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脐血ccsp、TGF-β1、IP-10水平与早产儿支气管肺发育不良的关系及预测价值

四川生理科学杂志 2024年第1期46卷 103-106页

作者：王锦王彬彬贺少军南阳医学高等专科学校第一附属医院儿科河南南阳473000

目的:探讨脐血Clara细胞分泌蛋白(Clara cell secretory protein,ccsp)、转化生长因子-β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1)、干扰素诱导蛋白-10(Interferon induced protein-10,IP-10)水平与早产儿支气管肺发育不良(Bronchopulmonary dysplasia,BPD)的关系及预测价值。方法:选取2021年8月至2022年8月我院收治的80例早产儿作为研究对象,根据患儿出生后28 d是否发生BPD将患儿分为BPD组(n=31)和非BPD组(n=49),根据BPD严重程度将BPD患儿分为轻度、中度、重度三个亚组。比较两组入院时脐血ccsp、TGF-β1、IP-10水平,比较入院时轻度、中度、重度BPD患儿脐血ccsp、TGF-β1、IP-10水平,分析入院时脐血ccsp、TGF-β1、IP-10水平与BPD发生及BPD严重程度相关性,偏回归分析早产儿发生BPD的影响因素,受试者工作特征曲线(Receiver operating characteristic,ROC)分析入院时脐血ccsp、TGF-β1、IP-10水平对早产儿发生BPD的预测价值。结果:与非BPD组相比,入院时BPD组脐血ccsp水平较低,TGF-β1、IP-10水平较高(Pccsp水平比较:轻度BPD>中度BPD>重度BPD,脐血TGF-β1、IP-10水平比较:轻度BPDccsp水平与是否发生BPD及BPD严重程度均呈负相关,IP-10、TGF-β1水平与是否发生BPD及BPD严重程度均呈正相关(P8.37 ng·mL^(-1))、IP-10(>30.62 ng·mL^(-1))水平是早产儿发生BPD的危险因素,ccsp(>40.66 ng·mL^(-1))水平是早产儿发生BPD的保护因素;入院时脐血ccsp、TGF-β1、IP-10水平联合预测早产儿发生BPD的曲线下面积(Area Under Curve,AUC)为0.854。结论:脐血ccsp、TGF-β1、IP-10水平变化与早产儿BPD的发生具有显著相关性,为临床早期诊断、评估病情提供参考依据,以针对性制定治疗方案,降低病死率。

关键词：早产儿支气管肺发育不良 ccsp TGF-β1 IP-10

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固本防哮饮对哮喘缓解期小鼠气道上皮紧密连接蛋白及ccsp的影响

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南京中医药大学学报 2022年第6期38卷 483-489页

作者：姜越张宇林董盈妹严花赵霞南京中医药大学附属医院江苏南京210029 南京中医药大学中医儿科学研究所江苏省儿童呼吸疾病(中医药)重点实验室江苏南京210023

目的研究固本防哮饮对哮喘缓解期小鼠气道上皮紧密连接蛋白及Clara细胞分泌蛋白(ccsp)的影响,探讨其防治缓解期哮喘的可能机制。方法联合使用卵清蛋白(OVA)及呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)建立哮喘缓解期小鼠模型,... 详细信息

目的研究固本防哮饮对哮喘缓解期小鼠气道上皮紧密连接蛋白及Clara细胞分泌蛋白(ccsp)的影响,探讨其防治缓解期哮喘的可能机制。方法联合使用卵清蛋白(OVA)及呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)建立哮喘缓解期小鼠模型,将36只Balb/c小鼠随机分为正常组、模型组、固本防哮饮低剂量组、固本防哮饮中剂量组、固本防哮饮高剂量组和孟鲁司特钠组,每组6只。模型建立完成后,固本防哮饮各剂量组分别予不同剂量(12、24、36 g·kg^(-1))固本防哮饮,孟鲁司特钠组予2.6 mg·kg^(-1)孟鲁司特钠,各组均灌胃28 d。末次给药后24 h留取样本。使用苏木精-伊红(HE)染色法观察各组小鼠肺组织病理;Western blot、qPCR及免疫组化检测各组小鼠肺组织中闭锁小带蛋白-1(ZO-1)等气道上皮紧密连接蛋白表达;ELISA法检测肺组织及肺泡灌洗液(BALF)中ccsp的表达。结果HE染色结果显示,与正常组相比,模型组小鼠肺组织中可见明显的炎性细胞浸润(Pccsp的表达显著下降(Pccsp的表达(Pccsp的表达水平,修复上皮损伤,恢复上皮屏障功能,从而防治哮喘。

关键词：固本防哮饮哮喘缓解期上皮屏障紧密连接蛋白 ccsp

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基于急性肺损伤的重组SP-B/ccsp蛋白表达特性及功能研究

基于急性肺损伤的重组SP-B/CCSP蛋白表达特性及功能研究

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作者：王婷重庆理工大学

学位级别：硕士

肺表面活性蛋白B(SP-B)是肺表面活性物质中不可缺的疏水性蛋白之一,有助于促进磷脂分子扩散,增加单分子膜的稳定性,具有调节肺泡气液界面表面张力的功能。Clara细胞分泌蛋白(Clara cell secreted protein,ccsp)是由细支气管、终末细支... 详细信息

肺表面活性蛋白B(SP-B)是肺表面活性物质中不可缺的疏水性蛋白之一,有助于促进磷脂分子扩散,增加单分子膜的稳定性,具有调节肺泡气液界面表面张力的功能。Clara细胞分泌蛋白(Clara cell secreted protein,ccsp)是由细支气管、终末细支气管黏膜上的Clara细胞分泌产生的亲水性蛋白,是肺内源性抗炎物质之一,其主要抗炎机制为竞争性抑制分泌型磷脂酶A2-IIA(sPLA2-IIA)。急性肺损伤(ALI)过程中会大量释放分泌型磷脂酶A2-IIA水解细胞表面活性磷脂,产生花生四烯酸等炎症因子,最终导致肺泡Ⅱ型上皮细胞形态、功能发生变化,表面活性物质合成减少,而SP-B合成的减少、构象改变及活性的降低,会进一步加重ALI的病理过程。研究目的:本课题研究目的在于探究SP-B/ccsp融合蛋白对LPS诱导的ALI中sPLA2-IIA水解活性的影响,肺泡上皮细胞的保护作用,为ALI替补治疗开发新型的基因工程药物提供一定的实验依据和参考。研究方法:(1)SP-B/ccsp融合蛋白生物信息学分析,通过对SP-B/ccsp蛋白疏水性和二级结构的分析,了解SP-B/ccsp融合蛋白结构特性。(2)从大鼠肺组织中提取RNA,RT-PCR扩增ccsp基因,构建ccsp表达载体pEGFP-N2-ccsp,对重组质粒pEGFP-N2-SP-B进行双酶切,插入ccsp基因,构建SP-B/ccsp融合表达载体pEGFP-N2-SP-B/ccsp。(3)筛选重组载体最佳转染条件,将重组质粒pEGFP-N2-ccsp和pEGFP-N2-SP-B/ccsp转染至A549细胞和CCL-149细胞中,检测ccsp蛋白及SP-B/ccsp融合蛋白的表达,观察融合蛋白的荧光表达定位情况。(4)MTT法筛选sPLA2-IIA最佳作用浓度,sPLA2-IIA处理重组质粒转染细胞,检测花生四烯酸和TNF-α含量,分析SP-B/ccsp融合蛋白对sPLA2-IIA水解作用的影响。(5)用脂质体构建ALI细胞模型,LPS处理重组质粒转染细胞,进行细胞拉曼光谱扫描,分析SP-B/ccsp融合蛋白对细胞膜结构的影响,ELISA检测炎症因子TNF-α、IL-6、IL-8的含量变化。研究结果:(1)对SP-B/ccsp蛋白进行疏/亲水性分析,发现ccsp为亲水性蛋白,SP-B为疏水性蛋白,两者进行融合后SP-B/ccsp蛋白仍然具有较强疏水性。SP-B/ccsp蛋白二级结构中含有61.1%的α-螺旋(Alpha helix)、37.1%的环状结构,1.7%无规卷曲。(2)从大鼠肺中提取肺总RNA,根据ccsp基因序列设计含有酶切位点的引物,通过PCR扩增,获得ccsp基因片段,大小约为309bp,通过Hind III、Eco RⅠ对pEGFP-N2进行双酶切,T4连接酶连接,筛选阳性克隆、测序,获得pEGFP-N2-ccsp重组质粒;pEGFP-N2-SP-B重组质粒,使用Hind III、Eco RⅠ对pEGFP-N2-SP-B进行双酶切,T4连接酶连接,筛选阳性克隆、测序,获得融合表达载体pEGFP-N2-SP-B/ccsp。(3)脂质体瞬时转染最佳转染条件为:质粒:Lip2000 1:1(ng:μL),转染时间为4h。将重组质粒转入A549和CCL-149细胞中表达,Western blot结果显示,ccsp重组蛋白大小约为39.46 k Da,SP-B/ccsp融合蛋白大小约为47.05 k Da。细胞荧光定位结果显示,ccsp重组蛋白在A549和CCL149细胞质中均匀分布,而SP-B重组蛋白和SP-B/ccsp融合蛋白在细胞中呈膜倾向性分布。(4)sPLA2-IIA最佳作用浓度为0.1μg/m L,SP-B/ccsp融合蛋白组和ccsp蛋白组的花生四烯酸和TNF-α含量与阳性对照组相比都有所降低,并且,SP-B/ccsp融合蛋白组与ccsp蛋白组相比,花生四烯酸和TNF-α浓度降低49.0%、67.5%,说明SP-B/ccsp融合蛋白具有更强的抑制sPLA2-IIA水解膜磷脂的能力。(5)用LPS构建ALI细胞模型,筛选出LPS最优处理剂量为10 mg/L,拉曼光谱细胞扫描结果显示,pEGFP-N2-SP-B/ccsp转染细胞的细胞膜C-C骨架结构无序程度比pEGFP-N2-ccsp更低,磷脂侧链间的有序性增大,细胞膜结构更加稳定;LPS处理转染细胞后,各组转染细胞中的炎症因子TNF-α、IL-6、IL-8含量增加,而SP-B/ccsp融合蛋白组和ccsp蛋白组中各炎症因子的浓度与阳性对照组相比都有所下降,并且,SP-B/ccsp融合蛋白组与ccsp蛋白组相比,TNF-α、IL-6、IL-8的含量降低61.2%、37.6%、42.7%,说明ccsp/SP

关键词： SP-B ccsp ALI sPLA2-ⅡA LPS

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第四届(1992年)全国信号处理学术会议(ccsp—2)征文通知

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信号处理 1991年第1期 65-65页

信号处理学科在众多的科技领域中发挥了越来越重要的作用,为加强学术交流、促进学科发展中国电子学会、中国仪器仪表学会信号处理学会拟定于1992年二季度在成都市召开第四届全国信号处理学术会议(90年的全国性学术活动正与在北京召开的... 详细信息

信号处理学科在众多的科技领域中发挥了越来越重要的作用,为加强学术交流、促进学科发展中国电子学会、中国仪器仪表学会信号处理学会拟定于1992年二季度在成都市召开第四届全国信号处理学术会议(90年的全国性学术活动正与在北京召开的国际信号处理学术会议(CISP′90)合并举行。现学会备存此次国际会议的论文集欢迎选购,论文集简介见本期P30)。

关键词：信号处理会议 ccsp

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ccsper,网络安全的捍卫者（下）

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在线技术 2004年第7期 90-92页

上期我们介绍了ccsp的基本情况及其考试课程，对于ccsp所涉及的考试内容和考试范围有了一定的了解。下面我们一起去看看如何备战ccsp，以及如何顺利通过考试?获得ccsp证书，可以证明自己的能力，并能顺利完成职业的转型。

关键词：网络安全 ccsp 安全专业认证考试教材学习交流

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大气混合污染物对大鼠肺Clara细胞分泌蛋白表达的影响

大气混合污染物对大鼠肺Clara细胞分泌蛋白表达的影响

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作者：王灿吉林大学

学位级别：硕士

目的探讨大气混合污染物(PM10、SO2、NO2及CO)对大鼠肺组织Clara细胞分泌蛋白(ccsp)的影响,为大气污染致肺损伤机制的研究提供科学依据。方法32只Wistar大鼠随机分为3个实验组(低、中、高剂量组)和1个对照组。一次性气管注入染尘,低、... 详细信息

目的探讨大气混合污染物(PM10、SO2、NO2及CO)对大鼠肺组织Clara细胞分泌蛋白(ccsp)的影响,为大气污染致肺损伤机制的研究提供科学依据。方法32只Wistar大鼠随机分为3个实验组(低、中、高剂量组)和1个对照组。一次性气管注入染尘,低、中、高剂量组大鼠分别气管注入1ml含7.5、15、22.5mg PM10的生理盐水混悬液,对照组大鼠注入1ml生理盐水。低、中、高剂量组大鼠分别静态吸入SO2、NO2、CO空气混合气,SO2、NO2、CO浓度分别为7.5、6、200㎎/m3,15、12、400㎎/m3,22.5、18、600㎎/m3。每天吸入2h,连续30d。对照组大鼠吸入正常空气。肺组织HE染色观察形态学变化。ELISA法测定血清、支气管肺泡灌洗液(BALF)中ccsp水平;RT-PCR法检测肺组织ccsp mRNA表达;肺组织免疫组化染色观察Clara细胞变化。结果本实验染毒剂量可致肺组织损伤。高剂量组血清中ccsp浓度升高、肺组织中ccsp阳性细胞积分值下降。实验组BALF中ccsp水平下降。肺组织ccsp mRNA表达各组间无差异。结论本实验各染毒剂量对大鼠肺组织形态有损害作用。血清中ccsp浓度增高,提示大气混合污染物致肺上皮细胞通透性增强,肺泡毛细血管膜的完整性受到破坏。BALF中ccsp水平下降、肺组织免疫组化染色可见部分Clara细胞脱落和大量Clara细胞浆内ccsp褐色变浅,表明大气混合污染物损害Clara细胞,并且抑制Clara细胞的分泌功能。

关键词：大气混合污染物大鼠 ccsp 肺组织 BALF 血清

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