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ClC-3 chloride channel in hippocampal neuronal apoptosis

Neural Regeneration Research 2013年第32期8卷 3047-3054页

作者： Lijuan Xu Shuling Zhang Hongling Fan Zhichao Zhong Xi Li Xiaoxiao Jin Quanzhong Chang Department of Physiology Zhuhai Campus of Zunyi Medical College First Hospital of Putian City Department of Pediatrics Zhuhai Campus of Zunyi Medical College

Over-production of nitric oxide is pathogenic for neuronal apoptosis around the ischemic area fol- lowing ischemic brain injury. In this study, an apoptotic model in rat hippocampal neurons was es- tablished by 0.5 mmol/L 3-morpholinosyndnomine （SIN-l）, a nitric oxide donor. The models were then cultured with 0.1 mmol/L of 4,4＇-diisothiocyanostilbene-2,2＇-disulfonic acid （DIDS; the chloride channel blocker）for 18 hours. Neuronal survival was detected using the 3-（4,5-dimethylthiazol- 2-yl）-2,5-diphenyltetrazolium bromide （MTT） assay, and apoptosis was assayed by Hoechst 33342-labeled neuronal DNA fluorescence staining. Western blot analysis and immunochemilumi- nescence staining were applied to determine the changes of activated caspase-3 and cic-3 channel proteins. Real-time PCR was used to detect the mRNA expression of cic-3. The results showed that SIN-1 reduced the neuronal survival rate, induced neuronal apoptosis, and promoted cic-3 chloride channel protein and mRNA expression in the apoptotic neurons. DIDS reversed the effect of SIN-I. Our findings indicate that the increased activities of the cic-3 chloride channel may be involved in hippocampal neuronal apoptosis induced by nitric oxide.

关键词： neural regeneration brain injury nitric oxide cic-3 chloride channel 3-morpholinosyndnomine 4,4'-diisothiocyanostilbene-2,2'-disulfonic acid hippocampal neurons apoptosis grants-supportedpaper neuroregeneration

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