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干扰cidea基因抑制牦牛皮下脂肪细胞的脂滴积累

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中国兽医学报 2023年第7期43卷 1478-1483页

作者：何婉婷李昕邈央金卓玛郑豫虎翰卓霍文韬熊燕西南民族大学畜牧兽医学院四川成都610041 青藏高原动物遗传资源保护与利用四川省重点实验室四川成都610041

旨在明确cidea基因在牦牛皮下脂肪细胞中的表达模式,并阐明其对皮下脂肪细胞脂滴积累的影响,为进一步研究cidea基因对牦牛皮下脂肪细胞脂代谢作用机制提供基础数据。本研究以金川牦牛为试验对象,使用siRNA介导的干扰技术作用于cidea基因... 详细信息

旨在明确cidea基因在牦牛皮下脂肪细胞中的表达模式,并阐明其对皮下脂肪细胞脂滴积累的影响,为进一步研究cidea基因对牦牛皮下脂肪细胞脂代谢作用机制提供基础数据。本研究以金川牦牛为试验对象,使用siRNA介导的干扰技术作用于cidea基因后,检测其干扰效率;通过观察皮下脂肪细胞的脂滴积累和检测脂代谢相关基因表达,明确该基因对皮下脂肪细胞脂滴积聚的影响。结果表明,干扰牦牛cidea基因后其脂滴的积聚显著降低,油红O染料萃取后的D值显著下降,且干扰后脂代谢相关基因C/EBPα、FAS均显著下调,ATGL表达水平显著上调,表明cidea基因参与牦牛脂肪组织沉积与代谢。

关键词：牦牛 cidea 干扰皮下脂肪细胞脂滴积累

小鼠cidea蛋白N端缺失异构体的鉴定和研究

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生物化学与生物物理进展 2010年第9期37卷 951-959页

作者：张景峰徐俐王文珊李蓬清华大学生命科学学院北京100084 北京交通大学生命科学与生物工程研究院北京100044

cidea蛋白调节脂肪代谢,在机体能量平衡过程中起重要作用,在转录和翻译后水平受到严格调控,但在翻译水平的调节还不清楚.通过对cidea基因敲除小鼠模型研究,鉴定了小鼠棕色脂肪组织内源性表达cidea蛋白N端缺失异构体mcidea-22.定点突变... 详细信息

cidea蛋白调节脂肪代谢,在机体能量平衡过程中起重要作用,在转录和翻译后水平受到严格调控,但在翻译水平的调节还不清楚.通过对cidea基因敲除小鼠模型研究,鉴定了小鼠棕色脂肪组织内源性表达cidea蛋白N端缺失异构体mcidea-22.定点突变等研究表明其产生机制为选择性起始翻译.并且,在异位表达时,N端缺失异构体和全长异构体的比例呈现细胞系特异性.此外,蛋白质稳定性实验表明mcidea-22半衰期很短.亚细胞定位研究显示mcidea-22是内质网和脂滴定位蛋白.为深入理解cidea蛋白的功能和精细调节提供了新的思路和方向.

关键词： CIDE cidea 棕色脂肪组织选择性翻译异构体内质网和脂滴定位

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cidea在脂代谢中的功能研究进展

中国奶牛 2022年第5期 15-18页

作者：赵欣姚大为赵淑颖陈成彬马毅南开大学生命科学学院天津300071 天津市农业科学院畜牧兽医研究所天津300381 天津农学院动物科学与动物医学学院天津300384

哺乳动物后代的生存离不开乳腺在哺乳期间提供的充足脂类,细胞死亡诱导DFFA样效应蛋白A(cidea)是一种脂滴外壳蛋白,在泌乳乳腺中高水平表达,在脂代谢过程中发挥重要作用。本文综述了CIDE蛋白家族及cidea在奶牛脂代谢中的作用。

关键词： CIDE蛋白家族 cidea CIDEB CIDEC 脂代谢

cidea和CIDEc基因在肉鸡中的表达分析

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CIDEa和CIDEc基因在肉鸡中的表达分析

作者：黄柳梅江西农业大学

学位级别：硕士

CIDE家族(诱导细胞凋亡DNA片段化因子45样效应因子)是一类脂滴相关蛋白,参与调控脂类代谢的多个方面,其中,cidea和CIDEc与脂滴融合,脂肪沉积,代谢性疾病有密切关联。目前关于肉鸡中cidea和CIDEc基因的表达分析报道甚少,在本论文中,我们... 详细信息

CIDE家族(诱导细胞凋亡DNA片段化因子45样效应因子)是一类脂滴相关蛋白,参与调控脂类代谢的多个方面,其中,cidea和CIDEc与脂滴融合,脂肪沉积,代谢性疾病有密切关联。目前关于肉鸡中cidea和CIDEc基因的表达分析报道甚少,在本论文中,我们以高脂系AA肉鸡和低脂系宁都三黄肉鸡为研究对象,采用实时荧光定量PCR法分别检测cidea和CIDEc基因在第六周龄AA肉鸡中的组织表达谱;在第二(2W)、四(4W)、六(6W)周龄AA肉鸡中的发育性表达规律;在第六周龄AA肉鸡和宁都三黄肉鸡中的品种间表达差异;在第六周龄AA肉鸡禁食24 h后的表达变化。取得的主要结果如下:1、cidea和CIDEc基因在AA肉鸡20个组织中普遍表达且表达谱相似,二者在脂肪组织中有最高表达量,其次是肝脏、肾脏和卵巢。2、cidea和CIDEc基因在AA肉鸡中的发育性表达相似,两个基因在五个组织中的相对表达量随着肉鸡日龄的增大而升高,并在6W时有最高表达量。此外,血清甘油三酯含量随着肉鸡日龄的增大而升高。4W的脂滴直径极显著大于2W,而极显著小于6W。3、cidea和CIDEc基因在高、低脂系肉鸡中的表达差异相似,两个基因在AA肉鸡六个组织中的相对表达量均高于宁都三黄肉鸡的相应组织。此外,AA肉鸡血清中的甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇水平和脂肪细胞中的脂滴直径均显著高于宁都三黄肉鸡。4、禁食组cidea和CIDEc基因在八个组织中的相对表达量较对照组均不同程度升高,其中,在五个部位脂肪组织中的升高幅度最为显著。以上结果为cidea和CIDEc基因在肉鸡中的表达分析提供了一定的理论依据,同时也为以后研究肉鸡脂类代谢和脂肪沉积的潜在分子机制奠定了基础。

关键词： cidea CIDEc 肉鸡表达谱发育性表达禁食

奶山羊cidea基因的克隆、序列分析与组织表达

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畜牧与兽医 2020年第3期52卷 6-11页

作者：李君吴姣权凯候霞飞杨芳慧张景锋赵金艳魏红芳河南牧业经济学院动物科技学院河南省非常规饲料资源创新利用重点实验室河南郑州450046

为获得奶山羊cidea基因序列并检测其在乳腺组织中的表达,采用RT-PCR技术从奶山羊乳腺组织扩增cidea基因序列,利用生物信息学软件对其进行预测分析,并采用荧光定量PCR检测cidea在干奶期和不同泌乳时期乳腺组织中的表达。结果表明:通过克... 详细信息

为获得奶山羊cidea基因序列并检测其在乳腺组织中的表达,采用RT-PCR技术从奶山羊乳腺组织扩增cidea基因序列,利用生物信息学软件对其进行预测分析,并采用荧光定量PCR检测cidea在干奶期和不同泌乳时期乳腺组织中的表达。结果表明:通过克隆测序得到奶山羊cidea基因CDS区660 bp,编码219个氨基酸,与GenBank公布的绵羊、牛、人和猪的核苷酸序列同源性分别为99%、96%、85%、85%。奶山羊cidea蛋白属于碱性、不稳定亲水蛋白,不存在跨膜结构和信号肽;蛋白主要定位在细胞质、线粒体和细胞核。cidea蛋白结构主要由α螺旋、β折叠和不规则卷曲组成。奶山羊cidea在泌乳前期、盛期和中期乳腺组织中表达量均显著高于干奶期(Pcidea可能参与奶山羊乳腺的泌乳过程,为进一步研究其在奶山羊乳腺组织中的功能及对乳品质的调控作用奠定基础。

关键词：奶山羊 cidea 基因克隆生物信息学分析组织表达

黄芪散对T2DM大鼠体脂系数和脂肪组织MCP-1、UCP-1、PRDM16、cidea mRNA表达的影响

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中华中医药学刊 2018年第10期36卷 2345-2348页

作者：王芳曾煦欣徐彬陈珺李卫民广东药科大学中药学院广东广州510006 佛山科学技术学院口腔医学院广东佛山528000 广东药科大学生命科学与生物制药学院广东广州510006 广州中医药大学中药学院广东广州510006

目的：采用糖皮质激素联合高脂喂养建立2型糖尿病（T2DM）大鼠模型,探讨黄芪散对T2DM大鼠体脂系数（肾周脂肪、附睾脂肪和棕色脂肪）及相关基因MCP-1、UCP-1、PRDM16、cidea mRNA表达的影响。方法：SD大鼠适应性饲养1周后,随机分为正常... 详细信息

目的：采用糖皮质激素联合高脂喂养建立2型糖尿病（T2DM）大鼠模型,探讨黄芪散对T2DM大鼠体脂系数（肾周脂肪、附睾脂肪和棕色脂肪）及相关基因MCP-1、UCP-1、PRDM16、cidea mRNA表达的影响。方法：SD大鼠适应性饲养1周后,随机分为正常组（Nor）、糖皮质激素＋高脂模型组（HFD＋GC）,黄芪散组（HQS）,每组10只。正常组喂基础饲料,其他两组喂高脂饲料。同时除正常组给予等体积的生理盐水外,其他两组大鼠灌胃醋酸泼尼松3. 5 mg/kg,1次/d,给药组1 h后灌胃黄芪散2. 96 g/kg。于给药12周后,测定各组大鼠空腹血糖（FBG）,分离肾周、附睾周围组织的白色脂肪,分离背部颈下肩胛间区中间棕色脂肪,称重,计算体脂系数。采用real-time PCR法检测白色脂肪组织中单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）和棕色脂肪组织中解偶联蛋白（UCP-1）、PR域包含16（PRDM16）、细胞死亡诱导DNA断裂因子α类似效应A（cidea） mRNA表达的影响。结果：与正常组比较,HFD＋GC模型组大鼠表现为高血糖、肾周脂肪系数、附睾脂肪系数显著性升高,MCP-1上调明显,棕色脂肪系数下降,UCP-1、PRDM16、cidea表达降低。与模型组比较,HQS可降低大鼠白色脂肪系数及MCP-1表达,升高棕色脂肪系数及UCP-1、cidea的表达。结论：黄芪散可减少T2DM模型大鼠伴随的肥胖症状,可提高机体能量代谢,可作用可有与降低MCP-1表达,升高UCP-1、cidea表达有关。

关键词：黄芪散白色脂肪棕色脂肪 MCP-1 UCP-1 PRDM16 cidea

cidea和Cidec促进肝脏中脂类的积累

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现代生物医学进展 2018年第5期18卷 801-806页

作者：赵东宇郁苗汪文敏任豪廖榕玉徐俐周林康清华大学生命科学学院北京100084

目的:探讨cidea和Cidec对肝脏中脂滴大小和脂类积累的影响。方法:首先,检测ob/ob肥胖小鼠的脂肪肝中cidea和Cidec的表达情况。然后,采用腺病毒系统在野生型小鼠肝脏中过表达cidea和Cidec,以及在ob/ob小鼠肝脏中基因沉默cidea和Cidec,检... 详细信息

目的:探讨cidea和Cidec对肝脏中脂滴大小和脂类积累的影响。方法:首先,检测ob/ob肥胖小鼠的脂肪肝中cidea和Cidec的表达情况。然后,采用腺病毒系统在野生型小鼠肝脏中过表达cidea和Cidec,以及在ob/ob小鼠肝脏中基因沉默cidea和Cidec,检测肝脏中脂滴大小和脂积累情况。结果:cidea和Cidec在脂肪性肝脏中高表达。肝脏细胞中过表达cidea和Cidec促进大脂滴的形成并能促进小鼠肝脏中的脂积累,且二者有协同作用。在脂肪肝中沉默cidea和Cidec能缓解脂肪肝的程度,且脂合成基因的下调,线粒体活性增加。cidea和Cidec的共沉默能进一步降低肝脏中的脂类积累。结论:cidea和Cidec在促进肝脏的脂积累中起重要作用,并且二者有协同作用。

关键词：脂肪肝脂滴 cidea Cidee

CIDE家族和脂肪酸合成相关基因在高能低蛋白日粮诱导的FLHS中的表...

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作者：黄恩福江西农业大学

学位级别：硕士

脂肪肝出血综合征(Fatty liver hemorrhagic syndrome,FLHS)是一种以肝细胞中大量的脂肪异常沉积而引起的营养代谢性疾病,它普遍发生于处在产蛋高峰期的笼养蛋鸡,可导致蛋鸡的产蛋率急剧下降和肝脏破裂引起突然的死亡。CIDE家族蛋白是... 详细信息

脂肪肝出血综合征(Fatty liver hemorrhagic syndrome,FLHS)是一种以肝细胞中大量的脂肪异常沉积而引起的营养代谢性疾病,它普遍发生于处在产蛋高峰期的笼养蛋鸡,可导致蛋鸡的产蛋率急剧下降和肝脏破裂引起突然的死亡。CIDE家族蛋白是一种脂类相关蛋白,它包含有cidea、CIDEb、CIDEc/Fsp27三种基因。它们和脂肪酸合成相关基因(FAS、ACC、ME)均可参与脂质代谢的调控,尤其是在脂肪组织和肝脏组织中脂类的稳态方面的调控起着重要作用。同时,cidea和CIDEc均能参与肥胖症、脂肪肝、Ⅱ型糖尿病的调控。本研究以海兰褐蛋鸡为试验动物,试验期间将其160羽蛋鸡随机分成对照组(80羽)和病理组(80羽),对照组饲喂基础日粮,病理组饲喂高能量低蛋白日粮,让其自由采食,给予充分光照(16小时),在试验期第80天采取肝脏、肾脏和脂肪组织样品,根据肝脏颜色及肝脏石蜡切片观察,同时参照Thomas Lionel Barton评分标准,将其划分为轻度FLHS组和重度FLHS组,然后采用real-time PCR方法检测对照组及病理组中肝脏、肾脏和各脂肪组织中的cidea、CIDEc和脂肪酸合成相关基因(FAS、ME、ACC)mRNA表达差异,拟揭示cidea、CIDEc和脂肪酸合成相关基因(FAS、ME、ACC)与FLHS的相关性。结果表明:(1)肝脏经HE染色结果显示:大量肝细胞发生脂肪变性,且肝细胞内含有许多大小不等的脂滴,表明高能量低蛋白日粮成功诱导FLHS。(2)cidea和CIDEc在轻度FLHS组和重度FLHS组中表达水平显著增加(Pcidea和CIDEc表达量与其发病程度呈正相关。(3)在FLHS病理模型鸡只中FAS、ME、ACC等脂肪合成酶基因表达水平显著高于对照组(P<0.05或P<0.01),揭示FAS、ME、ACC的表达差异与其发病程度成正相关。以上结果为进一步研究FLHS的分子机制提供理论基础。

关键词：海兰褐蛋鸡脂肪肝出血综合征 cidea CIDEc FAS ME ACC

临床酮病奶牛血液高浓度NEFA对乳蛋白与乳脂合成的影响

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临床酮病奶牛血液高浓度NEFA对乳蛋白与乳脂合成的影响

作者：舒馨吉林大学

学位级别：硕士

酮病是围产期奶牛泌乳初期常见的糖脂代谢障碍性疾病。患临床酮病的奶牛血浆非酯化脂肪酸(NEFA)与酮体浓度显著升高,并表现出乳蛋白率降低、乳脂率升高等特征。血液中高浓度的NEFA能够被奶牛乳腺组织吸收,并用于合成乳脂。乳蛋白与乳脂... 详细信息

酮病是围产期奶牛泌乳初期常见的糖脂代谢障碍性疾病。患临床酮病的奶牛血浆非酯化脂肪酸(NEFA)与酮体浓度显著升高,并表现出乳蛋白率降低、乳脂率升高等特征。血液中高浓度的NEFA能够被奶牛乳腺组织吸收,并用于合成乳脂。乳蛋白与乳脂的合成受到诸多因素的影响。其中JAK2/STAT5与mTOR信号通路是调节乳蛋白合成的核心途径;诱导细胞凋亡的DFF45样因子A(cidea)是脂滴相关蛋白,与脂质代谢密切相关。已有研究表明,在小鼠乳腺组织中,cidea参与乳脂的合成与分泌,并直接影响新生小鼠存活率,且在泌乳奶牛乳腺组织中高表达。但临床酮病奶牛高NEFA是否参与以及如何调控乳腺组织乳蛋白和乳脂的合成尚不清楚。因此,本实验通过采集健康与临床酮病奶牛乳腺组织,体外分离培养的奶牛乳腺上皮细胞(BMEC)并添加不同浓度NEFA,研究高浓度NEFA对乳蛋白和乳脂合成与分泌的影响及机制。采集健康奶牛与临床酮病奶牛的血液和乳汁样本,检测血清代谢指标并进行乳成分分析。结果表明,临床酮病奶牛血液中NEFA、乳中乳脂率显著高于健康奶牛,乳蛋白率显著低于健康奶牛。为进一步研究高浓度NEFA分别对乳蛋白与乳脂合成的影响,采集健康与临床酮病奶牛的乳腺组织;体外培养BMEC,并分为3个处理组:添加0、0.3、0.6、1.2 mM NEFA组,0.6 mM蛋氨酸(Met)与1.2 mM NEFA共培养组,催乳素(PRL)与1.2 mM NEFA共培养组。体内实验结果表明,在临床酮病奶牛乳腺组织中,JAK2/STAT5与mTOR信号通路均受到抑制,β-酪蛋白(β-casein)表达水平降低。体外实验表明,高浓度NEFA降低了BMEC中β-casein表达水平。与此同时,JAK2、STAT5、mTOR、S6K1磷酸化水平及STAT5、S6K1、4EBP1的mRNA转录水平随NEFA浓度的降低而降低。添加Met/PRL后,可显著缓解高浓度NEFA对β-casein表达水平、JAK2/STAT5和mTOR信号通路激活的抑制作用。结果说明,高浓度NEFA通过抑制JAK2/STAT5与mTOR信号通路的激活进而抑制BMEC中乳蛋白的合成。采集临床酮病与健康奶牛乳腺组织,分离培养的BMEC,分为3个处理组:转染过表达cidea腺病毒组,添加0、0.3、0.6、1.2 mM NEFA组,添加1.2 mM NEFA并转染沉默cidea腺病毒组。体外实验结果表明,临床酮病奶牛乳腺组织中cidea、脂肪酸从头合成基因(FASN和ACACA)和乳脂分泌基因(BTN1A1和XDH)表达水平均高于健康奶牛。体外实验发现,添加高浓度NEFA与过表达cidea均显著增加了BMEC中FASN、ACACA、BTN1A1、XDH的表达水平与甘油三酯(TAG)的含量。而沉默cidea则逆转了NEFA对FASN、ACACA、BTN1A1、XDH表达水平与TAG含量升高的作用。高浓度NEFA通过cidea介导BMEC乳脂合成与分泌的增加。以上结果表明,临床酮病奶牛低乳蛋白率、高乳脂率与血液中高浓度NEFA相关。提示临床酮病奶牛血液高浓度NEFA是导致奶牛低乳蛋白率、高乳脂率的重要起始因子,其对乳蛋白或乳脂率的影响分别由JAK2/STAT5和mTOR信号通路或cidea介导。

关键词：临床酮病奶牛 NEFA 奶牛乳腺上皮细胞乳蛋白合成乳脂合成 cidea