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肿瘤微环境中M2巨噬细胞调控cldn10通路促进膀胱癌细胞的上皮-间质转化

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第三军医大学学报 2021年第23期43卷 2525-2531页

作者：袁刚军韩娜谭星亮邹园涛鲜鹏宋彦平袁方戴君勇唐显力李俊王呈李元刘南重庆大学附属肿瘤医院:泌尿外科重庆400030 重庆大学附属肿瘤医院:健康体检与肿瘤筛查中心重庆400030 中山大学肿瘤防治中心泌尿外科广州150086

目的探讨膀胱癌微环境中M2巨噬细胞通过cldn10信号通路对膀胱癌细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的调控作用及其机制。方法收集2020年3-9月重庆大学附属肿瘤医院收治的10例膀胱癌患者的新鲜癌组织及癌旁组织标... 详细信息

目的探讨膀胱癌微环境中M2巨噬细胞通过cldn10信号通路对膀胱癌细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的调控作用及其机制。方法收集2020年3-9月重庆大学附属肿瘤医院收治的10例膀胱癌患者的新鲜癌组织及癌旁组织标本,免疫组化观测巨噬细胞表面标志物在膀胱癌组织中的表达;对癌和癌旁组织进行转录组测序,筛选出受巨噬细胞调控的潜在基因。采用CCK-8、细胞克隆、Western blot等方法观测cldn10对膀胱癌细胞生长和增殖的作用。结果巨噬细胞特征性分子CD68和M2型巨噬细胞CD163分子在膀胱癌组织中表达增加。对基因测序结果分析后发现cldn10基因在膀胱癌组织中表达最显著,对膀胱癌组织免疫组化结果行免疫评分后发现cldn10的表达与巨噬细胞在膀胱癌组织中的浸润呈正相关。Western blot检测结果表明膀胱癌组织中cldn10蛋白的表达水平较癌旁组织高(Pcldn10的表达后,与对照组相比,生长曲线结果表明膀胱癌细胞生长能力下降,细胞克隆形成实验结果表明膀胱癌细胞形成细胞克隆数目降低(198.0±10.3 vs 145.0±8.4,Pcldn10的表达促进膀胱癌细胞EMT的发生。

关键词：巨噬细胞肿瘤微环境 cldn10 膀胱癌

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人cldn10a启动子的克隆及活性分析

基因组学与应用生物学 2022年第7期41卷 1567-1578页

作者：周雯杨智时凤敏符碧薇吴岩唐敏郑琳王青松海南医学院组织胚胎学教研室海口571199 海南医学院形态学实验室海口571199 海南医学院生物技术专业实验室海口571199 海南医学院生物化学与分子生物学教研室海口571199

cldn基因家族编码构成细胞间紧密连接的主要跨膜蛋白Claudins,在维持细胞极性、信号转导和恶性肿瘤复发转移中发挥重要作用。cldn10基因属于cldn家族,有包括cldn10a在内的多个转录本。本研究利用多种生物信息学方法分析cldn10a的5′侧... 详细信息

cldn基因家族编码构成细胞间紧密连接的主要跨膜蛋白Claudins,在维持细胞极性、信号转导和恶性肿瘤复发转移中发挥重要作用。cldn10基因属于cldn家族,有包括cldn10a在内的多个转录本。本研究利用多种生物信息学方法分析cldn10a的5′侧翼序列的特征和转录因子结合位点,采用基因合成、PCR扩增和分子克隆构建5′缺失的不同长度的cldn10a启动子荧光素酶报告基因载体,瞬时转染HEK-293T细胞,通过双荧光素酶报告基因系统检测不同长度片段的启动子活性。生物信息学分析结果显示,cldn10a的上游转录调控区序列(-2000~+460 bp)含有TATA box、GC box和CAAT box,存在1个CpG岛,有4个启动子位置,有1个RNA聚合酶Ⅱ核心启动子;MatInspector和Jaspar分析发现,有75种可能的转录因子结合位点(评分≥0.99)。PCR和测序结果显示,成功构建了6个不同长度的cldn10a启动子的双荧光素酶报告基因质粒。荧光素酶活性检测表明,-1890~-1100 bp、-1000~-890 bp、-890~-150 bp和-150~+460 bp是人cldn10a启动子的主要活性区域,-150~+460 bp包含cldn10a的核心启动子区域。本实验为进一步研究cldn10基因的表达及调控机制提供了依据。

关键词： cldn10 启动子双荧光素酶报告基因系统生物信息学

基于数据挖掘分析cldn10基因在肾透明细胞癌的表达及临床意义

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海南医学 2021年第20期32卷 2589-2596页

作者：徐争光李灿楦李晓林晏廷陈洁暨南大学附属第一医院泌尿外科广东广州510630

目的探索cldn10在肾透明细胞癌(ccRCC)的表达及临床意义。方法通过Oncomine数据库、Ualcan数据库、GEPIA数据库、HPA数据库、String-DB数据库、Metascape数据库分析cldn10在正常肾组织与ccRCC中的表达差异、cldn10表达水平与ccRCC患者... 详细信息

目的探索cldn10在肾透明细胞癌(ccRCC)的表达及临床意义。方法通过Oncomine数据库、Ualcan数据库、GEPIA数据库、HPA数据库、String-DB数据库、Metascape数据库分析cldn10在正常肾组织与ccRCC中的表达差异、cldn10表达水平与ccRCC患者临床特征的相关性及其对患者预后的影响、cldn10在正常肾组织与ccRCC的甲基化水平差异、cldn10与上下游蛋白的相互作用关系以及关联基因的富集通路。结果cldn10在ccRCC中的mRNA和蛋白质表达水平较正常肾组织低(Pcldn10在正常肾组织与肿瘤分期(stage1、stage2、stage3和stage4)、ccRCC亚型(ccA和ccB)、淋巴结转移(N0和N1)的表达差异均为Pcldn10的表达呈下降趋势,其表达水平与肿瘤进展相关,cldn10低表达患者生存率较高表达组明显降低(Pcldn10在正常肾组织与stage1、stage2、stage3、stage4中的甲基化表达差异分别为P=1.62E-12、P=3.11E-08、P=1.62E-12、P=1.62E-12,以上差异均具有统计学意义(Pcldn10蛋白相关的蛋白有cldn14、cldn2、cldn16、cldn8、cldn3、cldn1、cldn19等,主要参与了增殖、分化、转移、细胞屏障、细胞紧密连接等生物过程。结论通过挖掘分析肿瘤生物信息数据库发现cldn10在ccRCC中低表达,且其表达水平与肿瘤进展和患者预后相关,为后续研究ccRCC的诊断标志物和治疗靶点提供理论依据。

关键词： cldn10 肾透明细胞癌生物信息学表达差异预后

cldn10基因检测在甲状腺癌诊疗的相关性研究及应用

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浙江临床医学 2019年第4期21卷 479-480页

作者：俞科黄婷刘异俞俊锋吴晓芳杭州市余杭区中医院 311106 杭州市余杭区计生指导站 11100

目的研究cldn10基因的表达水平与甲状腺肿瘤发生发展的相关性.方法观察2015年7月至2018年5月接受手术治疗的50例甲状腺结节患者、50例甲状腺癌、50例健康人的 cldn10基因的表达水平,利用ELISA法及real time -PCR进行检测,并通过单因... 详细信息

目的研究cldn10基因的表达水平与甲状腺肿瘤发生发展的相关性.方法观察2015年7月至2018年5月接受手术治疗的50例甲状腺结节患者、50例甲状腺癌、50例健康人的 cldn10基因的表达水平,利用ELISA法及real time -PCR进行检测,并通过单因素方差分析以及多因素统计分析方法.结果 ELISA法测cldn10蛋白甲状腺乳头状癌组阳性率(40%,Pcldn10表达与甲状腺癌患者年龄、性别、肿瘤大小无相关性(P>0.05),与淋巴结转移(Pcldn10基因的表达水平与甲状腺结节和甲状腺乳头状癌的发生、发展进行关联性研究,对于甲状腺结节和甲状腺乳头状癌的诊断、临床治疗及预后判断有重要意义.

关键词： cldn10 甲状腺肿瘤转移

基于公共数据库分析cldn10与MYH10在肾透明细胞癌中表达及预后的意义

维普期刊数据库评论

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实用癌症杂志 2021年第2期36卷 231-235页

作者：刘波姚雪婷路卯王辰飞温州医科大学眼视光学院、生物医学工程学院 325000 山西省晋城大医院 048006

目的探讨cldn10与MYH10在肾透明细胞癌中表达及预后的意义。方法通过GEO数据库分析获取肾透明细胞差异基因,并使用DAVID数据库对差异基因进行富集分析和功能注释,通过HPA数据库获取cldn10与MYH10在正常肾脏组织蛋白表达图谱,再通过GEPI... 详细信息

目的探讨cldn10与MYH10在肾透明细胞癌中表达及预后的意义。方法通过GEO数据库分析获取肾透明细胞差异基因,并使用DAVID数据库对差异基因进行富集分析和功能注释,通过HPA数据库获取cldn10与MYH10在正常肾脏组织蛋白表达图谱,再通过GEPIA数据库获取cldn10与MYH10表达差异及肾透明细胞癌患者的预后信息。结果GEO数据库分析表达谱数据集GSE105261共得到438个差异基因,DAVID数据库富集分析表明这些差异基因主要富集在分泌过程、细胞外的外泌体、细胞外基质结构组分以及抗生素的生物合成。GEPIA数据库分析显示:cldn10与MYH10在正常对照组中表达较肿瘤组显著增高(Pcldn10表达与MYH10表达呈显著正相关(Pcldn10、MYH10表达量与肾透明细胞癌患者的病理分期呈负相关(Pcldn10与MYH10在肾透明细胞癌组织中低表达,并且与患者的生存预后明显相关,cldn10与MYH10有望成为预测肾透明细胞癌患者预后的生物标志物及治疗的靶点。

关键词： cldn10 MYH10 肾透明细胞癌 GEO数据库 GEPIA数据库