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Microscopy Research 2018年第3期6卷 19-29页

作者： Bélgica J. Molina Elda Giansante Héctor J. Finol Center of Electron Microscopy Science Faculty Central University of Venezuela Caracas Venezuela Dermatology Service University Hospital of Caracas Caracas Venezuela

The skin contains various populaions of stem cells, but its characterization has been hampered by lack of markers and unclear location. The hair follicle has a niche for stem cells called a “bulge” which acts as a reservoir of multipotent stem cells. In the study reported here, an immunohistochemical and immunofluorescence analysis was performed on mouse and human tissues in order to determine the possible presence of stem cells of hair follicle through cytokeratin 15 (CK15), cd34, and cd200 markers identified as crucial to the stem cells and to identify the bulge region. Mouse (n = 7) and human (n = 7) skin samples were used. The expression of proteins was determined by the indirect immunoperoxidase technique and a secondary antibody bound to a fluorochrome. The specificity of staining was evaluated by negative controls. The results revealed that the stem cells associated with cd34 and cd200 antibodies were differentially expressed in the interfollicular epidermis, sebaceous glands, and bulge region, indicating that, in mice, cd34 and, in humans, cd200 are more specific than CK15 in detecting bulge cells. It also suggests that cd34 is specific for mouse bulge cells, while cd200 might have specificity for progenitor cells and partially differentiated cells in humans.

关键词： Stem Cells Hair Follicle Bulge cd34 cd200

探究雄激素对烧烫伤小鼠愈合过程中毛发及毛囊干细胞增殖的影响

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探究雄激素对烧烫伤小鼠愈合过程中毛发及毛囊干细胞增殖的影响

作者：吴庭辉塔里木大学

学位级别：硕士

目的初步探究双氢睾酮对烧烫伤小鼠愈合过程中毛发和毛囊的影响作用筛选出合适的双氢睾酮浓度,用免疫荧光标记法检测毛囊干细胞在烧烫伤愈合过程中的增殖、分化和迁移的过程。方法在体毛囊培养,不同浓度双氢睾酮皮下注射烧烫伤小鼠,分... 详细信息

目的初步探究双氢睾酮对烧烫伤小鼠愈合过程中毛发和毛囊的影响作用筛选出合适的双氢睾酮浓度,用免疫荧光标记法检测毛囊干细胞在烧烫伤愈合过程中的增殖、分化和迁移的过程。方法在体毛囊培养,不同浓度双氢睾酮皮下注射烧烫伤小鼠,分别取毛干电镜扫描观察,利用显微外科解剖技术,分离创口皮肤,OCT包埋,HE染色观察不同浓度双氢睾酮注射后毛囊数目及形态,再利用EdU及cd200免疫荧光染色观察,双氢睾酮注射后烧烫伤小鼠皮肤愈合过程中毛囊干细胞的增殖、分化、迁移过程。结果通过试验发现,不同浓度雄激素对烧烫伤小鼠愈合过程中毛干毛小皮的影响不明显,而对毛囊的影响作用明显。一定浓度范围的雄激素中,筛选出7.5 mg/kg·d双氢睾酮对烧烫伤小鼠皮肤愈合过程中毛囊抑制作用明显。EdU细胞增殖检测发现7.5 mg/kg·d双氢睾酮可抑制细胞的增殖,使得毛囊萎缩。干细胞标记物cd200免疫荧光显示,cd200阳性毛囊干细胞主要集中在毛囊外根鞘隆突部;同时7.5 mg/kg·d双氢睾酮可抑制cd200阳性毛囊干细胞的表达。结论一定浓度的双氢睾酮对烧烫伤小鼠愈合过程中毛囊起抑制作用,使愈合过程中生长期毛囊减少,毛囊变细萎缩,同时一定浓度的双氢睾酮可抑制毛囊外根鞘隆突部cd200阳性毛囊干细胞的表达。

关键词：雄激素 EdU cd200 毛囊干细胞烧烫伤

小鼠触须毛囊外根鞘体外再生模型的建立及干细胞迁移特征分析

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小鼠触须毛囊外根鞘体外再生模型的建立及干细胞迁移特征分析

作者：郭景旭塔里木大学

学位级别：硕士

目的观察小鼠触须毛囊外根鞘体外再生过程中形态变化,探究小鼠触须毛囊外根鞘体外再生过程中干细胞动态分布、增殖分化以及迁移特征,初步探讨这些特征与小鼠触须毛囊外根鞘体外再生的关系。方法体外无菌条件下,使用解剖显微外科剪对3 d... 详细信息

目的观察小鼠触须毛囊外根鞘体外再生过程中形态变化,探究小鼠触须毛囊外根鞘体外再生过程中干细胞动态分布、增殖分化以及迁移特征,初步探讨这些特征与小鼠触须毛囊外根鞘体外再生的关系。方法体外无菌条件下,使用解剖显微外科剪对3 d龄昆明乳鼠触须解剖并分离出毛囊外根鞘,进行体外毛囊外根鞘气液界面三维培养,OCT包埋,HE染色观察毛囊外根鞘再生形态;免疫荧光染色法观察干细胞及中性粒细胞在毛囊外根鞘体外再生过程中的动态变化。结果1、通过HE染色观察体外培养不同时期的小鼠触须毛囊外根鞘组织结构,创伤第5 d毛囊外根鞘再生趋于完整。2、细胞增殖EdU染色发现,细胞增殖由玻璃膜外围启动,并逐渐向玻璃膜内部表达,最终形成毛囊样结构。3、细胞凋亡TUNLE染色发现,小鼠触须毛囊外根鞘培养1 d时,玻璃膜处细胞凋亡增多;在培养至5 d时,随着玻璃膜内部细胞增殖逐渐增加,凋亡细胞散落分布于玻璃膜内部。4、α-SMA染色结果发现,小鼠触须毛囊外根鞘再生后新生细胞由骨架蛋白相连,再生结构趋于完整。5、干细胞标记物cd34、cd200免疫荧光显示,外根鞘再生过程中cd34、cd200阳性细胞向再生部位迁移。6、巨噬细胞F4/80及中性粒细胞LY6G免疫荧光结果发现:创伤后发生炎症反应,巨噬细胞受到创伤刺激后向炎症部位迁移,并在外根鞘玻璃膜外围形成一层细胞层。结论分离的小鼠触须毛囊外根鞘在培养第5d时初步重塑毛囊基本形态,毛囊干细胞由隆突部开始表达并参与母体外根鞘形态重塑,中性粒细胞和巨噬细胞在再生过程中发挥着重要作用。

关键词：毛囊外根鞘 EdU TUNEL a-SMA cd200 cd34 LY6G F4/80

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输血相关免疫调节机制研究进展

中国实验血液学杂志 2010年第1期18卷 268-272页

作者：朱鑫方夏荣复旦大学附属华山医院输血科上海200040

同种异体输血(allogenic blood transfusion,ABT)发挥临床治疗作用的同时,也会发生很多免疫相关的副作用,如术后感染率上升、恶性肿瘤切除复发率增加等。血制品中的同种异基因单核细胞表面的cd200分子、白细胞及储存过程中白细胞脱落的s... 详细信息

同种异体输血(allogenic blood transfusion,ABT)发挥临床治疗作用的同时,也会发生很多免疫相关的副作用,如术后感染率上升、恶性肿瘤切除复发率增加等。血制品中的同种异基因单核细胞表面的cd200分子、白细胞及储存过程中白细胞脱落的sHLA和sFasL、血清中的生物活性分子等与输血相关免疫调节(transfusion-relatedimmunomodulation,TRIM)的发生均有一定联系。临床对照试验,实验室研究及动物模型显示:克隆删除、诱导无能、免疫抑制是TRIM发生的效应机制。本文就TRIM的发生机制、诱导TRIM发生的介质的研究进展进行了综述。

关键词：同种异体输血输血相关免疫调节 cd200 sHLA sFasL

视网膜中央静脉阻塞伴发黄斑水肿患者房水中scd200、VEGF表达

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临床眼科杂志 2017年第6期25卷 488-492页

作者：许畅黎智湖北省襄阳市中心医院眼科 441021

目的观察视网膜中央静脉阻塞(CRVO)伴发黄斑水肿患者房水中scd200与VEGF浓度,并探讨其与黄斑厚度关系。方法前瞻性对照研究。纳入2015年11月至2017年2月在我科连续就诊的33例(33只眼)CRVO伴发黄斑水肿患者,同时选取30例(30只眼)无眼部... 详细信息

目的观察视网膜中央静脉阻塞(CRVO)伴发黄斑水肿患者房水中scd200与VEGF浓度,并探讨其与黄斑厚度关系。方法前瞻性对照研究。纳入2015年11月至2017年2月在我科连续就诊的33例(33只眼)CRVO伴发黄斑水肿患者,同时选取30例(30只眼)无眼部及全身疾病的年龄相关性白内障患者作为对照。收集伴有黄斑水肿的CRVO患者球内注射雷珠单抗前房水。同时还收集白内障患者手术前房水作对照。用ELISA分别检测两组患者房水以及血浆中scd200和VEGF的浓度。结果 CRVO组房水中scd200和VEGF的含量分别为(109.64±33.18)pg/ml、(323.30±245.40)pg/ml,对照组房水中scd200和VEGF的浓度分别为(42.55±28.27)pg/ml、(151.43±68.40)pg/ml。CRVO组scd200和VEGF的浓度均明显高于对照组,差异有统计学意义(Pcd200和VEGF的浓度两组相似,差异无统计学意义。CRVO组scd200和VEGF浓度呈正相关,scd200以及VEGF浓度与伴有黄斑水肿的CRVO患者的黄斑中央凹厚度呈正相关。结论伴有黄斑水肿的CRVO患者房水中scd200与VEGF表达明显上调,而且scd200与VEGF含量与黄斑水肿的程度相关。

关键词：视网膜中央静脉阻塞黄斑水肿血管内皮生长因子 cd200

运用CLLflow积分系统诊断中国B细胞慢性淋巴细胞增殖性疾病的研究

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临床血液学杂志 2021年第12期34卷 841-846页

作者：商芳影郑金娥马耀坤贺艳丽李娟胡宇杜雯武汉康圣达医学检验所有限公司流式细胞实验室武汉430071 华中科技大学同济医学院附属协和医院干细胞科生物靶向治疗研究湖北省重点实验室

目的:运用CLLflow积分系统诊断与鉴别诊断包括慢性淋巴细胞白血病(CLL)在内的B细胞慢性淋巴细胞增殖性疾病(B-CLPD)。方法:回顾性分析2018年3月—2020年6月就诊的363例B-CLPD患者,根据疾病类型分成CLL组(185例)和非CLL(non-CLL)组(178... 详细信息

目的:运用CLLflow积分系统诊断与鉴别诊断包括慢性淋巴细胞白血病(CLL)在内的B细胞慢性淋巴细胞增殖性疾病(B-CLPD)。方法:回顾性分析2018年3月—2020年6月就诊的363例B-CLPD患者,根据疾病类型分成CLL组(185例)和非CLL(non-CLL)组(178例),分别对其进行cd分子染色,经流式细胞仪前向/侧向散射光(FSC/SSC)和cd45设门,对2组标本中各类细胞进行分群,选择cd19;细胞,分析该群细胞的表型,并同时进行CLLflow和Matutes积分统计,比较CLL组和non-CLL组间2种积分以及各cd分子表达差异。结果:2组CLLflow和Matutes积分比较,差异均有统计学意义(P0.05),然而,CLLflow积分特异度明显高于Matutes积分(89.9%vs 64.6%,Pcd5、cd10、cd23、cd79b、FMC7的表达差异均有统计学意义(Pcd20、cd22表达差异无统计学意义(P>0.05)。cd5/cd23双阳性对CLL的诊断表现出了高敏感度和特异度(Pcd200在CLL组的表达率明显高于non-CLL组(P<0.01)。结论:运用复合免疫标记的CLLflow积分系统在诊断与鉴别诊断包括CLL在内的B-CLPD时有用性高。与Matutes积分相比,CLLflow积分灵敏度相当,特异度显著提高,稳定性更好。

关键词：慢性淋巴细胞白血病 CLLflow积分系统流式细胞术 cd200

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慢性心力衰竭患者全基因组的甲基化改变

首都医科大学学报 2012年第4期33卷 427-431页

作者：王建龙李海涛苏丕雄顾松刘岩张希涛颜钧安向光高杰辛悦蔡军北京市普仁医院心内科北京100062 首都医科大学附属北京朝阳医院心脏中心北京100020

目的研究全基因组甲基化对心力衰竭患者心肌基因表达的影响。方法取心脏移植中供体左心室心肌标本8例作为正常对照组,行心脏移植的心力衰竭患者自身左心室心肌标本14例作为实验组,提取基因组基因通过甲基化DNA免疫共沉淀结合甲基化芯片... 详细信息

目的研究全基因组甲基化对心力衰竭患者心肌基因表达的影响。方法取心脏移植中供体左心室心肌标本8例作为正常对照组,行心脏移植的心力衰竭患者自身左心室心肌标本14例作为实验组,提取基因组基因通过甲基化DNA免疫共沉淀结合甲基化芯片技术(methylated DNA immunoprecipitation-chip,MeDIP-chip)及基因表达谱芯片进行高通量的快速筛选。然后,得到MeDIP-chip初筛后的2个甲基化异常基因abca4和cd200进行亚硫酸氢钠测序PCR。结果疾病组abca4基因启动子区甲基化率为85.5%,正常组基因启动子区甲基化率为91.2%;疾病组基因启动子区甲基化率比正常组基因启动子区甲基化率低5.7%,心衰组cd200基因启动子区甲基化率为50.5%,正常组基因启动子区甲基化率为57.1%。结论 abca4和cd200启动子区甲基化改变会影响自身的基因表达量。心衰时DNA启动子区甲基化会发生改变,并且DNA启动子区的甲基化会伴随着基因表达量的改变。

关键词： DNA甲基化 abca4 cd200 表观遗传心力衰竭

Cell-cell contact with proinflammatory macrophages enhances the immunotherapeutic effect by mesenchymal stem cells in two abortion models

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