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中国兽医学报 2012年第10期32卷 1569-1571页

作者：田静王晶姝芦春艳张路培杨润军李俊雅赵志辉吉林大学畜牧兽医学院吉林长春130062 长春高新技术开发区奋进乡畜禽防疫服务中心吉林长春130052 中国农业科学院畜牧兽医研究所北京100193

以柠檬酸合成酶基因(citrate synthetase,cs)为候选基因,分析了该基因外显子3的遗传多态性与西门塔尔牛肉质性状的相关关系。选用95头西门塔尔牛为试验材料,采用PCR-RFLP的方法对该基因的外显子多态性进行检测,并利用SPSS软件对该外显... 详细信息

以柠檬酸合成酶基因(citrate synthetase,cs)为候选基因,分析了该基因外显子3的遗传多态性与西门塔尔牛肉质性状的相关关系。选用95头西门塔尔牛为试验材料,采用PCR-RFLP的方法对该基因的外显子多态性进行检测,并利用SPSS软件对该外显子多态性与肉质性状的相关性进行分析。结果表明:cs基因第三外显子第206bp处存在G/A突变,该基因多态性与脂肪颜色呈显著相关,AA型显著高于BB型。对其他性状的影响差异不显著。通过研究cs基因外显子的多态性,为西门塔尔牛利用该基因的多态性进行分子育种提供了试验依据。

关键词：西门塔尔牛 cs基因多态性肉质性状

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中国西门塔尔牛生产性能测定及cs基因多态性与肉质性状的关联分析

中国西门塔尔牛生产性能测定及CS基因多态性与肉质性状的关联分析

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作者：田静吉林大学

学位级别：硕士

西门塔尔牛分布广泛，分为乳用、肉用、乳肉兼用等类型。中国西门塔尔牛是一种大型的乳肉兼用品种。本研究以西门塔尔牛为研究对象，对与肉用性能相关的性状进行了测定，分别是：生长发育性状、肥育性状、胴体性状及肉质性状。通过对以... 详细信息

西门塔尔牛分布广泛，分为乳用、肉用、乳肉兼用等类型。中国西门塔尔牛是一种大型的乳肉兼用品种。本研究以西门塔尔牛为研究对象，对与肉用性能相关的性状进行了测定，分别是：生长发育性状、肥育性状、胴体性状及肉质性状。通过对以上四类性状指标的测定，共获得了260头育肥的中国西门塔尔牛的肉用性状性能数据，从而为后期的利用基因工程方法筛选与肉质性状相关的候选功能基因以及全基因组关联，建立基因聚合育种方法和标记辅助选择等提供基础。同时也为解决肉牛生产中所遇到的育肥效率、高档牛肉生产、牛肉品质鉴定等亟待解决的问题提供技术依据。柠檬酸合成酶（cs）是三羧酸循环代谢途径的关键成员，它对生物体的能量代谢、生物合成等相关的重要生命活动起到调节作用。柠檬酸合成酶在各种生物体内存在广泛，它是细胞内多种重要代谢途径的关键酶，它可以催化草酰乙酸和乙酰辅酶A之间发生缩合反应，生成柠檬酸和辅酶A。以往对柠檬酸合成酶的研究在植物方面，尤其是烟草和油菜等比较多，而在动物和真菌方面对柠檬酸合成酶的研究比较少。最初从酵母中分离与克隆的柠檬酸合成酶基因，共编码479个氨基酸，简称为Sscip。其后在猪体内克隆出的柠檬酸合成酶基因，共编码464个氨基酸，简称Pscip。对于鸡的柠檬酸合成酶基因方面，虽然鸡的柠檬酸合成酶基因的克隆尚未报道，但是已有一种长为433个氨基酸的鸡柠檬酸合成酶的晶体结构已经经过了详细的研究和阐述。而该基因与动物生产性状之间的关系目前尚处于极少报道方面。本研究为研究柠檬酸合成酶基因与西门塔尔牛产肉性能的相关性，选用95头西门塔尔牛为实验材料，采用PCR-RFLP的方法对该基因的外显子多态性进行检测，并利用SPSS软件对该外显子多态性与肉质性状的相关性进行了分析。结果表明：cs基因第三外显子第206bp处存在G（A）突变，该基因多态性与脂肪颜色呈显著相关，AA型显著高于BB型。对其他性状的影响差异不显著。通过研究cs基因外显子的多态性，为西门塔尔牛的选种选育提供实验依据。

关键词：生产性能西门塔尔牛 cs基因多态性肉质性状

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罗汉果遗传转化体系的建立与cs基因的转化研究

罗汉果遗传转化体系的建立与CS基因的转化研究

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作者：曾雯雯广西大学

学位级别：硕士

罗汉果(Siraitia grosvenorii为我国特有的药用和甜料经济作物,其果实中的有效成分甜苷V (Mogrosides V)是世界上甜度最高的非糖甜味物质之一。葫芦二烯醇酶(Cucurbitadienol Synthase, cs)是甜苷V生物合成的关键酶,利用基因工程技术,构... 详细信息

罗汉果(Siraitia grosvenorii为我国特有的药用和甜料经济作物,其果实中的有效成分甜苷V (Mogrosides V)是世界上甜度最高的非糖甜味物质之一。葫芦二烯醇酶(Cucurbitadienol Synthase, cs)是甜苷V生物合成的关键酶,利用基因工程技术,构建cs基因过表达载体,通过根癌农杆菌的介导将其转入罗汉果中,将是提高甜苷V含量的一种途径。罗汉果雌、雄异株,后代群体中雌株比例小,因而大量雄株浪费土地和资金;且种质资源匮乏,传统杂交育种困难。本文研究以罗汉果雌株组培苗真叶为外植体,优化了叶片离体再生体系;以正交试验设计为方法,通过根癌农杆菌的介导将cs基因过表达载体转入罗汉果中,建立了罗汉果遗传转化体系,为罗汉果转基因育种提供了科学依据。研究结果如下：1、罗汉果无菌苗壮苗的最佳激素组合为0.3 mg/L的6-BA和0.05 mg/L的IBA,株高达7.67 cm,新增叶片数为4.90张/株,最大叶面积达8.00cm2。2、叶片诱导的最佳激素组合为0.7 mg/L的TDZ和0.2 mg/L的IBA,出愈时间为12.7天,出愈率达89.43%,诱导出的愈伤组织大小为0.73 cm。3、愈伤组织诱导芽分化的最佳6-BA浓度为0.5 mg/L,分化率达73.33%,平均芽数4.11个/块：4、遗传转化中最佳的Km筛选浓度为10 mg/L;5、叶片遗传转化的最佳Cef抑菌浓度为300 mg/L;6、愈伤组织遗传转化的最佳Cef抑菌浓度为600 mg/L;7、叶片遗传转化研究中,正交试验结果的最优组合为(A2B2C1D3),即叶片最佳预培养时间为1天,最适农杆菌菌液浓度为OD600=0.5,最适侵染时间为5 mmin,最佳共培养时间为3天。用延迟筛选的方式筛选抗性再生苗,经PCR鉴定抗性苗224株,获得了3株转cs基因过表达载体的阳性植株,总转化率为1.34%;8、愈伤组织遗传转化中未检测到阳性植株。但根据除转化率外的其他指标结果选出了较优组合A3B1C2D1,即预培养2天,菌液浓度为OD600=0.4,侵染时间为15 min,共培养时间为1天。9、叶片可能比愈伤组织更适合作为植物受体来进行罗汉果遗传转化研究。

关键词：罗汉果遗传转化叶片愈伤组织 cs基因农杆菌介导

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