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The immunophenotypic changes and clinical effectiveness after treatment of cancer patients with infusion of human peripheral blood lymphocytes stimulated by anti-cd28 and anti-cd80 monoclonal antibodies in combination with radiotherapy and chemotherapy

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Journal of Microbiology and Immunology 2005年第2期3卷 142-147页

作者： JUN JIA LI QIONG LUO XUE LING RUAN QI FENG CHENG LIAN HUA XIONG TONG WANG SHU LIN HUANG Dongguan Municipal People＇s Hospital Dongguan P. R. China Guangclong Pharmaceutical university Guangzhou P. R. China

To investigate the changes on the immunophenotypes and the clinical effects of treatment of the late cancer patients with infusion of human peripheral blood lymphocytes stimulated by anti-cd28 and anti-cd80 monoclonal antibodies in combination with radiotherapy and chemotherapy, 42 patients with late cancers were collected for study, among which 22 patients were treated with infusion of stimulated lymphocytes in combination with radiotherapy and chemotherapy. The immunological treatment procedure was given twice per week, and one course of treatment consisted of 8 times of giving infusion of lymphocytes. Another 20 patients were selected for control group, in which only radiotherapy and chemotherapy were given without lymphocyte infusions. Flow cytometry was used to examine the immunophenotypes and the clinical symptoms were observed before and after treatments. It was found that the numbers of the cd3^+, cd4^+ cells increased, while those of the cd8^+ cells decreased, with an increase of cd4/cd8 radios, but no significant difference existed in case of 22 patients treated with lymphocyte infusion as well as with radiotherapy and chemotherapy. Fifteen patients out of these 22 cases (68.18%), the immunophenotypes changed obviously with increased numbers of cd3^+, cd4^+ cells in comparison with those before treatment, and the number of cd95^+ cells was increased after treatment. The PS value in this group of patients decreased after treatment. In comparison with 20 cases in the control group, the immunophenotypes showed no differences before and after treatment. While the PS value decreased obviously. Seven out of the 22 cases (31.83%) treated with lymphocyte infusions as well as with radiotherapy and chemotherapy illustrated no major changes in their immunophenotypes, compared with the situation before treatment, but the PS value also decreased. In case of treatment with lymphocyte infusions in combination with radiotherapy and chemotherapy, the alteration of phenotypes was reversely correlated with the changes of

关键词：免疫反应肿瘤血液净化淋巴细胞 cd28 cd80 单克隆抗体放射治疗

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急性髓细胞性白血病患者外周血单个核细胞cd28 mRNA的表达

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中国组织工程研究与临床康复 2011年第10期15卷 1841-1844页

作者：王亚南史进方顾国浩苏州大学附属第一医院检验科江苏省临床免疫学实验室江苏省苏州市215006 苏州市立医院本部南京医科大学附属医院江苏省苏州市215002

背景:大量研究显示,肿瘤患者外周血T细胞表面共刺激分子cd28蛋白表达存在差异,提示共刺激通路异常可能与恶性肿瘤的发生进展有关。目的:观察急性髓细胞性白血病外周血单个核细胞共刺激信号分子cd28 mRNA在中的表达。方法:急性髓细胞性... 详细信息

背景:大量研究显示,肿瘤患者外周血T细胞表面共刺激分子cd28蛋白表达存在差异,提示共刺激通路异常可能与恶性肿瘤的发生进展有关。目的:观察急性髓细胞性白血病外周血单个核细胞共刺激信号分子cd28 mRNA在中的表达。方法:急性髓细胞性白血病患者80例,其中M0型7例,M1型6例,M2型18例,M3型15例,M4型17例,M5型9例,M6型8例。并根据急性白血病疗效标准将80例患者分为完全治愈组、缓解组、未缓解组。采用Taqman探针实时荧光定量PCR检测80例患者及76名健康人群外周血单个核细胞cd28 mRNA的表达。结果与结论:急性髓细胞性白血病外周血单个核细胞M1,M3和M4亚型中的cd28 mRNA表达量低于健康人群(Pcd28 mRNA低于健康人群(Pcd28 mRNA表达与健康人群差异无显著性意义。说明急性髓细胞白血病患者外周血单个核细胞存在cd28 mRNA表达缺陷,并与临床分期、病情进展及预后有关。

关键词：急性髓细胞性白血病 cd28 共刺激分子 Taqman探针实时荧光定量PCR

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cd28/B7在银屑病皮损及外周血淋巴细胞中的表达

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中华皮肤科杂志 2004年第10期37卷 589-591页

作者：黄长征陈爱军涂亚庭刘志香华中科技大学同济医学院附属协和医院皮肤科武汉430022 重庆医科大学第一医院皮肤科

目的探讨cd28/B7共同刺激分子在银屑病发病中的作用。方法采用免疫组化ABC法检测22例银屑病皮损、流式细胞仪检测17例银屑病外周血淋巴细胞cd28、cd80、cd86的表达水平。15例整形外科手术患者的皮肤和外周血作为正常人对照。结果免疫组... 详细信息

目的探讨cd28/B7共同刺激分子在银屑病发病中的作用。方法采用免疫组化ABC法检测22例银屑病皮损、流式细胞仪检测17例银屑病外周血淋巴细胞cd28、cd80、cd86的表达水平。15例整形外科手术患者的皮肤和外周血作为正常人对照。结果免疫组化结果显示银屑病组皮损中cd28、cd80、cd86的表达明显增多,与正常人对照组相比差异均有显著性(Pcd28、cd80、cd86在银屑病组外周血淋巴细胞中的表达明显高于对照组,差异有显著性(Pcd28差异无显著性(P>0.05),cd80与cd86差异有显著性(P1cd28、cd80、cd86在银屑病发展过程中起一定作用。

关键词： cd28 cd86 cd80 银屑病皮损外周血淋巴细胞表达对照组显著性

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儿童急性B淋巴细胞白血病cd4＋cd25highFoxp3＋调节性T细胞亚群改变及意义

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中华微生物学和免疫学杂志 2014年第3期34卷 194-199页

作者：王缨王国兵文飞球肖海荣李长钢麦惠容刘四喜袁秀丽马东礼深圳市儿童医院血液肿瘤科 518026 深圳市儿童医院儿科研究所

目的：探讨急性B淋巴细胞白血病（B-ALL）患儿cd4＋cd25highFoxp3＋调节性T细胞（ Treg）亚群改变及其在B-ALL免疫逃逸机制中的作用。方法急性期B-ALL患儿42例，正常同年龄对照组28例，分别于化疗前直接取血备检。采用流式细胞检测外周... 详细信息

目的：探讨急性B淋巴细胞白血病（B-ALL）患儿cd4＋cd25highFoxp3＋调节性T细胞（ Treg）亚群改变及其在B-ALL免疫逃逸机制中的作用。方法急性期B-ALL患儿42例，正常同年龄对照组28例，分别于化疗前直接取血备检。采用流式细胞检测外周血cd4＋cd25 high Foxp3＋、cd4＋cd25high ICOS＋Foxp3＋、cd4＋cd25high ICOS-Foxp3＋细胞比例及IL-10、TGF-β、IL-35、TGF-βRII、ICOS、cd28蛋白表达水平；荧光定量PCR （ real-time PCR）检测cd4＋T细胞Smad3/4、TIEG1、Itch等mRNA表达；ELISA检测血浆中TGF-β浓度。结果（1）急性B-ALL患儿cd4＋cd25high Foxp3＋Treg细胞比例显著升高（P＜0．05），其中ICOS＋Foxp3＋和ICOS-Foxp3＋细胞比例均明显高于对照组（P＜0．05）， ICOS＋Foxp3＋/ICOS -Foxp3＋比值低于对照组（0．73±0．21 vs 1．87±0．59，P＜0．05）；（2）急性期B-ALL患儿ICOS＋Foxp3＋细胞转录因子Foxp3及抑制性细胞因子IL-10、IL-35和TGF-β表达水平显著上调（P＜0．05），ICOS-Foxp3＋细胞Foxp3表达略有增加，但差异无统计学意义（P＞0．05），其mTGF-β表达明显高于对照组（ P＜0．05）；（3）急性B-ALL患儿血浆TGF-β浓度明显高于对照组[（25.83±12．65） ng/ml vs （8．59±5．73） ng/ml， P＜0．05]，cd4＋T细胞表面TGF-βRII及下游信号分子Smad3/4、TIEG1、Itch表达水平显著上调（P＜0．05），cd4＋cd25highFoxp3＋Treg细胞表面ICOS、cd28表达亦明显增高（P＜0．05）。结论 TGF-β、ICOS、cd28信号过度活化可能是导致急性B-ALL患儿cd4＋cd25highFoxp3＋Treg细胞异常及其亚群比例失调的重要因素。

关键词：急性B淋巴细胞白血病调节性T细胞 Foxp3 ICOS cd28

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cd28在多发性硬化患者cd8^+淋巴细胞的表达

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免疫学杂志 2002年第B6期18卷 35-38页

作者：夏斌赵忠新张玲珍黄坚庄建华邵福源第二军医大学长征医院神经科上海200003 第二军医大学长征医院实验诊断科上海200003

目的　探讨cd2 8在多发性硬化 (MS)患者cd8+ 淋巴细胞的表达水平。方法　流式细胞仪测定 16例复发期MS患者和 2 0例对照组外周血淋巴细胞cd2 8+ 、cd8+ cd2 8- 和cd8+ cd2 8+ 的百分率。结果　复发期MS患者淋巴细胞cd8+cd2 8- 百分率低... 详细信息

目的　探讨cd2 8在多发性硬化 (MS)患者cd8+ 淋巴细胞的表达水平。方法　流式细胞仪测定 16例复发期MS患者和 2 0例对照组外周血淋巴细胞cd2 8+ 、cd8+ cd2 8- 和cd8+ cd2 8+ 的百分率。结果　复发期MS患者淋巴细胞cd8+cd2 8- 百分率低于对照组 ,cd2 8+ 和cd8+ cd2 8+ 的百分率与对照组无明显差异 ;甲基强的松龙治疗对cd2 8+ 、cd8+ cd2 8- 和cd8+ cd2 8+ 的百分率无影响。结论　参与MS的发病的cd8细胞是cd8+ cd2 8-

关键词： cd28 多发性硬化 cd8^+淋巴细胞抗原

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抗人cd28鼠-人嵌合抗体的构建及瞬时表达

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复旦学报（医学版） 2007年第4期34卷 482-485页

作者：程钢陈永井马震宇费敏孙中文徐耀瑜胡玲玲邱玉华苏州大学医学生物技术研究所苏州215007 苏州大学生化工程研究所苏州215007

目的构建及瞬时表达抗人cd28鼠-人嵌合抗体。方法采用基因工程技术,从分泌鼠抗人cd28单克隆抗体的杂交瘤细胞株(克隆号:2F5)中克隆出抗体重链和轻链可变区基因及相应信号肽编码序列。分别与人免疫球蛋白IgG1恒定区重、轻链基因拼接,构... 详细信息

目的构建及瞬时表达抗人cd28鼠-人嵌合抗体。方法采用基因工程技术,从分泌鼠抗人cd28单克隆抗体的杂交瘤细胞株(克隆号:2F5)中克隆出抗体重链和轻链可变区基因及相应信号肽编码序列。分别与人免疫球蛋白IgG1恒定区重、轻链基因拼接,构建含有重组基因的pIRES表达质粒pIRES/h2F5。转染293T细胞并用抗性药物G418选择培养。采用流式细胞术,检测瞬时转染细胞后嵌合抗体的表达情况。结果抗人cd28鼠人嵌合抗体得到表达并能与cd28分子特异性结合。结论抗人cd28鼠-人嵌合抗体的构建和瞬时表达是成功的,为后续构建稳定分泌抗人cd28鼠-人嵌合抗体的CHO基因转染细胞株奠定了基础。

关键词： cd28 单克隆抗体嵌合抗体瞬时表达

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cd28-T细胞亚群在类风湿关节炎患者外周血和关节液中的表达

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中华风湿病学杂志 2011年第9期15卷 611-614页

作者：孔瑞娜童强蔡青徐霞张兰玲韩星海赵东宝第二军医大学附属长海医院风湿免疫科上海200433

目的探讨cd28-T细胞亚群在类风湿关节炎（RA）患者外周血和关节液中的变化和意义。方法随机选择RA患者45例，取新鲜抗凝外周血单个核细胞（PBMC），其中15例同时提取关节液单个核细胞（SFMC），以流式细胞技术检测cd28-T细胞数量及其表... 详细信息

目的探讨cd28-T细胞亚群在类风湿关节炎（RA）患者外周血和关节液中的变化和意义。方法随机选择RA患者45例，取新鲜抗凝外周血单个核细胞（PBMC），其中15例同时提取关节液单个核细胞（SFMC），以流式细胞技术检测cd28-T细胞数量及其表面可诱导共刺激分子（ICOS）的表达。2组间比较用独立样本t检验。结果①与PBMC相比，RA患者SFMC中cd4＋cd28＋ICOS＋、cd4＋cd28-ICOS＋、cd8＋cd28＋、cd8＋cd28＋ICOS＋T细胞明显升高[（36＋19）％与（15＋8）％，t=-4．234，P〈0．01；（2．1±2．2）％与（0．6±1．4）％，t=-3．143，P〈0．01；（62±15）％与（47＋18）％，t=-2．885，P〈0．01；（9±9）％与（3±3）％，t=-2．131，P〈0．05]；cd8＋cd28-T细胞明显降低[（38_＋15）％与（54_＋18）％，t=2．975，P〈0．01]；cd8＋cd28-ICOS＋、cd4＋cd28＋和cd4＋cd28-T细胞无明显变化（P〉0．05）。②同一RA患者SFMC与PBMC相比，cd4＋cd28＋ICOS＋、cd8＊cd28＋T细胞明显升高[（38±18）％与（16＋10）％，t=-4．065，P〈0．01；（61＋16）％与（41±21）％，t=-2．883，P〈0．01]；cd8＋cd28-T细胞明显降低[（39±16）％与（59±21）％，t=2．949，P〈O．0130③缓解期与活动期RA患者相比，PBMC中cd4＋cd28-,cd8＋cd28-、cd28-ICOS＋T细胞无明显变化（P〉0．05）。结论RA患者关节液中cd28-T细胞亚群失衡和ICOS分子表达异常，可能是导致RA关节损伤的重要机制。

关键词：关节炎类风湿流式细胞术抗原 cd28

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葡萄球菌肠毒素A诱导小鼠体内T细胞无能过程中cd28/CTLA-4的变化

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解放军医学杂志 2008年第7期33卷 844-846页

作者：黄杨尹文张秀敏司少艳葛伟胡沛臻李侠隋延仿第四军医大学西京医院病理科西安710033 第四军医大学西京医院急诊科西安710033

目的在葡萄球菌肠毒素A(SEA)诱导小鼠体内T细胞无能的过程中,观察cd28和CTLA-4的变化规律及相互关系。方法单次(1×SEA组,n=4)或多次(2×SEA组,n=4;3×SEA组,n=4)向小鼠腹腔注射SEA,每次注射间隔3d,分别于末次注射后的第1、3、7、14天,... 详细信息

目的在葡萄球菌肠毒素A(SEA)诱导小鼠体内T细胞无能的过程中,观察cd28和CTLA-4的变化规律及相互关系。方法单次(1×SEA组,n=4)或多次(2×SEA组,n=4;3×SEA组,n=4)向小鼠腹腔注射SEA,每次注射间隔3d,分别于末次注射后的第1、3、7、14天,将小鼠处死,制备小鼠脾淋巴细胞。通过流式细胞仪检测细胞膜表达cd28和CTLA-4、细胞内表达CTLA-4和IL-2的阳性率。结果1×SEA组,细胞膜cd28和细胞内IL-2的表达显著上升;而CTLA-4在细胞内和细胞膜表面的表达均降低且无明显变化;2×SEA组cd28和IL-2的表达稍有上升;CTLA-4在细胞内和细胞膜表面的表达均明显增加,胞内CTLA-4的增加尤为显著。3×SEA组,细胞膜cd28、细胞膜和细胞内CTLA-4的表达呈下降趋势,细胞内IL-2在第7天已经检测不到。结论SEA初次诱导小鼠脾淋巴细胞时,能显著促进T细胞的活化;经SEA多次(3次)刺激可诱导T细胞的无反应性。在无能的形成过程中,IL-2产生减少与cd28表达下调可能有着密切联系;CTLA-4的表达上调有利于无能的诱导,但可能不参与无能的维持。

关键词：超抗原葡萄球菌肠毒素A(SEA) cd28 CTLA-4 无能

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cd28超抗体对大鼠闭塞性气管病的治疗作用

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中国免疫学杂志 2009年第11期25卷 1038-1040,1044页

作者：牛永胜范慧敏曹浩刘刚史乾刘中民同济大学附属东方医院心胸外科研究室上海200120

目的:研究cd28超抗体对在体扩增调节性T细胞的效果及对大鼠闭塞性气管病的影响。方法:采用大鼠同种异体异位气管移植模型。治疗组受体移植当天经腹腔注射cd28特异性单克隆超抗体JJ316(0.5 mg);对照组注射同型抗体mIgG(0.5 mg)。于术后第... 详细信息

目的:研究cd28超抗体对在体扩增调节性T细胞的效果及对大鼠闭塞性气管病的影响。方法:采用大鼠同种异体异位气管移植模型。治疗组受体移植当天经腹腔注射cd28特异性单克隆超抗体JJ316(0.5 mg);对照组注射同型抗体mIgG(0.5 mg)。于术后第7天采用流式细胞仪检测颈部淋巴结单个核细胞中cd4+cd25+T细胞和cd4+Foxp3+T细胞的比率;第21天取出移植气管进行病理形态学检查。结果:术后第7天cd28超抗体治疗组大鼠的颈部淋巴结中cd4+cd25+T细胞及cd4+Foxp3+T细胞的比率(8.5%±3.4%,11.5%±2.7%)均显著高于mIgG对照组(1.8%±1.9%,3.2%±2.1%)(Pcd28超抗体治疗组较mIgG对照组气管闭塞及上皮损伤程度明显减轻。结论:cd28超抗体可靶向扩增调节性T细胞,减轻了大鼠闭塞性气管病的管腔闭塞。

关键词：气管移植调节性T细胞闭塞性气管病 cd28

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cd28-T细胞亚群在多发性硬化患者外周血中的变化及临床意义

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中国神经免疫学和神经病学杂志 2019年第6期26卷 391-396页

作者：蒋觉安刘翠平薛群方琪俞立强张陆陆蒋建华苏州大学附属第一医院全科医学科 215031 苏州大学附属第一医院江苏省临床免疫研究所 215007 苏州大学附属第一医院神经内科 215031

目的检测多发性硬化(MS)患者外周血中cd4+cd28-和cd8+cd28-T细胞亚群的变化并揭示其临床意义。方法收集37例MS患者(MS组,复发期23例、缓解期14例)和33例健康对照(对照组)外周血标本(复发期患者进行甲泼尼龙治疗),采用流式细胞仪检测患者... 详细信息

目的检测多发性硬化(MS)患者外周血中cd4+cd28-和cd8+cd28-T细胞亚群的变化并揭示其临床意义。方法收集37例MS患者(MS组,复发期23例、缓解期14例)和33例健康对照(对照组)外周血标本(复发期患者进行甲泼尼龙治疗),采用流式细胞仪检测患者cd28-T细胞数量及其表面cd25、cd45RA和cd45RO的表达,以扩展残疾状况评分量表(Expanded Disability Status Scale,EDSS)评分评价神经功能缺损情况。比较分析MS患者外周血cd28-T细胞亚群,cd28-T细胞亚群表面cd25、cd45RA和cd45RO的表达情况,以及MS患者不同疾病分期及糖皮质激素治疗前后cd28-T细胞亚群变化情况,并分析cd28-T细胞亚群变化与MS患者神经功能缺损及年龄的相关性。结果与对照组比较,MS组cd4+cd28-T细胞数量升高(P=0.000)而cd8+cd28-T细胞数量降低(P=0.001)。MS组中,与cd4+cd28-T细胞比较,cd4+cd28-T细胞cd45RO表达升高,cd25和cd45RA表达下降(均P=0.000);与cd8+cd28+T细胞比较,cd4+cd28-T细胞cd45RO表达降低(P=0.000)。与MS缓解期患者及对照组比较,MS复发期患者cd4+cd28-T细胞数量均明显升高、cd8+cd28-T细胞数量均明显降低(均Pcd8+cd28-T细胞数量(P=0.028),而对cd4+cd28-T细胞无影响(P=0.128)。患者EDSS评分与cd4+cd28-T细胞数量呈正相关(r=0.621,P=0.000),与cd8+cd28-T细胞数量呈负相关(r=-0.364,P=0.027)。患者年龄与cd4+cd28-T细胞数量呈正相关(r=0.386,P=0.018),与cd8+cd28-T细胞数量不相关(r=0.120,P=0.479)。结论MS患者外周血中异常变化的cd28-T细胞亚群具有不同的免疫表型,与疾病的复发、治疗和神经功能缺损有关,提示该T细胞亚群失衡可能在MS的免疫病理进程中有一定的作用。

关键词：多发性硬化 cd28 记忆性T细胞调节性T细胞

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