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cpeb4对慢性髓系白血病细胞增殖与凋亡的影响

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中国实验血液学杂志 2019年第6期27卷 1779-1785页

作者：许昕瑜张丽娜吴惠文郭松佳山西医科大学汾阳学院科技中心山西汾阳032200 山西省人民医院肾脏病分子诊断与治疗实验室山西太原030000

目的:探索cpeb4在K562细胞中的表达、生物学活性及其可能的分子机制。方法:采用Western blot检测正常白细胞和K562细胞中cpeb4的表达情况;再将过表达质粒pcDNA3.1(+)-His-cpeb4、沉默质粒pPLK+Puro-cpeb4 shRNA电穿孔转染K562细胞,改变C... 详细信息

目的:探索cpeb4在K562细胞中的表达、生物学活性及其可能的分子机制。方法:采用Western blot检测正常白细胞和K562细胞中cpeb4的表达情况;再将过表达质粒pcDNA3.1(+)-His-cpeb4、沉默质粒pPLK+Puro-cpeb4 shRNA电穿孔转染K562细胞,改变cpeb4在K562细胞中的表达量,应用Western blot检测转染效率;最后应用CCK-8和流式细胞术检测不同处理的细胞增殖和凋亡情况,并用Western blot法检测增殖与凋亡标志蛋白(AKT、p-AKT、caspase-3、BCL-2)的表达变化。结果:与正常白细胞相比,K562细胞中cpeb4蛋白表达量较高(Pcpeb4沉默的K562细胞与对照组相比,细胞增殖水平显著增高(Pcpeb4过表达后的K562细胞增殖减慢(Pcpeb4可抑制K562细胞增殖,促进K562细胞凋亡,而AKT、p-AKT、BCL-2和Caspase-3等分子参与调控机制。

关键词： cpeb4 慢性髓系白血病细胞增殖细胞凋亡

cpeb4在非小细胞肺癌中表达及其对预后的预测价值

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中国肿瘤临床 2018年第9期45卷 453-457页

作者：秦爱英任铁军侯建锋刘畅单风晓熊向乐陈静郑州大学附属洛阳市中心医院肿瘤三科河南省洛阳市471000

目的:胞质多聚腺苷酸化元件结合蛋白4(cytoplasmic polyadenylation element binding protein 4,cpeb4)是胞质多聚腺苷酸化元件结合蛋白家族之一,与多种肿瘤发生发展密切相关,但在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的... 详细信息

目的:胞质多聚腺苷酸化元件结合蛋白4(cytoplasmic polyadenylation element binding protein 4,cpeb4)是胞质多聚腺苷酸化元件结合蛋白家族之一,与多种肿瘤发生发展密切相关,但在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的研究相对较少。方法:收集2007年6月至2012年12月郑州大学附属洛阳中心医院实施肺癌根治术102例患者临床病理资料。实时定量PCR(qRT-PCR)检测组织及细胞株中cpeb4 mRNA的表达,Western blot检测cpeb4在组织及细胞株中蛋白的表达,免疫组织化学法检测NSCLC患者石蜡标本中蛋白的表达。进一步分析cpeb4与NSCLC患者临床病理因素及预后的关系。结果:cpeb4 mRNA和蛋白(P49表达明显高于WI-38正常肺细胞株,同时cpeb4 mRNA(Pcpeb4阳性表达率为38.2%。相关分析显示N分期为cpeb4表达的独立相关因素。预后生存分析结果显示T、N分期和cpeb4表达与本组NSCLC患者预后密切相关。结论:cpeb4在NSCLC患者中高表达,并且与预后密切相关,可作为潜在靶点。

关键词： cpeb4 非小细胞肺癌预后

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cpeb4对脑胶质瘤细胞增殖、迁移的影响

郑州大学学报（医学版） 2018年第5期53卷 599-603页

作者：张成刚济南市第三人民医院神经外科济南250132

目的:探讨胞质多聚腺苷酸化元件结合蛋白4(cpeb4)对脑胶质瘤细胞增殖、迁移的影响。方法:采用实时荧光定量PCR法检测40例脑胶质瘤组织及对应的癌旁正常组织中cpeb4 mRNA的表达水平。分别将cpeb4 siRNA及无义siRNA转染至脑胶质瘤细胞U87... 详细信息

目的:探讨胞质多聚腺苷酸化元件结合蛋白4(cpeb4)对脑胶质瘤细胞增殖、迁移的影响。方法:采用实时荧光定量PCR法检测40例脑胶质瘤组织及对应的癌旁正常组织中cpeb4 mRNA的表达水平。分别将cpeb4 siRNA及无义siRNA转染至脑胶质瘤细胞U87中,Western blot法检测细胞中cpeb4、MMP-9、MMP-2、STAT3、p-STAT3、JAK2和p-JAK2蛋白的表达水平,MTT法检测细胞存活率,细胞划痕实验检测细胞迁移距离,以未处理细胞作对照。使用50μmol/L特异性JAK2抑制剂AG490作用于转染cpeb4 siRNA的U87细胞48 h后,检测细胞存活率及迁移距离,以未处理细胞和AG490处理的U87细胞作对照。结果:脑胶质瘤组织中cpeb4 mRNA表达水平高于癌旁正常组织(Pcpeb4 siRNA组细胞cpeb4蛋白表达水平下降(P490组与AG490+cpeb4 siRNA组细胞存活率和迁移距离均降低(P490组相比,AG490+cpeb4 siRNA组细胞存活率与迁移距离降低(Pcpeb4在脑胶质瘤组织中高表达,可能通过上调JAK/STAT3信号通路促进脑胶质瘤细胞的增殖与迁移。

关键词：脑胶质瘤 cpeb4 增殖迁移 JAK/STAT3信号通路

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cpeb4在胃癌中的表达及临床意义

CPEB4在胃癌中的表达及临床意义

作者：周思欣中国人民解放军医学院

学位级别：硕士

目的:胃癌的发病率和死亡率在我国均位居第二位,是最常见的恶性肿瘤之一,其发生发展是外界致癌因素和机体内在因素共同作用的复杂过程。胞质聚腺苷酸化物结合蛋白(cytoplasmic poly(A)denylation element binding protein, cpeb )是一... 详细信息

目的:胃癌的发病率和死亡率在我国均位居第二位,是最常见的恶性肿瘤之一,其发生发展是外界致癌因素和机体内在因素共同作用的复杂过程。胞质聚腺苷酸化物结合蛋白(cytoplasmic poly(A)denylation element binding protein, cpeb )是一种序列特异性RNA结合蛋白,可通过激活或抑制靶mRNA3’端的多聚腺苷酸化调节poly(A)尾长度,从而调控翻译。cpeb4与肿瘤增殖、侵袭转移及局部血管生成等关系密切,可通过多种途径参与肿瘤的发生发展,但其在胃癌中的研究较少。希望通过检测cpeb4在胃癌中的表达水平,分析其与临床病理资料的相关性,为发现胃癌潜在的诊断和治疗靶点提供依据。方法:通过实时荧光定量PCR、免疫组织化学染色及蛋白免疫印记的方法对30对胃癌及相应癌旁组织中cpeb4 mRNA及蛋白的表达水平进行检测,分析其与临床病理资料的相关性。结果:应用荧光定量PCR技术检测了 30对胃癌及相应癌旁组织中cpeb4 mRNA的表达水平,结果表明,在大部分胃癌组织中(27/30对)cpeb4mRNA的表达水平较相应癌旁组织上调,有3对组织标本,胃癌组织中cpeb4 mRNA的水平低于癌旁组织,提示cpeb4 mRNA在胃癌组织中高表达。其表达水平与患者年龄、性别、肿瘤部位、肿瘤分化程度及肿瘤浸润深度均无关,与淋巴结转移数目、远处转移情况及病理分期关系密切,cpeb4 mRNA高表达组淋巴结转移数目、远处转移率及病理分期均高于cpeb4mRNA低表达组,差异有统计学意义(Pcpeb4蛋白的表达情况,结果表明,胃癌组织中cpeb4的表达水平显著高于癌旁组织,差异有统计学意义,且表达量与淋巴结转移数目、远处转移情况及病理分期相关。同时,Wilcoxon检验结果显示,在胃癌组织中cpeb4蛋白表达水平与mRNA表达水平呈正相关,差异有统计学意义。结论:在胃癌组织中cpeb4mRNA和蛋白的表达水平较癌旁组织均显著上调,且表达量与淋巴结转移数目、远处转移情况及病理分期相关,提示cpeb4可能作为一种致癌因子参与胃癌的发生发展。

关键词：胃癌 cpeb4 肿瘤

人脑胶质瘤组织中cpeb4的表达及与细胞迁移和侵袭的关系

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郑州大学学报（医学版） 2016年第5期51卷 622-626页

作者：刘志军周海存陈小兵刘红林王贵聪河南大学淮河医院神经外科开封475500 永城市人民医院急诊科商丘476600

目的:探讨cpeb4在人脑胶质瘤组织中的表达及其与细胞迁移和侵袭能力的关系。方法:收集30例人脑胶质瘤患者的新鲜胶质瘤组织和瘤旁正常组织标本,应用Western blot法检测cpeb4的表达;分析cpeb4表达与患者临床病理特征的关系;分别应用siRN... 详细信息

目的:探讨cpeb4在人脑胶质瘤组织中的表达及其与细胞迁移和侵袭能力的关系。方法:收集30例人脑胶质瘤患者的新鲜胶质瘤组织和瘤旁正常组织标本,应用Western blot法检测cpeb4的表达;分析cpeb4表达与患者临床病理特征的关系;分别应用siRNA基因干扰系统和质粒过表达系统下调和上调人脑胶质瘤细胞SKMG-4和T98中cpeb4表达;应用Transwell实验检测细胞的侵袭和迁移能力;应用Western blot检测差异表达cpeb4后MMP2和MMP9的表达。结果:30例患者中,22例患者的胶质瘤组织中cpeb4表达高于瘤旁正常组织;cpeb4在脑胶质瘤组织中的高表达与KPS评分和病理分级有关(P4细胞cpeb4表达后,si cpeb4#2组迁移细胞数和侵袭细胞数均高于si Control组(Pcpeb4表达后,cpeb4过表达组迁移细胞数和侵袭细胞数均低于对照组(Pcpeb4在脑胶质瘤组织中呈高表达;cpeb4可通过调控MMP2和MMP9表达影响脑胶质瘤细胞的侵袭和迁移能力。

关键词： cpeb4 胶质瘤侵袭迁移

脑胶质瘤靶标cpeb4参与增殖侵袭的分子机制及预后相关性研究

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脑胶质瘤靶标CPEB4参与增殖侵袭的分子机制及预后相关性研究

作者：秦荣第二军医大学

学位级别：硕士

脑胶质瘤是一类常见、难治、重要的危害人类健康疾病，其中恶性胶质瘤占所有原发恶性脑肿瘤的80%，预后差，病死率高，即使手术切除后复发率仍高达70%0%，胶质母细胞瘤与间变型星形胶质瘤的中位生存期分别只有125个月与2年，5年生存率... 详细信息

脑胶质瘤是一类常见、难治、重要的危害人类健康疾病，其中恶性胶质瘤占所有原发恶性脑肿瘤的80%，预后差，病死率高，即使手术切除后复发率仍高达70%0%，胶质母细胞瘤与间变型星形胶质瘤的中位生存期分别只有125个月与2年，5年生存率分别仅为4.7%和25.9%。尽管随现代科技进步，新技术和新药物不断应用，手术、放化疗、免疫、基因治疗或其组合的综合措施取得了一定进展，但恶性胶质瘤的总体预后并未得到根本的改善，因此，阐明脑胶质瘤分子病理机制，寻找新的治疗靶点和策略以及可用于判断预测脑胶质瘤预后的相关分子靶标，从而提高胶质瘤的综合疗效已成为神经外科领域的前沿课题。脑胶质瘤的恶变是基因畸变的积累与生长因子信号通路异常调控的结果，这一过程包含了PI3K、p53、RB、MAPK等多条通路，并可能涉及到肿瘤细胞粘附、基质降解、迁移、细胞增殖等诸多环节，但目前其具体的机制仍不清楚。因此，脑胶质瘤治疗取得突破的关键因素就是找到其发生、增殖、侵袭过程中的上游核心调控基因，针对这些关键调控基因的分子靶向疗法则是胶质瘤治疗的新思路和新方向。挖掘出既能反应胶质瘤的生物学特性，又能辅助制定放化疗策略和预测预后的特征性分子靶标具有重要的临床意义，以实现真正意义上的分子靶向治疗。高通量技术的出现无疑为分子靶向治疗的实现提供强有力的工具。利用二代测序、基因芯片、组织芯片等技术不仅能对肿瘤样本进行分析，分辨疾病的亚型，还可以预测疾病的预后和对药物、放射线的敏感性，进而实施个体化治疗。在治疗中我们发现，即使是相同病理类型和级别的胶质瘤，同样的治疗方法，其治疗效果也存在着很大的差异。肿瘤的内在分子水平上的差异是导致这一现象的最关键因素。若在治疗前，就能预先发现特殊的肿瘤基因的突变、缺失等各种表型改变，进而可判断患者对治疗的反应和预后，则毫无疑问能为治疗提供更多的选择性和针对性并可能显著提高疗效。目前已有文献报道MGMT、IDH1、1p/19q等多个基因的甲基化、突变或缺失可用于判断部分胶质瘤亚型对替莫唑胺等化疗药物的敏感性，并且可作为预后判断的重要指标，但这些著名靶标尚没有胶质瘤的特异性。近年来，转录后水平的调控分子在肿瘤发生发展过程的作用不断被揭示，越来越多的证据表明，特定mRNA的转录后调控与肿瘤相关基因表达水平变化密切相关，且这种调控主要是通过3’非翻译区的顺式作用元件实现的。胞质聚腺苷酸化元件(Cytoplasmic polyadenylation element，CPE)即为已知的元件之一，在上百种涉及细胞增殖及分化的mRNA上均有表达。CPE结合蛋白(cpeb)是一组高度保守，包含有RNA识别序列及锌指结构的RNA结合蛋白，能够促进多聚腺苷酸化诱导的翻译过程并能介导包括干细胞发育、细胞分化和细胞衰老等过程。cpeb4是cpeb家族中的一员，已有研究发现其在胰腺癌组织中过表达，且表达水平高低与肿瘤恶性程度成正相关;另有文献报道cpeb4在GBM中过表达(同一篇文献？)，但cpeb4表达量与肿瘤恶性程度、发生发展、增殖侵袭及预后的关系，国际上尚无文献报道。因此，本实验从组织水平和细胞水平，通过高通量组织芯片、靶向RNA干扰慢病毒载体构建、RT-PCR、Western blot，以及细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡等体外实验方法，探索研究cpeb4蛋白表达量与患者预后的关系，并初步探讨其在胶质瘤细胞中的功能表型及可能的通路和分子机制。第一部分：cpeb4在脑胶质瘤组织中的表达及预后相关研究目的：cpeb4是cpeb家族中的重要一员，在细胞生理和病理过程中，调控有丝分裂、减数分裂细胞周期及细胞衰老，其在转录后调控中的重要作用，提示可能与肿瘤发生、发展密切相关，但其在胶质瘤领域中研究尚很少。本部分实验通过构建高通量组织芯片和免疫组化的方法，研究cpeb4在各级别胶质瘤组织中的表达情况，并分析cpeb4的表达量与胶质瘤预后的关系。方法：1)、收集经临床病理证实为胶质瘤的病理标本共计300例(通过2000年1月至2010年12月第二军医大学长征医院神经外科肿瘤切除手术取得);正常脑组织16例(通过外伤减压手术取得);制备成高通量的胶质瘤组织芯片;2)、利用组织芯片、免疫组化方法研究cpeb4在肿瘤细胞中的亚定位及其蛋白在各个级别胶质瘤和正常脑组织中的表达情况，并分析级别与表达量的关系;3)、对300例胶质瘤患者进行随访，获得其生存期，分析cpeb4表达量与胶质瘤患者生存期的关系。结果：在正常脑组织中cpeb4主要表达在神经元内，在胶质细胞中表达很少;在胶质瘤细胞中cpeb4主要表达在胞浆内，各级别胶质瘤中的表达均高于正常脑组织(Pcpeb4的表达量与胶质瘤患者的预后有相关性，Log-rank单因素分析显示cpeb4表达高者的总体生存期(OS

关键词： cpeb4 胶质瘤级别预后慢病毒 RNA干扰增殖凋亡细胞周期

cpeb4在结直肠癌组织中表达及其与预后的关系

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消化肿瘤杂志（电子版） 2016年第3期8卷 171-175页

作者：万仁辉温宜清吕勇邓浩财闵英运广东省东莞市横沥医院普外科广东东莞523460

目的探讨cpeb4蛋白在结直肠癌组织中表达及其与患者临床病理参数和预后的相关性。方法应用免疫组织化学染色检测142例结直肠癌组织中cpeb4蛋白的表达状况。分析cpeb4蛋白表达与结直肠癌临床病理参数的关系及其对患者预后的影响。结果CP... 详细信息

目的探讨cpeb4蛋白在结直肠癌组织中表达及其与患者临床病理参数和预后的相关性。方法应用免疫组织化学染色检测142例结直肠癌组织中cpeb4蛋白的表达状况。分析cpeb4蛋白表达与结直肠癌临床病理参数的关系及其对患者预后的影响。结果cpeb4蛋白在结直肠癌组织中阳性表达率为56.34%（80/142）,其表达与肿瘤直径（P=0.037）、分化程度（P=0.013）、肿瘤浸润深度（P=0.013）、淋巴结转移（P=0.011）、p TNM分期（P=0.001）和Duke＇s分期（P〈0.001）等临床病理参数有显著的相关性。cpeb4蛋白阳性表达患者预后较阴性表达者差（P〈0.001）。Cox多因素分析结果表明Duke＇s分期（HR=3.216,95%CI 2.21-4.68,P〈0.001）和cpeb4表达（HR=6.264,95%CI3.048~12.875,P〈0.001）是影响结直肠癌患者预后的独立影响因素。结论 cpeb4蛋白阳性表达可作为评价结直肠癌患者预后的评价指标之一。

关键词： cpeb4 结直肠癌临床病理参数预后

cpeb4在透明细胞性肾细胞癌中的表达及其对细胞株增殖、凋亡和侵袭力的影响

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中国医药科学 2019年第24期9卷 248-250,254页

作者：王静周梅王书芹毕超吕辉禤瑞霞汪芸包贵贤广东省中山市中医院病理科

目的研究cpeb4在透明细胞性肾细胞癌中的表达及其对细胞株增殖、凋亡和侵袭力的影响。方法选取我院于2016年3月~2018年3月进行透明细胞性肾细胞癌患者80例作为研究组,并选择我院同期收治的肿瘤周围正常肾组织50例为对照组,观察两组患者C... 详细信息

目的研究cpeb4在透明细胞性肾细胞癌中的表达及其对细胞株增殖、凋亡和侵袭力的影响。方法选取我院于2016年3月~2018年3月进行透明细胞性肾细胞癌患者80例作为研究组,并选择我院同期收治的肿瘤周围正常肾组织50例为对照组,观察两组患者cpeb4表达相关情况。结果研究组cpeb4表达高于对照组,且对照组细胞存活率高于研究组,迁移距离低于对照组,差异有统计学意义(Pcpeb4阳性率为10.00%,Ⅳ组患者阳性率最高为100.00%,随着级别升高患者阳性率随之升高,淋巴结转移者cpeb4表达高于未转移,Ⅲ~Ⅳ期cpeb4表达高于Ⅰ~Ⅱ期。研究组男女性别之间cpeb4表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论cpeb4在透明细胞性肾细胞癌中表达较高,对细胞株增殖侵袭较强,有利于后期诊断治疗,明确患者治疗意义,在临床中具有重要意义,值得应用。

关键词： cpeb4 透明细胞性肾细胞癌增殖凋亡侵袭

cpeb4沉默对宫颈癌Siha细胞的增殖、迁移和侵袭的影响

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中国生育健康杂志 2019年第6期30卷 530-533页

作者：綦春蕾于月成空军军医大学第一医院妇产科

目的探讨胞质聚腺苷酸化物结合蛋白4(cpeb4)在宫颈癌中的表达及其对宫颈癌Siha细胞增殖、迁移和侵袭的影响.方法采集本院2017年5月—2018年5月42例宫颈癌患者手术切除的癌变组织及其正常癌旁组织,采用实时定量PCR和Western blot方法检... 详细信息

目的探讨胞质聚腺苷酸化物结合蛋白4(cpeb4)在宫颈癌中的表达及其对宫颈癌Siha细胞增殖、迁移和侵袭的影响.方法采集本院2017年5月—2018年5月42例宫颈癌患者手术切除的癌变组织及其正常癌旁组织,采用实时定量PCR和Western blot方法检测宫颈癌及其癌旁组织中cpeb4的表达;采用siRNA转染沉默宫颈癌Siha细胞中cpeb4的表达,CCK-8法检测细胞增殖,Transwell检测细胞迁移和侵袭,Western blot检测P53、Twist1的蛋白表达.结果与癌旁组织相比,宫颈癌组织中cpeb4 mRNA和蛋白表达均显著上调;转染cpeb4 siRNA的Siha细胞增殖活性减弱,迁移和侵袭能力均显著下降(Pcpeb4在宫颈癌中高表达,可能通过调控P53和Twist1的表达影响宫颈癌细胞的增殖、迁移与侵袭,有望成为宫颈癌诊断标志物及潜在的治疗靶点.

关键词： cpeb4 宫颈癌增殖迁移侵袭