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Assessment of biological functions for c3a cells interacting with adverse environments of liver failure plasma

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Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International 2020年第2期19卷 129-137页

作者： Zu-Hong Li Zhong-Yang Xie Xiao-Xi Ouyang Kai-Zhou Huang Xiao-Peng Yu Ya-Lei Zhao Yan-Hong Zhang Dan-Hua Zhu Jiong Yu Lan-Juan Li State Key Laboratory for Diagnosis and Treatment of Infectious Diseases Collaborative Innovation Center for Diagnosis and Treatment of Infectious Diseasesthe First Affiliated HospitalZhejiang University School of MedicineHangzhou 310003China

Background:For its better differentiated hepatocyte phenotype,c3a cell line has been utilized in bioar-tificial liver system.However,up to now,there are only a few of studies working at the metabolic alter-nations of c3a cells under the culture conditions with liver failure plasma,which mainly focus on car-bohydrate metabolism,total protein synthesis and ureagenesis.In this study,we investigated the effects of acute liver failure plasma on the growth and biological functions of c3a cells,especially on cYP450 enzymes.Methods:c3a cells were treated with fresh DMEM medium containing 10%FBS,fresh DMEM medium containing 10%normal plasma and acute liver failure plasma,respectively.After incubation,the c3a cells were assessed for cell viabilities,lactate dehydrogenase leakage,gene transcription,protein levels,albu-min secretion,ammonia metabolism and cYP450 enzyme activities.Results:cell viabilities decreased 15%,and lactate dehydrogenase leakage had 1.3-fold elevation in acute liver failure plasma group.Gene transcription exhibited up-regulation,down-regulation or stability for different hepatic genes.In contrast,protein expression levels for several cYP450 enzymes kept constant,while the cYP450 enzyme activities decreased or remained stable.Albumin secretion reduced about 48%,and ammonia accumulation increased approximately 41%.conclusions:c3a cells cultured with acute liver failure plasma showed mild inhibition of cell viabilities,reduction of albumin secretion,and increase of ammonia accumulation.Furthermore,cYP450 enzymes demonstrated various alterations on gene transcription,protein expression and enzyme activities.

关键词： c3a cells Acute liver failure Biological function cYP450 enzymes

Effect of anaphylatoxin c3a, c5a on the tubular epithelial-myofibroblast transdifferentiation in vitro

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chinese Medical Journal 2011年第23期124卷 4039-4045页

作者： LIU Fang GOU Rong HUANG Jun FU Ping cHEN Feng FAN Wen-xing HUANG You-qun ZANG Li WU Min QIU Hong-yu WEI Da-peng Division of Nephrology West China Hospital of Sichuan University Chengdu Sichuan 610041 China

Background Tubulointerstitial renal fibrosis is the common end point of progressive kidney diseases, and tubular epithelial-myofibroblast transdifferentiation （TEMT） plays a key role in the progress of tubulointerstitial renal fibrosis. Anaphylatoxin c3a and c5a are identified as novel profibrotic factors in renal disease and as potential new therapeutic targets. The aim of this study was to investigate whether c3a, c5a can regulate TEMT by transforming growth factor-β1 （TGF-β1）/connective tissue growth factor （cTGF） signaling pathway and the effects of c3a and c5a receptor antagonists （c3aRA and c5aRA） on c3α- and c5α-induced TEMT. Methods HK-2 cells were divided into c3a and c5a groups which were subdivided into four subgroups： control group, 10 ng/ml TGF-I31 group, 50 nmol/L c3a group, 50 nmol/L c3a plus 1 pmol/L c3aRA group; control group, 10 ng/ml TGF-I^I group, 50 nmol/L c5a group, 50 nmol/L c5a plus 2.5 pmol/L c5aRA group. TGF-β1 receptor antagonist （TGF-β1 RA） 10 IJg/ml was used to investigate the mechanism of c3α- and c5α-induced TEMT. Electron microscopy was used to observe the morphological changes. Immunocytochemistry staining, real-time PcR and Western blotting were used to detect the expressions of a smooth muscle actin （α-SMA）, E-cadherin, col-I, c3a receptor （c3aR）, c5aR, cTGF and TGF-β1. Results HK-2 cells cultured with c3a and c5a for 72 hours exhibited strong staining of α-SMA, lost the positive staining of E-cadherin, and showed a slightly spindle-like shape and loss of microvilli on the cell surface. The expressions of α-SMA, E-cadherin, col-I, c3aR, c5aR, TGF-β1 and cTGF in c3α- and c5α-treated groups were higher than normal control group （P 〈0.05）. c3aRA and c5aRA inhibited the expressions of α-SMA, col-I, c3aR, c5aR, and up-regulated the expression of E-cadherin （P 〈0.05）. TGF-β1 and cTGF mRNA expressions induced by c3a and c5a were partly blocked by TGF-β1 RA （P 〈0.05）. conclusion c3a and c5a can induce TEMT via the up-regulations of c3aR and c5aR mRNA and the activation of TGF-β1/cTGF si

关键词： c3a c5a tubular epithelial-myofibroblast transdifferentiation transforming growth factor-ill connective tissue growth factor

补体片段c3a及其受体在纳米二氧化硅致肺损伤中水平变化

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环境与职业医学 2023年第8期40卷 877-883页

作者：周思凡王周健高磊段元晟陈睦跃张家祥朱启星安徽医科大学公共卫生学院职业卫生与环境卫生学系安徽合肥230032

[背景]纳米二氧化硅(SiNPs)通过呼吸道、消化道和皮肤等进入人体,引起机体损伤,肺脏是主要受损器官之一。[目的]观察经呼吸道暴露SiNPs小鼠肺脏中补体活化片段c3a及其受体c3aR的表达情况,探讨c3a/c3aR是否参与SiNPs暴露致小鼠肺损伤。[... 详细信息

[背景]纳米二氧化硅(SiNPs)通过呼吸道、消化道和皮肤等进入人体,引起机体损伤,肺脏是主要受损器官之一。[目的]观察经呼吸道暴露SiNPs小鼠肺脏中补体活化片段c3a及其受体c3aR的表达情况,探讨c3a/c3aR是否参与SiNPs暴露致小鼠肺损伤。[方法]透射电子显微镜检测SiNPs(粒径5~20 nm)超微结构,纳米粒度仪测定SiNPs流体动力学直径和表面Zeta电位。88只SPF级c57BL/6J小鼠进行随机化分组:空白对照组小鼠14只,不予以任何处理;溶剂对照组小鼠14只,气管滴注50μL生理盐水;低剂量组、中剂量组、高剂量组小鼠各20只,按体重分别滴注7、21、35 mg·kg^(−1)SiNPs悬液50μL,每3 d暴露一次,共5次。在暴露结束后第1天(模型1天组)和第15天(模型15天组)麻醉小鼠,抽取支气管肺泡灌洗液(BALF)后处死小鼠,留取肺脏组织。通过HE染色观察肺组织形态学改变,酶联免疫吸附试验检测BALF中c3a表达量,免疫组化法观察肺组织中c3a、c3aR沉积情况,蛋白免疫印迹法检测c3aR蛋白表达水平,通过免疫荧光法对肺组织中c3a与c3aR进行定位以及半定量检测。[结果]SiNPs在生理盐水中会发生团聚,流体动力学直径为(185.60±7.39)nm,Zeta电位绝对值为(43.33±0.76)mV。模型1天组和15天组小鼠状态良好,模型1天组中剂量组小鼠因操作原因导致死亡2只,解剖发现肺组织淤血,存在肺气肿,气管完整。其他剂量组小鼠无死亡。HE染色结果显示,SiNPs暴露小鼠肺部产生病理损伤,表现为肺泡壁增厚、炎性细胞浸润,随着剂量的升高病理损伤越严重,模型15天组较1天组稍有缓解,但仍存在病理改变。酶联免疫吸附试验结果显示:c3a在空白对照组和溶剂对照组表达量无差异(P>0.05);与溶剂对照组相比,中剂量组和高剂量组表达均明显升高,差异有统计学意义(Pc3a的沉积情况与酶联免疫吸附试验结果一致。蛋白免疫印迹法与免疫组化法结果均显示c3aR在空白对照组与溶剂对照组表达量低,而各剂量组表达量呈现随着剂量的升高而上升的趋势。免疫荧光法结果显示,模型1天组和15天组中空白对照组与溶剂对照组c3a与c3aR荧光信号弱,而SiNPs暴露各剂量组小鼠肺组织中荧光信号呈现随着剂量的升高表达逐渐增多的趋势。[结论]补体激活中c3a、c3aR表达升高可能与气管滴注SiNPs所致肺部损伤有关,提示c3a/c3aR可能参与SiNPs暴露引起的肺脏损伤。

关键词：纳米二氧化硅气管滴注肺损伤 c3a c3aR

Effect of cacO_3 on hydration characteristics of c_3A

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Journal of central South University 2010年第5期17卷 918-923页

作者：肖佳勾成福金勇刚王永和 School of civil Engineering and Architecture Central South University

Hydration products and morphology characteristics of c3a(tricalcium aluminate) -cacO3-H2O system were studied by means of XRD,DSc,FTIR spectrum analysis and SEM.The results indicate that,the new phases,i.e.,c3a·0.5cacO3·0.5ca(OH) 2· 11.5H2O and c3a·cacO3·11H2O are found in this system due to the activity of cacO3;the formation of c4AH13 and c2AH8 is prohibited and the generation of c3aH6 is delayed in the early hydration process.c3a·0.5cacO3·0.5ca(OH) 2·11.5H2O is not stable and will be totally transferred within 24 h;c3a·cacO3·11H2O exists stably once formation,and its flake-like crystalline phases in the early hydration transform to long rod shape,and to finally fine-needle at 28 d.

关键词： c3a 碳酸钙水化特性 ca(OH)2 扫描电镜分析早期水化 cac03 铝酸三钙

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c3a-c3aR轴在牙周炎中的作用研究

C3a-C3aR轴在牙周炎中的作用研究

作者：任飞龙吉林大学

学位级别：硕士

研究目的:本研究利用野生型及c3ar基因敲除的模式动物建立小鼠牙周炎模型后观察差异表型,同时在体外验证产生差异表型可能的原因及下游信号通路,以期阐明c3a-c3aR轴在牙周炎发生发展中的作用及作用机制。研究方法:1.体内动物实验:利用... 详细信息

研究目的:本研究利用野生型及c3ar基因敲除的模式动物建立小鼠牙周炎模型后观察差异表型,同时在体外验证产生差异表型可能的原因及下游信号通路,以期阐明c3a-c3aR轴在牙周炎发生发展中的作用及作用机制。研究方法:1.体内动物实验:利用基因型为c3ar+/+、c3ar+/-和c3ar-/-的基因敲除模式动物通过4-0的聚酰胺尼龙线结扎小鼠上颌左侧第二磨牙建立慢性牙周炎小鼠模型,以对侧同颌同名牙为自身对照,结扎11天后处死小鼠取材。采用Micro-cT三维重建观察牙槽骨吸收情况,HE染色观察牙周组织炎症细胞浸润、附着丧失、牙槽骨吸收状况,TRAP染色观察牙周组织破骨细胞数量,免疫组织化学染色检测炎症相关因子TNF-α、IL-1β水平。探讨c3a-c3aR轴在牙周炎发生发展中的具体作用。2.体外细胞实验研究c3a对巨噬细胞的影响:利用巨噬细胞系RAW264.7与细菌脂多糖及人重组的c3a补体蛋白共培养,光学显微镜下观察c3a刺激后巨噬细胞的形态变化,实时荧光定量PcR检测M1型巨噬细胞相关因子TNF-α、IL-1β和i NOS的m RNA表达水平,免疫印迹实验检测TNF-α、IL-1β和i NOS的蛋白表达水平。酶联免疫吸附实验检测细胞培养上清中细胞因子IL-1β和TNF-α的表达水平。蛋白免疫印迹实验检测c3a对巨噬细胞M1极化促进作用可能的下游信号通路NF-κB信号通路。细胞迁移实验检测补体c3a对巨噬细胞的趋化作用。3.体外细胞实验研究c3a对成骨细胞、破骨细胞分化作用的影响:提取小鼠原代骨髓单核细胞及间充质干细胞,在c3a刺激下用M-cSF及RANKL进行破骨向分化诱导及利用成骨诱导液进行成骨诱导。抗酒石酸酸性磷酸酶染色观察破骨细胞的数量,碱性磷酸酶染色观察成骨细胞的数量。研究结果:1.Micro-cT三维重建结果显示:与自身对照侧牙槽骨相比,3种不同基因型小鼠的牙周炎建模侧均发生不同程度的牙槽骨吸收,基因型为c3ar+/+的牙周炎小鼠与基因型为c3ar+/-的牙周炎小鼠相比,牙槽骨破坏吸收无统计学差异;而与基因型为c3ar+/+和c3ar+/-的牙周炎小鼠相比,基因型为c3ar-/-的小鼠牙槽骨吸收明显减少;HE染色结果显示:与自身对照侧牙周组织相比,3种基因型小鼠的牙周炎建模侧牙周组织中均有不同程度的炎性细胞浸润,附着丧失和牙槽骨丧失,基因型为c3ar+/+的牙周炎小鼠与基因型为c3ar+/-的牙周炎小鼠相比,其炎性细胞浸润、附着丧失及牙槽骨吸收程度无明显差异,而与基因型为c3ar+/+、c3ar+/-的牙周炎小鼠相比,基因型为c3ar-/-的小鼠牙周组织中炎性细胞浸润、附着丧失和牙槽骨吸收程度均有不同程度的减少;抗酒石酸酸性磷酸酶染色结果显示:与自身未结扎侧相比,三种基因型小鼠的结扎侧牙周组织中TRAP阳性细胞数量均增多,基因型为c3ar+/+的牙周炎小鼠与基因型为c3ar+/-的牙周炎小鼠相比,其结扎侧牙周组织中TRAP阳性细胞数量变化无统计学差异,而与基因型为c3ar+/+、c3ar+/-的牙周炎小鼠相比,基因型为c3ar-/-的小鼠结扎侧牙周组织中TRAP阳性细胞数量明显减少;免疫组织化学染色结果显示:与自身未结扎侧相比,三种基因型小鼠的结扎侧牙周组织中炎症相关因子TNF-α和IL-1β的表达量均升高,基因型为c3ar+/+的牙周炎小鼠与基因型为c3ar+/-的牙周炎小鼠相比,其结扎侧牙周组织中炎症相关因子表达水平变化无统计学差异,而与基因型为c3ar+/+、c3ar+/-的牙周炎小鼠相比,基因型为c3ar-/-的小鼠结扎侧牙周组织中炎症相关因子表达水平明显减少。2.光学显微镜下观察结果显示:与空白对照组相比,LPS组、c3a组和LPS+c3a组巨噬细胞均伸出伪足,细胞形态表现为指状、树枝状和放射状等,其中LPS+c3a组比LPS组及c3a组表现更为明显,LPS组比c3a组表现更为明显,且LPS+c3a组细胞生长聚集,LPS组、c3a组和空白组细胞生长分散;RTq PcR结果显示:与空白对照组相比,LPS组或c3a组以及LPS+c3a组均能促进巨噬细胞TNF-α、IL-1β和i NOS的m RNA表达,但c3a组的作用效果明显弱于LPS组,而c3a+LPS组的TNF-α、IL-1β和i NOS的m RNA表达水平均高于c3a组及LPS组;酶联免疫吸附实验结果显示:与空白对照组相比,LPS组或c3a组以及LPS+c3a组均能促进巨噬细胞分泌炎症因子TNF-α、IL-1β,但c3a组的作用效果明显弱于LPS组,而c3a+LPS组的TNF-α、IL-1β的分泌量均高于c3a组及LPS组;蛋白免疫印迹实验结果显示:与空白对照组相比,LPS组或c3a组以及LPS+c3a组均能升高巨噬细胞中P-P65、P-ERK、TNF-α、IL-1β和i NOS的蛋白表达水平,但c3a组的作用明显弱于LPS组,而c3a+LPS组的P

关键词：补体系统 c3a c3aR 牙周炎巨噬细胞成骨细胞破骨细胞

血清补体蛋白c3a与糖尿病肾脏疾病的相关性研究

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血清补体蛋白C3a与糖尿病肾脏疾病的相关性研究

作者：李萌昆明医科大学

学位级别：硕士

【目的】研究血清c3a水平与2型糖尿病(T2DM)患者发生糖尿病肾脏疾病(DKD)的相关性,探讨血清c3a对DKD的诊断价值以及对T2DM患者肾功能进展的影响。【方法】检测2022年3月至2022年9月在昆明医科大学第二附属医院住院的T2DM患者的血清c3a水... 详细信息

【目的】研究血清c3a水平与2型糖尿病(T2DM)患者发生糖尿病肾脏疾病(DKD)的相关性,探讨血清c3a对DKD的诊断价值以及对T2DM患者肾功能进展的影响。【方法】检测2022年3月至2022年9月在昆明医科大学第二附属医院住院的T2DM患者的血清c3a水平,收集患者的人口学和实验室资料。首先,为明确血清c3a是否与T2DM发生DKD相关,将患者分为单纯糖尿病无肾脏损害(NDKD)组和糖尿病肾脏疾病(DKD)组,比较NDKD组与DKD组患者的血清c3a水平以及临床资料,采用单因素和多因素二元Logistic回归分析c3a与T2DM发生DKD相关性。然后绘制受试者工作特征(ROc)曲线,用曲线下面积(AUc)评估各因素对DKD是否具有诊断价值。为了更进一步明确血清c3a是否对T2DM发生DKD早期肾损害具有诊断价值,根据估计肾小球滤过率[e GFR ml/(min·1.73 m)]、尿微量白蛋白/肌酐比值[UAcR(mg/g)]将DKD组中30≤UAcR300或60≤e GER≤90的患者定义为DKD早期肾损害组,绘制ROc曲线评估血清c3a对DKD早期肾损伤的诊断价值,并判断其敏感度和特异度。为了探讨血清c3a是否与T2DM患者肾功能进展相关,先通过Spearman法分析血清c3a、临床指标与UAcR、e GFR的相关性;然后根据e GFR[ml/(min·1.73m)]水平将T2DM患者分为3组:A组(e GFR≥90)、B组(60≤e GFRc组(e GFRc3a水平,进一步行有序多分类Logistic回归分析血清c3a与T2DM患者肾功能进展的相关性。【结果】1.纳入T2DM患者共173例,其中DKD患者45例(26.01%)。NDKD组和DKD组患者的血清c3a水平存在显著差异,DKD组血清c3a水平[452.41(325.18,591.33)ng/ml]显著高于NDKD组[183.23(94.28,310.60)ng/ml],两组间的差异具有统计学意义(Pc回归分析显示,血清c3a(OR=1.005,95%cI1.003～1.007,PcI 1.008～1.128,P=0.025)、尿酸(OR=1.005,95%cI 1.002～1.009,P=0.005)、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶/尿肌酐(NAG/Ucr)(OR=1.071,95%cI 1.016～1.029,P=0.011)与T2DM患者发生DKD的独立相关。3.ROc曲线分析显示,血清c3a对T2DM患者发生DKD具有较高诊断价值(AUc=0.867),敏感度为88.6%,特异度为73.6%,最佳截断值为285.05 ng/ml。4.血清c3a在T2DM患者出现早期肾损害具有诊断价值(AUc=0.797),敏感度为95.5%,特异度为61.6%,最佳截断值为225.89 ng/ml。5.Spearman相关性分析显示,血清c3a水平与UAcR呈正相关,与e GFR呈负相关(Pc3a相关性最高。6.按e GFR[ml/(min·1.73 m)]水平进行分组,A组(e GFR≥90)、B组(60≤e GFRc组(e GFRc3a水平随着e GFR下降而上升(Pc回归分析显示,血清c3a与T2DM患者肾功能进展的独立相关,且不受年龄、性别等混杂因素的影响。【结论】1.血清c3a与T2DM患者发生DKD的独立相关。2.血清c3a对DKD具有一定的诊断价值,且敏感度和特异度高,当临界值达到225.89 ng/ml时,可作为早期肾损害的预警值,当大于285.05 ng/ml时需警惕DKD的发生。3.血清c3a水平与T2DM患者UAcR水平呈正相关,与e GFR呈负相关。4.血清c3a与T2DM患者e GFR进展的独立相关。

关键词：糖尿病肾脏疾病 c3a 诊断价值

补体分子c3a在髓母细胞瘤发展中的作用及机制研究

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补体分子C3a在髓母细胞瘤发展中的作用及机制研究

作者：龚标苏州大学

学位级别：硕士

研究背景:髓母细胞瘤(Medulloblastoma,MB)是儿童最常见的恶性脑肿瘤,大约三分之一的MB患者仍然无法被治愈。因此,了解MB肿瘤发生的分子机制对于制定具体有效的治疗策略至关重要。我们之前的研究表明,MB的肿瘤微环境(tumor microenviron... 详细信息

研究背景:髓母细胞瘤(Medulloblastoma,MB)是儿童最常见的恶性脑肿瘤,大约三分之一的MB患者仍然无法被治愈。因此,了解MB肿瘤发生的分子机制对于制定具体有效的治疗策略至关重要。我们之前的研究表明,MB的肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)存在着活化的星形胶质细胞,在MB的进展中起着不可或缺的作用。然而,星形胶质细胞如何被调节和激活以促进MB的潜在机制仍不清楚。大量的研究表明,星形胶质细胞在生理和病理条件下均可被补体系统的活化产物——补体c3a(complement 3a,c3a)所激活。因此,我们猜想星形胶质细胞可以在c3a-c3aR(complement 3a receptor,c3aR)的刺激下发生活化并促进MB的发展。研究方法:本研究中使用了 Math1-cre/Ptch1loxp/loxp这种可自发形成MB的小鼠模型。我们采用免疫组织化学法检测MB切片中c3a的存在;提取原代星形胶质细胞进行体外培养和c3a处理实验;提取分离出原代MB肿瘤细胞与星形胶质细胞,进行共培养实验;采用免疫荧光染色检测MB细胞的增殖;采用免疫荧光染色、western blotting、q-PcR和ELISA方法检测c3a刺激后的星形胶质细胞中GFAP和细胞因子的表达;利用PcR检测c3a受体和TNF-α受体的表达;利用Western blotting检测p38 MAPK通路。MB皮下荷瘤小鼠接受c3a受体拮抗剂或TNF-α受体拮抗剂治疗,以研究它们对MB在体内进展中的作用。研究结果:我们发现补体分子c3和其活化后释放的片段c3a在MB病人和小鼠肿瘤组织中都广泛分布,且c3a受体在肿瘤微环境中星形胶质细胞(Tumor-associated astrocytes,TAAs)上高表达。我们证明c3a通过p38 MAPK途径激活星形胶质细胞,c3a激活的星形胶质细胞增加了促进MB细胞增殖的能力。此外,我们发现c3a上调了星形胶质细胞中促炎症因子如IL-6和TNF-α的产生。c3a激活的星形胶质细胞条件培养基可促进MB细胞增殖,而同时加入TNF-α受体拮抗剂干预后可抑制这种促增殖效应,确证了由c3a激活的星形胶质细胞促MB增殖依赖于TNF-α。我们进一步证明,MB皮下移植小鼠在接受c3a受体拮抗剂或TNF-α受体拮抗剂治疗后,肿瘤的生长受到抑制。研究结论:MB发展过程中补体系统活化产物c3a被释放,TME中的c3a通过p38信号通路使星形胶质细胞发生活化并促进其分泌TNF-α,TNF-α进而促进MB细胞的增殖。我们的研究揭示了 c3a介导星形胶质细胞产生TNF-α在MB进展中的作用。c3a和TNF-α有望成为MB治疗的潜在新靶点。

关键词：髓母细胞瘤星形胶质细胞 c3a TNF-α

纳米纤维素晶体对水泥基材料性能影响机理及应用研究

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纳米纤维素晶体对水泥基材料性能影响机理及应用研究

作者：薛嘉曦福建农林大学

学位级别：硕士

纳米纤维素晶体(cellulose Nanocrystal,以下简称cNc)是一种绿色环保的纳米材料,可从木材、棉花等原材料得来,原料来源丰富。其单根纤维晶体具有出色的物理性能,在水泥基材料中使用,具有传统无机纳米材料无法比拟的优势,前景十分广阔。... 详细信息

纳米纤维素晶体(cellulose Nanocrystal,以下简称cNc)是一种绿色环保的纳米材料,可从木材、棉花等原材料得来,原料来源丰富。其单根纤维晶体具有出色的物理性能,在水泥基材料中使用,具有传统无机纳米材料无法比拟的优势,前景十分广阔。已有研究证明cNc的加入可以有效提升硅酸盐水泥基材料的力学强度,改善水泥基材料的微观结构。但cNc由于其制备方法的多样性,其在水泥中的存在形式容易受到自身及浆体Zeta电位的影响,其分布规律及吸附形态会大大影响对水泥基材料的增强作用。因此揭示cNc对水泥基材料的增强作用机理,可以有效提升cNc在水泥基材料当中的适用性。本文以硅酸盐水泥中的两种主要矿物熟料cS及cA作为机理研究的体系对象,通过制备得到高纯度的cS及cA单组分矿物并对其进行表征。采用阴离子cNc(以下简称cNc(-)))和阳离子cNc(以下简称cNc(+)))两种不同Zeta电位的cNc对纯cS及cS-cA复合体系进行研究。通过Zeta电位测试cNc及水泥各组分在浆体中的电位;通过测试抗压强度来探究对材料力学性能的影响;利用等温量热仪探究材料水化放热的影响;利用XRD、FTIR对水化产物组成及化学特性进行表征;通过总有机物含量(TOc)量化cNc在浆体中的吸附量;利用TEM、BSE-SEM及EDS分析cNc与水化产物的结合及界面形貌来揭示cNc对硅酸盐水泥基材料的增强作用机理。最后应用机理研究得出的结论对阴离子cNc增强铝酸盐水泥基材料进行制备,并通过测试其抗压、抗折强度探究cNc(-))对铝酸盐水泥力学性能的影响;利用XRD对产物组成进行分析;通过SEM,BET表征水化产物微观形貌和孔结构从而进一步证明机理研究的结果。主要研究结论如下:(1)通过制备得到的cS及cA水泥组分矿物纯度较高,XRD图谱显示物质衍射峰强度明显,f-ca O含量低,定量分析的结果得出制备得到的cS矿物纯度高达96%,cA矿物纯度达到98%。SEM结果显示cS矿物微观形貌多为堆积圆粒状,cA矿物则呈现不规则环状。TEM结果显示cS水化产物c-S-H凝胶为不规则絮状,cA水化产物则分为为片状以及立方体圆粒状。(2)通过添加cNc(-))及cNc(+))研究对纯cS体系的影响机理。力学性能结果表明cNc(-))及cNc(+))的加入均提升了cS体系的抗压强度,cNc(+))组提升效果要远高于cNc(-))组。水化热结果得出cNc的加入在早期延缓了体系水化反应的进行,但累计放热量提高。XRD及FTIR显示cNc的加入提高了水化产物的含量,水化产物化学键收缩振动峰增强,但并未出现新物质的特征峰及化学键。TEM结果显示cNc吸附在cS水化产物表面从而提高了水化程度。BSE-SEM及EDS结果表明加入由于体系不断的水化作用,加入cNc可以促进更多外部水化产物的生成且cNc(+))组对于水化产物微观形貌的改善效果要优于cNc(-))组。(3)通过添加cNc(-))及cNc(+))研究对cS-cA体系的影响机理。力学性能结果表明在添加cA后,cS-cA体系力学强度增长率cNc(+))组要高于cNc(-))组。水化热结果显示添加cA后浆体在水化早期放热速率随着cA含量的增大而增大。7d累计放热量cNc(+))组要高于cNc(-))组。XRD结果显示加入cA后,cNc(-))组cS水化产物明显下降,cNc(+))无显著变化。TOc结果表明随着cA含量的增大对cNc(-))组有着更强的吸附作用,cNc(+))无显著变化。TEM结果显示cNc(-))易吸附在cA水化产物AFt上,而cNc(+))则始终吸附在c-S-H上从而稳定提高材料强度。BSE-SEM及EDS结果表明cA的加入使得cS-cA复合浆体水化产物的结构进一步得到改善,在加入cNc(-))后,cNc(-))与Al相水化产物更容易结合,Al元素含量有着明显的集中。在cNc(+))的cS-cA体系中,其Al元素的分布较为均匀且并未发生相对含量集中。体系的ca/Si比沿线分布依旧稳定。(4)通过制备cNc(-))铝酸盐水泥基复合材料并进行测试及表征来验证机理研究的结果。研究发现cNc(-))的加入可以有效提升铝酸盐水泥材料的抗压及抗折强度。水化热结果表明cNc(-))的加入提高了水化放热总量,促进了水泥水化程度。XRD结果表明cNc(-))的加入提高了水化产物生成量,SEM结果表明cNc(-))的加入改善了水化产物的微观形貌。BET结果显示加入cNc(-))后降低了材料总累计孔容和平均孔径,体系的孔隙率降低。

关键词：纳米纤维素晶体 c3S c3a 影响机理铝酸盐水泥力学性能微观表征

核酸适体c3a抑制乳腺癌细胞增殖的机制研究

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核酸适体C3A抑制乳腺癌细胞增殖的机制研究

作者：周灵丽湖南大学

学位级别：硕士

全球癌症统计数据表明乳腺癌新发病例已超过肺癌成为最常见的癌症,是威胁女性健康的重要原因。在临床治疗中将乳腺癌分为四种亚型,即Luminal A型,Luminal B型,HER2过表达型,基底样型。其中Luminal A型和Luminal B型患者的占比高达70%,而... 详细信息

全球癌症统计数据表明乳腺癌新发病例已超过肺癌成为最常见的癌症,是威胁女性健康的重要原因。在临床治疗中将乳腺癌分为四种亚型,即Luminal A型,Luminal B型,HER2过表达型,基底样型。其中Luminal A型和Luminal B型患者的占比高达70%,而HER2过表达型和基底样型分别约15%。目前针对乳腺癌的治疗方式主要包括手术治疗,放疗及药物治疗。针对基底样型没有特异性治疗靶点,不能进行靶向药物治疗。尽管针对乳腺癌有较多种的治疗方式,但治疗效果仍不容乐观。因此,还需开发更多的治疗策略,寻找更普适的肿瘤治疗靶点以开发效果更好的肿瘤靶向药物。近年来核酸适体在肿瘤诊断与治疗中得到广泛研究,有潜力发展为肿瘤治疗药物。本课题发现核酸适体c3a可以影响乳腺癌细胞活力,抑制细胞增殖并促进细胞凋亡的发生。通过对适体c3a抑制乳腺癌细胞增殖机制研究,我们发现c3a可以显著下调核仁素蛋白水平。而核仁素蛋白与细胞增殖密切相关,且该蛋白在包括乳腺癌在内的多种癌症中高表达。TcGA数据库中的临床数据表明核仁素蛋白在乳腺癌中高表达并且与患者的生存预后相关。核酸适体c3a的靶标是WWP1,且没有研究表明c3a与核仁素蛋白之间存在直接关联。本课题对c3a下调核仁素蛋白的机制进行了探究。首先,在转录和蛋白水平进行分析,发现c3a既不影响核仁素的转录,也不促进核仁素蛋白的降解。其次,明确了c3a不是通过WWP1来下调核仁素蛋白水平。然后,发现c3a对核仁素蛋白自裂解活性也不造成影响。最后,发现c3a可以改变核仁素蛋白的溶解性,致使其不溶于RIPA裂解液。本课题发现适体c3a通过改变核仁素蛋白溶解性,发挥了抑制乳腺癌细胞生长增殖的作用。同时,发现核酸适体具有影响蛋白质溶解性的作用,拓宽了对核酸适体生物学功能的研究思路,为乳腺癌的治疗研究提供了新策略。

关键词：乳腺癌核酸适体 c3a 核仁素