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作者：杨鸿超昆明医科大学

学位级别：硕士

[目的]炎症因子 IL-β(Interleukin-1 β,IL-1 β)、Toll-4 受体(TLR-4)、核转录因子(NF-KB)信号通路的激活与机体内炎症反应的发生及细胞凋亡密切相关。本课题组前期的细胞实验模型,证实了透明质酸合成酶2/3(Hyaluronan Synthase 2/3,... 详细信息

[目的]炎症因子 IL-β(Interleukin-1 β,IL-1 β)、Toll-4 受体(TLR-4)、核转录因子(NF-KB)信号通路的激活与机体内炎症反应的发生及细胞凋亡密切相关。本课题组前期的细胞实验模型,证实了透明质酸合成酶2/3(Hyaluronan Synthase 2/3,HAS-2/3)表达下调可直接影响软骨细胞骨架(Cytoskeleton,csk)的形态及功能,可以在核酸分子水平及蛋白分子水平上调RhoA通路的表达,调节软骨csk相关蛋白的表达,导致软骨细胞功能退变及凋亡增加。因此HAS-2/3能否通过调控炎症相关因子表达水平上调来促进软骨退变以及HAS-2/3的表达下调是否也在动物水平上调RhoA信号通路的表达水平,进而诱导软骨细胞功能退变,有待进一步的研究。本研究通过细胞实验研究HAS-2/3表达下调后相关炎症因子的表达变化及csk变化情况,从动物实验层面研究HAS-2/3表达下调后RhoA信号通路的表达情况,探讨HAS-2/3对软骨csk调控的作用通路,为骨关节炎等相关软骨退行性疾病的早期预防及治疗提供新的方向。[方法]通过慢病毒载体介导的shHAS-2/3转染C28/I2人正常软骨细胞,构建HAS-2/3基因沉默细胞模型,运用细胞免疫荧光,激光共聚焦显微镜(Laser Scanning Confocal Microscope,LSCM)方法检测 HAS-2/3 表达下调后,炎症相关因子IL-β、TLR-4、NF-KB P65的表达情况及观察csk破坏程度,探讨上述因子在软骨csk破坏中的作用机制。同时通过膝关节腔内注射shHAS-2/3沉默HAS-2/3基因构建实验动物模型,运用RT-PCR、Western Blot等分子生物学手段检测实验动物软骨细胞中HAS-2/3、RhoA/ROCK1/ROCK2 mRNA和HAS-2/3、RhoA/ROCK1/ROCK2的蛋白表达水平,探讨HAS-2/3下调在动物水平对RhoA信号通路的影响;通过病理标本包埋,HE染色,观察HAS-2/3表达下调对软骨细胞的影响;运用免疫组织化学,观察HAS-2/3表达下调在动物水平对软骨csk相关蛋白的影响。[结果]1、细胞实验:沉默HAS-2/3后,(1)细胞免疫荧光,LSCM检测IL-1 β的表达量及软骨csk情况,结果表明,HAS-2/3与IL-1 β存在显著的相关性(Pcsk破坏严重程度与IL-1 β的表达水平具有显著的相关性(Pcsk情况,结果表明,HAS-2/3与TLR-4存在显著的相关性(Pcsk破坏严重程度与TLR-4的表达水平具有显著的相关性(Pcsk情况,HAS-2/3与NF-KB P65存在显著的相关性(Pcsk破坏严重程度与NF-KB P65的表达水平具有显著的相关性(Pcsk破坏。(3)tublin免疫组化结果显示:实验组(sh-HAS2组、sh-HAS3)组中阳性细胞数明显减小,浅层阳性细胞数较对照组未见明显差异,但在软骨中层及深层组织中阳性细胞数目极少,关节软骨csk相关蛋白表达减少,csk破坏。(4)RT-PCR检测HAS-2、HAS-3及RhoA/ROCK1/ROCK2信号通路mRNA表达情况,实验组HAS-2、HAS-3mRNA 表达水平明显下降(P<0.05),RhoA/ROCK1/ROCK2mRNA 表达水平明显上调(P<0.05);(5)W-B检测HAS-2、HAS-3及RhoA/ROCK1/ROCK2蛋白表达水平,实验组HAS-2、HAS-3蛋白表达水平明显下降(P<0.05),RhoA/ROCK1/ROCK2蛋白表达水平明显上调(P<0.05)。[结论]***-2/3表达下调会导致IL-1 β的表达上调,NF-KB信号通路的激活,出现

关键词：骨关节炎透明质酸合成酶 csk 软骨细胞炎症因子

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二进制混沌键控信号相关解调的实验研究

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电路与系统学报 2000年第3期5卷 31-35页

作者：禹思敏丘水生罗伟民华南理工大学电子与通信工程系广东广州510640

本文对二进制混沌键控系统的单向耦合同步进行分析，导出耦合电阻与蔡氏电路参数之间的关系表达式。根据混沌信号的相关特性和文献［１］所提出的ＣＳＫ原理，设计一种二进制混沌键控信号调制与相关解调的硬件实验系统，在此基础上进行... 详细信息

本文对二进制混沌键控系统的单向耦合同步进行分析，导出耦合电阻与蔡氏电路参数之间的关系表达式。根据混沌信号的相关特性和文献［１］所提出的ＣＳＫ原理，设计一种二进制混沌键控信号调制与相关解调的硬件实验系统，在此基础上进行了该系统的硬件实验研究。

关键词：蔡氏电路混沌键控相关解调 csk 单向耦合同步

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静态拉伸应变对人牙周膜成纤维细胞的影响

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实用口腔医学杂志 2003年第5期19卷 439-442页

作者：麻健丰胡军张秀华李乐乐陈新民温州医学院附属口腔医院修复科 325027 浙江大学附属口腔医院修复科四川大学口腔医学院修复科

目的 :研究人牙周膜成纤维细胞 (PDLF)在机械拉伸应变作用下 ,细胞和细胞核投影面积及其细胞骨架的改变情况 ,探讨PDLF的形态、功能和应变之间的关系。方法 :采用自制的细胞体外静态机械加载装置用不同的拉伸应变量加力于细胞上 ,通过... 详细信息

目的 :研究人牙周膜成纤维细胞 (PDLF)在机械拉伸应变作用下 ,细胞和细胞核投影面积及其细胞骨架的改变情况 ,探讨PDLF的形态、功能和应变之间的关系。方法 :采用自制的细胞体外静态机械加载装置用不同的拉伸应变量加力于细胞上 ,通过激光扫描共聚焦显微镜观察细胞骨架的形态及其改变情况 ,并进行统计分析。结果 :在 8%、12 %、16%力值组 ,细胞和细胞核投影面积随着加力时间和力值的增加而每天递增 ,肌动蛋白纤维也随之逐渐增粗 ,排列更有规律 ;而在 2 0 %力值组 ,其结果则反之。结论

关键词：人牙周膜成纤维细胞 PDLF 细胞骨架 csk 细胞核

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PEAK1通过与Src/ZO-1相互作用维持肠上皮细胞紧密连接的形成及渗透性机制研究和大剂量糖皮质激素对肾脏副作用研究

PEAK1通过与Src/ZO-1相互作用维持肠上皮细胞紧密连接的形成及渗...

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作者：张再宽重庆医科大学

学位级别：硕士

PEAK1（Pseudopodium enriched atypical kinase 1）是在细胞伪足中被鉴定到的、酪氨酸残基高度磷酸化的蛋白,近年来的研究表明PEAK1在多种转移肿瘤中高表达,能促进多种肿瘤细胞迁移,但PEAK1是否参与调控紧密连接的形成及排列未见报道... 详细信息

PEAK1（Pseudopodium enriched atypical kinase 1）是在细胞伪足中被鉴定到的、酪氨酸残基高度磷酸化的蛋白,近年来的研究表明PEAK1在多种转移肿瘤中高表达,能促进多种肿瘤细胞迁移,但PEAK1是否参与调控紧密连接的形成及排列未见报道。我们构建了PEAK1敲除鼠,结果发现敲除鼠对4 KD FITC-Dextran的通透性增加。组织免疫荧光,透射电镜结果以及Caco2细胞中均显示PEAK1缺失,会导致紧密连接破坏。进一步研究发现,PEAK1与紧密连接蛋白标志物闭锁小带1（Zonula Occludens 1,ZO1）存在互作和共定位,互作基序位于PEAK1的714位至731位氨基酸。而ZO1与PEAK1的互作结构域则位于Actin结合区域（Actin-Binding-Region,ABR）结构域。机制研究发现,PEAK1缺失导致下调了ZO1和Occludin酪氨酸磷酸化水平,蛋白表达量及其两者之间的互作。同时,PEAK1缺失通过C端Src激酶（C-terminal Src kinase,csk）下调Src活性,而且PP2抑制剂处理后,PEAK1与ZO1及Src的互作显著降低,同时Caco2表现出和PEAK1缺失一样的褶皱状紧密连接,说明PEAK1参与紧密连接的形成依赖Src活性。综上所述,PEAK1以ZO-1为支架定位于肠上皮细胞紧密连接部位,结合并调控Src的激酶活性,动态影响ZO-1、Occludin表达量及酪氨酸磷酸化水平,进而维持肠上皮细胞的屏障功能。糖皮质激素（Glucocorticoids,GCs）作为抗炎、抗休克和免疫抑制药物已广泛应用于临床治疗。然而,过量的GCs对肾脏免疫反应和代谢的影响尚不清楚。在这里,我们研究了大剂量地塞米松（dexamethasone,DEX）处理后小鼠肾脏的基因表达。通过基因本体论（Gene Ontology,GO）和京都基因基因组百科全书通路（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG）分析表明,这些差异基因在细胞外基质-受体相互作用、细胞黏附分子信号通路明显富集,且绝大多数参与了单羧酸代谢、白细胞细胞粘附和脂肪酸代谢。对差异表达激酶的KEGG通路分析显示,T细胞受体和叉头盒O类信号通路的表达丰富。此外,我们发现地塞米松治疗后,多种蛋白激酶的表达明显失调,包括经典的GCs刺激效应器-血清和GC调节激酶（Sgk）。这些蛋白激酶参与小鼠肾脏的多种信号通路,如MAPK和PI3K/AKT信号通路。因此研究大剂量地塞米松治疗小鼠肾脏基因及激酶的影响,为进一步研究GCs在临床治疗中的毒副作用机制提供了重要信息。

关键词：紧密连接 PEAK1 ZO1 Src csk

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混沌信号非相干的一种检测技术

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桂林电子工业学院学报 2003年第3期23卷 1-4页

作者：刘雄英丘水生刘重明华南理工大学电子与信息学院广州510640 香港理工大学电子与资讯工程系

混沌信号对初始条件的敏感,使得目前混沌信号在通信系统的收发端难以建立同步,实际应用中基于同步的混沌信号相干检测技术还不很成熟。通过采用一种基于概率统计的方法,应用最大似然法和贝叶斯公式,在csk(ChaosShiftKeying)系统的接收... 详细信息

混沌信号对初始条件的敏感,使得目前混沌信号在通信系统的收发端难以建立同步,实际应用中基于同步的混沌信号相干检测技术还不很成熟。通过采用一种基于概率统计的方法,应用最大似然法和贝叶斯公式,在csk(ChaosShiftKeying)系统的接收端重构发射端混沌映射,实现混沌信号的非相干检测。在一定的信噪比条件下,理论推导和计算机仿真结果是一致的。

关键词：混沌信号最大似然法贝叶斯公式 csk 非相干检测概率统计混沌数字通信

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