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Sdha基因敲低对小鼠肝细胞BNL cl.2细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响

中国药理学与毒理学杂志 2016年第2期30卷 107-112页

作者：李欣曹焕玲赵亚伟郭银汉王庆阳北京中医药大学中药学院北京100029 军事医学科学院基础医学研究所免疫学研究室北京100850

目的探讨琥珀酸脱氢酶复合物亚单位A(SDHA)对小鼠肝细胞BNL cl.2细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响。方法用慢病毒载体介导的sh RNA敲低BNL cl.2细胞中sdha基因的表达。流式细胞仪检测慢病毒的感染效率;实时荧光定量PCR和Western蛋白印迹... 详细信息

目的探讨琥珀酸脱氢酶复合物亚单位A(SDHA)对小鼠肝细胞BNL cl.2细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响。方法用慢病毒载体介导的sh RNA敲低BNL cl.2细胞中sdha基因的表达。流式细胞仪检测慢病毒的感染效率;实时荧光定量PCR和Western蛋白印迹法分别检测sdha m RNA和SDHA蛋白表达水平;细胞计数法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期。结果无相关sh RNA对照组和sdha sh RNA组慢病毒的感染效率均>80%。与无相关sh RNA对照组相比,感染sdha sh RNA慢病毒载体的BNL cl.2细胞sdha m RNA水平降低20倍左右(P细胞增殖速度减慢,为无相关sh RNA对照组的70%左右(P细胞周期发生改变,G0/G1期细胞百分率是无相关sh RNA对照组的1.17倍(P2/M期细胞百分率为1.37倍(P细胞百分率为73.8%(P细胞凋亡率无明显差异。结论降低SDHA表达对小鼠肝细胞BNL cl.2细胞增殖有明显的抑制作用,其抑制作用与细胞周期阻滞相关,与细胞凋亡无明显关系。

关键词：琥珀酸脱氢酶复合物亚单位A BNL cl.2细胞细胞增殖细胞周期细胞凋亡

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