表达水平显著增高 (P cyp11b2基因的mRNA水平均有明显下降 (P cyp11b1基因的mRNA水平无明显变化。结论　丹参酮ⅡA抑制高血压左室肥厚的效应可能与其下调心肌醛固酮合成相关基因cyp11b2的表达水平 ,减少心脏局部醛固酮的生物合成有关。

关键词：丹参酮ⅡA 醛固酮醛固酮合成相关基因 cyp11b1 cyp11b2

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Clinical and molecular characterization of 10 Chinese children with congenital adrenal hyperplasia due to 11beta‑hydroxylase deficiency

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World Journal of Pediatrics 2024年第4期20卷 422-433页

作者： Wen‑Li Lu Xiao‑Yu Ma Jiao Zhang Jun‑Qi Wang Ting‑Ting Zhang Lei Ye Yuan Xiao Zhi‑Ya Dong Wei Wang Shou‑Yue Sun Chuan‑Yin Li Rong‑Gui Hu Guang Ning Li‑Dan Zhang Department of Pediatrics Ruijin HospitalShanghai Jiao Tong University School of MedicineNo.197Ruijin 2nd RdHuangpu DistrictShanghai 200025China Department of Pediatric Genetic and Metabolic Endocrinology West China Second University HospitalSichuan UniversityNo.20Section 3Renmin South RoadSichuan 610041China Department of Endocrine and Metabolic Diseases Shanghai Clinical Center for Endocrine and Metabolic DiseasesRuijin HospitalShanghai Jiao Tong University School of MedicineShanghai 200025China Cancer Center School of MedicineShanghai Tenth People’s HospitalTongji UniversityYanchang Zhong Lu 301St RdJing’an DistrictShanghai 200031China

background The clinical manifestations of nonclassical 11beta-hydroxylase deficiency are very similar to those of nonclassical 21-hydroxylase *** this study,we investigated the relationship between the clinical and molecular features of congenital adrenal hyperplasia caused by 11beta-hydroxylase deficiency and reviewed the related literature,which are expected to provide assistance for the clinical diagnosis and analysis of congenital adrenal *** Clinical data for 10 Chinese patients diagnosed with congenital adrenal hyperplasia in our hospital from 2018 to 2022 were retrospectively *** examined the effects of gene mutations on protease activity and constructed threedimensional structure prediction models of *** We describe 10 patients with 11beta-hydroxylase gene mutations(n=5,46,XY;n=5,46,XX),with 10 novel mutations were *** patients received treatment at an early stage,with an average age of 2.08±1.66 years,whereas male patients received treatment significantly later,at an average age of 9.77±3.62 *** most common cyp11b1 pathogenic variant in the Chinese population was found to be c.1360C>*** mutations lead to spatial conformational changes that affect protein *** Our study found that there was no significant correlation between each specific mutation and the severity of clinical *** patients with the same gene pathogenic variant may have mild or severe clinical *** correlation between genotype and phenotype needs further ***-dimensional protein simulations may provide additional support for the physiopathological mechanism of genetic mutations.

关键词： 11β-hydroxylase deficiency cyp11b1 Enzymatic activity Phenotype-genotype correlation Threedimensional protein simulations

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细胞色素P450 5A1和11b1与配体相互作用的理论研究

细胞色素P450 5A1和11B1与配体相互作用的理论研究

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作者：胡丽琴吉林大学

学位级别：硕士

细胞色素P450广泛存在于各种生物体内,参与多种重要的生理过程,如解毒、防御和内源性化合物(如类固醇激素)的生物合成以及外源性物质的代谢。许多疾病的发生都与P450酶的代谢相关,因此,了解P450酶与配体的相互作用是十分重要的。单纯利... 详细信息

细胞色素P450广泛存在于各种生物体内,参与多种重要的生理过程,如解毒、防御和内源性化合物(如类固醇激素)的生物合成以及外源性物质的代谢。许多疾病的发生都与P450酶的代谢相关,因此,了解P450酶与配体的相互作用是十分重要的。单纯利用实验方法研究蛋白质功能具有较大的局限性,已经很难满足人们的需要,以计算机技术为基础的分子模拟方法弥补了这一不足。本论文利用分子动力模拟方法,对两种P450酶(cyp5A1和cyp11b1)与配体的相互作用进行了系统的理论研究。主要内容总结如下:***5A1与含氮杂环抑制剂相互作用的分子动力学模拟细胞色素P450 5A1(Cytochrome P450 5A1,cyp5A1)参与血栓素A合成,血栓素A是血小板聚集、血管收缩和支气管收缩的有效介质,该酶被认为是治疗心血管疾病的重要靶点。然而,由于缺乏实验数据,人们对该酶的结构特征及其与抑制剂分子的作用机制理解有限。该工作通过同源模建、分子对接和分子动力学模拟的方法,考察了cyp5A1与三种抑制剂(ozagrel、pyragrel和furegrelate)的相互作用情况。结果表明,三种抑制剂以相似的结合模式稳定在cyp5A1的结合口袋中。结合自由能分析表明,非极性相互作用是cyp5A1与抑制剂结合的关键因素。我们注意到,L125、I340和I345在cyp5A1与三种抑制剂的结合中都起到了重要作用,它们形成一个“夹子”结构,将抑制剂固定在结合位点。此外,我们发现与另外两个抑制剂相比,抑制剂pyragrel由于有更多的支链,和蛋白有更多的接触,所以结合能力更强。该项工作将有助于我们更好地理解cyp5A1的结构-功能关系,可为相关抑制剂的开发提供理论线索。2.突变影响cyp11b1与底物相互作用的分子机制细胞色素P450 11b1(Cytochrome P450 11b1,cyp11b1)属于细胞色素P450酶11家族,参与类固醇激素的合成。cyp11b1突变可导致皮质醇产生减少以及类固醇前体的积累,最终引起先天性肾上腺皮质增生症(Congenital Adrenal Hyperplasia,CAH)。了解残基突变对cyp11b1结构和功能的影响具有重要意义。文献报道cyp11b1的A306V和L299P突变使得该酶活性几乎完全丧失。11-脱氧皮质酮(11-deoxycorticosterone,DOC)是cyp11b1的一种典型底物。在这一部分工作中,我们以DOC为分子探针,利用分子对接、分子动力学模拟、结合自由能计算、自由能面图分析和通道分析来考察了cyp11b1与DOC的相互作用情况,明确了二者相互作用的细节,阐明了A306V与L299P突变导致cyp11b1酶活性降低的原因。结果表明,9个关键残基(F130、A313、G314、T318、V378、G379、L382、F487和I488)构成了一个疏水口袋,通过疏水相互作用将DOC稳定在活性位点,F381与DOC形成氢键将DOC锚定在有利于催化的位置。突变研究结果表明,A306突变为V306,会间接破坏疏水口袋,从而影响底物结合,而L299突变为P299引起cyp11b1局部构象的改变,最终影响了底物结合。综上,A306V与L299P突变间接改变了DOC与cyp11b1的结合方式,降低了配体与cyp11b1的亲和力,不利于反应的发生。研究结果可以帮助我们了解cyp11b1代谢DOC的过程并在原子层面上解释了突变导致cyp11b1活性下降的原因。

关键词： cyp5A1 cyp11b1 同源模建分子动力学模拟结合自由能计算

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金枪鱼胰脏酶解多肽对db/db糖尿病小鼠肾脏的保护作用

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食品科学 2017年第3期38卷 182-187页

作者：孙婷婷李妍妍周君张迪骏李晔张春丹何珊黄忠白苏秀榕宁波大学海洋学院浙江宁波315211 康奈尔大学农业与生命科学学院美国纽约州伊萨卡14850

目的:研究金枪鱼胰脏酶解多肽对db/db糖尿病小鼠体质量、血清胰岛素、糖化血红蛋白、血脂的影响,为进一步开发金枪鱼胰脏、研制新型保健型食品提供理论依据。方法:雄性Db/m小鼠为空白对照组,雄性db/db小鼠30只,分为模型对照组、阳性药组... 详细信息

目的:研究金枪鱼胰脏酶解多肽对db/db糖尿病小鼠体质量、血清胰岛素、糖化血红蛋白、血脂的影响,为进一步开发金枪鱼胰脏、研制新型保健型食品提供理论依据。方法:雄性Db/m小鼠为空白对照组,雄性db/db小鼠30只,分为模型对照组、阳性药组(甲基巴多索隆9.75 mg/(kg·d))、实验组,实验组灌胃金枪鱼胰脏酶解多肽(50 mg/(kg·d))。10周后测定各组小鼠体质量、血清胰岛素、糖化血红蛋白、血脂水平等指标。利用基因芯片技术,比较不同组间肾脏基因的表达水平。结果:与模型对照组相比,实验组能显著降低糖尿病小鼠的体质量、血清胰岛素、糖基化血红蛋白水平;降低总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇水平,升高高密度脂蛋白胆固醇水平。并且,与模型对照组的差异表达比较,实验组基因表达水平有显著改变,获得差异基因678个,其中161个上调,517个下调。结论:金枪鱼胰脏酶解多肽可以改善db/db糖尿病小鼠的体质量、血清胰岛素、糖化血红蛋白、血脂水平,其作用效应可能与其下调醛固酮合成相关基因cyp11b1的表达水平有关。

关键词：金枪鱼胰脏酶解多肽糖尿病 db/db小鼠 cyp11b1

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原发性醛固酮增多症伴亚临床库欣综合征1例报道并文献复习

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山东大学学报（医学版） 2023年第12期61卷 107-112页

作者：刘庆燕王翰博包瑾瑾苏文敬刘佳内分泌糖脂代谢与脑老化教育部重点实验室山东第一医科大学附属省立医院内分泌代谢病科山东济南250021 山东省糖尿病与代谢疾病临床医学研究中心山东济南250021 山东省内分泌与代谢病研究所山东济南250021 山东第一医科大学附属省立医院泌尿外科山东济南250021 山东第一医科大学附属省立医院病理科山东济南250021

有研究表明,原发性醛固酮增多症常与亚临床库欣综合征相关,且患病率在10%以上,但两者发生于同侧肾上腺腺瘤的情况较为少见。由于肾上腺静脉采血,cyp11b1(基因编码11β-羟化酶)、cyp11b2(基因编码醛固酮合成酶)功能性免疫组织化学检测在... 详细信息

有研究表明,原发性醛固酮增多症常与亚临床库欣综合征相关,且患病率在10%以上,但两者发生于同侧肾上腺腺瘤的情况较为少见。由于肾上腺静脉采血,cyp11b1(基因编码11β-羟化酶)、cyp11b2(基因编码醛固酮合成酶)功能性免疫组织化学检测在临床中较少应用,使得疾病漏诊、误诊的概率大大增加。本文报道1例发生于同侧肾上腺腺瘤的原发性醛固酮增多症伴亚临床库欣综合征病例,通过肾上腺静脉采血、功能性免疫组织化学检测证实其诊断,为临床医生正确诊疗相关疾病提供更多思路。

关键词：原发性醛固酮增多症亚临床库欣综合征肾上腺静脉采血 cyp11b1 cyp11b2

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丹参酮ⅡA抑制高血压状态下心脏醛固酮合成及其相关基因的表达(英文)

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中国临床康复 2005年第23期9卷 243-245,F003页

作者：占成业陶秀良韩少杰郑智华中科技大学同济医学院附属同济医院急诊科湖北省武汉市430030 华中科技大学同济医学院附属同济医院中西医结合研究所湖北省武汉市430030

背景:醛固酮是左心室肥厚的主要致病因子,有效抑制其生物合成可防治高血压左室肥厚。目的:观察丹参酮ⅡA对自发性高血压大鼠心肌醛固酮合成及其相关基因cyp11b1和cyp11b2表达的作用,以及其抑制高血压左室肥厚的可能途径。设计:以自发性... 详细信息

背景:醛固酮是左心室肥厚的主要致病因子,有效抑制其生物合成可防治高血压左室肥厚。目的:观察丹参酮ⅡA对自发性高血压大鼠心肌醛固酮合成及其相关基因cyp11b1和cyp11b2表达的作用,以及其抑制高血压左室肥厚的可能途径。设计:以自发性高血压大鼠为实验对象,以正常血压的WKY大鼠为对照,完全分组设计,随机对照实验,各组间均数的比较用方差分析。单位:华中科技大学同济医学院附属同济医院急诊科和中西医结合研究所。材料:实验于2003-01/2004-02在华中科技大学同济医学院附属同济医院急诊科实验室完成。选用12周龄雄性正常血压WKY大鼠10只为对照组,将12周龄雄性自发性高血压大鼠20只随机分为2组,每组10只,分别为高血压组和丹参酮ⅡA组。方法:丹参酮ⅡA组经腹腔每天注射1.5mg/kg丹参酮ⅡA,高血压组和对照组均腹腔注射相当容积的蒸馏水。实验12周后断头处死大鼠留取心肌标本,心肌组织醛固酮和血管紧张素II含量采用放射免疫法测定,心肌醛固酮合成相关基因cyp11b1和cyp11b2mRNA表达水平采用反转录聚合酶链反应检测。主要观察指标:实验12周后各组大鼠心肌组织醛固酮和血管紧张素II含量及cyp11b1和cyp11b2基因的mRNA表达量比较。结果:自发性高血压大鼠20只和正常血压WKY大鼠10只均进入结果分析。①实验12周后大鼠心肌组织醛固酮含量:高血压组和丹参酮ⅡA组均明显高于对照组[(0.056±0.014),(0.031±0.010),(0.018±0.009)ng/g,Pcyp11b1基因的表达量:高血压组和丹参酮ⅡA组均明显高于对照组(2.774±0.138,2.533±0.127,1.973±0.102,Pcyp11b2基因的表达量:高血压组和丹参酮ⅡA组均明显高于对照组(1.573±0.106,1.024±0.113,0.786±0.121,Pcyp11b1和cyp11b2及参照基因甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因的反转录聚合酶链反应产物电泳带的位置与理论值相符。结论:丹参酮ⅡA抑制高血压左室肥厚的效应可能与其下调心肌醛固酮合成相关基因cyp11b2的表达水平,减少心脏局部醛固酮的生物合成有关。

关键词：丹参酮/药理学醛固酮 cyp11b1 cyp11b2

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丹参酮ⅡA抑制醛固酮生物合成的作用(英文)

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中国临床康复 2005年第27期9卷 218-219页

作者：夏艳占成业韩少杰郑智华中科技大学同济医学院附属同济医院支助中心病房湖北省武汉市430030 华中科技大学同济医学院附属同济医院急诊科湖北省武汉市430030

背景:醛固酮是左心室肥厚重要的致病因子,有证据提示中药丹参提取物能够干预醛固酮的生物合成。目的:探讨丹参酮ⅡA对心肌醛固酮合成相关基因表达的作用。设计:随机对照观察。单位:华中科技大学同济医学院附属同济医院。材料:实验于2002... 详细信息

背景:醛固酮是左心室肥厚重要的致病因子,有证据提示中药丹参提取物能够干预醛固酮的生物合成。目的:探讨丹参酮ⅡA对心肌醛固酮合成相关基因表达的作用。设计:随机对照观察。单位:华中科技大学同济医学院附属同济医院。材料:实验于2002-11/2004-03在华中科技大学同济医学院附属同济医院急诊科实验室完成,选用12周龄雄性自发性高血压SHR大鼠20只,随机分为高血压组、丹参酮ⅡA组,每组10只。方法:丹参酮ⅡA组经尾静脉注射丹参酮ⅡA溶液1.5mg/(kg·d),高血压组给予相当容积的蒸馏水。给药12周后断头处死大鼠,留取心肌标本,通过反转录-聚合酶链反应,以GAPDH基因扩增引物表为内参照,分别测定心肌醛固酮合成相关基因cyp11b1及cyp11b2mRNA表达。主要观察指标:心肌醛固酮合成相关基因cyp11b1及cyp11b2mRNA表达水平。结果:20只大鼠被纳入实验,并全部进入结果分析,无脱失值。①两组大鼠心肌cyp11b1及cyp11b2基因表达的定性分析:以100bpPlusLad-der为Marker,分别在440bp,461bp及336bp处可见清晰的扩增条带,DNA测序证实为cyp11b1,YP11b2及GAPDH的编码基因片段。②两组大鼠心肌cyp11b1及cyp11b2基因表达的定量分析:丹参酮ⅡA组cyp11b1及cyp11b2的mRNA表达水平明显低于高血压组(0.924±0.121,1.343±0.132,P119,1.675±0.126,Pcyp11b1及cyp11b2mRNA表达,抑制心脏局部醛固酮的生物合成,从而发挥抗高血压左室肥厚的效应。

关键词：高血压丹参酮醛固酮 cyp11b1 cyp11b2

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