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Plant Communications 2023年第4期4卷 77-87页

作者： Vasiliki Zacharaki Shiv Kumar Meena Peter Kindgren UmeåPlant Science Centre Department of Forest Genetics and Plant PhysiologySwedish University of Agricultural Sciences90187 Umea°Sweden

Non-coding transcription is present in all eukaryotic genomes,but we lack fundamental knowledge about its importance for an organism’s ability to develop *** plants,emerging evidence highlights the essential biological role of non-coding transcription in the regulation of coding ***,we have few molecular insights into this ***,we show that a long isoform of the long noncoding RNA SVALKA-L(SVK-L)forms a natural antisense transcript to the host gene cbf1 and negatively regulates cbf1 mRNA levels at normal temperatures in the model plant Arabidopsis ***,we show detailed evidence for the specific mode of action of *** pathway includes the formation of double-stranded RNA that is recognized by the DICER proteins and subsequent downregulation of cbf1 mRNA ***,the cbf1-SVK regulatory circuit is not only important for its previously known role in cold temperature acclimation but also for biomass production at normal *** study characterizes the developmental role of SVK-L and offers mechanistic insight into how biologically important overlapping natural antisense transcripts can act on and fine-tune the steady-state levels of their host gene’s mRNA.

关键词： SVALKA cis-natural antisense transcript non-coding transcription cbf1 Arabidopsis

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拟南芥cbf1与植物对低温和干旱的抗性

遗传 2004年第3期26卷 394-398页

作者：刘粉霞谭振波朱建清邓晓建北京市农林科学院北京农业生物技术研究中心北京100089 四川农业大学水稻研究所温江611130

对冷驯化过程中基因表达差异的认识,使抗冻基因(COR)的克隆及其功能的分析成为研究冷驯化过程的主要目标。在拟南芥和其他抗冻植物中,分离了许多COR基因,这些基因对植物抗冻起着非常重要的作用。在拟南芥COR调控的研究中,发现了cbf转录... 详细信息

对冷驯化过程中基因表达差异的认识,使抗冻基因(COR)的克隆及其功能的分析成为研究冷驯化过程的主要目标。在拟南芥和其他抗冻植物中,分离了许多COR基因,这些基因对植物抗冻起着非常重要的作用。在拟南芥COR调控的研究中,发现了cbf转录因子的基因家族,其中cbf1能调控一组COR基因的表达。近年来,在冷敏植物如番茄和玉米中也发现了cbf类似基因,拟南芥cbf1基因在转基因番茄中的过量表达提高了植株的抗寒和抗旱性。这一研究结果展示了拟南芥cbf1类似基因的应用可能为冷敏植物抗寒和抗旱性的品种改良提供一条新的途径。

关键词： COR cbf1 低温和干旱胁迫抗冻植物冷敏植物

冷诱导基因转录因子cbf1的组成型表达对植物的抗寒性及生长发育的影响

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核农学报 2005年第6期19卷 465-468,455,F0003页

作者：韦善君孙振元巨关升韩蕾余龙江华中科技大学生命科学与技术学院湖北武汉430074 中国林业科学研究院林业研究所北京100091

通过农杆菌介导法将玉米泛素启动子(Pubi)调控的cbf1基因以及CaMV35启动子调控的GUS基因一起转化烟草,研究了冷诱导基因的转录因子cbf1(CRT/DRE binding factor 1)对植物抗寒性及生长发育的影响。结果表明:cbf1的组成型表达增强了冷敏... 详细信息

通过农杆菌介导法将玉米泛素启动子(Pubi)调控的cbf1基因以及CaMV35启动子调控的GUS基因一起转化烟草,研究了冷诱导基因的转录因子cbf1(CRT/DRE binding factor 1)对植物抗寒性及生长发育的影响。结果表明:cbf1的组成型表达增强了冷敏感植物的抗寒性;在表型上使植株矮壮,叶片着生密集,叶色深绿,叶厚度增加;促进侧枝生长,延长营养生长期,推迟花期;对植株的结实性无明显影响。植株抗寒能力以及表型变化程度与cbf1的表达强度相关。因此,利用cbf1基因进行植物遗传改良时应根据物种的应用特点采用合适的表达调控策略。

关键词： cbf1 转基因烟草抗寒性生长发育

类番茄茄和多毛番茄cbf1基因转化烟草的表达调控分析

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华中农业大学学报 2017年第6期36卷 8-16页

作者：葛君张瑶宫超陈宏宇王傲雪胡春祥东北林业大学林学院哈尔滨150040 东北农业大学生命科学学院哈尔滨150030

利用农杆菌介导的叶盘法将类番茄茄(Solanum lycopersicoides)和多毛番茄(Lycopersicon habrochaites)的cbf1基因转入普通烟草(Nicotiana tabacum L.),通过分析转基因烟草在低温胁迫条件下目的基因的表达水平并结合转录组数据分析差异... 详细信息

利用农杆菌介导的叶盘法将类番茄茄(Solanum lycopersicoides)和多毛番茄(Lycopersicon habrochaites)的cbf1基因转入普通烟草(Nicotiana tabacum L.),通过分析转基因烟草在低温胁迫条件下目的基因的表达水平并结合转录组数据分析差异表达的基因,揭示cbf1基因在烟草中发挥抗冷作用的机制与相关性。结果显示:低温胁迫下,转基因烟草的抗低温能力高于非转基因的野生型;Slcbf1和Lhcbf1基因在普通烟草中过量表达后,转录组测序分析表明Slcbf1基因转化的烟草植株与野生型烟草植株相比,差异表达基因为53个,其中33个表达上调,20个表达下调;Lhcbf1基因转化的烟草和野生型烟草植株相比,差异表达的基因为106个,表达上调的有62个,表达下调的有44个。表明在烟草中过表达Slcbf1和Lhcbf1会影响转基因烟草中受其调控的下游基因的表达水平,进而提高烟草的抗冷能力。

关键词： cbf1 类番茄茄多毛番茄烟草转录组

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植物cbf1转录因子的生物信息学分析

林业科学 2010年第6期46卷 43-50页

作者：蒋瑶陈其兵四川农业大学林学院雅安625014

利用生物信息学手段,对GenBank中18种不同植物cbf1的氨基酸序列进行比对及系统发育树的构建,并对其氨基酸的组成、等电点、亲水/疏水性、蛋白质的二级结构和三级结构及功能域进行分析预测。结果表明:18种不同植物cbf1的N端存在富含精氨... 详细信息

利用生物信息学手段,对GenBank中18种不同植物cbf1的氨基酸序列进行比对及系统发育树的构建,并对其氨基酸的组成、等电点、亲水/疏水性、蛋白质的二级结构和三级结构及功能域进行分析预测。结果表明:18种不同植物cbf1的N端存在富含精氨酸和赖氨酸残基的核定位信号(NLS)、与DNA结合的AP2核心结构域以及C端的酸性氨基酸。构建cbf1进化树,并对其分子进化进行探讨。cbf1的氨基酸主要是脂肪族类,都含有非极性氨基酸Ala,其蛋白等电点多数为酸性,且为不稳定亲水性蛋白。α-螺旋和无规则卷曲是18种不同植物cbf1最大量的结构元件,而β-转角和延伸链则散布于整个蛋白质中。不同植物cbf1蛋白的亚细胞定位存在一定的差异。三维结构检测表明此模型的结构符合立体化学规则。

关键词： cbf1 生物信息学分子进化

低温胁迫下拟南芥cbf1超表达突变体胞质中Ca^(2+)浓度的变化

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植物学报 2009年第3期44卷 283-289页

作者：张国增白玲宋纯鹏河南大学生命科学学院河南省植物逆境生物学重点实验室开封475001

低温严重影响植物的生长,低温刺激可引起植物细胞中Ca2+浓度迅速升高。以拟南芥(Arabidopsis thaliana)cbf1超表达突变体为材料,研究了低温处理时cbf1基因的表达情况及胞质Ca2+的浓度变化。结果表明,cbf1本身可受低温诱导。同时将水母... 详细信息

低温严重影响植物的生长,低温刺激可引起植物细胞中Ca2+浓度迅速升高。以拟南芥(Arabidopsis thaliana)cbf1超表达突变体为材料,研究了低温处理时cbf1基因的表达情况及胞质Ca2+的浓度变化。结果表明,cbf1本身可受低温诱导。同时将水母发光蛋白基因转入该拟南芥突变体中并检测Ca2+的浓度变化,发现低温刺激时突变体细胞质中Ca2+的浓度变化幅度明显高于野生型,但液泡的胞质面两侧Ca2+的浓度变化相似。用EGTA和LaCl3处理拟南芥后,胞质Ca2+的浓度升高被抑制,并且cbf1突变体及对照胞质中的Ca2+浓度下降到同一水平。上述结果表明,Ca2+参与了cbf1应答低温信号的转导过程,并且cbf1超表达突变体可能是通过提高胞质Ca2+浓度来提高植物的抗低温胁迫能力。

关键词：水母发光蛋白拟南芥钙离子 cbf1 低温胁迫

钝挫伤及力竭运动对大鼠骨骼肌卫星细胞激活及Pax7/cbf1/DAPT含量的影响

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中国运动医学杂志 2018年第5期37卷 406-413页

作者：潘同斌叶雷雷马兵李娜仝昕炜汪亚如扬州大学体育学院扬州225009 南京体育学院训练处南京210014

目的:研究钝挫伤及力竭运动对大鼠骨骼肌卫星细胞激活及Pax7/cbf1/DAPT含量的影响,探索损伤修复的机制。方法:取7周龄雄性SD大鼠24只,分为4组,每组6只:安静对照组(C组);力竭运动即刻组(E0组);力竭运动后24 h组(E24组);力竭运动后48 h组(... 详细信息

目的:研究钝挫伤及力竭运动对大鼠骨骼肌卫星细胞激活及Pax7/cbf1/DAPT含量的影响,探索损伤修复的机制。方法:取7周龄雄性SD大鼠24只,分为4组,每组6只:安静对照组(C组);力竭运动即刻组(E0组);力竭运动后24 h组(E24组);力竭运动后48 h组(E48组)。另取18只SD大鼠,分为3组,每组6只:钝挫伤即刻组(Do组);钝挫伤后24 h组(D24组);钝挫伤后48 h组(D48组)。各组分别于安静状态、力竭运动后和钝挫伤后不同时间点,宰杀取血,分离血清。并取下右侧腓肠肌,将腓肠肌分为二份,一份立即进行细胞培养实验,另一份和血清一起在-80℃冰箱保存,用ELISA法检测Pax7、cbf1、DAPT的含量变化。另取新生3日龄鼠3只,宰杀后同样取右侧腓肠肌进行细胞培养实验。结果:(1)体外培养结果显示:新生鼠1天后即可见到梭形卫星细胞,其它各组的肌卫星细胞增长速度较慢,到第3天、第5天时各组开始大量增殖梭形细胞,且一直保持增殖良好并传代,第7天仍有较好的长势,且出现部分融合和微管。各组比较显示,安静对照组未见卫星细胞增殖;新生鼠卫星细胞数量最高,增殖速度也最快;而钝挫伤组的肌卫星细胞数量及增殖速度显著高于力竭运动组。(2)ELISA结果显示:力竭运动组和钝挫伤组各组骨骼肌、血清中cbf1和Pax7的含量与安静对照组相比均显著上调(Pcbf1含量差异极显著(P1),明显高于其他各组(P1)且明显低于其他各组(P1)钝挫伤及力竭运动可使肌卫星细胞激活、增殖分化,并且钝挫伤导致的肌卫星细胞的激活数量明显高于力竭运动组,可能由于钝挫伤的刺激更强所致。(2)钝挫伤和力竭运动可以使大鼠骨骼肌和血清Pax7和cbf1的含量上升,但下调DAPT的含量。Pax7和cbf1可能在骨骼肌卫星细胞激活及骨骼肌损伤修复中起着正向调节的作用,而DAPT可能起着负向调节作用。

关键词：钝挫伤力竭运动肌卫星细胞 Pax7 cbf1 DAPT

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黄瓜中cbf1基因的克隆及其表达分析

植物生理学通讯 2010年第3期46卷 245-248页

作者：李丹蒋欣梅于锡宏东北农业大学园艺学院蔬菜生理与设施园艺研究室哈尔滨150030

以黄瓜中RNA为模板,RT-PCR扩增出cbf1基因cDNA序列的部分片段。测序表明此基因与黄瓜cbf1基因的同源性达99.44%。RT-PCR方法检测结果显示,cbf1基因在低温和盐胁迫下的黄瓜中表达,而在干旱和ABA胁迫下则不表达。

关键词：黄瓜 cbf1 RT—PCR 基因表达

诱导型和组成型表达的冷诱导转录因子cbf1基因表达载体的构建

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华北农学报 2009年第3期24卷 41-45页

作者：杨志如云锦凤魏建华徐春波内蒙古农业大学内蒙古呼和浩特010019 北京农业生物技术研究中心北京100097 中国农科院草原研究所内蒙古呼和浩特010010

为研究冷诱导转录因子cbf1(C-repeat-binding-factor)基因对我国优良豆科牧草——苜蓿的抗寒性的改良作用,试验从拟南芥(Arabidopsis thaliana)中利用PCR方法分离了cbf1基因及其启动子,分别构建了CaMV 35S启动子和来源于拟南芥的cbf1启... 详细信息

为研究冷诱导转录因子cbf1(C-repeat-binding-factor)基因对我国优良豆科牧草——苜蓿的抗寒性的改良作用,试验从拟南芥(Arabidopsis thaliana)中利用PCR方法分离了cbf1基因及其启动子,分别构建了CaMV 35S启动子和来源于拟南芥的cbf1启动子驱动的农杆菌介导的植物转化表达载体,为下一步研究利用cbf1基因改良苜蓿抗逆性奠定了基础。

关键词：拟南芥 cbf1 cbf1启动子表达载体构建

筇竹cbf1基因的原核表达和多克隆抗体的制备

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园艺学报 2014年第2期41卷 375-381页

作者：肖艳林华杨丽娟陈世界熊泽平陈其兵四川农业大学风景园林学院成都611130 四川出入境检验检疫局技术中心成都610041 望江楼公园成都610021

以筇竹(Qiongzhuea tumidinoda Hsueh et Yi)叶片为试材,采用RT-PCR方法克隆其cbf1基因,并将cbf1连接到原核表达载体pET32a(+)上,经克隆测序确定所构建的重组载体pET32-QZ开放阅读框正确。将重组载体pET32-QZ转化大肠杆菌Rosetta2(DE3)... 详细信息

以筇竹(Qiongzhuea tumidinoda Hsueh et Yi)叶片为试材,采用RT-PCR方法克隆其cbf1基因,并将cbf1连接到原核表达载体pET32a(+)上,经克隆测序确定所构建的重组载体pET32-QZ开放阅读框正确。将重组载体pET32-QZ转化大肠杆菌Rosetta2(DE3)菌株,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE凝胶电泳,考马斯亮蓝染色,证明cbf1蛋白得到了高效表达,所表达蛋白是大小约为45 kD的融合蛋白。经镍柱纯化后作为抗原免疫家兔,制备cbf1蛋白特异性抗血清。所制备的多克隆抗体能够与融合蛋白和经冷诱导的筇竹叶片总蛋白在25 kD处出现杂交条带。上述结果表明,表达的目的蛋白可用于免疫组织化学、蛋白质印迹检测。

关键词：筇竹 cbf1 原核表达抗血清制备