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支气管哮喘急性发作患儿血中性粒细胞胞外诱捕网及cd40配体、单核细胞趋化蛋白1与第1秒用力呼气容积/用力肺活量、儿童呼吸困难评分的关系

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中国小儿急救医学 2024年第4期31卷 300-303页

作者：张丽然李玉华杨丽娟承德市妇幼保健院(承德市儿童医院)儿科 067000

目的探讨支气管哮喘(哮喘)急性发作患儿血浆游离DNA(cf-DNA)/中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)及血清cd40配体(cd40L)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)水平与第1秒用力呼气容积(FEV1)/用力肺活量(FVC)、儿童呼吸困难评分(PRAM)的相关性。方法选取2... 详细信息

目的探讨支气管哮喘(哮喘)急性发作患儿血浆游离DNA(cf-DNA)/中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)及血清cd40配体(cd40L)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)水平与第1秒用力呼气容积(FEV1)/用力肺活量(FVC)、儿童呼吸困难评分(PRAM)的相关性。方法选取2019年4月至2021年11月我院收治的85例哮喘急性发作期患儿为哮喘组,另选同期健康体检的50例正常儿童为健康组。检测两组儿童血清NETs、cd40L、MCP-1水平并做肺功能检查,采用PRAM评分将患儿病情严重程度分为轻、中、重度3组,比较3组血清cf-DNA/NETs、cd40L、MCP-1水平;采用Pearson相关性分析血清cf-DNA/NETs、cd40L、MCP-1与FEV1/FVC、PRAM评分的关系,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清cf-DNA/NETs、cd40L、MCP-1水平对哮喘的诊断效能。结果哮喘组cf-NDA/NETs、cd40L、MCP-1水平高于健康组(Pcd40L、MCP-1水平高于轻中度组(Pcd40L、MCP-1水平与FEV1/FVC呈负相关(Pcd40L、MCP-1的ROC曲线下面积分别为0.885、0.779、0.814,cf-DNA/NETs诊断哮喘的敏感度为88.2%、特异度为88.0%,cd40L的敏感度为84.7%、特异度为74.0%,MCP-1的敏感度为87.1%、特异度为74.0%。结论哮喘急性发作期血清cf-DNA/NETs、cd40L、MCP-1水平上升,与患儿肺功能及病情严重程度密切相关,可作为评估病情的特异性指标。

关键词：支气管哮喘急性发作期中性粒细胞胞外诱捕网水平 cd40配体单核细胞趋化蛋白1 肺功能儿童呼吸困难评分

cd40配体刺激人外周血来源B细胞的长期培养及增殖活化

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中华医学杂志 2009年第2期89卷 124-127页

作者：吴超刘勇赵琪陈广梅陈军浩严晓敏周乙华黄祖瑚南京医科大学鼓楼临床医学院感染科 210008 南京医科大学鼓楼临床医学院科研部 210008 南京医科大学第一附属医院感染科

目的建立外周血来源B细胞体外长期培养体系，观察培养过程中B细胞的增殖活化及抗原提呈功能。方法利用重组人可溶性CIM0配体（scd40L）刺激人外周血B细胞的长期培养过程中，流式细胞技术检测B细胞DNA周期及B细胞表面cd80、cd86、主要组... 详细信息

目的建立外周血来源B细胞体外长期培养体系，观察培养过程中B细胞的增殖活化及抗原提呈功能。方法利用重组人可溶性CIM0配体（scd40L）刺激人外周血B细胞的长期培养过程中，流式细胞技术检测B细胞DNA周期及B细胞表面cd80、cd86、主要组织相容复合物（MHC）Ⅰ类及Ⅱ分子的表达状况；观察B细胞增殖情况及B细胞活化后表面分子的表达。采用乙型肝炎病毒（HBV）核心抗原（HBcAg）-异硫氰酸荧光素（FITC）标记抗原多肽与B细胞共孵育，检测B细胞对抗原多肽的负载能力。结果人外周血B细胞在scd40L培养体系中可长期培养达50d，在此期间，B细胞绝对计数增加近10倍，外周血B细胞比例由8．21％增高到70．67％，活化的B细胞高表达cd80、cd86、MHC—Ⅰ、MHC—Ⅱ，并可负载HBV核心抗原肽。结论scd40L培养体系可在体外长期培养人外周血B细胞，并使B细胞增殖活化，具有抗原提呈细胞的特征。

关键词： B淋巴细胞 cd40配体抗原提呈细胞肝炎核心抗原,乙型

cd40配体对转cd40 cdNA的人肺癌细胞功能调节的研究

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中华肿瘤杂志 2004年第3期26卷 150-153页

作者：崔巍李龙芸中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院检验科 100730 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院呼吸科 100730

目的　研究cd4 0配体 (cd4 0L ,cd15 4 )对cd4 0阴性肺癌细胞系转染cd4 0cdNA后 (即cd4 0高表达细胞系 )的调节作用 ,评价cd4 0作为治疗靶抗原的潜能。方法　通过流式细胞术筛选cd4 0阴性细胞系 ,即GLC 82细胞。以 3D5细胞为模板 ,以pcd... 详细信息

目的　研究cd4 0配体 (cd4 0L ,cd15 4 )对cd4 0阴性肺癌细胞系转染cd4 0cdNA后 (即cd4 0高表达细胞系 )的调节作用 ,评价cd4 0作为治疗靶抗原的潜能。方法　通过流式细胞术筛选cd4 0阴性细胞系 ,即GLC 82细胞。以 3D5细胞为模板 ,以pcdNA3为载体 ,通过基因克隆技术制备cd4 0cdNA并转染到GLC 82细胞中 ,建立cd4 0高表达细胞系 ,即GLC 82 /cd4 0。在细胞培养液中加入 0 .1μg/mlcd4 0L ,通过流式细胞术和MTT试验检测cd4 0L对细胞表型、细胞生长、细胞周期及凋亡的影响。结果　Western蛋白印迹检测、限制性酶切电泳、DNA测序和流式细胞仪测定均证明了cd4 0cdNA转染成功 ,转染后细胞的cd4 0表达率高达 95 .9%。cd4 0L与cd4 0作用后 ,使GLC 82 /cd4 0细胞系上MHC I、ICAM 1和Fas分子的表达增强 ,EGFR表达减弱。细胞生长受到抑制 ,第 5天受抑最明显 ,受抑率为 30 % ,但无周期特异性变化。cd4 0L停用 4 8h后 ,各种指标的变化有所恢复。cd4 0L对原有高表达cd4 0的Calu 3肺癌细胞上述指标的影响较GLC 82 /cd4 0更明显 ,而对不表达cd4 0的GLC 82细胞无明显影响。所有肺癌细胞系均未出现细胞凋亡。结论　cd4 0L对转染cd4 0cdNA后cd4 0高表达肺癌细胞系具有免疫导向治疗的潜能。

关键词： cd40配体 cdNA 肺癌靶抗原流式细胞术细胞凋亡免疫导向治疗肿瘤转移

cd40配体-受体载体介导的CpG ODN靶向脐血B淋巴细胞的特异传递及其免疫效应(英文)

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中国组织工程研究与临床康复 2009年第5期13卷 974-978页

作者：曾慧兰蒋建伟郑梅珍古晨韩新爱曾耀英狄静芳严玉霞暨南大学附属第一医院广东省广州市510632 暨南大学医学院生化教研室广东省广州市510632 中山大学中山医学院临床医学系广东省广州市510632 暨南大学组织移植与免疫研究中心广东省广州市510632

背景:CpG寡核苷酸是一种高效低毒的免疫佐剂,在许多疾病的基因治疗中具有广阔的应用价值,但存在种属和细胞特异性,细胞摄取率低,易被酶降解,成为临床应用的障碍。目的:拟验证CpG寡核苷酸通过cd40配体-受体载体系统对脐血B淋巴细胞特异... 详细信息

背景:CpG寡核苷酸是一种高效低毒的免疫佐剂,在许多疾病的基因治疗中具有广阔的应用价值,但存在种属和细胞特异性,细胞摄取率低,易被酶降解,成为临床应用的障碍。目的:拟验证CpG寡核苷酸通过cd40配体-受体载体系统对脐血B淋巴细胞特异靶向传递及其免疫效应的增强作用。设计、时间及地点:观察对比实验,于2004-04/2007-10在广州暨南大学附属第一医院血液科、儿科完成。材料:取健康新生儿的肝素抗凝新鲜脐血,事先征得父母知情同意并获医院伦理委员会审核批准。方法:制备cd40配体-碳二亚胺-多聚左旋赖氨酸-CpG寡核苷酸交联复合物,与脐血单个核细胞共培养。分别于24,48,72,96h应用流式细胞仪检测单个核细胞对FAM标记CpG寡核苷酸的摄取率及平均摄入强度;培养96h后用直接免疫荧光标记法标记cd19,cd20,cd22单抗,以流式细胞仪检测阳性表达率;细胞悬液加入96孔板,3组分别加入cd40配体-碳二亚胺-多聚左旋赖氨酸-CpG寡核苷酸、单纯CpG寡核苷酸及ddH2O,培养92h,以四甲基偶氮唑盐比色法测细胞增殖能力;以酶联免疫吸附法测以上3组细胞培养上清IgG水平。主要观察指标:单个核细胞对CpG寡核苷酸的摄取率及平均摄入强度,淋巴细胞亚群的表达,细胞增殖能力,培养上清IgG水平。结果:与单纯CpG寡核苷酸未交联组相比,单个核细胞对交联复合物摄取率更高(>98%),达摄取峰值时间更早。共培养后cd19+,cd22+,cd20+细胞表达升高,细胞增殖量及上清IgG水平均高于对照组(Pcd40配体-受体载体系统有助于CpG寡核苷酸特异高效的B细胞靶向投递,并增强其免疫效应。

关键词： cd40配体 CPG寡核苷酸 B淋巴细胞靶向投递

cd40-cd40配体相互作用对培养的人单核细胞二酰基甘油-蛋白激酶C信号通路及胞内Ca2+的影响(英文)

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Acta Pharmacologica Sinica 2003年第7期24卷 65-69+104页

作者：严金川吴宗贵孔宪涛仲人前张玲珍上海 200003 中国东南大学附属中大医院心内科第二军医大学长征医院心内科第二军医大学长征医院心内科南京 210009

目的:探讨cd40-cd40配体(cd40L)相互作用是否能激活人外周血单核细胞(PBMC)内二酰基甘油(DAG)-蛋白激酶C(PKC)信号通路。方法:细胞内DAG含量采用放射酶标记、薄层层析和放射自显影方法检测,细胞PKC活性及胞内游离钙分别采用[Υ32P]ATP... 详细信息

目的:探讨cd40-cd40配体(cd40L)相互作用是否能激活人外周血单核细胞(PBMC)内二酰基甘油(DAG)-蛋白激酶C(PKC)信号通路。方法:细胞内DAG含量采用放射酶标记、薄层层析和放射自显影方法检测,细胞PKC活性及胞内游离钙分别采用[Υ32P]ATP磷酸转移法和Fluo-3荧光负载流式细胞术检测。结果:cd40L以剂量依赖方式刺激人外周血单核细胞合成DAG,并具有双时限性变化,第一峰值在20s,第二峰值在10min时出现,然后DAG水平缓慢下降,至少持续20-30min,单核细胞蛋白激酶C总活性受cd40L刺激后明显增加,峰值在12min,持续20min以上,并且这种作用主要是胞浆PKC活性向胞膜PKC活性转位所致,cd40L能刺激胞内游离Ca2+出现短暂的快速升高,继之为持续阶段,移去细胞外Ca2+,胞内快速阶段无影响,而持续阶段明显受到抑制,抗cd40抗体能显著抑制cd40L引起的胞内DAGPKC信号通路激活及[Ca2+]i的动态变化。结论:cd40-cd40L相互作用能激活人外周血单核细胞[Ca2+]i动态变化及二酰基甘油-蛋白激酶C信号通路。

关键词： cd40抗原 cd40配体蛋白激酶C 二酰基甘油单核细胞信号转导钙

可溶性cd40配体的表达及其对树突状细胞和恶性B细胞的影响(英文)

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2000年第6期32卷 562-568页

作者：时宏珍黄伟达王月丹鲁严江阳张学光复旦大学生命科学院生物化学和分子生物学实验室!上海200433 苏州医学院免疫教研室!苏州215007

cd4 0配体 (cd4 0L)是TNF超家族成员 ,表达于人活化的cd4 + T细胞表面 ,与存在于B细胞、抗原递呈细胞表面的相应受体cd4 0分子相互作用 ,促发并调节机体的体液免疫和细胞免疫应答。用PCR法从cd4 0L全长cdNA质粒中扩增cd4 0L胞外段编码cd... 详细信息

cd4 0配体 (cd4 0L)是TNF超家族成员 ,表达于人活化的cd4 + T细胞表面 ,与存在于B细胞、抗原递呈细胞表面的相应受体cd4 0分子相互作用 ,促发并调节机体的体液免疫和细胞免疫应答。用PCR法从cd4 0L全长cdNA质粒中扩增cd4 0L胞外段编码cdNA ,即可溶性cd4 0L(scd4 0L)编码cdNA ,并克隆入 pSK质粒 ;cdNA序列经测序证实后与 pPICZαA质粒重组构建成 pPICZαA scd4 0L分泌型表达载体并在GS1 1 5毕氏酵母菌株中成功地表达出人可溶性cd4 0配体(rhscd4 0L) ,最高表达量为 35mg/L(培养上清 )。结果显示 :在无TNFα存在时 ,重组人可溶性cd4 0L(rhscd4 0L)可有效地诱导人外周单核细胞向树突状细胞 (DC)的分化 ,具有典型的DC形态特征和特殊表面标志 (cd1a、cd80、cd83等 ) ,为DC在体外的大量扩增提供新手段 ;进一步研究发现 ,rhscd4 0L能直接并显著地抑制恶性淋巴瘤细胞株Daudi和多发性骨髓瘤细胞株XG 2的体外增殖 ;并证实rhscd4 0L与cd4 0L基因转染细胞 (L/cd4 0L TC)一样 ,在体外均诱导XG2细胞的凋亡 ;rhscd4 0L有希望成为一种重要的免疫调节剂和新的抗肿瘤药物

关键词： cd40配体毕氏酵母树突状细胞恶性B细胞

cd40配体通过诱导型环氧合酶途径诱导单核巨噬细胞分泌基质金属蛋白酶

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第二军医大学学报 2006年第8期27卷 845-847页

作者：樊民李岚吴宗贵黄佐任雨笙潘晓明第二军医大学长征医院心内科上海200003 中国人民解放军第411医院内4科上海200081

目的:观察重组人cd40配体(rhcd40L)对U937细胞分泌基质金属蛋白酶(MMPs)的影响,探讨其可能的作用机制。方法:不同浓度(0.1、0.2、0.4μg/ml)的rhcd40L和不同浓度(10-5、10-4、10-3mol/L)的NS-398(COX-2特异性抑制剂)分别刺激体外培养的U... 详细信息

目的:观察重组人cd40配体(rhcd40L)对U937细胞分泌基质金属蛋白酶(MMPs)的影响,探讨其可能的作用机制。方法:不同浓度(0.1、0.2、0.4μg/ml)的rhcd40L和不同浓度(10-5、10-4、10-3mol/L)的NS-398(COX-2特异性抑制剂)分别刺激体外培养的U937细胞24 h后收集上清液;在加入终浓度为0.4μg/ml rhcd40L的基础上,分别加入终浓度为10-4mol/L的阿司匹林(COX-1抑制剂)或NS-398,共同刺激U937细胞24 h后收集上清液。酶谱法测定上述U937细胞培养上清中MMPs活性。结果:rhcd40L可使MMP-2和MMP-9活性增加(Pcd40L作用最强;NS-398可抑制MMP-2和MMP-9的活性,且抑制作用随剂量的增加而增强(Pcd40L诱导U937细胞分泌MMP-2和MMP-9(Pcd40L以浓度依赖的方式诱导单核巨噬细胞分泌MMPs,这种诱导作用可能与诱导型环氧合酶(COX)有关,而且与COX-2的相关性可能较COX-1更密切。

关键词： cd40配体诱导型环氧合酶基质金属蛋白酶巨噬细胞

急性进展性脑梗死患者外周血可溶性cd40配体及PBMC胞核NF-κB的表达

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细胞与分子免疫学杂志 2011年第2期27卷 177-179页

作者：毛德军郭瑞友唐咏春臧运华青岛大学医学院附属海慈医疗集团神经内科山东青岛266033

目的:研究急性进展性脑梗死(APCI)患者外周血清可溶性cd40配体(scd40L)水平及外周血单个核细胞(PB-MC)胞核核因子κB(NF-κB)p65表达率的变化。方法:采用前瞻性研究方法选择起病7d以内的99例APCI患者作为APCI组,选择同期急性脑梗死(ACI... 详细信息

目的:研究急性进展性脑梗死(APCI)患者外周血清可溶性cd40配体(scd40L)水平及外周血单个核细胞(PB-MC)胞核核因子κB(NF-κB)p65表达率的变化。方法:采用前瞻性研究方法选择起病7d以内的99例APCI患者作为APCI组,选择同期急性脑梗死(ACI)患者及门诊查体的脑动脉硬化(CAS)患者各100例分别作为ACI组和CAS组;CAS组于查体时,APCI组及ACI组于入院时、病程第7天、第14天、第30天分别监测患者外周血清scd40L及PBMC胞核NF-κBp65表达率的变化。结果:ACI组入院时外周血清scd40L及PBMC胞核NF-κBp65表达率均明显高于CAS组(Pcd40L及PBMC胞核NF-κBp65表达率均明显高于ACI组(Pcd40-cd40L信号通路及PB-MC胞核NF-κB表达的过度上调而介导的炎症、凋亡机制可能是APCI发生与发展的分子生物学机制之一。

关键词：脑梗死 cd40配体核因子κB

急性冠脉综合征患者血清白介素-6、基质金属蛋白酶2、cd40配体的水平变化及临床意义

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中国当代医药 2023年第4期30卷 78-81页

作者：吴炜鹏厦门市第三医院心血管内科福建厦门361100

目的探究急性冠脉综合征患者血清白介素-6、基质金属蛋白酶2、cd40配体的水平变化及临床意义。方法选取2020年1月至10月厦门市第三医院心血管内科收治的50例急性ST段抬高型心肌梗死患者作为STEMI组,50例非ST段抬高型急性冠脉综合征患者... 详细信息

目的探究急性冠脉综合征患者血清白介素-6、基质金属蛋白酶2、cd40配体的水平变化及临床意义。方法选取2020年1月至10月厦门市第三医院心血管内科收治的50例急性ST段抬高型心肌梗死患者作为STEMI组,50例非ST段抬高型急性冠脉综合征患者作为NST-ACS组,另同期选择50名健康体检者作为对照组。比较三组的血清白介素-6、基质金属蛋白酶2、cd40配体水平。结果STEMI组血清白介素-6、基质金属蛋白酶2、cd40配体的水平均高于NST-ACS组、对照组,差异有统计学意义(Pcd40配体的水平变化进行检测,能够对患者病变程度进行评价,利于后续治疗的开展,值得研究和推广。

关键词：急性冠脉综合征血清白介素-6 基质金属蛋白酶2 cd40配体