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Effects of the cntf-collagen gel-controlled delivery system on rat neural stem/progenitor cells behavior

Science China(Life Sciences) 2010年第4期53卷 504-510页

作者： YANG ZhaoYang1, QIAO Hui2 & LI XiaoGuang1,3 1School of Biological Science and Medical Engineering, Beihang University, Beijing 100191, China 2Public Heath School, Ningxia Medical University, Yinchuan 750004, China 3Beijing Institute for Neuroscience, Capital Medical University, Beijing 100069, China 1. School of Biological Science and Medical Engineering Beihang University Beijing 100191 China2. Public Heath School Ningxia Medical University Yinchuan 750004 China3. Beijing Institute for Neuroscience Capital Medical University Beijing 100069 China

The injury of central nervous system (CNS) usually causes the cavity formation. Although transplantation of neural stem/precursor cells (NSPCs) into the lesioned area of CNS has been shown to be implicated in the functional restoration, the therapeutic result is limited by the poor survival of NSPCs as well as their insufficient proliferation and differentiation abilities. Type-1 collagen is considered as a candidate scaffold or drug delivery system to overcome the aforementioned obstacle. This study observed the effects of the cntf (ciliary neurotrophic factor)-collagen gel-controlled delivery system and daily addition of soluble-form cntf on the NSPC survival, migration, proliferation and differentiation. The results showed that, within 12 h of the initial co-culture, cntf was released in a burst pattern, then the cntf-collagen gel-controlled delivery system stably released cntf for up to 12 d. The cell viability test, together with immunohistochemistry, RT-PCR and Western blotting, showed that the cntf-collagen gel-controlled delivery system supported the NSPCs seeded on the surface of collagen gel survival and facilitated their migration and proliferation. The daily addition of soluble-form cntf to the medium had similar effects to the cntf-collagen gel-controlled delivery system, but large quantities of soluble-form cntf were consumed during the entire process. Taken together, the cntf-collagen gel-controlled delivery system not only provides a physical scaffold for the transplanted NSPCs to adhere and migrate, but also facilitates the NSPC survival, growth and proliferation, simultaneously reducing the consumption of the expensive growth factors. This system may be used to enhance the microenvironment in the lesioned area of CNS.

关键词： spinal cord neural stem/progenitor cells control release type-1 collagen cntf

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Regeneration and functional recovery of the completely transected optic nerve in adult rats by cntf-chitosan

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Signal Transduction and Targeted Therapy 2023年第3期8卷 912-915页

作者： Xiao Liu Fei Hao Peng Hao Jingxue Zhang Liqiang Wang Si-Wei You Ningli Wang Zhaoyang Yang Kwok-Fai So Xiaoguang Li Department of Neurobiology School of Basic Medical SciencesCapital Medical University100069 BeijingChina School of Engineering Medicine Beijing Key Laboratory for Biomaterials and Neural RegenerationBeihang University100083 BeijingChina Beijing Tongren Eye Center Beijing Tongren HospitalCapital Medical UniversityBeijing Ophthalmology and Visual Sciences Key Laboratory100005 BeijingChina Department of Ophthalmology The Third Medical CenterChinese PLA General Hospital100089 BeijingChina Department of Ophthalmology Xijing HospitalThe Fourth Military Medical University710032 Xi’anShanxi ProvinceChina Guangdong-Hongkong-Macao Institute of CNS Regeneration Ministry of Education CNS Regeneration Collaborative Joint LaboratoryJinan University510632 GuangzhouGuangdong ProvinceChina Bioland Laboratory(Guangzhou Regenerative Medicine and Health Guangdong Laboratory) 510530 GuangzhouGuangdong ProvinceChina Department of Ophthalmology and State Key Laboratory of Brain and Cognitive Sciences The University of Hong Kong999077 Hong KongChina Center for Brain Science and Brain-Inspired Intelligence Guangdong-Hong Kong-Macao Greater Bay Area510515 GuangzhouGuangdong ProvinceChina Co-innovation Center of Neuroregeneration Nantong University226001 NantongJiangsu ProvinceChina Beijing International Cooperation Bases for Science and Technology on Biomaterials and Neural Regeneration Beijing Advanced Innovation Center for Big Data-Based Precision MedicineBeihang University100083 BeijingChina

Dear Editor,The optic nerve,which belongs to the central nervous system(CNS),cannot regenerate when injured in adult mammals.1 Up to now,no readily translatable measures are available for repairing a severely injured optic *** we demonstrated that ciliary neurotrophic factor(cntf)-chitosan enabled the reconstruction and functional recovery of the adult rat visual system,thus shedding light on the clinical potential for repairing the severely injured optic nerve.

关键词： Regeneration functional cntf

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Neuro-protective effects of cntf on hippocampal neurons via an unknown signal transduction pathway

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Chinese Science Bulletin 2006年第1期51卷 48-53页

作者： LI Ping WANG Zongwen YAN Jin Li Zhaoshen JIANG Chunlei NI Xin YANG Yongji LIU Fang LU Changlin Department of Psychology Second Military Medical University Shanghai 200433 China Changhai Hospital Second Military Medical University Shanghai 200433 China Laboratory of Stress Medicine Second Military Medical University Shanghai 200433 China School of Basic Medicine Second Military Medical University Shanghai 200433China

In our previous study, we proposed that there may be an unknown pathway in the upper stream of the known signal transduction pathway of Ciliary neurotrophic factor (cntf) that mediates the neuro-protective function of cntf. In the present experiment, we observed that the neuro-protective function of the non-classic signal transduction path- way in a L-NMDA (a glutamic acid ion type receptor atagonist) induced hippocampal neuron injury model, using primary culture rat hippocampal neurons, con- tinuous photography and gp130 immunohistochemi- cal assay. The results showed that L-NMDA induced injurious reaction of hippocampal neurons, and cntf was able to inhibit the toxic action of L-NMDA on hippocampal neurons. Additionally, when JAK/STATs in the known classic signal transduction pathway of cntf were blocked by PTPi-2, the protective effect of cntf against L-NMDA injury still existed. L-NMDA caused a rapid increase in the concentration of hip- pocampal intracellular free [Ca2+]i. cntf was able to attenuate L-NMDA-induced elevation of [Ca2+]i, and blocking JAK/STATs in the known classic signal trans- duction pathway of cntf did not affect L-NMDA- induced elevation of [Ca2+]i, indicating that, apart from the known classic signal transduction pathway, there may be some other transduction pathways for cntf to exert the protective effect on hippocampal neurons, and this pathway is related to [Ca2+].

关键词： cntf L-NMDA 海马神经元 JAK/STATs PTPi-2 NMDA

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cntf对NMDA引起大鼠海马神经元蛋白激酶C核转位的影响

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中国应用生理学杂志 2003年第2期19卷 145-148页

作者：刘芳严进姜宗来王雪琦鲍璿路长林第二军医大学解剖学教研室上海200025 第二军医大学神经生物学教研室上海200025 中科院上海脑研究所上海200433

目的 :探讨睫状神经营养因子 (cntf)对N 甲基 D 天冬氨酸 (NMDA)引起大鼠海马神经元蛋白激酶C(PKC)发生核转位的影响。方法 :以NMDA及cntf处理原代培养的大鼠海马神经元 ,PKCγ、PKCε免疫细胞化学并结合图象分析方法测定PKC阳性神经元... 详细信息

目的 :探讨睫状神经营养因子 (cntf)对N 甲基 D 天冬氨酸 (NMDA)引起大鼠海马神经元蛋白激酶C(PKC)发生核转位的影响。方法 :以NMDA及cntf处理原代培养的大鼠海马神经元 ,PKCγ、PKCε免疫细胞化学并结合图象分析方法测定PKC阳性神经元胞核的灰度。结果 :①给予不同浓度NMDA处理不同时间后 ,神经元核内有不同程度的PKCγ及PKCε表达 ,其中以 10 0 μmol/LNMDA 30min组表现尤为显著 ;②cntf +5 0 0 μmol/LNMDA组神经元胞核PKC灰度与对照组相似。结论 :NMDA可引起海马神经元PKCγ、PKCε的核转位 ,而cntf则抑制其转位的发生 ,提示cntf对海马神经元的保护作用与抑制PKC的核转位有关。

关键词：睫状神经营养因子 cntf N-甲基-D-天冬氨酸 NMDA 大鼠海马神经元蛋白激酶C PKC 核转位

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cntf对应激大鼠行为障碍和海马CA1神经元损害的作用

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心理学报 2000年第2期32卷 210-216页

作者：严进路长林汤淑萍何成王成海王雪琦黄爱军孟玲鲍璇张铁峰第二军医大学基础部神经生物学教研室第二军医大学基础部组织胚胎学教研室上海200433 中国科学院上海脑研究所上海200031 中国科学院上海生理研究所上海200031

实验采用ｏｐｅｎｆｉｅｌｄ测定、Ｎｉｓｓｌ染色、Ｂｉｅｌｓｃｈｏｗｓｋｙ－Ｇｒｏｓ－Ｌａｗｒｅｎｔｊｅｗ染色和常规透射电镜技术，观察急性和慢性足底电击应激大鼠的ｏｐｅｎｆｉｅｌｄ行为和海马ＣＡ１神经元形态的变化... 详细信息

实验采用ｏｐｅｎｆｉｅｌｄ测定、Ｎｉｓｓｌ染色、Ｂｉｅｌｓｃｈｏｗｓｋｙ－Ｇｒｏｓ－Ｌａｗｒｅｎｔｊｅｗ染色和常规透射电镜技术，观察急性和慢性足底电击应激大鼠的ｏｐｅｎｆｉｅｌｄ行为和海马ＣＡ１神经元形态的变化，及双侧海马注射睫状神经营养因子（ＣＮＴＦ）对它的影响。结果表明，急性应激大鼠ｏｐｅｎｆｉｅｌｄ行为活动增加，海马ＣＡ１神经元形态无明显变化；慢性应激大鼠ｏｐｅｎｆｉｅｌｄ行为活动减少，海马ＣＡ１神经元出现明显的损伤性形态变化；睫状神经营养因子对对照组大鼠和急性应激大鼠的ｏｐｅｎｆｉｅｌｄ行为和海马ＣＡ１神经元形态均无明显作用，但可显著减轻慢性应激大鼠海马ＣＡ１神经元损伤程度，改善其行为障碍。实验结果提示睫状神经营养因子可能通过保护海马神经元从而改善慢性应激大鼠的行为障碍。

关键词： cntf 应激海马 CA1神经元

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cntf对大鼠脊髓损伤后逆行性红核神经元损伤的保护作用

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第二军医大学学报 2002年第6期23卷 598-601,F004页

作者：叶俊丽曹莉崔瑞耀黄爱军阎志勇路长林何成第二军医大学基础医学部神经生物学教研室上海200433 青岛大学青岛医学院病理生理学教研室青岛266021

目的 :研究睫状神经营养因子 (cntf)对脊髓损伤后逆行性红核神经元损伤的保护作用和促进肢体功能恢复的作用。方法 :将大鼠分为假手术组、生理盐水 (NS)组和 cntf组 ,用 Allen改良法撞击致 SD大鼠脊髓 T1 0 损伤 ,经蛛网膜下腔留置导管... 详细信息

目的 :研究睫状神经营养因子 (cntf)对脊髓损伤后逆行性红核神经元损伤的保护作用和促进肢体功能恢复的作用。方法 :将大鼠分为假手术组、生理盐水 (NS)组和 cntf组 ,用 Allen改良法撞击致 SD大鼠脊髓 T1 0 损伤 ,经蛛网膜下腔留置导管注射 NS和 cntf;术后每周进行一次 BBB评分和斜板试验的行为学评分 ;6周时采用辣根过氧化物酶 (HRP)逆行示踪技术标记红核神经元 ,取红核部位脑组织作冰冻切片 ,应用四甲基联苯胺 (TMB)呈色反应显示脊髓损伤后红核神经元存活率 ,并进行图像数据的分析。结果 :(1) cntf组行为功能评分高于 NS组 ;(2 ) cntf组 HRP标记红核神经元数目多于对照组。结论 :cntf可减轻脊髓损伤后的逆行性损伤 ,而对上行运动神经元发挥保护作用 ,从而对肢体功能的恢复起到促进作用。

关键词： cntf 大鼠脊髓损伤逆行性红核神经元损伤保护作用睫状神经营养因子 HRP

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血竭含药血清对雪旺氏细胞NGF,BDNF,cntf,LNGFR,TrkA,GDNF,GAP-43和NF-H表达的影响

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中国中药杂志 2015年第7期40卷 1392-1395页

作者：古今何新荣韩亚亮中国人民解放军总医院药品保障中心中药房北京100853

目的:观察血竭含药血清对雪旺氏细胞NGF,BDNF,cntf,LNGFR,TrkA,GDNF,GAP-43和NF-H表达的影响,探讨其促进周围神经再生的可能机制。方法:SD大鼠随机分为血竭给药组(灌服血竭的香油溶液)和空白对照组(等体积香油),制备血竭含药血清和空白... 详细信息

目的:观察血竭含药血清对雪旺氏细胞NGF,BDNF,cntf,LNGFR,TrkA,GDNF,GAP-43和NF-H表达的影响,探讨其促进周围神经再生的可能机制。方法:SD大鼠随机分为血竭给药组(灌服血竭的香油溶液)和空白对照组(等体积香油),制备血竭含药血清和空白对照血清。选取出生3 d SD大鼠双侧坐骨神经制备雪旺氏细胞;将培养的雪旺氏细胞分为血竭组和空白对照组,分别用10%血竭含药血清和空白对照血清干预培养。48 h后应用RT-PCR法检测各组雪旺氏细胞NGF,BDNF等基因mRNA表达水平。结果:镜下观察到大部分雪旺氏细胞呈双极梭形,细胞呈肩对肩或端对端排列,免疫细胞化学鉴定均呈阳性;与空白组比较,血竭组NGF,LNGFR,GDNF和GAP-43 mRNA表达上调(Pcntf和TrkA的mRNA均下调(Pcntf,TrkA mRNA来发挥其促进神经修复作用。

关键词：血竭雪旺氏细胞 NGF BDNF cntf

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cntf对NMDA引起大鼠海马神经元NOS活性改变的影响

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细胞生物学杂志 2003年第2期25卷 113-115页

作者：刘芳严进姜宗来鲍璿路长林第二军医大学解剖学教研室上海200433 第二军医大学神经生物学教研室中科院上海脑研究所上海200031

为探讨cntf对NMDA引起大鼠海马神经元一氧化氮合酶(nNOS)表达的作用,以不同浓度的NMDA处理海马神经元,倒置显微镜下观察其形态,并以nNOS免疫细胞化学结合图象分析方法测定nNOS神经元胞体的灰度,揭示NMDA对NOS活性的影响以及在此过程中C... 详细信息

为探讨cntf对NMDA引起大鼠海马神经元一氧化氮合酶(nNOS)表达的作用,以不同浓度的NMDA处理海马神经元,倒置显微镜下观察其形态,并以nNOS免疫细胞化学结合图象分析方法测定nNOS神经元胞体的灰度,揭示NMDA对NOS活性的影响以及在此过程中cntf发挥的作用。发现(1)NMDA可引起海马神经元的毒性反应,且呈剂量依赖性和时间依赖性;(2)100μmmol/L NMDA 10min组nNOS神经元胞体的灰度值大于对照组(Pcntf,nNOS神经元的胞体及阳性突起的表现与对照组相似。提示cntf可能通过抑制nNOS的活性及NO的渗出而减弱NMDA对神经元的毒性作用。

关键词：睫状神经营养因子 cntf N-甲基-D-天冬氨酸 NMDA 一氧化氮合酶海马神经元作用机制酶活性神经毒性

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cntf基因在大鼠脊髓中的表达及生后发育的变化

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解剖学报 2001年第4期32卷 305-308,T004页

作者：顾晓松丁斐刘炎沈爱国姚登兵南通医学院神经科学研究所南通226001

目的　观察cntf基因在大鼠脊髓中的表达以及生后发育过程中的变化。　方法　以地高辛标记(dig )cntfcDNA为探针 ,采用原位杂交法 ,观察cntfmRNA在大鼠脊髓中的分布 ;采用RT PCR法 ,半定量分析大鼠生后发育过程中 ,脊髓cntfmRNA表达水平... 详细信息

目的　观察cntf基因在大鼠脊髓中的表达以及生后发育过程中的变化。　方法　以地高辛标记(dig )cntfcDNA为探针 ,采用原位杂交法 ,观察cntfmRNA在大鼠脊髓中的分布 ;采用RT PCR法 ,半定量分析大鼠生后发育过程中 ,脊髓cntfmRNA表达水平的变化。　结果　cntfmRNA原位杂交阳性信号存在于正常大鼠脊髓白质的腹索、外侧索周边的部分胶质细胞中 ;灰质中未能发现阳性杂交信号。RT PCR结果显示 ,大鼠生后 1d脊髓组织中即可见cntfmRNA表达 ,但表达量较低 ;出生 15d表达量迅速增加 ;30d时最高 ;6 0d时的表达量有下降的趋势。　结论　大鼠脊髓白质的部分胶质细胞可表达cntfmRNA ;大鼠出生后 1dcntfmRNA即有表达。

关键词： cntf mRNA 脊髓发育大鼠 cntf基因

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cntf在周围神经损伤及再生中的表达和分布

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第二军医大学学报 2002年第6期23卷 605-607页

作者：郑宏良由振东周水淼李兆基路长林严进黄益灯王成海刘葛音第二军医大学长海医院耳鼻咽喉科上海200433 第二军医大学基础医学部神经生物学教研室

目的 :探讨周围神经损伤及修复后神经干睫状神经营养因子 (cntf)的表达及分布。方法 :以犬喉返神经损伤及修复再生为实验模型 ,采用原位杂交及免疫组织化学技术 ,结合图像分析技术检测 cntf m RNA及其蛋白反应产物的灰度及面积。结果 ... 详细信息

目的 :探讨周围神经损伤及修复后神经干睫状神经营养因子 (cntf)的表达及分布。方法 :以犬喉返神经损伤及修复再生为实验模型 ,采用原位杂交及免疫组织化学技术 ,结合图像分析技术检测 cntf m RNA及其蛋白反应产物的灰度及面积。结果 :正常神经 cntf位于神经膜细胞中。神经切断后远段神经干 cntf表达迅速下降 ,6周后消失。随着神经的再生cntf表达逐渐增加 ,表达产物分布于包绕再生轴突及髓鞘的神经膜细胞质中 ,cntf蛋白还出现于再生的轴突中。神经再生完成后 ,表达仍明显低于正常状态。近段神经干也出现类似远段的改变。结论 :再生神经 cntf的表达呈下调型并与轴突再生有关 ;cntf的重分布为神经再生提供合适的微环境。

关键词： cntf 周围神经损伤神经再生神经生长因子睫状神经营养因子喉神经声带麻痹

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