检索结果-南通市图书馆

中国农业科学 2021年第10期54卷 2095-2104页

作者：郑信诗尚鹏祥李景远丁新伦吴祖建张洁福建农林大学植物保护学院植物病毒研究所/闽台作物有害生物生态防控国家重点实验室/福建省植物病毒学重点实验室

【目的】通过分析发现木尔坦棉花曲叶病毒(cotton leaf curl Multan virus,cLcuMuV)c4开放阅读框(open reading frame,ORF)附近可编码3个不同大小的蛋白,而NcBI数据库登录的cLcuMuV各个分离物编码的c4蛋白大小也不尽相同,本研究试图通... 详细信息

【目的】通过分析发现木尔坦棉花曲叶病毒(cotton leaf curl Multan virus,cLcuMuV)c4开放阅读框(open reading frame,ORF)附近可编码3个不同大小的蛋白,而NcBI数据库登录的cLcuMuV各个分离物编码的c4蛋白大小也不尽相同,本研究试图通过分析该3个假定的"c4 ORF"编码蛋白对病毒致病性的影响,以明确cLcuMuV c4蛋白ORF的确切定位。【方法】根据双生病毒编码蛋白的保守性,在cLcuMuV c4 ORF附近查找到3个大小不等的ORF,分别标记为c4-L(567 nt)、c4-M(546 nt)和c4-S(303 nt)。利用同源重组的方法将该3个ORF分别构建到PVX异源表达载体,通过农杆菌介导的植物接种法,分析PVX介导的3个蛋白在本氏烟表达对本氏烟症状的影响。利用同源重组的方法构建cLcuMuV野生型及c4-L或c4-S缺失突变型的侵染性克隆,同样通过农杆菌介导的植物接种法,分别与其伴随DNA-β分子的侵染性克隆接种本氏烟,分析c4-L或c4-S缺失对cLcuMuV致病性的影响,并利用Southern blot和Western blot分别对接种烟草的病毒基因组的积累量和病毒c4蛋白的表达量进行分析。同时利用Gateway系统载体对c4-L和c4-S蛋白在本氏烟叶片表皮细胞中的亚细胞定位进行分析。【结果】PVX异源表达载体接种本氏烟,结果发现PVX-c4-L和PVX-c4-S接种的本氏烟叶片卷曲、叶柄伸长,并且PVX-c4-S症状更重,而PVX-c4-M接种的本氏烟症状较轻或基本无症状,Western blot试验也在PVX-c4-L和PVX-c4-S接种组检测到了c4蛋白的表达,说明c4-S ORF编码的蛋白对PVX异源病毒的致病性影响最大。侵染性克隆接种本氏烟,结果发现野生型(cLcuMuV)和c4-L突变型(cLcuMuV-ΔL)接种的本氏烟叶片皱缩增生、叶柄和茎秆扭曲,而c4-S突变型(cLcuMuV-ΔS)和对照组(Mock)接种的本氏烟未显示任何症状,并且前两者的植株高度明显矮于后两者,同时Southern blot试验在cLcuMuV和cLcuMuV-ΔL接种的本氏烟中均检测到大量病毒基因组的积累,而Western blot试验也在其中检测到c4蛋白的表达,说明c4-S ORF编码的蛋白在cLcuMuV诱导寄主产生症状过程中起关键作用。亚细胞定位发现YFP-c4-L主要定位在本氏烟叶片表皮细胞的叶绿体,YFP-c4-S则定位在细胞膜或细胞质周边,并有点状聚集体结构。【结论】c4-S ORF编码的蛋白对cLcuMuV的侵染必不可少,而c4-L和c4-M ORF编码的蛋白对cLcuMuV的侵染不是必需。

关键词：木尔坦棉花曲叶病毒 c4开放阅读框致病性

来源：

同方期刊数据库评论

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：