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骨髓增生异常综合征患者骨髓cd25+造血干细胞数量的研究

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骨髓增生异常综合征患者骨髓CD25+造血干细胞数量的研究

作者：车梦婷天津医科大学

学位级别：硕士

目的:骨髓增生异常综合征(Myelodysplastic Syndromes,MDS)是成人常见的获得性骨髓衰竭性疾病。本文对MDS骨髓cd25+造血干细胞数量进行研究,并分析其与MDS疾病进展程度和预后之间的相关性,探索MDS恶性克隆表面标记和MDS单克隆治疗潜在... 详细信息

目的:骨髓增生异常综合征(Myelodysplastic Syndromes,MDS)是成人常见的获得性骨髓衰竭性疾病。本文对MDS骨髓cd25+造血干细胞数量进行研究,并分析其与MDS疾病进展程度和预后之间的相关性,探索MDS恶性克隆表面标记和MDS单克隆治疗潜在靶点。背景:MDS是起源于骨髓造血干细胞(Hematpoietic stem cells,HSC)的恶性克隆性血液肿瘤,以骨髓髓系细胞发育异常、无效克隆性造血、病态造血导致的外周血一系或多系不同程度难治性血细胞减少为特点,1/3 MDS患者疾病进展为急性髓系白血病。近年来,有文献报道cd25分子在白血病干细胞(leukemic stem cell,LSC)表面表达率高达24.6%,而在正常HSC表面几乎不表达。将cd25+LSC细胞群接种于NOD-SCID-IL2rgnulli小鼠骨内膜区域,可以成功造出白血病小鼠模型,且该群细胞在小鼠体内仍停留在细胞周期静止期(G0期),可逃避传统细胞周期性化疗药物的诱导凋亡作用,符合LSCs特性。本研究使用流式细胞术(Flow cytometry,FCM)检测MDS患者造血干细胞表面cd25分子的表达率,并与MDS临床指标之间进行相关性分析。方法:采集18例初治MDS患者的新鲜骨髓,同时随机选取9例初治急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者作为阳性对照、10名正常志愿者作为正常对照,采用FCM检测cd25和cd123分子在骨髓造血干细胞表面的表达情况,分析MDS患者骨髓cd25+造血干细胞数量与cd123+造血干细胞数量之间的相关性。同时分析cd25在MDS造血干细胞表面的表达率与MDS疾病进展程度和预后之间的相关性,包括cd25表达率与IPSS评分之间的相关性、cd25表达率与外周血血常规及外周血细胞减少系数之间的相关性、cd25表达率与骨髓原始细胞比例之间的相关性及不同亚型MDS患者cd25的表达率。结果:1.MDS组cd25+cd34+cd38-/cd34+cd38-百分比显著高于正常对照组(28.81%±24.32%vs9.41%±9.51%,P=0.02025.42%,P=0.410>0.05)。2.MDS组cd123+cd34+cd38-/cd34+cd38-百分比显著高于正常对照组(47.12%±27.78%vs8.40%±7.18%,P0.05)。3.骨髓造血干细胞表面cd25和cd123表达率呈显著正相关(r=0.602,P=0.008>0.05)。4.分析cd25在造血干细胞表面的表达率与MDS临床指标和预后间的相关性:1)cd25表达率与IPSS评分的相关性:cd25在低危MDS患者造血干细胞表达率显著低于高危MDS患者(18.66%±16.59%vs53.27%±22.94%,P=0.003>0.05)。2)cd25表达率与外周血血常规的相关性:cd25在MDS骨髓造血干细胞表达率与外周血中性粒细胞计数呈显著负相关(r=-0.684,P=0.002>0.05);cd25在MDS骨髓造血干细胞表达率与血小板计数呈显著负相关(r=-0.561,P=0.015>0.05)。3)cd25表达率与骨髓原始细胞比例之间的相关性:cd25在MDS患者造血干细胞表达率与骨髓原始细胞比例呈显著正相关(r=0.596,P=0.009>0.05)。4)cd25表达率与外周血细胞减少系数之间的相关性:随外周血血细胞减少的系数增加,MDS患者造血干细胞的cd25表达率随之增加(F=6.46,P=0.009>0.05)。5)cd25在不同亚型MDS的表达率:cd25表达率随MDS亚型进展而增加,RAEB型患者cd25表达率高于非RAEB型患者,但非RAEB和RAEB亚型间的cd25表达率无显著性差异。结论:MDS患者骨髓cd25+造血干细胞数量显著高于正常对照组,与AML组接近。cd25+造血干细胞数量与cd123+造血干细胞数量之间存在显著正相关。cd25表达率与MDS患者疾病进展及不良预后密切相关。

关键词：骨髓增生异常综合征造血干细胞白血病干细胞 cd25 cd123

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强直性脊柱炎并发葡萄膜炎临床特点的研究

强直性脊柱炎并发葡萄膜炎临床特点的研究

作者：荆梅华扬州大学

学位级别：硕士

目的：研究并发葡萄膜炎的强直性脊柱炎（AS）患者临床特点,以及并发葡萄膜炎对AS患者的疾病严重程度、总体预后、治疗的影响。研究对象：并发及未并发葡萄膜炎的强直性脊柱炎（AS）患者方法：收集了2009年6月至2012年... 详细信息

目的：研究并发葡萄膜炎的强直性脊柱炎（AS）患者临床特点,以及并发葡萄膜炎对AS患者的疾病严重程度、总体预后、治疗的影响。研究对象：并发及未并发葡萄膜炎的强直性脊柱炎（AS）患者方法：收集了2009年6月至2012年6月期间扬州大学临床医学院风湿免疫科门诊及住院部AS患者的临床资料,共301例。将AS患者中并发葡萄膜炎的患者及未并发葡萄膜炎的患者分别定义为葡萄膜炎组及非葡萄膜炎组。所有AS患者均符合1984年的AS纽约修订标准。对所有患者的性别、年龄、病程、总体评分、晨僵程度、晨僵持续时间、外周关节受累情况、BASDAI、BASFI评分、治疗方案以及血沉、CRP、cd25、HLA-B27、髋关节MRI结果进行归纳、总结。所有统计学处理在SPSS17.0及Excel2007软件中完成。计量资料采用独立样本t检验,计数资料使用卡方检验进行统计分析。结果：301例AS患者,其中男性共218例,女性83例,男女比约2.6：1。曾经或就诊时有葡萄膜炎的患者为36例（11.96%）。 36例并发葡萄膜炎的患者中,有18例（50%）患者在AS发病后一年出现了葡萄膜炎;有14例（38.89%）患者在AS发病后一年内出现了葡萄膜炎;有3例（8.33%）患者在发病初出现了葡萄膜炎。其中28例（77.78%）患者葡萄膜炎反复发作。反复发作葡萄膜炎的患者中仅有2例为单眼发作,而其他均为双侧交替发作,其中6例视力明显减退。葡萄膜炎组及非葡萄膜炎组患者的性别比例、发病年龄、晨僵程度、晨僵持续时间、总体不适程度、CRP、ESR、BASDAI评分、HLA-B27阳性率、髋关节受累率均无统计学意义;而葡萄膜炎组平均病程较非葡萄膜炎组长（P=0.006）;葡萄膜炎组患者中cd25升高的患者有56.67%,多于非葡萄膜炎组;躯体功能指数（BASFI）评分在葡萄膜炎组显著大于非葡萄膜炎组,并且其差异有统计学意义。并发葡萄膜炎的患者中有28例（77.78%）有外周关节受累,较非葡萄膜炎组多。治疗方案方面发葡萄膜炎患者中的生物制剂使用率为41.67%,未并发葡萄膜炎患者中的生物制剂使用率为24.53%,两组间生物制剂使用率的差异有统计学意义（P=0.029）。结论： 1、多数AS并发的葡萄膜炎为反复发作,可为首发,也可发生在AS发病后,甚至可在AS发病前数年发生。 2、AS患者的葡萄膜炎发生率随着病程延长而升高。而与性别、AS发病年龄、HLA-B27无关。 3、并发葡萄膜炎对疾病活动度无显著影响,但可加重躯体功能受损。 4、AS并发葡萄膜炎可能与cd25升高有关。 5、并发葡萄膜炎患者更易有外周关节受累。 6、由于葡萄膜炎复发率高,可致视力下降,甚至失明,伴发葡萄膜炎的AS患者应首先考虑生物制剂治疗。

关键词：强直性脊柱炎葡萄膜炎病程疾病活动度 cd25

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紫杉醇对小鼠T细胞的影响

现代免疫学 2005年第2期25卷 113-116,130页

作者：彭桉平曾耀英王青肇静娴俞瑜狄静芳暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广州510632

为研究抗癌药紫杉醇(PTX)对T细胞行为的影响及其分子机制,利用流式细胞术分析多克隆刺激剂ConA刺激下T细胞行为:羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记技术分析T细胞增殖相关指数;碘化丙锭染色分析细胞周期分布;AnnexinV-PI染色检测... 详细信息

为研究抗癌药紫杉醇(PTX)对T细胞行为的影响及其分子机制,利用流式细胞术分析多克隆刺激剂ConA刺激下T细胞行为:羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记技术分析T细胞增殖相关指数;碘化丙锭染色分析细胞周期分布;AnnexinV-PI染色检测T细胞凋亡;荧光标记的单克隆抗体染色检测T细胞活化表达cd25的百分率。结果显示.PTX对ConA刺激下小鼠T细胞增殖具有明显的抑制作用,且呈剂量依赖性。该浓度范围PTX阻滞T细胞于G2/M期,诱导凋亡及抑制cd25表达。25nmol/L的PTX与10nmol/L的环孢素A(CsA)具有明显的协同抑制效应。以上结果表明PTX可明显抑制多克隆刺激剂ConA诱导的T细胞体外增殖,是G2/M期阻滞、凋亡诱导和cd25表达抑制等多种机制共同作用的结果。

关键词：紫杉醇 T淋巴细胞增殖 G2/M期凋亡 cd25

多发伤患者早期细胞免疫动态变化及相关因素研究

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多发伤患者早期细胞免疫动态变化及相关因素研究

作者：梁海鹏上海交通大学

学位级别：硕士

目的:研究严重多发伤患者在创伤后早期细胞免疫功能的动态变化,并监测多发伤患者外周血中cd4+cd25+cd127-调节性T细胞（Treg）比率及炎性因子水平变化规律,为多发伤临床治疗提供理论指导。方法:选择我院急诊收治29例多发伤患者为实验组... 详细信息

目的:研究严重多发伤患者在创伤后早期细胞免疫功能的动态变化,并监测多发伤患者外周血中cd4+cd25+cd127-调节性T细胞（Treg）比率及炎性因子水平变化规律,为多发伤临床治疗提供理论指导。方法:选择我院急诊收治29例多发伤患者为实验组（ISS＞16分）,在创伤后第1、4、7天抽取外周静脉血8ml,另取30例我院健康体检者为对照组,一次性抽取外周静脉血8ml,利用流式细胞仪术检测各血液标本cd4+、cd8+、cd4+cd25+cd127-调节性T细胞（Treg）细胞百分率;用免疫比浊法和化学发光法分别测定C反应蛋白（CRP）和白细胞介素-6（IL-6）的浓度。组间比较采用t检验,相关性分析采用Pearson线性相关分析法。结果:严重多发伤患者外周血cd4+细胞在严重创伤后17天均明显低于健康对照组（P＜0.01）;cd8+细胞在伤后17天明显高于健康对照组,但两组差异性在第1天无统计学意义（P＞0.05）,而在第4、7天具有统计学意义（P＜0.01或P＜0.05）;cd4+/cd8+比值在伤后17天明显低于健康对照组,在第1、4天差异性具有统计学意义（P＜0.05）,而在第7天差异无统计学意义（P=0.16＞0.05）;cd4+cd25+cd127-调节性（Treg）T细胞在第1、4、7天显著高于对照组（P＜0.05）。多发伤患者外周血CRP和IL-6浓度在伤后17天显著高于对照组（P＜0.01）。多发伤组在伤后第1天cd4+cd25+cd127-调节性T细胞（Treg）与CRP、IL-6呈正线性相关,而与cd4+、cd8+成负线性相关。结论:多发伤患者在严重创伤后早期存在细胞免疫功能抑制和过度炎症反应。另外,严重创伤后Treg细胞比率明显升高,其可能与细胞免疫功能抑制相关。多发伤患者外周血除了cd4+、cd8+、cd4+/cd8+比值外,Treg细胞比率也可作为多发伤患者早期细胞免疫功能评价指标,同时上述指标的监测对手术时机的判断具有积极的意义。

关键词：多发伤细胞免疫调节性T细胞 cd25 cd127

人和小鼠流产模型子宫NK细胞cd25和Foxp3的表达特征

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人和小鼠流产模型子宫NK细胞CD25和Foxp3的表达特征

作者：陈琳琳暨南大学

学位级别：硕士

近年来,由于环境和人体自身的因素,如遗传的因素、内分泌失调因素、感染以及全身性疾病和生殖器官畸形等因素,导致自然流产现象越来越普遍。其中,免疫因素也是导致反复自发性流产发生的主要原因之一。经过多年科研人员的不断努力,关于... 详细信息

近年来,由于环境和人体自身的因素,如遗传的因素、内分泌失调因素、感染以及全身性疾病和生殖器官畸形等因素,导致自然流产现象越来越普遍。其中,免疫因素也是导致反复自发性流产发生的主要原因之一。经过多年科研人员的不断努力,关于这类疾病的预防及治疗水平得到了明显提高,但是由于这类病的发病的分子机理尚未阐明,从而限制了各种医疗手段在临床实际中的应用。因此,通过研究人和小鼠妊娠期母-胎界面中的T细胞和NK细胞的表达特征将有助于加深妊娠免疫耐受机制的理论研究,也有助于对于某些严重影响妊娠结局的病理性妊娠发病机制的研究。孕早期有大量的cd56bright NK细胞分布于人类的子宫蜕膜中,故又称为子宫自然杀伤细胞(uNK细胞),大约占蜕膜淋巴细胞的70%～80%。多年来的研究显示,uNK细胞可能有利于维持正常的妊娠母-胎免疫耐受,但对于这一过程涉及的很多环节的研究尚未清楚。在这一类研究领域中,已被国际上认可的经典自发性流产动物模型是CBA/J×DBA/2J小鼠,通过与基因型相同的CBA/J×BALB/c小鼠(均为H-2k×H-2d)对比,研究表明CBA/J×DBA/2J小鼠的自发性胚胎丢失率明显的高于后者,但是对于这种小鼠的发病机制也还未完全阐明。cd4阳性和cd25阳性的T细胞可以表达一定量的Foxp3,而在人类的cd8+cd25T细胞也分布有Foxp3。许多研究显示,Foxp3可特异性的表达于小鼠的cd4+cd25+T细胞,而其在cd8+T细胞中的表达明显低于cd4+T细胞。适量的Foxp3有利于维持正常的妊娠,而且有可能是调控母-胎界面上免疫耐受形成的因素。在人类和小鼠中的NK细胞中也分布有cd25和Foxp3,参与妊娠免疫耐受的一系列细胞因子如cd25、Foxp3、TNF-α、IL-4、TGF-β和IL-10等,它们的表达与妊娠免疫耐受的关系需要进一步阐明。目的1.探讨cd25和Foxp3分子的表达水平与自发性流产小鼠模型流产发病机制的关系。2.分析人子宫NK细胞表达cd25和Foxp3分子的情况与妊娠免疫耐受的关系。材料与方法1.建立实验组CBA/JxDBA/2J交配组合和对照组CBA/JxBALB/c交配组合,即每一雌性CBA/J小鼠与一雄性DBA/2J或BALB/c小鼠同笼,实验组和对照组孕鼠数量均为12只。于孕12.5d处死孕鼠,计算小鼠胚胎吸收率。同时从这些孕鼠胎盘(包括胎盘及其附着处的蜕膜组织)中获得单个核细胞。通过磁珠亲和细胞分选术(MACS)分离小鼠uNK细胞,并采用流式细胞术技术来检测NK细胞cd25和Foxp3分子的表达情况。通过自发性流产小鼠CBA/JxDBA/2J和正常对照CBA/JxBALB/c小鼠在流产率和NK细胞cd25、Foxp3分子表达的差异对比,探讨流产与NK细胞cd25、Foxp3分子表达量的关系。每组检测重复4次。2.建立CBA/JxDBA/2J和CBA/JxBALB/c交配组合,并获得各组18只孕鼠。于孕12.5d,在无菌条件下收集CBA/JxBALB/c小鼠胎盘和蜕膜组织中的淋巴细胞,通过MACS可获得cd49b+cd25+Foxp3+ NK的纯化细胞,将其培养约24h(RPMI 1640培养基)。把CBA/JxDBA/2J交配组合获得的18只孕鼠分为两组,每组9只。实验组于孕4.5d经尾静脉注射cd49b+cd25+Foxp3+ NK细胞(106细胞/例)。对照组通过尾静脉注射相同体积的无菌PBS。在孕12.5天处死小鼠,计算并比较两组的胚胎吸收率。3.收集5例自发性流产患者的胎盘淋巴细胞作为实验组,对照组是5例人工流产患者的胎盘淋巴细胞,采用流式细胞术检测人子宫NK细胞表达cd25和Foxp3分子的情况,分析这些分子与妊娠免疫耐受的关系。4.全部数据采用SPSS13.0软件进行统计学分析,对两组小鼠进行χ2检验(卡方检验)来比较其胚胎吸收率。分别采用独立样本t检验比较两组小鼠和人的cd25和Foxp3表达率的变化。Pcd25和Foxp3阳性率均明显低于CBA/JxBALB/c小鼠(cd25阳性率分别是4.8%±2.8%和10.5%±6.3%,Foxp3阳性率分别是0.3%±0.2%和7.4%±4.2%,均为Pcd3和cd4分子。此外,输注cd49b+cd25+Foxp3+ NK细胞可显著降低CBA/JxDBA

关键词：流产免疫耐受母-胎界面 cd25 Foxp3 人小鼠

术后镇痛对cd_(25)表达及T细胞亚群影响的临床研究

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中国疼痛医学杂志 2008年第3期14卷 145-146页

作者：万兆星王升刘晶涛侯建民河南省安阳地区医院安阳455000

目的:研究术后镇痛对cd25表达及T细胞亚群的影响。方法:将40例择期经腹胆囊切除术患者,随机分为二组。A组20例无术后镇痛,B组20例有术后镇痛。于麻醉前(T0)、麻醉后1小时(T1)、手术后24小时(T2)、手术后72小时(T3),分别采取外周静脉血... 详细信息

目的:研究术后镇痛对cd25表达及T细胞亚群的影响。方法:将40例择期经腹胆囊切除术患者,随机分为二组。A组20例无术后镇痛,B组20例有术后镇痛。于麻醉前(T0)、麻醉后1小时(T1)、手术后24小时(T2)、手术后72小时(T3),分别采取外周静脉血采用流式细胞学法分别检测T细胞亚群及淋巴细胞cd25。结果:术后,A组T细胞亚群百分数及淋巴细胞cd25水平下降缓慢,B组在短时间内(24小时内)迅速下降至术前水平,两组相比有显著性差异(P<0.05)。结论:术后镇痛可较好地维护机体免疫功能,使机体免疫功能快速恢复至术前状态。

关键词：术后镇痛免疫胆囊切除术 T细胞亚群 cd25

新生儿缺氧缺血性脑病患儿外周血cd25表达

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中国微生态学杂志 2008年第4期20卷 392-393页

作者：孙琳陆勤王健安徽理工大学医学院妇产科护理学教研室安徽淮南232001 淮南市妇幼保健院新生儿科安徽淮南232007 安徽理工大学医学院病原学与免疫学教研室安徽淮南232001

目的探讨新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)患儿外周血cd25表达。方法应用生物素-链霉亲和素(BSA)法检测新生儿HIE患儿及足月正常新生儿出生后第1、7天外周血cd25水平。结果HIE患儿生后第1天静息期和诱导期cd25水平分别为(3.7±1.2)%和(22.4±6... 详细信息

目的探讨新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)患儿外周血cd25表达。方法应用生物素-链霉亲和素(BSA)法检测新生儿HIE患儿及足月正常新生儿出生后第1、7天外周血cd25水平。结果HIE患儿生后第1天静息期和诱导期cd25水平分别为(3.7±1.2)%和(22.4±6.5)%,与正常对照组相比,差异有显著性(Pcd25水平分别为(4.1±1.5)%和(25.3±7.2)%,与正常对照组相比,差异无显著性(P>0.05)。其中HIE(重度)患儿静息期和诱导期cd25水平均较低,与正常对照组相比,差异有显著性(Pcd25水平降低,并与HIE严重程度有关。

关键词：缺氧缺血性脑病新生儿生物素-链霉亲和素 cd25

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缺氧缺血性脑病新生儿血细胞因子表达的意义

实用儿科临床杂志 2006年第6期21卷 341-342,354页

作者：王健陆勤安徽理工大学医学院病原学与免疫学教研室淮南市妇幼保健院新生儿科安徽淮南232000

目的观察缺氧缺血性脑病(HIE)新生儿血cd25、cd25mRNA和IL-1β表达水平,探讨其临床意义。方法Ficoll常规分离外周血单个核细胞,用生物素-链霉亲和素、Real-time PCR和ELISA法分别检测新生儿HIE患儿及足月正常新生儿生后d1、3、7植物凝集... 详细信息

目的观察缺氧缺血性脑病(HIE)新生儿血cd25、cd25mRNA和IL-1β表达水平,探讨其临床意义。方法Ficoll常规分离外周血单个核细胞,用生物素-链霉亲和素、Real-time PCR和ELISA法分别检测新生儿HIE患儿及足月正常新生儿生后d1、3、7植物凝集素(PHA)诱导前后cd25、cd25mRNA及IL-1β水平,以cd25cdNA与磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)比值为cd25mRNA最终相对表达量。结果HIE患儿生后d1静息期和诱导期cd25表达水平分别为(3.6±1.1)%、(20.9±4.8)%,IL-1β为(17.7±8.2)ng/L,与正常对照相比,差异有显著性(Pcd25表达水平分别为(3.9±1.2)%、(22.8±5.1)%,IL-1β为(15.9±4.9)ng/L,与正常对照相比,静息期差异有显著性(Pcd25表达水平分别为(4.1±1.2)%(、23.8±5.2)%,与正常对照相比,静息期差异有显著性(Pcd25mRNA与对照组相比,无显著差异(P>0.05)。结论HIE患儿存在明显炎症反应;新生儿免疫细胞表面cd25表达水平偏低,但其mRNA水平稳定,具有一定免疫调节能力,可参与HIE脑损伤的修复。

关键词：婴儿新生缺氧缺血脑 cd25 cd25mRNA 白细胞介素-1β 生物素-链霉亲和素

原发性胆汁性肝硬化患者外周血cd4+cd28-T细胞和cd4+cd25+T细胞亚群变化及意义

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现代预防医学 2010年第6期37卷 1104-1105+1107页

作者：汪群英徐芸郑州大学第一附属医院消化内科

[目的]探讨原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者外周血cd4+cd28-T细胞和cd4+cd25+调节性T细胞亚群的变化及意义。[方法]入选病例为我院从2006年6月到2008年12月共59例原发性胆汁性肝硬化患者(活动期36例、稳定期23例),同时以30例健康体检者为对... 详细信息

[目的]探讨原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者外周血cd4+cd28-T细胞和cd4+cd25+调节性T细胞亚群的变化及意义。[方法]入选病例为我院从2006年6月到2008年12月共59例原发性胆汁性肝硬化患者(活动期36例、稳定期23例),同时以30例健康体检者为对照,借助双色荧光标记技术对外周血cd4+cd28-T细胞和cd4+cd25+占cd4+T细胞比例进行流式细胞术测定。[结果]活动期PBC患者外周血cd4+cd25+细胞比例(1.66±0.83)%低于稳定期(2.53±1.06)%和正常组(4.06±2.36)%(P﹤0.05);而cd4+cd28-细胞比例(4.15±1.89)%则高于稳定组(3.66±0.7)%和正常组(1.54±0.99)%(P﹤0.05)。[结论]活动期PBC患者外周血cd4+cd25+T细胞比例减少而cd4+cd28-T细胞比例升高,cd4+cd25+比例降低可能使外周免疫耐受失去平衡,参与了PBC疾病的发生发展。

关键词：原发性胆汁性肝硬化(PBC) T淋巴细胞 T淋巴细胞亚群自身免疫 cd4 cd28 cd25