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Protein & cell 2020年第10期11卷 776-782页

作者： jinliang Wang Lei Shuai chong Wang Renqiang Liu Xijun He Xianfeng Zhang Ziruo Sun Dan Shan jinying Ge Xijun Wang Ronghong Hua Gongxun Zhong Zhiyuan Wen Zhigao Bu State Key Laboratory of Veterinary Biotechnology Harbin Veterinary Research Institute Chinese Academy of Agricultural Sciences Harbin 150069 China National High containment Laboratory for Animal Diseases control and Prevention Harbin 150069 China

Dear Editor,As of june,2020,more than ten million cases of cOVID-19 have been reported worldwide.The causative pathogen of the disease is a novel coronavirus named severe acute respiratory syndrome coronavirus 2(SARS-coV-2)(World Health Organization,2020).Animal infection models are important to characterize the infection,pathogenesis,and immunology of SARS・coV・2,as well as for the development of medications and vaccines against cOVID-19.Mice are particularly attractive animal models for their identical genetic background,reliable reproducibility,well characterized biology,and the huge availability of research reagents and knockout animals.Models in inbreed mice such as BALB/c and C57BL/6J(c57),which are widely used in research,are highly desired.

关键词： C57BL/6J BALB/c respiratory

苯丙酮酸对动物焦虑抑郁行为和运动能力的影响

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江西农业大学学报 2019年第3期41卷 551-557页

作者：汪滔廖正睿杜满杨金苹何志惠曾宇贤梁冰清罗旭芳江青艳潘木水束刚华南农业大学动物科学学院/广东省动物营养调控重点实验室广东广州510642 广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所广东广州510610

研究不同剂量苯丙酮酸对C57BL/6J雄性小鼠焦虑抑郁行为和运动能力的影响。将24只8周龄C57BL/6J雄性小鼠随机分为3组,分别在普通日粮中添加0, 0.2%和0.4%的苯丙酮酸饲喂7周。利用旷场试验(O penfieldtest,OFT)、高架十字迷宫试验(H igh p... 详细信息

研究不同剂量苯丙酮酸对C57BL/6J雄性小鼠焦虑抑郁行为和运动能力的影响。将24只8周龄C57BL/6J雄性小鼠随机分为3组,分别在普通日粮中添加0, 0.2%和0.4%的苯丙酮酸饲喂7周。利用旷场试验(O penfieldtest,OFT)、高架十字迷宫试验(H igh plus maze,EPM)和悬尾试验(Tail suspension test,TST)评价小鼠的焦虑抑郁行为;运用跑步机、抓力试验和网屏试验评价小鼠的运动能力。OFT结果表明,普通日粮添加0.2%或0.4%的苯丙酮酸都能显著延长小鼠中央区域的活动时间和距离,增加小鼠进入中央区域的次数,减少周边区域的活动时间、距离和因应激引起的排便次数(P<0.05)。 EPM结果表明,苯丙酮酸显著增加小鼠进入开臂区域的次数,延长小鼠在开臂区域的活动时间(P<0.05)。 TST结果表明,苯丙酮酸显著缩短小鼠的不动时间,延长其活动时间(P<0.05)。跑步试验、抓力试验和网屏试验结果表明,0.2%的苯丙酮酸能显著提高小鼠爪握力,增加其运动耐力和爆发力(P<0.05)。研究结果提示,日粮添加苯丙酮酸可以有效缓解小鼠的焦虑抑郁行为,提高小鼠的运动能力。

关键词： C57BL/6J 小鼠苯丙酮酸焦虑抑郁运动能力

补精益视片对形觉剥夺性近视C57BL/6J小鼠视网膜及巩膜microRNA-21的表达影响

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补精益视片对形觉剥夺性近视C57BL/6J小鼠视网膜及巩膜microRNA-2...

作者：刘进成都中医药大学

学位级别：硕士

目的:探讨形觉剥夺性近视C57BL/6J小鼠视网膜及巩膜microRNA-21基因的表达,及补精益视片对其的影响,为近视的早期中药干预治疗提供理论依据,并为近视的防治提供新的研究方向。方法:本实验选用3周龄健康C57BL/6J小鼠,制备形觉剥夺性近视... 详细信息

目的:探讨形觉剥夺性近视C57BL/6J小鼠视网膜及巩膜microRNA-21基因的表达,及补精益视片对其的影响,为近视的早期中药干预治疗提供理论依据,并为近视的防治提供新的研究方向。方法:本实验选用3周龄健康C57BL/6J小鼠,制备形觉剥夺性近视模型,以右眼为实验眼进行比较,随机不平均分为3组:正常对照组(双眼不做任何处理)、模型组(第22日龄开始进行右眼形觉剥夺)、中药干预组(第22日龄开始右眼形觉剥夺同时中药灌胃)。实验一阶段:将正常对照组和模型组用等量蒸馏水灌胃,每日一次;中药干预组用补精益视片混悬液灌胃,浓度为54.6mg/ml,灌胃容量0.1ml/10g,小鼠在饲养3周至43日龄时随机处死中药干预组全组小鼠、正常对照组及模型组小鼠各3只,处死组分别标记为正常对照1组,模型1组、中药干预组。实验二阶段:将余下的对照组小鼠标记为正常对照2组(双眼不做任何处理),模型组小鼠右眼继续形觉剥夺,并随机平均分为5组:模型2组,中药低、中、高剂量组,阳性药物对照组;对正常对照2组和模型2组继续用等量蒸馏水灌胃,每日一次;中药低、中、高剂量组给予补精益视片混悬液灌胃,每日一次,浓度分别为:27.3mg/ml、54.6mg/ml、109.2mg/ml,灌胃容量0.1ml/10g;阳性药物对照组给予甲钴胺片混悬液灌胃,每日一次,容量0.01mg/ml,浓度0.1ml/10g,该部分所有小鼠继续饲养3周至64日龄处死。两个阶段实验前后测量小鼠屈光度,后将小鼠处死后测量各组小鼠眼轴长度,用qPcR检测法送基因公司检测实验两个阶段后各组小鼠视网膜及巩膜的mi croRNA-21基因表达量。结果:1.屈光度统计结果:实验前,3组小鼠屈光度差异无统计学意义(P>0.05)。实验一阶段后,模型1组较正常对照1组诱导出现近视,差异均具有统计学意义(P0.05)。3.视网膜及巩膜qPcR检测结果:视网膜基因结果:实验一阶段后:模型1组基因表达量较正常对照1组相对减少,模型1组较中药干预组相对减少,中药干预组表达量高于正常对照组,各组间基因表达量差异具有统计学差异(P0.05);实验二阶段后:模型2组基因表达量高于中药高、中、低剂量组,差异无统计学意义,中药低剂量组的表达量低于中药高剂量组,阳性药物对照组的表达量低于中药高剂量组,阳性药物对照组的表达量低于模型2组,正常对照2组低于模型2组,差异具有统计学意义(PC57BL/6J小鼠出现轴性近视,在形觉剥夺的过程中,补精益视片有一定延缓近视发展的作用。2、视网膜及巩膜microRNA-21表现出与近视相关的差异表达,随着近视的发展,该基因在视网膜及巩膜上有所上调,其可能参与眼球视网膜及巩膜的生长调节。3、补精益视片对近视C57BL/6J小鼠视网膜及巩膜microRNA-21有一定的调控作用,可能对视网膜和巩膜外基质重塑有一定的调节作用。

关键词：补精益视片形觉剥夺性近视 C57BL/6J 视网膜巩膜 microRNA-21

Tissue specific distribution of iNKT cells in three strains of mice:DBA/1, NOD/Ltj and C57BL/6J

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高剂量D-半乳糖复制C57BL/6J衰老小鼠模型的研究

第十三届全国免疫学学术大会

作者： Huifang Liu Shengde chen Huijuan Zhao Xiang Gao Ming Meng Hebei University School of Medicine

Background: DBA/1, NOD/Ltj and C57BL/6J mice are used as the preferred strains of mice for rheumatoid arthritis,type 1 diabetes and obesity models, respectively.Bridging the innate and acquired immunity, iNKT cells play an important regulatory role in autoimmune diseases and immune metabolic diseases.Objective: To compare the rates of iNKT cells and the proportion of iNKT1, iNKT2 in(peripheral blood), thymus, spleen, liver respectively in the mice of DBA/1, NOD/Ltj and C57BL/6J.Methods: Isolation of lymphocytes from peripheral blood, thymus, spleen and liver of mice.TcR β and cD1d tetramers were detected by using FcM to identify the rates of iNKT cells, endonuclear PLZF and T-bet were detected to confirm i NKT1 and iNKT2 subgroup in lymphocytes of these tissues.Results: The rates of iNKT cells was the lowest in the peripheral blood and the highest in the liver in all the three strains of mice.compared with DBA/1 and NOD/Ltj mice, the rates of iNKT cells in C57BL/6J mice was lower in thymus, but was higher in liver.compared with C57BL/6J and DBA/1 mice, the rates of iNKT cells in NOD/Ltj mice was lower in spleen and liver.In all the three strains of mice, the proportion of iNKT2 was relatively high in thymus, iNKT1 was relatively high in spleen and liver.Among them, C57BL/6J mice was the lowest proportion of iNKT2 in thymus, and NOD/Lt j mice had the highest proportion of iNKT1 in spleen and liver.conclusion: In the DBA/1, NOD/Ltj and C57BL/6J mice, the rates and subpopulation ratio of iNKT cells were significantly different in different tissues of the same strain mice and in different strains mice of the same tissue.

关键词： DBA/1 NOD/Ltj C57BL/6J iNKT cells iNKT1 iNKT2

来源： cnki会议评论

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中国现代医学杂志 2019年第16期29卷 10-16页

作者：赵焕东胥洪鹃李坚任彩萍陈玉祥中南大学湘雅医院手术室湖南长沙410008 中南大学基础医学院肿瘤研究所湖南长沙410078 中南大学湘雅医院普外科湖南长沙410008 中南大学湘雅药学院湖南长沙410013

目的探讨高剂量D-半乳糖复制C57BL/6J衰老小鼠模型的效果。方法选用30只9周龄雄性C57BL/6J小鼠,随机分为3组:500mg/(kg·d)D-半乳糖组、1000mg/(kg·d)D-半乳糖组及对照组,持续皮下注射8周后解剖小鼠,测定血液和组织中超氧化物歧化酶(S... 详细信息

目的探讨高剂量D-半乳糖复制C57BL/6J衰老小鼠模型的效果。方法选用30只9周龄雄性C57BL/6J小鼠,随机分为3组:500mg/(kg·d)D-半乳糖组、1000mg/(kg·d)D-半乳糖组及对照组,持续皮下注射8周后解剖小鼠,测定血液和组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)及丙二醛(MDA)等,Westernblotting检测组织中血红素加氧酶-1(HO-1)的表达,并对部分组织行苏木精-伊红染色。结果1000mg/(kg·d)D-半乳糖组小鼠出现不同程度的脱毛现象。D-半乳糖组小鼠的SOD和GSH-Px低于对照组(P<0.05),而MDA和HO-1高于对照组(P<0.05)。D-半乳糖组小鼠肝、脑组织有不同程度的衰老相关病理学改变。结论D-半乳糖可以成功诱导小鼠衰老,是复制小鼠衰老模型的较好选择。

关键词： D-半乳糖衰老模型 C57BL/6J 氧化应激

抗生素混合使用对C57BL/6J小鼠肠道菌群破坏的研究

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甘肃畜牧兽医 2019年第11期49卷 47-50,53页

作者：王悦萦粟雨芯李方琳李凌浩马忠仁西北民族大学生物医学研究中心生物工程与技术国家民委重点实验室甘肃兰州730030 西北民族大学生命科学与工程学院甘肃兰州730030

为探究抗生素对肠道菌群的破坏作用及肠道菌群失衡对机体的影响。本研究拟以C57BL/6J小鼠为研究对象,建立一个肠道菌群失衡的小鼠模型,并结合空腹血糖、血平板检测结果,通过综合分析实验结果,鉴定抗生素对小鼠肠道菌群的破坏作用,为以... 详细信息

为探究抗生素对肠道菌群的破坏作用及肠道菌群失衡对机体的影响。本研究拟以C57BL/6J小鼠为研究对象,建立一个肠道菌群失衡的小鼠模型,并结合空腹血糖、血平板检测结果,通过综合分析实验结果,鉴定抗生素对小鼠肠道菌群的破坏作用,为以后抗生素的合理使用提供理论依据。在抗生素的干预下,小鼠的肠道菌群数量减少,空腹血糖降低。抗生素滥用会导致小鼠肠道菌群遭到破坏,从而致使机体其他机能失衡。

关键词：抗生素肠道菌群失衡空腹血糖 C57BL/6J

γδT细胞及相关细胞因子在C57BL/6J小鼠金黄色葡萄球菌乳房炎模...

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作者：曹铎耀西北农林科技大学

学位级别：硕士

γδT细胞作为连接固有免疫应答与适应性免疫反应的的主要细胞，在抵抗病原菌入侵以及粘膜免疫中起着至关重要的作用。根据分泌细胞因子的不同，将γδT细胞分为IL-17+γδT细胞和分泌IFN-γ+γδT细胞。乳房炎过程中关于γδT细胞的变... 详细信息

γδT细胞作为连接固有免疫应答与适应性免疫反应的的主要细胞，在抵抗病原菌入侵以及粘膜免疫中起着至关重要的作用。根据分泌细胞因子的不同，将γδT细胞分为IL-17+γδT细胞和分泌IFN-γ+γδT细胞。乳房炎过程中关于γδT细胞的变化研究至今未见报道。本研究就此开展研究，以期为阐明乳房炎免疫防御机制提供参考资料。本研究通过对C57BL/6J小鼠为试验动物，首先建立小鼠葡萄球菌性乳房炎模型，采用临床观察和病理解剖、病理组织切片对乳房炎进行鉴定;采用流式细胞检测来测定乳腺和脾脏γδT细胞亚群在炎症过程中的变化;采用实时荧光PcR（Real Time-PcR， RT—PcR）检测分化和分泌相关细胞因子以及转录因子的变化;用ELISA测定了乳腺组织TGF-β、IL-6、IL-17等细胞因子的含量。研究获得以下结果： 1.在乳腺临床观察和组织病理切片结果显示，乳腺组织外部出现红肿，剖检后发现乳腺组织出血;通过病理切片发现大量炎性细胞浸润，乳腺腺泡结构瓦解。 2.流式细胞检测结果显示，分泌IFN-γ的γδT细胞在早期感染时细胞比例升高，而分泌IL-17的γδT细胞在感染中后期比例升高。 3. RT-PcR检测结果显示，IFN-γ+的γδT细胞分泌的细胞因子IFN-γ mRNA表达量在感染8h时达到峰值;与该细胞分化相关的细胞因子IL-12p35mRNA的表达量在4h时达到最大值;IFN-γ+的γδT细胞转录因子T-bet mRNA的表达量在8h达到最大值。IL-17+的γδT细胞与其分化相关的细胞因子IL-1β、IL-6和TGF-β1的mRNA表达量在感染8h时达到最大值;该细胞分泌的细胞因子IL-17mRNA表达量在12h和48h时出现峰值;该细胞的转录因子RORγt和表面标志ccR6均在感染后的12h和48h出现峰值。结论：该研究为乳房炎免疫防御机制提供了新的思路。

关键词： γδT 细胞金黄色葡萄球菌乳房炎 C57BL/6J 小鼠

C57BL/6J、129/Svj及其杂交一代小鼠的行为学比较研究

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实验动物与比较医学 2019年第6期39卷 429-436页

作者：万颖寒沈如凌王珏龚慧李俊董茹费俭上海实验动物研究中心/同济大学生命科学与技术学院模式生物技术联合实验室上海201203 上海南方模式生物科技股份有限公司上海模式动物工程技术研究中心上海201318

目的比较C57BL/6J和129/Svj两种不同遗传背景及其杂交一代(F1)在行为学表型上的差异。方法将C57BL/6J小鼠和129/Svj小鼠交配繁育,得到两种F1小鼠129B6F1和B6129F1,连同C57BL/6J和129/Svj按照不同性别分为8组,每组小鼠数量n≥12,进行旷... 详细信息

目的比较C57BL/6J和129/Svj两种不同遗传背景及其杂交一代(F1)在行为学表型上的差异。方法将C57BL/6J小鼠和129/Svj小鼠交配繁育,得到两种F1小鼠129B6F1和B6129F1,连同C57BL/6J和129/Svj按照不同性别分为8组,每组小鼠数量n≥12,进行旷场活动、悬尾、水迷宫、被动回避、热板实验等行为学研究,分别从焦虑、抑郁、学习记忆、热痛四个方面比较C57BL/6J和129/Svj小鼠及F1小鼠的行为表现。结果在旷场活动中,与129/Svj比较,F1在外周、边缘的活动差异显著(PC57BL/6J比较,F1寻找到平台的潜伏期和进入暗箱的潜伏期差异显著(P<0.05)。结论 F1的不同行为表型受到亲代的不同遗传背景影响。

关键词：近交系小鼠 C57BL/6J 129/Svj 杂交一代(F1) 行为学

莱菔子水溶性生物碱对c57bl-6j小鼠血脂及NO水平影响的实验研究

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莱菔子水溶性生物碱对C57BL-6J小鼠血脂及NO水平影响的实验研究

作者：李伟长春中医药大学

学位级别：硕士

目的:观察高脂饮食条件下,莱菔子水溶性生物碱对C57BL/6J小鼠血清胆固醇（Tc）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白-胆固醇（LDL-c）、高密度脂蛋白-胆固醇（HDL-c）和血清一氧化氮（NO）水平的影响,进而证明莱菔子具有降低血脂及升高血清... 详细信息

目的:观察高脂饮食条件下,莱菔子水溶性生物碱对C57BL/6J小鼠血清胆固醇（Tc）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白-胆固醇（LDL-c）、高密度脂蛋白-胆固醇（HDL-c）和血清一氧化氮（NO）水平的影响,进而证明莱菔子具有降低血脂及升高血清一氧化氮水平的作用,为临床新药的研究提供实验依据。方法:将C57BL/6J小鼠用电子秤逐个称重并详细记录,之后依据小鼠体重,由小到大标记后按随机数字表随机分为6组,分别为空白组、模型组、莱菔子水溶性生物碱高、中、低剂量组,血脂康组。每组10只,每笼5只。空白组喂饲普通饲料,其余各组均喂饲高脂饲料。空白组及模型组按等体积蒸馏水灌胃,其余四组分别按90mg/kg.d、60mg/kg.d、30mg/kg.d、0.2g/kg.d灌胃。实验8周后,通过生化检测,比较各组小鼠血清中总胆固醇（Tc）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-c）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-c）及血清NO的数值。结果:治疗8周后,与模型组比较,莱菔子水溶性生物碱各组及血脂康组均能降低C57BL/6J小鼠的血清Tc、TG和LDL-c水平,同时升高HDL-c水平,各治疗组均具有极显著性差异（P＜0.01）。莱菔子水溶性生物碱高剂量组与血脂康组比较分析,二者在降低Tc、TG、LDL-c和升高HDL-c方面没有显著性差异（P﹥0.05）。各治疗组均能升高小鼠血清NO水平,各组疗效均明显好于模型组,与血脂康组比较,莱菔子水溶性生物碱高剂量组无显著性差异（P＞0.05）,莱菔子水溶性生物碱中、低剂量组有极显著性差异（P﹤0.01）。结论:1.莱菔子水溶性生物碱能降低C57BL/6J小鼠（高脂饮食）血清总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇水平,并且还可升高高密度脂蛋白胆固醇水平,其调节血脂的作用与给药量呈正相关。2.莱菔子水溶性生物碱能升高C57BL/6J小鼠（高脂饮食）血清一氧化氮水平,其调节一氧化氮的水平与给药量呈正相关。

关键词：莱菔子水溶性生物碱 C57BL/6J 小鼠血脂血清NO

C57BL/6J小鼠Ⅱ型糖尿病模型的优化和评价

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C57BL/6J小鼠Ⅱ型糖尿病模型的优化和评价

作者：朱文烽南方医科大学

学位级别：硕士

研究背景与目的糖尿病对人类造成的健康危害和经济负担,仅次于肿瘤和心脑血管疾病而高居第三位,且发病率仍呈上升趋势。非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM,Ⅱ型糖尿病)发病率占所有糖尿病的90%-95%,其中60%-90%的Ⅱ型糖病患者体重超重,能够... 详细信息

研究背景与目的糖尿病对人类造成的健康危害和经济负担,仅次于肿瘤和心脑血管疾病而高居第三位,且发病率仍呈上升趋势。非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM,Ⅱ型糖尿病)发病率占所有糖尿病的90%-95%,其中60%-90%的Ⅱ型糖病患者体重超重,能够模拟和体现各型糖尿病病理生理变化的动物模型将有助于人们更好地理解疾病的本质并提供更好的治疗方法。高脂饮食+STZ(Streptozotocin,链脲佐菌素)诱导Ⅱ型糖尿病模型是一种常见的造模方法,通常是应用脂肪含量在30%左右的高脂饲料喂养后再辅以小剂量的STZ(小鼠的STZ剂量在200mg／kg左右),能够比较好地评价治疗Ⅱ型糖尿病的药物以及进行Ⅱ型糖尿病病理机理和并发症相关方面的研究,具备方法简单、经济、节省时间等优点。但是查阅早些的文献以及我们的一些实验情况来看,模型还存在着不少的缺点：比如有很多因素影响模型的成模效果,模型对于有些药物评价效果不好(例如格列美脲类的促胰岛素分泌药),把对胰岛素释放有促进效果的药物判为无效,因此在应用该模型对新型化合物进行体内药效评价和筛选时很有可能会漏筛一些极具开发价值的药物,所以很有必要对模型进行进一步的优化和改良。通过查阅文献和对以往实验的总结我们发现主要有三大因素影响着模型,分别是STZ单次注射剂量、首次注射的时间以及注射的次数,为了找出这几个因素间的最佳组合,我们进行了三因素三水平的正交实验并为这些因素设计了如下的水平：三个注射剂量为75mg/kg、85mg/kg、100mg/kg,首次注射时间为第2周、第3周、第4周,注射次为1次、2次、3次,根据正交表来安排这些组合,通过正交实验筛选出其中的最佳组合,然后对该组合进行模型的稳定性和重复性的考察,最后进行药效学评价,明确模型的适用范围。本课题的目的是进一步缩短造模时间,优化模型,使模型更加接近于Ⅱ型糖尿病并明确模型的适用范围,为抗糖尿病药物的筛选和评价提供一个更好的平台。方法和内容 1.进行三因素三水平的正交实验,考察不同因素间的组合对模型的影响,筛选出最佳的组合。我们采用脂肪含量为30%的高脂饮食,各因素和水平分别为：首次STZ注射的时间a1=第2周,a2=第3周,a3=第4周;STZ单次注射剂量的三个水平为b1=75mg/kg, b2=85mg/kg, b3=100mg/kg;STZ注射的次数c1=1次,c2=2次,c3=3次。查正交表安排正交试验,组合安排如下：a1b1c1,a1b2c2,a1b3c(c2), a2b1c2,a2b2c3(c2),a2b3c1,a3b1c3,a3b2c1,a3b3c2;根据以往的文献剔出不符合的组合换成括号里面的组合。3周龄的断乳C57BL/6J小鼠分为9组,每组8只,每周观察体重、血糖指标的变化,注射STZ前检测部分动物空腹血糖或非空腹血糖,以观察血糖升高情况。空腹血糖检测方法是：晚上8点换垫料禁食但自由饮水,到第2天早上8点,禁食12h。剪尾取血,用美国强生公司稳步倍加型血糖仪及试纸条检测血糖。注射完STZ后继续高脂饲料喂养。每周观察体重、进食量、血糖的变化,5周后处死,取内脏做病理切片,处死前两天进行OGTT实验。 2.口服糖耐量/OGTT实验实验前小鼠禁食15个小时,给葡萄糖前先测小鼠的空腹血糖,根据空腹血糖的情况确定给予葡萄糖的浓度：当空腹血糖平均150mg/dl时,用10%葡萄糖。经过30分钟、60分钟、120分钟测一次血糖,做成血糖曲线图,进行统计学的处理,比较各组间的差异,采用重复测量资料的方差分析,检验水准：a=0.05。 3.血脂以及胰岛素水平的测定采用血浆甘油三酯和游离脂肪酸检测试剂盒检测血脂水平;胰岛素的检测原理是采用ELISA方法,在96孔板上进行。检测方法和步骤：按照试剂盒的说明操作 4.组织病理学检测小鼠处死后,用组织剪和手术刀取合适大小的胰腺组织。经4%多聚甲醛固定24h以上,酒精梯度脱水、二甲苯梯度透明,浸蜡包埋,4度下过夜,切成4um切片贴于防脱硅化玻片上,烘干后备用。HE染色：经脱蜡、一系列的酒精梯度脱水、水洗、HE染色、脱水和封片固定,在光学显微镜下进行组织学病理变化的观察,对胰腺组织的坏死、凋亡以及变性情况进行评价。 5.对最佳组合进行模型稳定性和重复性考察：对最佳的组合进行8周以上的观察,以考察其稳定性。24只c57bl6j小鼠,分为模型组、对照组和高脂饮食组,每组8只,按照正交实验的结果进行造模;用7个不同批次小鼠进行造模以考察模型的重复性。 6.对优化后的模型进行药效学评价100只c57bl／6j小鼠中,80只喂饲高脂饲料,20只喂饲低脂饲料。高脂鼠其中的70只和低脂鼠其中的10只注射STZ(按优化后的方法)。70只高脂+STZ造模的小鼠中,选一部分用于药物试验,分为对照组和给药组,对照组为阴性对照和正常对照,每类药物分为高剂量和低剂量：二

关键词： C57BL/6J Ⅱ型糖尿病模型正交实验 STZ高脂饮食