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花旗松素在Caco-2细胞模型中吸收转运机制及其抗炎活性研究

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中草药 2020年第16期51卷 4266-4271页

作者：赵鑫杨冰周福军华洁单淇张然周钰通侯文彬张铁军天津医科大学天津300070 天津药物研究院天津市中药质量标志物重点实验室天津300462 中国医学科学院放射医学研究所天津300192

目的制备花旗松素单体并测定花旗松素在不同介质中的表观油水分配系数,研究其在结肠癌Caco-2细胞模型中吸收转运机制。方法酶解法制备花旗松素,采用高效液相色谱法测定花旗松素在37℃、不同pH值缓冲盐溶液和水中的饱和溶解度,通过油水... 详细信息

目的制备花旗松素单体并测定花旗松素在不同介质中的表观油水分配系数,研究其在结肠癌Caco-2细胞模型中吸收转运机制。方法酶解法制备花旗松素,采用高效液相色谱法测定花旗松素在37℃、不同pH值缓冲盐溶液和水中的饱和溶解度,通过油水分配系数计算公式得花旗松素表观油水分配系数;cck-8实验考察花旗松素在Caco-2细胞中的安全浓度范围,再利用Caco-2细胞单层模型研究其双侧跨膜吸收转运机制;cck-8实验考察花旗松素在人脐血管内皮细胞HDMEC细胞中的安全浓度范围,采用脂多糖诱导的HDMEC细胞建立炎症模型,用花旗松素进行干预,乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测LDH的活力。结果花旗松素在不同溶剂中的lgP分别为0.29(0.1 mol/L盐酸)、0.48(pH 2.0)、0.46(pH 5.8)、0.34(pH 6.8)、0.26(pH 7.4)、0.38(水);花旗松素质量浓度在50~500μg/mL对Caco-2细胞无明显毒性作用;不同质量浓度花旗松素在Caco-2单层细胞模型中的转运具有时间依赖性,不同质量浓度花旗松素双侧转运P_(app)值无显著性差异,且均小于1×10^(-6) cm/s,外排率(ER)均小于2。花旗松素在50~300μg/mL对HDMEC细胞无明显毒性作用,给予花旗松素干预后,与单独给予脂多糖(LPS)刺激组相比,花旗松素各用药组均能明显降低LDH活力(P<0.05),花旗松素在50~100μg/mL明显降低LDH活力,100~250μg/mL趋于平稳。结论花旗松素在肠道中属于难吸收药物,其跨膜转运机制为被动转运,其有对LPS致HDMEC细胞炎症有抑制作用,具有抗炎活性。

关键词：花旗松素表观油水分配系数 Caco-2细胞吸收转运抗炎油水分配系数酶解法饱和溶解度 cck-8实验 HDMEC细胞乳酸脱氢酶

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Aglaroxin C对肝癌细胞体内外生长的抑制作用

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Aglaroxin C对肝癌细胞体内外生长的抑制作用

作者：肖雪珍新乡医学院

学位级别：硕士

背景肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是世界上常见的致死性恶性肿瘤之一。研究表明,我国肝癌发病率居恶性肿瘤的第3位,死亡率在中国城市仅次于肺癌。目前肝癌的手术、肝动脉栓塞化疗术、生物靶向治疗等技术虽有所提高,但肝癌... 详细信息

背景肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是世界上常见的致死性恶性肿瘤之一。研究表明,我国肝癌发病率居恶性肿瘤的第3位,死亡率在中国城市仅次于肺癌。目前肝癌的手术、肝动脉栓塞化疗术、生物靶向治疗等技术虽有所提高,但肝癌患者的治疗效果并不乐观,肝癌患者5年生存率约为10%。楝酰胺(Rocaglamide A,Roc-A)是King等在1982年从楝科植物Aglaia elliptifolia中分离得到的一种环戊烷并苯并呋喃类化合物,并发现楝酰胺可以延长P388淋巴细胞白血病荷瘤小鼠的中位生存期。近来,Santagata等研究发现楝酰胺衍生物Rohinitib(RHT)通过抑制热休克因子(heat-shock transcription factor 1,HSF-1)活性和葡萄糖的摄取而发挥抗肿瘤作用。Stone SD等研究发现楝酰胺衍生物Aglaroxin C具有和RHT类似的抗肿瘤作用,国内关于楝酰胺衍生物Aglaroxin C的体内外实验研究尚无文献报道。目的观察楝酰胺衍生物Aglaroxin C对人HepG2肝癌细胞的体外增殖影响,并初步探讨该化合物对H22肝癌移植瘤小鼠的抗肿瘤作用。方法1.体外培养人HepG2肝癌细胞,取对数生长期细胞分别加入不同浓度Aglaroxin C和顺铂作用24h、48h、72 h后,采用细胞计数试剂盒(Cell Counting Kit-8,cck-8)检测Aglaroxin C和顺铂对人HepG2肝癌细胞的细胞增殖毒性,计算细胞增殖抑制率及Aglaroxin C半数抑制浓度(50%inhibiting concentration,IC)。2.建立小鼠肝癌移植瘤模型,随机分为尾静脉对照组、尾静脉0.1mg组、瘤内对照组、瘤内0.05mg组、瘤内0.1mg组,隔天给药,共给药四次,给药期间监测小鼠肿瘤体积变化,末次给药后24小时,剖取出肿瘤组织,计算肿瘤抑制率。取部分肿瘤组织行苏木精-伊红染色(Hematoxylin-Eosin Staining,HE染色)显微镜下观察肿瘤组织的病理学变化。结果1.体外实验结果分析:同一时间点随Aglaroxin C药物浓度的逐渐增加,人HepG2肝癌细胞的增殖抑制率随之增加(F=175.64、F=37.36、F=36.35,P8h、72h的IC分别为73nM、25 nM、82 nM;24h、48h、72h的Aglaroxin C10nM组与顺铂5μM组细胞增殖抑制率比较,差异无统计学意义(P>0.05);显微镜下观察,随着Aglaroxin C浓度增加,肝癌细胞数量逐渐减少,细胞形态变圆、皱缩,失去极性,贴壁能力下降,死亡细胞增多。2.体内实验表明,同种给药方式下,给药组小鼠肿瘤体积、瘤质量明显小于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。尾静脉0.1mg组、瘤内0.05mg组、瘤内0.1mg组肿瘤抑制率分别为24.64%、27.83%、53.91%。结论楝酰胺衍生物Aglaroxin C可以显著抑制人HepG2肝癌细胞的体外增殖;对H22肝癌移植瘤小鼠具有显著的抗肿瘤作用,未来可能成为一种新型的治疗肝癌的药物。

关键词： Aglaroxin C 肝癌细胞 cck-8实验移植瘤小鼠抗肿瘤作用

一种新型生物材料——玉米醇溶蛋白多孔支架的质量监控

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Engineering 2017年第1期 277-288页

作者：张玥李伟迎兰润王瑾晔 School of Biomedical Engineering Shanghai Jiao Tong University

我们之前的研究显示玉米醇溶蛋白具有良好的生物相容性和机械特性。由玉米醇溶蛋白多孔支架制成的第一个产品——一种可吸收的骨替代物,已经通过了国家食品药品监督管理总局医疗器械的生物学评价（ISO 10993）。然而,作为一种三类医疗器... 详细信息

我们之前的研究显示玉米醇溶蛋白具有良好的生物相容性和机械特性。由玉米醇溶蛋白多孔支架制成的第一个产品——一种可吸收的骨替代物,已经通过了国家食品药品监督管理总局医疗器械的生物学评价（ISO 10993）。然而,作为一种三类医疗器械,在其进入市场前需要进行质量监控,这些监控包括原材料的质量监控、灭菌方法的选择和生物相容性的评价。在本文中,我们通过氨基酸分析（AAA）和十二烷基硫酸钠–聚丙烯酰氨凝胶电泳（SDS-PAGE）研究了四种玉米醇溶蛋白,来监控其组成和纯度,以控制原材料的质量。我们用SDS-PAGE研究了三种灭菌方式对玉米醇溶蛋白多孔支架的影响,并比较了在不同γ射线剂量下SDS-PAGE图谱的变化。我们发现在剂量20;0 kGy范围内,γ射线灭菌过程中玉米醇溶蛋白的肽链没有发生断裂或聚合,这表明γ射线灭菌对于玉米醇溶蛋白多孔支架是适用的。对于细胞相容性,我们发现使用MTT实验和cck-8实验来评估玉米醇溶蛋白膜上细胞的增殖是有区别的,由于在cck-8实验中背景的吸光度差异较小,我们认为cck-8实验更为适合。

关键词：玉米醇溶蛋白氨基酸分析十二烷基硫酸钠–聚丙烯酰氨凝胶电泳 γ射线灭菌 MTT实验 cck-8实验

不同统计软件在医药生物学教学实验数据处理中的应用比较

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中国医药科学 2024年第2期14卷 74-77页

作者：翟渊粉罗志丹石晓司鑫鑫江苏海洋大学药学院江苏连云港222005

目的探讨不同统计软件在医药生物学实验中的应用,以加强药学等相关专业学生在医药生物学实验中的数据处理能力。方法以cck-8实验中运用不同软件计算半抑制浓度(IC_(50))值为例,介绍Excel、Origin、SPSS以及GraphPad Prism在医药生物学... 详细信息

目的探讨不同统计软件在医药生物学实验中的应用,以加强药学等相关专业学生在医药生物学实验中的数据处理能力。方法以cck-8实验中运用不同软件计算半抑制浓度(IC_(50))值为例,介绍Excel、Origin、SPSS以及GraphPad Prism在医药生物学实验中的应用。结果发现Excel、Origin、SPSS以及GraphPad Prism统计软件在医药生物学实验中具有广泛的应用价值,但在本科生教学中的应用仍有待于进一步的发掘。结论通过比较不同统计软件的应用,有助于药学专业学生选择合适的软件进行数据处理,实现对研究结果的快速、科学处理,并得出正确的结论,从而提高医药生物学实验的教学质量。

关键词：统计分析软件 cck-8实验 IC_(50)值医药生物学数据处理

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