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Plant Communications 2022年第4期3卷 150-160页

作者： Le Wang May Lee Fei Sun Zhuojun Song Zituo Yang Gen Hua Yue Temasek Life Sciences Laboratory Singapore 117604Singapore Department of Biological Sciences National University of SingaporeSingapore 117543Singapore

chia(Salvia hispanica)is a functional food crop for *** its seeds contain high omega-3 fatty acids,the seed yield of chia is still *** resources available for this plant are *** report the first high-quality chromosome-level genome sequence of *** assembled genome size was 347.6 Mb and covered 98.1%of the estimated genome size.A total of 31069 protein-coding genes were *** absence of recent whole-genome duplication and the relatively low intensity of transposable element expansion in chia compared to its sister species contribute to its small genome *** sequencing and gene duplication analysis reveal that the expansion of the fab2 gene family is likely to be related to the high content of omega-3 in *** white seed coat color is determined by a single locus on chromosome *** study provides novel insights into the evolution of Salvia species and high omega-3 content,as well as valuable genomic resources for genetic improvement of important commercial traits of chia and its related species.

关键词： genome fatty acid seed coat color Salvia species chia

苏云金芽孢杆菌chia,chiB全基因的克隆、表达及其序列分析

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微生物学报 2007年第5期47卷 843-848页

作者：陈艳玲卢伟陈月华肖亮蔡峻韩苗苗南开大学生命科学学院微生物学系天津市微生物功能基因组学重点实验室天津300071

以苏云金芽孢杆菌科默尔亚种15A3菌株基因组DNA为模版,用touchdown PCR方法扩增几丁质酶chia和ChiB的全基因序列(GenBank登录号:EF103273和DQ512474)。将PCR产物连接pUCm-T克隆载体,获得重组质粒pUCm-chia和pUCm-chiB,分别转化***-Blue。克隆的几丁质酶基因可以利用本身的启动子异源表达各自的蛋白,不需要几丁质作为诱导物。表达的几丁质酶能够分泌到胞外。证明15A3菌株可组成型表达2种几丁质酶。经核苷酸及氨基酸序列分析证明,chia基因全长1426bp,含有343bp的上游非编码区和1083bp的ORF,编码360个氨基酸。推测成熟蛋白分子量为36kD,只有一个几丁质酶催化域。chiB基因全长2279bp,含有248bp的上游非编码区和2031bp的ORF,编码676个氨基酸。推测成熟蛋白分子量约为70.6kD,具有三个功能域。核苷酸序列分析显示chia和chiB的启动子所处的位置及转录起始碱基都不相同,-35区相同,而-10区有两个碱基不同,SD序列也不完全一致。

关键词：苏云金芽孢杆菌 chia ChiB 组成型表达序列分析

chia和CHI3L1基因变异与汉族儿童哮喘发病的关系

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中国免疫学杂志 2013年第7期29卷 706-709,717页

作者：黄湘谭家余袁春雷周涛罗雅玲南方医科大学附属中山市博爱医院产前诊断中心中山528402 南方医科大学附属南方医院呼吸内科.广州510515

目的:探讨chia和CHI3L1基因的变异与中山市汉族儿童哮喘发病的相关性。方法:采用病例对照研究,利用MassARRAY-IPLEX技术和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱平台(MALDI-TOF-MS)对chia基因的rs10494132和CHI3L1的rs946263位点进行基因分... 详细信息

目的:探讨chia和CHI3L1基因的变异与中山市汉族儿童哮喘发病的相关性。方法:采用病例对照研究,利用MassARRAY-IPLEX技术和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱平台(MALDI-TOF-MS)对chia基因的rs10494132和CHI3L1的rs946263位点进行基因分型。结果:在中山市汉族儿童中rs10494132检出CC、CT和TT基因型,rs946263检出AA、AG和GG三种基因型。与正常对照相比,哮喘组rs10494132的基因型分布(χ2=8.767,P=0.012)和等位基因分布(χ2=9.749,P=0.002)均具有明显差异,而rs946263基因型分布(χ2=0.472,P=0.790)和等位基因分布(χ2=0.013,P=0.910)均无显著性差异。与CC+CT基因型相比,rs10494132的TT基因型能显著增加哮喘发生的危险性,OR值(95%可信区间)分别为2.093(1.252～3.498)。在哮喘组中,与CC+CT基因型亚组相比,rs10494132的TT基因型亚组IgE浓度(Z=-2.013,P=0.044)明显增高,而嗜酸性粒细胞计数(Z=-0.704,P=0.482)和CRP(Z=-0.488,P=0.626)无明显变化。rs10494132位点的基因型分布在哮喘初次确诊规则治疗前不同病情严重程度分级之间未见明显差异(χ2=0.719,P=0.397)。结论:chia基因的rs10494132可能与中山市汉族儿童哮喘的发病有关,TT基因型可能增加血清IgE浓度。

关键词：支气管哮喘 chia CHI3L1 单核苷酸多态性基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱儿童

Assessing the Oxidative Stability of Commercial chia Oil

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Journal of Food Science and Engineering 2013年第7期3卷 349-356页

作者： Maria A. Grompone Bruno Irigaray Denisse Rodriguez Norma Sammain Departamento de Ciencia y Tecnologia de los Alimentos Facultad de Quimica Universidad de la Repfiblica Montevideo Gral.Flores 2124 Uruguay Departamento Bioqulmica de la Nutrici6n Instituto Superior de Investigaciones Biol6gicas (INSIBIO) Universidad Nacional deTucumc~n Tucumc~n Chacabuco 461 Argentina

The fatty acid composition as well as the antioxidant composition and content of two commercially available chia oils of different origins were studied. The purpose of this work was the study of the oxidative stability from different methods and the antioxidant content of the chia oils compared with other commercial oils. The oxidative stability of the oils was determined based on the oxidative stability index test （OSI test） conducted at 110 ~C and isothermal as well as non-isothermal differential scanning calorimeter （non-isothermal DSC） for the chia oil and the linseed oil. The OSI induction time of chia oil was compared with that of commercially available linseed, canola, sunflower and high-oleic sunflower oils, chia oil being the least stable oil among those studied. The inherent stability value and oxidazibility for linseed oil was lower than the chia oil A may be ascribed to a lower linolenic acid content of the former. The induction time （It） quotient at 110 ~C calculated for chia oil A and linseed oil were similar, suggesting a high degree of consistency between the results obtained by the two methods. The activation energy and specific reaction rate constant of chia and linseed oils were compared based on the results of isothermal and non-isothermal DSC. An apparent inconsistency in the experimental data results from the temperature-dependence of the activation energy of each fatty acid which can explain because the methods conditions were different.

关键词： chia oil tocopherol oxidation DSC.

chia在胃癌发生发展中的作用及分子机制研究

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CHIA在胃癌发生发展中的作用及分子机制研究

作者：胡春丽遵义医科大学

学位级别：硕士

目的:酸性哺乳动物几丁质酶(chia)是18个糖苷酶家族成员之一,在各种器官的上皮细胞中表达,可以降解含几丁质的病原体,并参与Th2细胞介导的炎症反应,增强机体对病原体入侵的先天性和适应性免疫力。在胃中,chia主要表达在胃黏膜的主细胞,... 详细信息

目的:酸性哺乳动物几丁质酶(chia)是18个糖苷酶家族成员之一,在各种器官的上皮细胞中表达,可以降解含几丁质的病原体,并参与Th2细胞介导的炎症反应,增强机体对病原体入侵的先天性和适应性免疫力。在胃中,chia主要表达在胃黏膜的主细胞,且先前的研究表明chia的下调与幽门螺杆菌引起的萎缩性胃炎有关,但是,chia在胃癌中的表达和功能尚不清楚。因此,本研究旨在研究chia在胃癌(GC)发病中的潜在作用。方法:1)通过IHC检测人胃癌旁组织和胃癌组织中chia的表达,并分析chia与胃癌患者临床病理学特征及预后的关系;2)使用人正常胃粘膜细胞GES-1和人胃癌细胞株(AGS;KATOIII;7901;MKN-45;BGC-823)来研究chia在正常胃粘膜细胞株及胃癌细胞中的表达;3)构建AGS细胞chia过表达稳转株和GES-1细胞chia沉默稳转株,分别运用RT-q PCR和Western Blot来验证过表达及沉默效率;4)细胞功能学实验检测chia过表达和沉默后分别对AGS和GES-1细胞生物学行为的影响;5)运用Western Blot检测AGS细胞过表达chia及GES-1细胞沉默chia后对Wnt/β-catenin信号通路的影响;6)建立chia缺陷型小鼠模型以研究chia在胃黏膜病变中的作用。结果:1)chia在正常胃中高表达,但在慢性萎缩性胃炎及各种类型的胃癌组织(包括胃高分化腺癌、胃中分化腺癌、胃低分化腺癌及胃印戒细胞癌)中均明显下调。此外,对人正常胃上皮(n=80),CAG(n=63)和胃癌(n=114)的IHC分析发现,chia表达逐渐下降,表明chia的下调是正常胃上皮进展为CAG和恶性病理过程的关键事件;2)与临床观察一致,chia表达在所有胃癌细胞株中相对于正常的胃上皮细胞GES-1均显着降低,且AGS细胞中表达最低。另外,上调的chia可以明显抑制AGS细胞的增殖,促进AGS细胞的凋亡;且下调的chia也可以明显促进GES-1细胞的增殖,抑制GES-1细胞的凋亡,但对迁移和侵袭的无明显影响。3)此外,上调的chia可以明显抑制胃癌细胞AGS中Wnt-1、β-catenin、Cyclin D1、c-Myc的表达,明显促进GSK-3β、AIF、Endo G的表达。同时,GES-1沉默chia细胞后,可发现下调的chia可以明显促进GES-1细胞中Wnt-1、β-catenin、Cyclin D1、c-Myc的表达,明显抑制GSK-3β、AIF、Caspase 3的表达;表明chia可能通过Wnt/β-catenin信号通路影响胃癌细胞的增殖及凋亡。4)在动物实验中,与野生型小鼠相比,chia缺陷型小鼠在7个月时表现出主细胞丧失,并伴有严重的胃黏膜炎症反应,且伴随Mist1、Lgr5和chia表达的下调,但在观察期内未发现肿瘤的形成,我们将继续监测组织学变化。结论:chia可能通过Wnt/β-catenin信号通路来调节胃癌的发生和发展。因此,chia可能是胃癌的新型治疗靶标。

关键词： chia 胃癌 Wnt/β-catenin 增殖凋亡

chia基因缺失导致解痉多肽表达型化生（SPEM）发生的分子机制研究

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CHIA基因缺失导致解痉多肽表达型化生（SPEM）发生的分子机制研究

作者：赵荧荧遵义医科大学

学位级别：硕士

目的:胃黏膜上皮细胞的异常分化出现的解痉多肽表达型化生(SPEM),是癌前病变研究中新的关注点。哺乳动物酸性几丁质酶(chia)在胃主细胞上高表达,具有上皮细胞分化及免疫调控,维持组织器官重塑和器官完整性的“非酶”重要功能,这为chia... 详细信息

目的:胃黏膜上皮细胞的异常分化出现的解痉多肽表达型化生(SPEM),是癌前病变研究中新的关注点。哺乳动物酸性几丁质酶(chia)在胃主细胞上高表达,具有上皮细胞分化及免疫调控,维持组织器官重塑和器官完整性的“非酶”重要功能,这为chia缺失导致SPEM发生奠定了理论基础。在胃中,主细胞不仅产生胃蛋白酶原,而且在胃黏膜中发挥“储备”干细胞的功能,调控胃黏膜细胞分化;主细胞自发性缺失后会直接诱导TFF2表达的粘液细胞产生—从而直接导致SPEM发生,成为SPEM触发因素及新的关注点。因此,探寻SPEM发生的细胞新起源及胃癌防治新靶点显得尤为重要,本研究重点关注主细胞初始缺失,探寻chia基因对胃黏膜细胞分化调控的具体分子机制。方法:1)构建chia基因敲除小鼠,通过琼脂糖凝胶电泳检测小鼠纯合子;2)通过HE染色了解chia小鼠胃黏膜上皮分化情况,免疫组织化学(IHC)及蛋白质印迹(WB)了解chia的表达情况。3)运用IHC技术检测chia基因敲除小鼠的黏膜细胞分化情况,包括主细胞分子特异性标记物(Mist1,PGC)、壁细胞分子标记物(H-K-ATPase)以及上皮细胞分子标记物(MUC5AC、Claudin18.2)等;胃上皮细胞干性分子标记物(Mist1、Lgr5、Lrig1),肿瘤细胞干性分子标志物有:(CD44、CD133),以及胃黏膜上皮分化情况包括SPEM标记物(TFF2、MUC6)、肠化(IM)标记物(CDX2、MUC2)。4)运用荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测STAT3上游炎症激活因子(IL-6、IL-11)以及STAT3下游信号通路(IL-17、IL-23、BCL-2、BCL-XL、MCL1、CCND1、VEGF)等分子表达情况。5)运用IHC及WB技术验证STAT3信号通路包括p-STAT3、BCL-2、C-MYC、CCND1等。6)通过qRT-PCR技术检测M2巨噬细胞分子标记物(Arg1、Klf4、Fizz1)。7)通过免疫荧光技术(IF)检测小鼠胃黏膜组织中M2巨噬细胞(F4/80、CD163)表达情况。结果:与野生型小鼠相比,在不同的月龄背景下,chia基因敲除(chia)小鼠胃黏膜表现出不同的分化表型,包括主细胞进行性减少,SPEM表型及轻度的异型增生等。chia小鼠胃黏膜上皮细胞呈现出不同的分化趋势:主细胞(Mist1,PGC)、黏膜上皮细胞标记物(MUC5AC、Claudin18.2)减少,增殖标记物(Ki67)增加,但是壁细胞的分化却不受影响。机制研究表明,chia缺失显著激活了经典的IL-6/STAT3信号通路,其下游激活M2巨噬细胞(Arg1、Klf4、Fizz1)免疫荧光共定位证实了M2巨噬细胞向胃黏膜的浸润增加。结论:主细胞中chia基因缺失通过激活IL-6/STAT3信号通路,促进M2巨噬细胞浸润诱导SPEM发生。

关键词： chia 主细胞 SPEM M2巨噬细胞

CpTI和chia基因的克隆，双价表达载体构建及其农杆菌介导的紫花苜蓿遗传转化的研究

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CpTI和ChiA基因的克隆，双价表达载体构建及其农杆菌介导的紫花苜...

作者：罗娟西北农林科技大学

学位级别：硕士

畜牧业是我国重要的经济产业,紫花苜蓿是畜牧业中重要的饲草,素称“牧草之王”。但近几年来病虫害问题越来越严重,已经成为制约紫花苜蓿生产的一个重要的因素。在我国北方地区,尤其以真菌性病害如褐斑病、霜霉病和锈病发生严重;虫害种... 详细信息

畜牧业是我国重要的经济产业,紫花苜蓿是畜牧业中重要的饲草,素称“牧草之王”。但近几年来病虫害问题越来越严重,已经成为制约紫花苜蓿生产的一个重要的因素。在我国北方地区,尤其以真菌性病害如褐斑病、霜霉病和锈病发生严重;虫害种类也比较多,其中主要是粘虫和蚜虫等。近年来作物育种学家们一直致力于提高苜蓿抗病虫害能力的研究,随着基因工程的兴起,为我们在环境友好的基础上防治病虫害提供了一种新的手段和方法。许多实验都已经证明:几丁质酶(Chitinas)主要具有降解真菌细胞壁的几丁质的作用,从而达到抑制真菌增长的功能,同时兼具杀虫功能;豇豆胰蛋白酶抑制剂(Cowpea trypsin inhibitor,CpTI)直接作用于昆虫消化系统造成昆虫非正常死亡,具广谱杀虫功能。本研究分别从苜蓿和豇豆克隆了这两个基因,构建成双价植物表达载体,并利用农杆菌介导法将之转入紫花苜蓿中,初步得到抗性愈伤。其结果如下: 1.提取豇豆叶片DNA,设计引物,经过PCR特异扩增得到324 bp大小的片断,克隆到pMD-18T载体上,并转化*** DH5α,得到重组子pMD-CpTI,酶切并测序鉴定,该片段分子大小为324 bp,将该基因登陆到GeneBank (***088405)并进行同源性鉴定,证明该基因为丝氨酸蛋白酶抑制剂基因家族中的一员。在此基础上,将CpTI基因用限制性内切酶BamHⅠ/SacⅠ切下后,克隆到pCUbi1303的UBI启动子和NOS终止子之间。经PCR和酶切鉴定,得到了该基因的真核表达载体pCUbi1303CpTI,为下一步的转基因做好了准备。 2.将CpTI基因克隆到***表达载体pGEX4T-1上,经酶切鉴定后,得到重组质粒pGEX4T-CpTI,在浓度0.08 mmol/L的IPTG的诱导下表达出37 KD的蛋白,证明该基因在原核表达系统中可以正常表达。 3.用水杨酸结合机械刺伤法诱导培育15 d左右的紫花苜蓿植株,根据设计的特异性引物,分别从苜蓿的基因组DNA及总RNA克隆得到大小为984 bp的片断。将之克隆到pMD-18T载体上,得到重组子pMD-chia,酶切并测序鉴定,该基因的DNA与cDNA的核酸序列完全一致。将该基因登陆到GeneBank (***294179)并进行同源性鉴定,核苷酸顺序与兰州报道的紫花苜蓿上的同源性可达到100%,并具有典型的N端信号肽序列、几丁质结合域、可变间隔区和催化区,证明是Ⅰ类几丁质酶基因。 4.将pMD-chia和pMD-CpTI分别NocⅠ和PmlⅠ双酶切,先后插入到植物表达载体pC35S1303上,经限制性酶切及PCR分子验证,表明构建的双价植物表达载体pC35S1303-chia-CpTI正确。随后,将双价植物表达载体pC35S1303-chia-CpTI转化根癌农杆菌LBA4404受体菌中,得到了用于植物遗传转化的工程菌株LBA4404。 5.用9%的NaClO处理紫花苜蓿种子,培育苜蓿无菌苗,以苜蓿的叶片和下胚轴为外植体进行农杆菌侵染,黑暗培养3 d后,转入到愈伤诱导培养基和筛选培养基。

关键词：紫花苜蓿 CpTI chia 双价植物表达载体遗传转化

chia基因在甲状腺癌发生发展中的作用及分子机制研究

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CHIA基因在甲状腺癌发生发展中的作用及分子机制研究

作者：穆仁敏遵义医科大学

学位级别：硕士

目的:甲状腺癌（Thyroid cancer,TC）发病率逐年上升,且发病具有年轻化趋势,但其具体发病机制仍不明确。酸性哺乳动物几丁质酶（chia）—18糖基化水解酶家族成员之一,在胃、肺及甲状腺等组织中表达,可降解含几丁质的病原体并参与寄生虫... 详细信息

目的:甲状腺癌（Thyroid cancer,TC）发病率逐年上升,且发病具有年轻化趋势,但其具体发病机制仍不明确。酸性哺乳动物几丁质酶（chia）—18糖基化水解酶家族成员之一,在胃、肺及甲状腺等组织中表达,可降解含几丁质的病原体并参与寄生虫宿主防御反应。在甲状腺中,有研究表明几丁质酶-3样蛋白1（CHI3L1）的上调可促进甲状腺癌的进展,此外,几丁质酶样蛋白在肿瘤中的作用成为近来医药领域的研究热点。但是,其家族同源物chia在甲状腺癌中的表达及功能尚不明确。因此,本研究重点探索chia在甲状腺癌组织及细胞中的表达,分析其与临床病理学特征的相关性,结合细胞功能学实验初步阐明chia在甲状腺癌发病过程中的分子作用机制,期望为甲状腺癌的诊治找到新的理论基础及科学依据。方法:1、运用免疫组化检测甲状腺癌和癌旁的组织中chia的表达量;通过WB技术检测chia在人正常甲状腺细胞Nthori-3-1和人甲状腺癌细胞（BCPAP;TPC-1;KTC-1;FTC133及8305C）中的表达;2、分析chia的表达量与患者的临床病理学信息（包括:性别、年龄、肿瘤大小、TNM分期及病理分期等）之间的相关性;3、分别构建chia慢病毒沉默及过表达的甲状腺癌细胞稳转株,并运用WB验证其转染效率;4、细胞功能学实验探索chia沉默或过表达后对甲状腺癌细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭的影响;5、WB检测chia沉默或过表达后对甲状腺癌细胞的EMT、增殖、调亡等相关蛋白的影响;6、探寻chia在甲状腺癌发生发展中的可能机制。结果:1、chia在甲状腺癌组织中相对于癌旁组织表达明显上调;2、在甲状腺癌细胞TPC-1中chia沉默后可诱导凋亡,并抑制甲状腺癌细胞的增殖及迁移;且在KTC-1中过表达chia进行了反向验证获得一致的结果;3、chia沉默后抑制甲状腺癌细胞中增殖标志物（C-myc、Cyclin D1）、EMT相关的间质蛋白标志物Vim、Snail的表达,而促进上皮相关蛋白标志物（如ZO-1、E-cadherin）的表达,而在KTC-1细胞中过表达chia后,C-myc、Cyclin D1及Vim、Snail上调,而ZO-1、E-cadherin下调;4、在TPC-1细胞中,chia下调后,JAK2、STAT3及P-STAT3表达下调;而KTC-1细胞中过表达chia后,STAT3及P-STAT3上调。结论:1.该研究表明chia基因在甲状腺癌中表达量明显增高,且与性别及肿瘤大小相关,在女性患者及肿瘤大小大于2cm的患者中,chia表达量较高。2.进一步机制研究分析表明chia可能通过JAK2/STAT3通路促进TPC-1细胞和KTC-1细胞的增殖、迁移,并抑制其凋亡,提示酸性哺乳动物几丁质酶chia可能为TC的诊疗提供新的方向和靶点。

关键词： chia 甲状腺癌上皮间质转化(EMT) 增殖凋亡迁移

Pbrchia:a key chitinase of pear in response to Botryosphaeria dothidea infection by interacting with PbrLYK1b2 and down-regulating ROS accumulation

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Horticulture Research 2023年第10期10卷 185-201页

作者： Qiming Chen Huizhen Dong Qionghou Li Xun Sun Xin Qiao Hao Yin Zhihua Xie Kaijie Qi Xiaosan Huang Shaoling Zhang State Key Laboratory of Crop Genetics and Germplasm Enhancement Centre of Pear Engineering Technology ResearchNanjing Agricultural UniversityNanjing 210095China

Pear ring rot,caused by the pathogenic fungi Botryosphaeria dothidea,seriously affects pear *** the infection-induced reactive oxygen species(ROS)burst of infected plants limits the proliferation of *** during the early infection stage,high ROS levels can also contribute to their growth during the later necrotrophic infection ***,it is important to understand how plants balance ROS levels and resistance to pathogenic *** during the later *** this study,we identified Pbrchia,a glycosyl hydrolases 18(GH18)chitinase-encoding gene with high infection-induced expression,through a comparative transcriptome *** substitution,stable overexpression,and virus induced gene silencing(VIGS)experiments demonstrated that Pbrchia can positively regulate pear resistance as a secreted chitinase to break down *** mycelium in vitro and that overexpression of Pbrchia suppressed infection-induced ROS *** analysis revealed that Pbrchia can bind to the ectodomain of PbrLYK1b2,and this interaction suppressed PbrLYK1b2-mediated chitin-induced ROS ***,we propose that the combination of higher antifungal activity from abundant Pbrchia and lower ROS levels during later necrotrophic infection stage confer resistance of pear against ***.

关键词： infection chia resistance

Clonal propagation of mastic tree(Pistacia lentiscus *** Duham.) in outdoor beds using different rootstock and grafting techniques

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Journal of Forestry Research 2018年第4期29卷 1052-1058页

作者： Salih Parlak Department of Forest Engineering Faculty of ForestryBursa Technical University

We assessed different rootstocks and grafting techniques to clonally propagate mastic tree （Pistacia lentiscus var. chia）. Mastic tree is a dioecious tree but the quantity and quality of the resin secreted by female trees are very low; therefore, male trees that are clonally propagated are used to establish commercial plantations for mastic production. Conventional long branch cuttings for clonal production requires too much materials and has a very low rooting rate. Rooting with tissue culture and green cuttings has also failed outdoors. Grafting of mastic on other Pistacia species has not been tried so far; therefore, this study was aimed at developing grafting methods for the clonal propagation of mastic. P. atlantica and P. lentiscus rootstocks were grafted from 15 February to 15 October every 15 days using three grafting methods and a two-factor randomized block trial design. Early spring （15 February-15 March） proved to be the best time for grafting using either of the rootstocks. The highest grafting success was attained using the scions grafted on P. atlantica from 15 February to 15 March. The best bud-burst percentage was obtained using P. atlantica and P. lentiscus rootstocks.

关键词： Pistacia lentiscus var chia Grafting Budding Rootstock