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南方医科大学学报 2013年第9期33卷 1367-1371页

作者：黄榕权龙捷张惠球张雅洁广州医科大学病理教研室广东广州510182

目的研究短肽RGDSY-ctthwgftlc对乳腺癌MCF-7细胞的抗肿瘤能力,为开发更高效的肽类抗肿瘤药物奠定实验理论基础。方法 (1)化学合成目标短肽RGDSY-ctthwgftlc(简称RGDSY-CTT),阳性对照肽ctthwgftlc(简称CTT),阴性对照肽STTHWGFTLS(简称ST... 详细信息

目的研究短肽RGDSY-ctthwgftlc对乳腺癌MCF-7细胞的抗肿瘤能力,为开发更高效的肽类抗肿瘤药物奠定实验理论基础。方法 (1)化学合成目标短肽RGDSY-ctthwgftlc(简称RGDSY-CTT),阳性对照肽ctthwgftlc(简称CTT),阴性对照肽STTHWGFTLS(简称STT);(2)将MCF-7细胞接种于预涂布纤连蛋白的96孔板,与短肽共孵育2 h,检测RGDSY-CTT对MCF-7细胞粘附能力的影响;(3)将MCF-7细胞接种于预铺基质胶的Transwell小室,与短肽共孵育16 h,检测RGDSY-CTT对MCF-7细胞侵袭能力的影响;(4)与短肽共孵育12 h后,MTT法检测RGDSY-CTT对MCF-7细胞增殖能力的影响;(5)与短肽共孵育24 h后,PI染色流式法检测RGDSY-CTT对MCF-7细胞凋亡和细胞周期的影响。结果(1)短肽对MCF-7细胞粘附能力的影响:RGDSY-CTT在终浓度为50、100、200μg/ml时,MCF-7细胞的粘附率依次为85.1%、74.1%和63.8%,随着浓度升高,粘附率明显降低,且比CTT组下降更显著(P0.05);(3)短肽对MCF-7细胞增殖的影响:RGDSY-CTT在终浓度为50、100、200μg/ml时,MCF-7细胞的增殖率依次为98.8%、82.4%和63.0%,随着肽浓度升高,增殖率下降明显;在100、200μg/ml时增殖抑制能力比CTT更强(P<0.05);(4)短肽对MCF-7细胞凋亡和细胞周期的影响:RGDSY-CTT处理组MCF-7细胞经流式法检测到凋亡峰,细胞周期阻滞发生在G0/G1期,占76.7%,显著高于CTT组、STT组及正常对照组(P<0.01)。结论 RGDSY-CTT能抑制乳腺癌细胞的侵袭能力,同时还具有抑制乳腺癌细胞粘附、增殖和诱导肿瘤细胞凋亡的能力。

关键词：短肽 ctthwgftlc RGD 乳腺癌

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双靶点抗肿瘤肽RGDSY-ctthwgftlc的设计合成及活性研究

引用

肿瘤防治研究 2014年第6期41卷 531-535页

作者：黄榕权龙捷张雅洁广州医科大学病理教研室广州510182

目的设计合成ctthwgftlc(简称CTT)的衍生肽RGDSY-ctthwgftlc(简称RGDSY-CTT),以期获得更优的水溶性、活性和抗肿瘤能力。方法 (1)自行设计RGDSY-CTT肽,化学合成(公司合成),并合成CTT(阳性对照)、STT(即STTHWGFTLS,阴性对照),质谱分析。... 详细信息

目的设计合成ctthwgftlc(简称CTT)的衍生肽RGDSY-ctthwgftlc(简称RGDSY-CTT),以期获得更优的水溶性、活性和抗肿瘤能力。方法 (1)自行设计RGDSY-CTT肽,化学合成(公司合成),并合成CTT(阳性对照)、STT(即STTHWGFTLS,阴性对照),质谱分析。(2)将Ⅳ型胶原酶、酶底物酪蛋白分别与RGDSY-CTT、CTT共孵育,酪蛋白水解抑制实验检测短肽的抑酶活性。(3)取RGDSY-CTT、CTT分别溶于蒸馏水,以蛋白定量BCA法对比两者的溶解度。(4)MCF-7细胞接种于预涂布纤连蛋白的96孔板,分别与RGDSY-CTT、CTT、STT共孵育,细胞黏附试验比较短肽对MCF-7细胞黏附能力的影响。(5)MCF-7细胞接种于Transwell小室的上室,分别与RGDSY-CTT、CTT、STT共孵育,细胞迁移试验比较RGDSY-CTT与CTT对MCF-7细胞迁移能力的影响。结果短肽合成,质谱分析符合。在浓度为250μg/ml时RGDSY-CTT、CTT对Ⅳ型胶原酶的水解抑制率为53.6%和77.7%;在500μg/ml时,两者抑制率分别为94.6%和96.9%。BCA法测得CTT的饱和溶解度约为745μg/ml,而RGDSY-CTT最高检测值为4 030μg/ml,溶液并未饱和。RGDSY-CTT在终浓度为50、100、200μg/ml时,MCF-7细胞的黏附率依次降低为:85.1%、74.1%、63.8%,黏附率显著低于CTT处理组(P<0.01)。在100和200μg/ml浓度时,RGDSY-CTT对MCF-7细胞的迁移抑制率为42.9%和60.8%;两个浓度RGDSY-CTT的抑制作用均比CTT强(P<0.05)。结论新合成短肽RGDSY-CTT的水溶性较CTT明显改善。RGDSY-CTT获得了抑制肿瘤细胞黏附的能力,并具有比CTT更强的运动抑制能力。

关键词：短肽 ctthwgftlc RGD 乳腺癌

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