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cnqx对清醒大鼠习得性LTP中海马DG区谷氨酸浓度的影响

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内蒙古医学杂志 2008年第8期40卷 897-902页

作者：孙志刚姜岩包金锁金秀吉金元哲金清华内蒙古民族大学附属医院神经外科研究所内蒙古通辽028000 延边大学基础医学院生理学与病理生理学教研部吉林延吉133000

目的:观察条件反射的建立和消退过程中,ɑ-氨基羟甲基恶唑丙酸(AMPA)受体拮抗剂对自由活动大鼠海马齿状回(DG)细胞外液中Glu浓度的影响,并进一步探讨它们与习得性突触效应长时程增强(LD-LTP)和行为学习之间的关系。方法:本实验使用脑部... 详细信息

目的:观察条件反射的建立和消退过程中,ɑ-氨基羟甲基恶唑丙酸(AMPA)受体拮抗剂对自由活动大鼠海马齿状回(DG)细胞外液中Glu浓度的影响,并进一步探讨它们与习得性突触效应长时程增强(LD-LTP)和行为学习之间的关系。方法:本实验使用脑部微量透析法、脑部微量注射法、高效液相色谱法、慢性埋植电极技术以及行为学习监测与电生理记录相结合的实验方法。结果:未进行条件反射训练大鼠海马DG注射cnqx后,并不影响DG区细胞外液中的Glu水平,但其PS幅值从注射前的100%明显下降到65.47%±13.82%(Pcnqx,明显抑制条件反射的形成,而且随着训练天数的增加,Glu浓度逐渐增加达到训练开始前的285.51%±43.83%(P0.05)。结论:AMPA受体在海马DG区习得性LTP的形成过程中起触发作用,此受体的激活是海马DG区习得性LTP形成的必要条件。

关键词：海马齿状回 Glu 习得性LTP 学习记忆 cnqx

cnqx对伤害性刺激隐神经诱发大鼠脊髓Fos蛋白表达的影响

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中国现代药物应用 2014年第2期8卷 5-6页

作者：杨宇姚阳刘坤刘畅张宇平魏昭沈晶晶沈阳医学院生理学教研室 110034 沈阳医学院临床医学系 110034

目的探讨伤害性刺激隐神经(SN)能否诱发脊髓神经元Fos蛋白表达及发生机制。方法应用免疫组化方法观察伤害性刺激SN和尾静脉注射谷氨酸非NMDA受体拮抗剂(cnqx)后诱发脊髓神经元Fos蛋白表达的变化。结果伤害性刺激SN后,诱导脊髓神经元Fos... 详细信息

目的探讨伤害性刺激隐神经(SN)能否诱发脊髓神经元Fos蛋白表达及发生机制。方法应用免疫组化方法观察伤害性刺激SN和尾静脉注射谷氨酸非NMDA受体拮抗剂(cnqx)后诱发脊髓神经元Fos蛋白表达的变化。结果伤害性刺激SN后,诱导脊髓神经元Fos蛋白表达显著增强,cnqx拮抗了Fos蛋白表达的显著增强。结论以伤害性刺激SN模拟躯体痛后,cnqx拮抗了伤害性刺激SN引起的脊髓神经元Fos蛋白表达的显著增加,表明非NMDA受体在躯体痛的调控中起到了重要的作用。

关键词：脊髓隐神经 Fos蛋白 cnqx

谷氨酸AMPA受体拮抗剂cnqx对大鼠颠倒学习的影响

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三峡大学学报（自然科学版） 2006年第6期28卷 570-572页

作者：李楠欣北京大学心理学系北京100871

研究利用旋转T迷宫装置,通过食物强化,分别训练大鼠视觉辨别学习和颠倒学习任务;每次训练前均向动物腹腔注射20μg/kg的谷氨酸AMPA受体拮抗剂cnqx,以考察其对大鼠学习能力的影响.结果发现,cnqx并不影响正常学习,但对于颠倒学习,cnqx注... 详细信息

研究利用旋转T迷宫装置,通过食物强化,分别训练大鼠视觉辨别学习和颠倒学习任务;每次训练前均向动物腹腔注射20μg/kg的谷氨酸AMPA受体拮抗剂cnqx,以考察其对大鼠学习能力的影响.结果发现,cnqx并不影响正常学习,但对于颠倒学习,cnqx注射组的学习次数较控制组显著增加,说明cnqx可以对大鼠的认知灵活性造成损害.

关键词：谷氨酸 AMPA受体 cnqx 颠倒学习精神分裂症

清醒大鼠室旁核灌流谷氨酸受体阻断剂对压力感受性反射的影响

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中国应用生理学杂志 2008年第4期24卷 421-425页

作者：崔桂玉尹桂东姜海英金元哲金清华延边大学医学院生理学与病理生理学教研室吉林延吉133000 内蒙古民族大学医学院内蒙古通辽028007

目的:探讨下丘脑室旁核(PVN)内谷氨酸参与压力感受性反射中枢调节的神经化学机制。方法:在清醒大鼠,用脑部微量透析法和高效液相色谱法观察静脉注射苯肾上腺素诱发压力感受性反射对PVN区谷氨酸含量的影响;NMDA受体阻断剂MK-801或非NMDA... 详细信息

目的:探讨下丘脑室旁核(PVN)内谷氨酸参与压力感受性反射中枢调节的神经化学机制。方法:在清醒大鼠,用脑部微量透析法和高效液相色谱法观察静脉注射苯肾上腺素诱发压力感受性反射对PVN区谷氨酸含量的影响;NMDA受体阻断剂MK-801或非NMDA受体阻断剂cnqx直接灌流PVN区并诱发压力感受性反射,进一步探讨PVN区谷氨酸对压力感受性反射的作用。结果:①静脉注射苯肾上腺素诱发压力感受性反射时,PVN内的谷氨酸含量迅速升高到注射前的384.82%±91.77%(Pcnqx,同时诱发压力感受性反射,其血压升值明显减少,心率降值明显增加(P<0.01),压力感受性反射的敏感性(△HR/△MAP)明显增加(P<0.01)。结论:PVN内的谷氨酸可能通过离子型谷氨酸受体参与压力感受性反射的中枢调节,而且此调节作用可能是抑制性的。

关键词：下丘脑室旁核压力感受性反射谷氨酸 MK-801 cnqx 清醒大鼠

Inhibition of Non-NMDA ionotropic glutamate receptors delays retinal degeneration in rd10 mice

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Inhibition of Non-NMDA ionotropic glutamate receptors delays...

逍遥散对肝郁脾虚证大鼠边缘系统神经元超微结构的影响

中国神经科学学会第十二届全国学术会议

作者： Zongqin Xiang Jia Zhang Ying Xu GHM Institute of CNS Regeneration Jinan University

Objective: Retinitis pigmentosa is a progressive neurodegenerative disease that cause deterioration of rod and cone photoreceptors and is the leading cause of blindness in the world. The aim of this study is to understand the progress of the disease focusing in the glutamate pathway, and to seek effective way to protect the function of retinal neurons, hoping to provide a new strategy to treat retinitis pigmentosa in the clinic. Methods: In our study, we used rd10 mice, a well-established animal model of retinitis pigmentosa, to detect the changes of glutamate receptors expression during photoreceptor degeneration and the impact on the function of retinal ganglion cells. We firstly checked the changes of ON signal cascade proteins（metabotropic glutamate receptor 6, m Glu R6 and TRPM1 protein） and OFF signal cascade related ionotropic glutamate receptors（i Glu Rs）by immunostaining. Then we used multi-electrode-array（MEA） system to record the light response of ganglion cells and the effects of perfusing low dose of cnqx（non-NMDA i Glu Rs antagonist） on the functions of retinal ganglion cells. Lastly, we *** rd10 mice with cnqx for 2 weeks, and examined the changes of light response of ganglion cells and the morphology of retinal neurons, as well as the animal behavior. Results: m Glu R6 and TRPM1 were down-regulated in the outer plexiform layer during photoreceptors degeneration. In contrast, i Glu Rs were up-regulated in the inner plexiform layer, and AMPA receptors formed abnormal clusters in the outer plexiform layer. During photoreceptors degeneration, the light response of ganglion cells in rd10 retina decreased while the spontaneous spiking increased abnormally. Both in vitro and in vivo application of low-dose cnqx inhibited the abnormal spontaneous spiking and increased the light evoked response of ganglion cells. Furthermore, in vivo application of cnqx increased the survival of photoreceptors, improved the morphology of bipolar cells as well as the

关键词： Retinitis pigmentosa glutamate receptor cnqx retinal ganglion cells light responses multi-electrode-array

来源： cnki会议评论

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中华中医药杂志 2009年第5期24卷 577-581页

作者：梁媛陈家旭郭晓玲岳广欣杨美娟葛桂玲北京中医药大学中医诊断系北京100029 北京中医药大学组织胚胎学教研室北京100029 北京中医药大学电镜室北京100029

目的:探讨慢性束缚应激所致肝郁脾虚证大鼠海马CA1区和杏仁核细胞超微结构的变化,明确逍遥散和6-氰基-7-硝喹啉-2,3-双酮(cnqx)对慢性应激所致肝郁脾虚证的保护作用及其机制。方法:将100只雄性SD大鼠随机分为正常组(A组)、假手术组(B组... 详细信息

目的:探讨慢性束缚应激所致肝郁脾虚证大鼠海马CA1区和杏仁核细胞超微结构的变化,明确逍遥散和6-氰基-7-硝喹啉-2,3-双酮(cnqx)对慢性应激所致肝郁脾虚证的保护作用及其机制。方法:将100只雄性SD大鼠随机分为正常组(A组)、假手术组(B组)、模型组(C组)、逍遥散组(D组)、cnqx组(E组)和逍遥散+cnqx组(F组)。C、D、E、F组大鼠通过连续21d慢性束缚应激建立肝郁脾虚证候模型,D、F组大鼠每天束缚前灌服逍遥散5.32g/kg,E、F组大鼠在第1、4、7、10、13、16、19、21d右侧杏仁核区微量注射α-氨基羟甲基恶唑丙酸(AMPA)受体拮抗剂cnqx0.5μl。第22d处死动物,用透射电镜方法观察海马CA1区和左侧杏仁核神经细胞和突触的形态结构。结果:模型组大鼠海马出现了细胞核变形、线粒体嵴模糊,突触结构不清等,正常组、假手术组和给药各组大鼠CA1区未见明显异常;各组大鼠杏仁核均未见明显异常。结论:逍遥散可改善慢性束缚应激导致的海马CA1区超微结构的损伤,其作用机制可能与cnqx一致。

关键词：慢性束缚应激肝郁脾虚逍遥散 cnqx 海马杏仁核电镜

逍遥散对肝郁脾虚证大鼠海马和杏仁核BDNF的调节作用

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逍遥散对肝郁脾虚证大鼠海马和杏仁核BDNF的调节作用

作者：霍素坤北京中医药大学

学位级别：硕士

1理论探讨本课题利用慢性束缚的方法,模拟肝郁日久,木郁乘土,肝郁脾虚的病理演变过程,成功复制出大鼠肝郁脾虚证模型。慢性束缚应激模拟了肝失疏泄的病理过程,而逍遥散的治疗促进了肝主疏泄功能恢复。由于慢性应激涉及到人体多个系统,... 详细信息

1理论探讨本课题利用慢性束缚的方法,模拟肝郁日久,木郁乘土,肝郁脾虚的病理演变过程,成功复制出大鼠肝郁脾虚证模型。慢性束缚应激模拟了肝失疏泄的病理过程,而逍遥散的治疗促进了肝主疏泄功能恢复。由于慢性应激涉及到人体多个系统,在不同应激原、不同个体、不同环境下,可能导致的结果也不相同,给预防和治疗慢性应激所致疾病造成了困难,而中医药的整体观念、辨证论治、个体化诊疗等理念在这方面显示出了更大的优越性。逍遥散是治疗肝郁脾虚证的名方,本实验从逍遥散入手,探讨逍遥散的调节作用。本课题为国家自然科学基金(No.30672578)资助课题。主要选择大脑中相互关联的两个区域--海马与杏仁体。从现代应激理论入手,结合中医学有关应激理论的研究成果,通过探讨慢性束缚应激时BDNF分布与表达,对大脑突触可塑性的观察,以及逍遥散对BDNF的调节作用,进一步探索慢性应激时所造成的人体损伤及疾病的内在机制,以及肝主疏泄是慢性应激调节的核心及逍遥散在消除或减轻慢性应激时所产生的部分作用机理,这也是肝主疏泄功能的体现。这些研究不仅有利于中医基础理论和中医临床的研究发展,而且对于许多应激性疾病的预防和治疗具有重要的意义。当前认为AMPA的受体拮抗剂cnqx比NMDA的受体拮抗剂MK-801更能有效的阻止CA3锥体神经元受损。本实验拟拮抗双侧杏仁核AMPA受体,抑制杏仁核尤其抑制BLA的兴奋,通过行为学观察以及免疫组化和RT-PCR技术检测各组大鼠海马CA1、CA3、DG和杏仁核BLA区BDNF的变化,以探索逍遥散对其调节作用。2实验研究本实验由四部分组成。实验一,肝郁脾虚证大鼠模型的建立与评价。从动物行为学着手、观察宏观表征和检测反应小肠吸收功能的尿D-木糖排泄率确证慢性束缚应激方法造成的大鼠肝郁脾虚证模型;实验二、三和四通过行为学、免疫组化和RT-PCR检测海马各区和杏仁核的BDNF的表达情况,探讨逍遥散的重要调节作用,共分五组,正常组、模型组、假手术组、cnqx组和逍遥散组,每组15只,5只/笼群养。后四组束缚捆绑21d后,第22d开始做手术。假手术组和逍遥散组分别在双侧杏仁核用脑立体定位仪定位微量注射生理盐水0.5μl,cnqx组双侧杏仁核微量注射cnqx溶液0.5μl。除逍遥散组灌服逍遥散溶液外,其它组均灌相同体积的生理盐水。模型组只束缚不手术。第25d进行行为学观察。第26d分别灌注固定取材留做免疫组化和剥离取大鼠海马和杏仁核组织留做RT-PCR。3结果和结论3.1实验一结果:模型组大鼠由初次束缚时反抗挣脱,逐步转变为神态倦怠、抗争不积极、烦躁、毛发枯黄散乱无光泽、蛰伏静卧、大便稀溏等;模型组大鼠体重增长缓慢,尿D-木糖排泄率逐渐降低;旷场实验中第7d开始穿格数、站立次数、修饰次数均有下降趋势,第21d达到最低点。而逍遥散对模型组大鼠有显著的调节作用,从体重增长、穿格数、站立次数和修饰次数相较于模型组有明显改善。结论:利用慢性束缚的方法造模,模拟肝郁日久,木郁乘土,肝郁脾虚的病理演变过程,成功复制出大鼠肝郁脾虚证模型。3.2实验二结果:束缚21d后,模型组大鼠出现类似肝郁脾虚的不良表现,在三周实验过程中体重增长量明显减少,在旷场实验中模型组大鼠的总穿格数、站立次数和修饰次数明显减少;假手术组大鼠呈现焦躁状态;cnqx组起到治疗作用,大鼠焦躁状态得到抑制;逍遥散组大鼠表现与正常组相近,说明逍遥散起到很好的调节作用。结论:①大鼠双侧杏仁核微量注射cnqx后,抑制杏仁核尤其BLA兴奋性,可以缓解焦躁状态,起到治疗的作用;②逍遥散对肝郁脾虚证起到良好的调节作用。3.3实验三结果:①BDNF阳性面积、MOD和IOD趋势与阳性细胞数变化趋势大致相似。②慢性应激致海马CA3区神经元较CA1区神经元受损严重,CA1区和BLA区变化趋势大致相似。DG区损伤程度较CA3区和CA1区轻,这可能因为DG区有显著的再生功能。③阳性细胞数变化趋势:在海马CA1区,与正常组比较,假手术组和cnqx组有统计学意义,且阳性细胞数减少;与假手术组比较,逍遥散组有统计学意义,且较假手术组阳性细胞数减少;cnqx组和逍遥散组间有统计学意义。在海马CA3区,与正常组比较,模型组、假手术组和逍遥散组均有统计学意义,且均较正常组BDNF阳性细胞数减少;cnqx组和逍遥散组间有统计学意义。在海马DG区,与正常组比较,模型组、假手术组和逍遥散组均有统计学意义;与模型组比较,假手术组、cnqx组和逍遥散组均无明显差异,假手术组和cnqx组较模型组减少,逍遥散组较模型组阳性细胞数增多;与假手术组比较,模型组、cnqx组和逍遥散组间无明显差异,

关键词：逍遥散肝郁脾虚证调节作用 BDNF cnqx 海马杏仁核慢性束缚应激

非NMDA型兴奋性氨基酸受体促进大鼠伤害性传入引起的脊髓后角星形胶质细胞的激活

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非NMDA型兴奋性氨基酸受体促进大鼠伤害性传入引起的脊髓后角星形...

作者：岳玲河北医科大学

学位级别：硕士

传统观点认为神经元是神经系统的基本功能单位,中枢神经系统对伤害性刺激的感受、传导以及调节,都是由神经元介导的。但近年来研究表明,脊髓胶质细胞在病理性痛的产生和维持中发挥重要作用。很多伤害性刺激,如皮下炎性刺激、外周神经损... 详细信息

传统观点认为神经元是神经系统的基本功能单位,中枢神经系统对伤害性刺激的感受、传导以及调节,都是由神经元介导的。但近年来研究表明,脊髓胶质细胞在病理性痛的产生和维持中发挥重要作用。很多伤害性刺激,如皮下炎性刺激、外周神经损伤等均可以激活脊髓后角胶质细胞。给予胶质细胞抑制剂(如氟代柠檬酸、CNI-1493)可明显抑制伤害性刺激引起的热痛敏和机械性痛敏。体外实验表明胶质细胞可以被一些疼痛相关物质,如ATP、兴奋性氨基酸(excitatoryamino acids ,EAAs)、前列腺素、P 物质、一氧化氮等激活。激活的脊髓胶质细胞可以产生许多细胞因子和神经活性物质促进伤害性信息的传递。由此可见脊髓胶质细胞的激活在伤害性信息处理过程中发挥重要作用。但伤害性传入引起脊髓胶质细胞激活的机制有待阐明。EAAs 是脊髓中介导伤害性信息传递的重要神经递质,可通过N-甲基-D-天门冬氨酸(N-methyl-D-asparte,NMDA )和非NMDA受体介导伤害性信息,其中NMDA受体除介导脊髓后角痛相关神经元的兴奋外,在伤害性传入引起的脊髓后角星形胶质细胞的激活中也发挥重要作用,但非NMDA 受体是否参与伤害性传入引起的脊髓后角星形胶质细胞的激活尚未见报道。因此,本实验通过观察非NMDA 受体拮抗剂6-cyano-7-nitroquinoxaline-2,3-dione(cnqx)对大鼠蜜蜂毒(Bee venom,BV)炎性痛及痛过敏所致脊髓后角星形胶质细胞胶质原纤酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)表达的影响,以及非NMDA 受体激动剂海人藻酸(kainic acid,KA)在引起伤害性感受过程中对脊髓后角星形胶质细胞GFAP 表达的影响,探讨非NMDA 受体在伤害性信息传入所致脊髓后角星型胶质细胞激活中的作用。1 非NMDA 受体拮抗剂cnqx 对大鼠蜂毒炎性痛及痛过敏所致脊髓后角星形胶质细胞GFAP 表达的影响雄性Sprague-Dawley 大鼠77 只,体重270-280g。动物随机分为4 组,分别为对照(Control)组、蜂毒(BV)组、BV +溶剂二甲基亚砜(DMSO)对照组、BV+cnqx 组。其中BV+cnqx 组根据cnqx 剂量分为2.5nmol、10nmol、 40nmol三个亚组。对照组足底皮下注射生理盐水(NS)50μl,其余各组均于右后足底皮下注射BV 溶液50μl(4g·L-1)致外周炎性痛及痛过敏。BV+DMSO 组、BV+cnqx 组于足底注射蜂毒前15min 鞘内注射10μl 溶剂(50% DMSO)或cnqx溶液。各组均于足底注射后1h 或24h 取材,免疫组化法观察脊髓后角GFAP 表达的变化。取材前测定自发缩足反射次数(1h),并应用温水浴法和热辐射法测定热甩尾潜伏期(24h)。结果发现,①缩足反射足底注射蜂毒后大鼠出现缩足反射。鞘内给予DMSO 对上述BV 注射引起的缩足反射次数无显著影响(P>0.05),而鞘内给予cnqx 则可使大鼠的退缩反射次数显著降低(Pcnqx剂量显示明显的剂量依赖性。②热甩尾潜伏期大鼠右后足掌面皮下注射蜂毒后其热甩尾潜伏期显著缩短(P<0.05)。

关键词：炎性痛及痛过敏蜜蜂毒 GFAP 星形胶质细胞非NMDA 受体 cnqx KA 大鼠

清醒大鼠室旁核灌流谷氨酸受体阻断剂对压力感受性反射的影响

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清醒大鼠室旁核灌流谷氨酸受体阻断剂对压力感受性反射的影响

作者：崔桂玉延边大学

学位级别：硕士

下丘脑室旁核(hypothalamic paraventricular nucleus，PVN)是内分泌系统和自主神经系统的整合中枢，大量研究表明，PVN是调节机体内环境稳态和心血管活动的重要结构。据报道，PVN在正常或应激状态下有着加强心血管活动的作用。但是，... 详细信息

下丘脑室旁核(hypothalamic paraventricular nucleus，PVN)是内分泌系统和自主神经系统的整合中枢，大量研究表明，PVN是调节机体内环境稳态和心血管活动的重要结构。据报道，PVN在正常或应激状态下有着加强心血管活动的作用。但是，这些研究多数是直接或间接刺激PVN后观察了心血管活动的变化，没有对参与心血管活动调节的PVN内的神经递质做进一步的研究，尤其是对PVN参与正常压力感受性反射调节的神经化学机制，还是报道稀少。因此，为了阐明PVN参与正常压力感受性反射调节的部分神经化学机制，本实验在清醒大鼠，静脉注射苯肾上腺素诱发压力感受性反射，同时利用脑部微量透析法和高效液相色谱分析法，观察PVN区谷氨酸Glu(glutamate)含量的变化。其次，通过PVN区灌流谷氨酸受体阻断剂Dizocilpine(MK-801)和6-cyano-7-nitroquinoxaline-2，3-dione(cnqx)，进一步探讨了PVN区谷氨酸参与压力感受性反射中枢调节的具体机制。实验结果如下： 1．静脉注射苯肾上腺素诱发压力感受性反射，血压由正常的99.5±5.6mmHg上升到149.8±4.3mmHg;心率反射性地从400.8±5.2次／分下降到273.4±6.7次／分(p＜0.05)。PVN区细胞外液中谷氨酸水平由正常100％升高到373.44±47.60％(P＜0.01)。 2．向PVN区灌流谷氨酸受体阻断剂MK-801或cnqx(100μmol／L)20分钟，同时静脉给予与对照组相同剂量的苯肾上腺素诱发压力感受性反射。和对照组相比，阻断剂使用组比较，血压升高的幅度明显减少(P＜0.01)，而心率下降的幅度却明显升高(P＜0.01)，导致压力感受性反射的敏感性ΔHR／ΔMAP明显增加(P＜0.01)。结论：室旁核区的谷氨酸可能是通过离子型谷氨酸受体参与压力感受性反射的中枢调节，而且其作用可能是抑制性的。

关键词：压力感受性反射下丘脑室旁核清醒大鼠 MK-801 cnqx 苯肾上腺素谷氨酸