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长爪沙鼠NAFLD模型中CIP4基因的表达及与β-catenin蛋白相互作用的免疫共沉淀验证

浙江医学 2020年第10期42卷 995-999,I0003页

作者：吴鸿儒吴旧生王志远刘月环浙江绿城心血管病医院消化内科杭州310012 浙江大学动物科学学院浙江省医学科学院江大学医学院

目的获得长爪沙鼠非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)模型中cdc42作用蛋白4(CIP4)基因的表达规律及是否受β连环蛋白(β-catenin)调控的证据。方法3月龄雄性长爪沙鼠30只采用随机数字表法分为正常组6只和模型组24只,模型组按饲喂高脂饲料的时间... 详细信息

目的获得长爪沙鼠非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)模型中cdc42作用蛋白4(CIP4)基因的表达规律及是否受β连环蛋白(β-catenin)调控的证据。方法3月龄雄性长爪沙鼠30只采用随机数字表法分为正常组6只和模型组24只,模型组按饲喂高脂饲料的时间不同分为2周组、4周组、8周组、12周组,每组6只。按组采集肝脏大叶标本4份,HE染色及Masson染色检测肝脏的病理变化,荧光定量PCR(qPCR)法检测CIP4 mRNA相对表达量,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测CIP4蛋白相对表达量,免疫共沉淀(CoIP)验证CIP4与β-catenin的相互作用。结果肝病理学检测结果显示,随着造模时间的延长,模型组沙鼠均出现肝脏脂肪病变(单纯脂肪肝,2~4周造模,S0~S1),脂肪性肝炎(4~8周造模,脂堆积形成肝细胞的肿胀,坏死和空泡,少量纤维化出现,S1~S2),肝纤维化(8~12周造模,S2~S3),部分有假小叶形成。qPCR和Western blot结果显示,随着造模时间延长,CIP4 mRNA和蛋白相对表达量均下降。模型组被CoIP下来的CIP4蛋白明显下降,这表明模型组β-catenin与CIP4的相互作用减少。结论随着NAFLD病程的进展,长爪沙鼠模型CIP4呈现降低趋势,其作用受β-catenin的调控。

关键词：非酒精性脂肪性肝病模型长爪沙鼠 cdc42作用蛋白基因免疫共沉淀

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