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Development of A Super-Sensitive Diagnostic Method for African Swine Fever Using crispr Techniques

Virologica Sinica 2021年第2期36卷 220-230页

作者： Meishen Ren Hong Mei Ming Zhou Zhen F.Fu Heyou Han Dingren Bi Fuhu Peng Ling Zhao State Key Laboratory of Agricultural Microbiology Huazhong Agricultural UniversityWuhan 430070China Key Laboratory of Preventive Veterinary Medicine in Hubei Province College of Veterinary MedicineHuazhong Agricultural UniversityWuhan 430070China College of Science Huazhong Agricultural UniversityWuhan 430070China Hubei Center for Animal Disease Control and Prevention Wuhan 430070China

African swine fever(ASF)is an infectious disease caused by African swine fever virus(ASFV)with clinical symptoms of high fever,hemorrhages and high mortality rate,posing a threat to the global swine industry and food *** and control of ASFV is crucial for preventing swine industry from ASFV *** this study,a recombinase polymerase amplification(RPA)-crispr-based nucleic acid detection method was developed for diagnosing *** a highly sensitive method,RPA-crispr can detect even a single copy of ASFV plasmid and genomic DNA by determining fluorescence signal induced by collateral cleavage of crispr-lw Cas13 a(previously known as C2c2)through quantitative real-time PCR(q PCR)and has the same or even higher sensitivity than the traditional q PCR method.A lateral flow strip was developed and used in combination with RPA-crispr for ASFV detection with the same level of sensitivity of Taq Man q ***,RPA-crispr is capable of distinguishing ASFV genomic DNA from viral DNA/RNA of other porcine viruses without any *** diagnostic method is also available for diagnosing ASFV clinical DNA samples with coincidence rate of 100%for both ASFV positive and negative ***-crispr has great potential for clinical quarantine of ASFV in swine industry and food security.

关键词： African swine fever(ASFV) Recombinase polymerase amplification(RPA) crispr-lwcas13a Sensitive diagnosis

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