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Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology) 2006年第6期7卷 445-451页

作者： XU Dong LI Xu-fen ZHENG Shu JIANG Wen-zhi Cancer Institute the Second Affiliated Hospital School of Medicine Zhejiang University Hangzhou 310009 China

This study is aimed at establishing a sensitive approach to detect disseminated tumor cells in peripheral blood and evaluate its clinical significance. A total of 198 blood samples including 168 from colorectal carcinoma (CRC) patients and 30 from healthy volunteers were examined by quantitative real-time reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) to evaluate the expression of carcinoembryonic antigen (CEA), cytokeratin 20 (ck20) and cytokeratin 19 (ck19) mrna. CEA mrna was detected in 35.8% of patients and 3.3% of controls, ck20 mrna in 28.3% of patients and 6.7% of controls, and ck19 mrna in 41.9% of patients and 3.3% of controls. CEA and ck20 mrna positive ratio increased with the advancing Dukes stages, but there was no significant difference in positive ratio between any two stages (P>0.05). Also, relatively high positive ratio of CEA, ck20 and ck19 mrna expression was observed in some CRC patients with earlier Dukes stages. A higher positive ratio was obtained when two or three detection markers were combined compared to a single marker. Our study indicates that quanti-tative real-time RT-PCR detection for CEA, ck20 and ck19 mrna in peripheral blood is a valuable tool for monitoring early stage dissemination of CRC cells in blood circulation.

关键词： Colorectal carcinoma Real-time RT-PCR CEA mrna ck20 mrna ck19 mrna

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ck19 mrna和LUNX mrna RT-PCR检测肺癌微转移

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实用放射学杂志 2002年第6期18卷 449-452页

作者：王绪刘德林朱广迎彭猛青刘慧沈万华徐州医学院附属医院放射科徐州医学院附属医院放射科江苏徐州221002

目的　以ck19、LUNX为靶基因 ,建立RT -PCR检测肺癌患者外周血中微转移的方法 ;检验ck19mrna、LUNXmrna作为肺癌微转移检测分子标志物的可行性及二者特异性和敏感性的比较。方法　选择影像学未发现转移灶的非小细胞肺癌 (NSCLC)患者 40... 详细信息

目的　以ck19、LUNX为靶基因 ,建立RT -PCR检测肺癌患者外周血中微转移的方法 ;检验ck19mrna、LUNXmrna作为肺癌微转移检测分子标志物的可行性及二者特异性和敏感性的比较。方法　选择影像学未发现转移灶的非小细胞肺癌 (NSCLC)患者 40例 ,在治疗前抽取外周血 ;另选择肺部良性疾病 3 0例与健康人 10例作为对照组。对以上标本用逆转录PCR(reversetran scriptasepolymerasechainreaction ,RT -PCR)法检测ck19及LUNXmrna的表达 ,同时对其进行半定量。结果　 40例NSCLC外周血中ck19mrna和LUNXmrna阳性率分别为 42 .5 % (17/ 40 )和 5 7.5 % (2 3 / 40 ) ,而 3 0例肺良性疾病患者外周血中ck19及LUNXmrna阳性率分别为 6.7% (2 / 3 0 )和 0 .0 % (0 / 3 0 ) ;10例健康志愿者外周血无 1例表达ck19mrna和LUNXmrna ,与肺癌组比较均有极显著差异。结论　ck19mrna、LUNXmrna均可作为RT -PCR法检测肺癌患者外周血微转移的分子标志物 ;但后者在特异性和敏感性上优于前者。该方法的建立可能有助于早期诊断肺癌转移 ,从而指导临床分期和治疗。

关键词： RT-PCR 非小细胞肺癌微转移 ck19 mrna LUNX mrna

非小细胞肺癌患者外周血Survivin mrna联合ck19 mrna检测的临床研究

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非小细胞肺癌患者外周血Survivin mRNA联合CK19 mRNA检测的临床研...

作者：张倩馨大连医科大学

学位级别：硕士

目的:通过检测非小细胞肺癌（ Non-small cell lung cancer,NSCLC）患者外周血生存素（Survivin）mrna及细胞角蛋白19（ck19） mrna的表达;及与癌胚抗原（CEA）、细胞角质片段抗原21-1（CYFRA21-1）进行比较,观察Survivin mrna联合ck19 ... 详细信息

目的:通过检测非小细胞肺癌（ Non-small cell lung cancer,NSCLC）患者外周血生存素（Survivin）mrna及细胞角蛋白19（ck19） mrna的表达;及与癌胚抗原（CEA）、细胞角质片段抗原21-1（CYFRA21-1）进行比较,观察Survivin mrna联合ck19 mrna对NSCLC早期诊断、早期发现微转移的临床价值和意义。方法:采集55例非小细胞肺癌患者、30例肺部良性病变患者、30例健康人外周血,采用逆转录聚合酶链反应法（RT-PCR）检测Survivin mrna和ck19 mrna的表达情况;采用电化学发光免疫分析法（Electro-Chemiluminescence Immunoassay, ECLI）检测CEA、CYFRA21-1的表达情况,分析它们与临床病理因素之间的关系。结果:Survivin mrna和ck19 mrna在NSCLC组的阳性率分别为61.82%（34/55）和49.09%（27/55）;良性病变组阳性率分别6.67%（2/30）和16.67%（5/30）;健康对照组阳性率均为0%,有显著性差异（P＜0.01）。阳性表达率与临床TNM分期有关（P＜0.01）,与性别、年龄、病理组织类型无关（P＞0.05）。CEA、CYFRA21-1两指标在NSCLC组的阳性率分别为43.64%（24/55）和34.55%（19/55）,阳性表达率与临床TNM分期、组织类型有关（P＜0.05）。Survivin mrna和ck19 mrna联合检测在NSCLC组的灵敏性为80.00%（44/55）,特异性90%（54/60）,准确率85.22%（98/115）。CEA与CYFRA21-1联合灵敏性为50.91%（28/55）,特异性85% （51/60）,准确率68.70% （79/115）。Survivin mrna和ck19 mrna联合检测比较CEA与CYFRA21-1联合检测的灵敏性与准确性差异有统计学意义（P＜0.05）,特异性差异无统计学意义（P＞0.05）。结论: *** mrna较ck19 mrna、CEA、CYFRA21-1在NSCLC患者外周血中高表达。检测外周血Survivin mrna表达,可作为辅助诊断NSCLC及微转移的一个有价值的肿瘤标志物。 *** mrna和ck19 mrna联合检测的灵敏性,准确性较CEA联合CYFRA21-1提高。Survivin mrna联合ck19 mrna检测可能有助于提高NSCLC早期检出率,并及早发现微转移,从而指导临床诊断。 3. CEA对腺癌敏感,CYFRA21-1对鳞癌敏感。CEA和CYFRA21-1对于判断非小细胞肺癌患者的病理分型有一定的帮助。

关键词： Survivin mrna ck19 mrna CEA CYFRA21-1 非小细胞肺癌

乳腺癌腔镜淋巴结清扫术腋窝冲洗液中脱落癌细胞与ck19 mrna表达的检测及意义

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乳腺癌腔镜淋巴结清扫术腋窝冲洗液中脱落癌细胞与CK19 mRNA表达...

作者：李国鹏中南大学

学位级别：硕士

目的：采用巢式RT-PCR方法对腔镜乳腺癌淋巴结清扫术腋窝冲洗液中ck19 mrna的表达情况进行检测,探索乳腺癌患者腋窝冲洗液中ck19 mrna的表达水平;并分析腔镜乳腺癌淋巴结清扫术腋窝冲洗液细胞学检查结果;为手术的安全性提供可靠的依据... 详细信息

目的：采用巢式RT-PCR方法对腔镜乳腺癌淋巴结清扫术腋窝冲洗液中ck19 mrna的表达情况进行检测,探索乳腺癌患者腋窝冲洗液中ck19 mrna的表达水平;并分析腔镜乳腺癌淋巴结清扫术腋窝冲洗液细胞学检查结果;为手术的安全性提供可靠的依据。方法：1.对50例淋巴结阳性的乳腺癌手术患者腋窝冲洗液进行细胞学检查,其中腔镜组20例、常规组30例,并将其结果与临床参数对比分析。2.设计ck19 mrna的特异性引物,以管家基因葡萄糖-3-磷酸脱氢酶(glucose3-phosphate dehydrogenase, G3PDH)作为内参照,运用巢式RT-PCR扩增ck19 mrna和G3PDH mrna。收集50例乳腺癌患者的腋窝冲洗液,分为腔镜组及常规组;提取RNA,巢式RT-PCR扩增ck19 mrna,琼脂糖凝胶电泳结果采用凝胶分析软件Gelpro4.0分析其积分光密度值(IOD),检测ck19 mrna的基因表达。结果：1.脱落癌细胞与临床参数的关系：腔镜组在冲洗液中找到癌细胞者5例(5/20),占25.0%;常规组在冲洗液中找到癌细胞者9例(9/30)占30.0%。(P>0.05)随着肿瘤的增大、病期的进展,转移淋巴结数的增多,腔镜组、常规组脱落的癌细胞阳性率有增高趋势,但差异无统计学意义(P>0.05);癌细胞的阳性率与病理学类型关系不明显(P>0.05)。2.腔镜手术组ck19 mrna的表达明显低于常规手术组的ck19mrna的表达(Pck19 mrna表达量更低,乳腺癌腔镜手术后脱落的癌细胞更少;随着淋巴结转移数量增多,脱落癌细胞检出率亦增加。

关键词： ck19 mrna 巢式RT-PCR 乳腺癌腔镜腋窝淋巴结清扫术

胃癌中ck19 mrna的表达变化及临床意义

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癌症进展 2020年第2期18卷 157-159页

作者：孙永华王惠胡博徐优耀李晶中国医科大学附属第一医院鞍山医院检验科辽宁鞍山114011 中国医科大学附属第一医院鞍山医院消化内科辽宁鞍山1140110 中国医科大学附属第一医院鞍山医院普外科辽宁鞍山1140110

目的探讨胃癌患者外周血中细胞角蛋白19(ck19)mrna的表达情况及临床意义。方法选取90例胃癌患者为胃癌组,选取90例健康者为对照组。采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测两组受试者外周血中ck19 mrna的相对表达量,分析不同临床特征... 详细信息

目的探讨胃癌患者外周血中细胞角蛋白19(ck19)mrna的表达情况及临床意义。方法选取90例胃癌患者为胃癌组,选取90例健康者为对照组。采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测两组受试者外周血中ck19 mrna的相对表达量,分析不同临床特征胃癌患者外周血中ck19 mrna的表达情况。结果胃癌组患者外周血中ck19 mrna的相对表达量为(12.167±2.770),明显高于对照组患者的(1.804±0.448),差异有统计学意义(P﹤0.01)。不同年龄、性别、病灶直径、病理类型、分化程度、浸润深度胃癌患者外周血中ck19 mrna的相对表达量比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05);不同TNM分期、淋巴结转移情况胃癌患者外周血中ck19 mrna的相对表达量比较,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。结论胃癌患者外周血中ck19 mrna的表达水平较高,且其表达水平可能与胃癌患者的TNM分期、淋巴结转移情况有关。

关键词：胃癌 ck19 mrna 实时定量聚合酶链反应临床特征淋巴结转移

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Expression of ck19 mrna and MUC-1 mrna in the peripheral blood of patients with colorectal cancer and their clinical significances

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The Chinese-German Journal of Clinical Oncology 2014年第7期13卷 316-319页

作者： Qian Wang Jie Liu Zewu An Department of General Surgery The No. 252 Hospital of PLA Department of Neurology The First Central Hospital of Baoding

Objective: Using nested reverse transcription-polymerase chain reaction(Nested RT-PCR) to test the mrna level in peripheral blood ck19 and MUC-1 in colorectal cancer patients and it's clinical significance, to discuss the feasibility of colorectal carcinoma micro-metastasis detection of molecular markers. Methods: The expression level was detected by nested RT-PCR in 20 healthy people, 20 patients with colorectal adenoma and 90 cases of patients with colorectal cancer disease peripheral blood ck19 mrna and MUC-1 mrna. Results: The positive expression rate of ck19 mrna and MUC-1 mrna were: 58.89%(53/90) and 52.22%(47/90). No ck19 mrna healthy people 20 cases in the control group in the peripheral blood, the expression of MUC-1 mrna in 12 cases, the expression rate of 60%(12/20). In 20 cases of colorectal adenoma diseases have the expression of ck19 mrna in 1 cases, the expression rate of 5%(1/20), the expression of MUC-1 mrna in 10 cases, the expression rate of 50%. Patients with colorectal cancer ck19 mrna, MUC-1 mrna expression rate was significantly correlated with tumor staging, the degree of differentiation of the tumor cells and tumor metastasis(P ck19 mrna as the detection of micro-metastasis in peripheral blood of patients with colorectal cancer has good sensitivity and specificity, but ck19 mrna, MUC-1 mrna can be used to judge the prognosis of patients with colorectal cancer index.

关键词： colorectal cancer (CRC) peripheral blood ck19 mrna MUC-1 mrna nested reverse transcription-polymerase chainreaction (Nested RT-PCR)

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CAIX/MN/G250mrna和ck19在肾癌术前、术后表达的研究

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CAIX/MN/G250mRNA和CK19在肾癌术前、术后表达的研究

作者：刘旭郑州大学

学位级别：硕士

肾癌占到全身恶性肿瘤的3%,在泌尿系统肿瘤中的发病率仅次于膀胱癌,其发病率大多在40岁,其发病率3.7/10万,肾脏肿瘤的发病主要特点是隐匿性,转移性较其他脏器肿瘤早并且缺乏特异性,早期诊断较为困难,尤其是影像学表现不典型时,肾癌的影... 详细信息

肾癌占到全身恶性肿瘤的3%,在泌尿系统肿瘤中的发病率仅次于膀胱癌,其发病率大多在40岁,其发病率3.7/10万,肾脏肿瘤的发病主要特点是隐匿性,转移性较其他脏器肿瘤早并且缺乏特异性,早期诊断较为困难,尤其是影像学表现不典型时,肾癌的影像学与肾脏的良性实性占位病变的鉴别较为困难。因此,如何寻找肾脏肿瘤的特异性抗原,是研究提高肾癌治疗效果的一大课题。在对肾肿瘤相关抗原（TAA）的研究中,发现碳酸酐酶9（carbonic anhydrase IX, CA IX）和细胞角蛋白（ck19mrna）具有良好的肿瘤特异性。碳酸酐酶9是新的碳酸酐酶家族（CAs）异构体之一,其在肾细胞癌中表达的程高,在我们目前知道的肾细胞癌分子标记物中占有重要的地位,但其在肾癌的诊断和术后的微转移方面研究的较少。细胞角蛋白（ck19mrna）是近年来发现的肿瘤标记物之一,细胞角蛋白对于维持细胞的连续性和细胞形态的稳定具有重要的作用,细胞胶蛋白具有组织和分化的特异性及高度的保守型并在细胞的信号传导,细胞的增殖,分化;细胞的凋亡方面起着重要的作用,目前,细胞胶蛋白19在甲状腺癌,胃癌及宫颈癌研究较多,但在肾癌术后微转移方面的研究较少,本实验主要研究细胞胶蛋白在肾癌中的应用。碳酸酐酶9和细胞角蛋白对于我们在临床工作中对肾细胞癌术前诊断和术后监测是否伴有肿瘤细胞的微转移具有重要意义本实验采用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）从RNA水平研究碳酸酐酶9（carbonic anhydrase IX,CA IX）术后外周血的表达情况及从RNA水平研究细胞角蛋白（ck19mrna）在肾癌根治术前和术后及术后外周血的表达情况,并分析二者在肾癌发生过程过程中的机制,并探讨二者作为微转移标记物在肾癌中的应用。材料和方法碳酸酐酶9（carbonic anhydrase IX,CA IX）试验标本收集郑州大学第二附属医院泌尿外科,河南省人民医院泌尿外科,河南省肿瘤医院外科2008年9月至2011年1月肾癌患者的外周血液标本,共40例,其中男性28例,女性22例,分别与术后6、12、18、24、30、36个月于清晨空腹抽取外周血各一份。同时根据情况选择体格检查及B超/CT/MRI/胸部X线检查。血液标本每份3ml,置于EDTAk2负压抗凝管中防止凝结,及时提取其总RNA,冻存于-80℃冰箱中,利用RT-PCR法以GAPDH为内参照,检测上述标本中CAIX mrna的表达,并对外周血中CAIX mrna水平行半定量测定。细胞角蛋白（ck19mrna）试验标本收集郑州大学第二附属医院泌尿外科,河南省人民医院泌尿外科,河南省肿瘤医院外科2010年1月至2011年1月肾癌组织及肾癌患者的外周血液标本,共32例,其中临床Ⅰ期患者8例,临床Ⅱ期患者11例,临床Ⅲ～Ⅳ期患者13例,临床病理类型：肾脏透明细胞癌,肾脏嗜色细胞癌,肾脏嫌色细胞癌,分别为22例,8例,2例。作为参照,同时取10例正常组织和10例取自距癌灶边缘3Cm以上癌旁非癌性正常组织。在术前标本收集过程中,所有患者均未做过任何治疗,组织标本均经病理证实,组织标本术中取出后立即置于冻存管中,并迅速转植入-80℃冰箱冻存防止组织中的mrna降解。16例健康志愿者于晨起空腹时采血;血液标本量为每份3ml,肾癌患者分别在术前2小时及行肾癌根治术后一周、第二周、第三周、第四周时晨起空腹采血各一份,血液标本量为每份3ml,置于EDTAK抗凝管中,并及时提取其总RNA,并立即冻存于-80℃冰箱中以防止降解,。试验采用RT-PCR法以GAPDH为内参照,检测标本中ck19 mrna的表达,并对外周血中ck19mrna水平行半定量测定。两种试验均采用SPSS10.0软件进行统计分析,具有统计学意义差异的检验标准α=0.05。实验结果在Ⅰ期肾癌的患者的根治术后6个月至术后36个月中,肾癌患者在18个月和24个月时间段表达有两例转阴,在肾癌Ⅱ期根治术后18,24,30个月时间段共有4例患者CAIXmrna表达转阴,在Ⅲ～Ⅳ期肾癌无患者CAIXmrna表达转阴,在术后6个月至术后36个月Ⅲ～Ⅳ肾癌中共有7例患者死亡。肾癌患者术后术后6个月至术后36个月各时间段内Ⅰ期,Ⅱ期,Ⅲ～Ⅳ期差异具有统计学意义。肾癌患者外周血中CAIX mrna半定量水平术后6月为0.313±0.078、术后12月0.275±0.064,术后18月,0.178±0.055,术后24月0.144±0.041,术后30月0.129±0.023,术后36月0.120±0.018。RCC患者外周血CAIX mrna水平在肾癌根治术后随时间的推移呈明显下降趋势（F=38.644,P＜0.01）。各组间比较统计学意义（f=104

关键词：肾癌 CAIX mrna ck19 mrna 逆转录聚合酶链式反应

实时荧光定量RT-PCR检测肺癌外周血中ck19mrna的表达及临床意义

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实时荧光定量RT-PCR检测肺癌外周血中CK19mRNA的表达及临床意义

作者：王明钊青岛大学

学位级别：硕士

目的：探讨检测细胞角蛋白19(cytokeratin19，ck19)在非小细胞肺癌患者外周血微转移的表达特点及其临床意义。方法：采用实时荧光定量RT—PCR的方法对35例非小细胞肺癌患者和10例健康人外周血ck19 mrna表达进行检测。结果：35例肺癌病... 详细信息

目的：探讨检测细胞角蛋白19(cytokeratin19，ck19)在非小细胞肺癌患者外周血微转移的表达特点及其临床意义。方法：采用实时荧光定量RT—PCR的方法对35例非小细胞肺癌患者和10例健康人外周血ck19 mrna表达进行检测。结果：35例肺癌病人外周血液及10例正常健康人外周血液中，GAPDH的mrna均有表达，阳性率为100％;ck-19 mrna在35例肺癌病人外周血液中，24例为阳性，阳性率68.6％。10例正常健康人外周血液对照中均无阳性。肺癌病人外周血中ck19 mrna阳性与临床分期、病理分型和肿瘤分化程度无相关性(P＞0.05)，与淋巴结转移密切相关(P＜0.05)。结论：实时荧光定量RT—PCR方法检测肺癌患者外周血中ck19 mrna表达有较高的敏感性和特异性，可能有助于早期诊断肺癌血行转移，指导临床分期和治疗。

关键词： ck19 mrna 实时荧光定量RT-PCR 非小细胞肺癌外周血

非小细胞肺癌患者骨髓ck19和LUNXmrna的实时荧光定量检测和意义

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非小细胞肺癌患者骨髓CK19和LUNXmRNA的实时荧光定量检测和意义

非小细胞肺癌患者外周血ck19和LUNXmrna的实时荧光定量检测和意义

第四届中国肿瘤学术大会暨第五届海峡两岸肿瘤学术会议

作者：刘毅梅张鹏陈洁陈刚杨萍天津医科大学总医院心胸外科天津医科大学总医院心胸外科天津医科大学总医院心胸外科天津医科大学总医院心胸外科天津医科大学总医院心胸外科

目的:检测非小细胞肺癌患者ck19 mrna和 LUNX mrna的表达情况,探讨其作为微转移检测分子标志物的可行性。方法:选择初治的非小细胞肺癌（NSCLC）患者62例,以肺部良性疾病10例作为对照组,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（FQ—RT—PC... 详细信息

目的:检测非小细胞肺癌患者ck19 mrna和 LUNX mrna的表达情况,探讨其作为微转移检测分子标志物的可行性。方法:选择初治的非小细胞肺癌（NSCLC）患者62例,以肺部良性疾病10例作为对照组,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（FQ—RT—PCR）和普通RT—PCR 技术,检测肺癌,良性病变肺组织和骨髓的ck19 mrna和 LUNX mrna的表达。结果:肺癌和良性病变肺组织RT— PCR检测结果显示ck19 mrna和LUNX mrna表达阳性率为100％,62例NSCLC患者骨髓标本FO-RT-PCR检测结果显示,NSCLC患者中骨髓ck19 mrna表达阳性率 45．2％（28／62）明显高于肺良性病变组10％（1／10）（P=0．037）, NSCLC组骨髓LUNX mrna表达阳性率38．7％（24／62）明显高于肺良性病变组0％（0／10）（P=0．017）,骨髓ck19 mrna 表达阳性率随病理分期升高,接近统计学意义（P=0．06）,而与病理类型,肿瘤分化程度无关,骨髓LUNX mrna表达阳性率随分期升高且有统计学意义（P=0．02）,而与病理类型,肿瘤分化程度无关,骨髓ck19 mrna和LUNX mrna表达明显相关（P＜0．001）。结论:ck19 mrna和LUNX mrna可作为检测非小细胞肺癌患者微转移特异,敏感的分子标志物,可能有助于早期诊断肺癌转移,从而指导临床分期和治疗。

关键词：非小细胞肺癌微转移 ck19 mrna LUNX mrna 实时荧光定量 RT-PCR

来源： cnki会议评论

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非小细胞肺癌患者外周血CK19和LUNXmRNA的实时荧光定量检测和意义