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c-myb基因启动子表观遗传修饰对该基因表达的影响

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基因组学与应用生物学 2019年第9期38卷 3973-3980页

作者：赵丽蓉李小霞姜蓬垒兰树雨张俊芳韩兵社上海海洋大学水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室水产科学国家级实验教学示范中心海洋生物科学国际联合研究中心

已有研究表明c-myb 基因在白血病等癌症中发挥重要的作用,但是目前关于c-myb 基因的调控机制尚不清楚。为了探究c-myb基因启动子区域表观修饰对该基因表达调控的作用,我们利用cRISPR-dcas9系统,在融合了p300 和DNMT3A蛋白后,分别和靶向c... 详细信息

已有研究表明c-myb 基因在白血病等癌症中发挥重要的作用,但是目前关于c-myb 基因的调控机制尚不清楚。为了探究c-myb基因启动子区域表观修饰对该基因表达调控的作用,我们利用cRISPR-dcas9系统,在融合了p300 和DNMT3A蛋白后,分别和靶向c-myb 启动子的引导RNA (guide RNA, gRNA)共转染到小鼠急性髓系白血病M1 细胞(mouse myeloid leukemia, M1)中,chIP-qPcR 结果显示dcas9-p300 和dcas9-DNMT3A 分别成功结合到c-myb 基因启动子区域,并伴随有启动子区域组蛋白修饰H3K27 乙酰化或DNA甲基化5-mc 的显著增高。Western blotting及RT-qPcR 结果表明dcas9-p300 使M1 细胞中c-myb表达明显上调(pcas9-DNMT3A 使c-myb 表达明显下调(pcas9-p300可以对抗白细胞介素6 (interleukelin-6, IL-6)引起的c-myb基因表达下调。本研究结果证明c-myb 基因启动子的表观遗传修饰可以影响该基因的表达,为研究白血病等癌症提供了新的治疗思路和方案。

关键词： c-myb cRISPR-dcas9 DNA甲基化 H3K27 乙酰化表观遗传修饰

c-myb反义RNA重组载体构建及其包装细胞株的建立

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中山医科大学学报 2001年第3期22卷 235-237页

作者：马会慧姚集鲁李刚姚春斓陈雪娟杨绍基中山医科大学附属第三医院传染科广东广州510630

【目的】构建反义c myb重组逆转录病毒载体并建立其包装细胞株。【方法】采用RT PcR方法 ,获取目的基因 ,通过TA克隆方法克隆入 pUc19,再反向亚克隆入逆转录病毒载体 pDOR中。采用DOTAP法将重组逆转录病毒载体转入包装细胞 ,以NIH3T3细... 详细信息

【目的】构建反义c myb重组逆转录病毒载体并建立其包装细胞株。【方法】采用RT PcR方法 ,获取目的基因 ,通过TA克隆方法克隆入 pUc19,再反向亚克隆入逆转录病毒载体 pDOR中。采用DOTAP法将重组逆转录病毒载体转入包装细胞 ,以NIH3T3细胞为靶细胞测定产病毒滴度。【结果】序列测定结果与GenBank中序列一致。c myb基因片段已定向克隆入 pDOR。细胞转染表明 ,已形成稳定的包装细胞株PA317/pDOR myb ,产病毒滴度达 5 2× 10 4 ～ 9 5× 10 4 cFU/mL。【结论】成功构建了含有反义c myb的重组逆转录病毒质粒。

关键词：肝纤维化 c-myb 反义RNA 载体构建分子克隆

c-myb对胚胎干细胞体外造血分化及定型的影响

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第三军医大学学报 2005年第6期27卷 485-489页

作者：陈洁平 Deborah clarke constanze Bonifer 第三军医大学西南医院血液内科重庆400038 Molecular Medicine Unit St. James's University Hospital University of Leeds

目的　通过体外胚胎干细胞培养体系对ES细胞进行c- myb等位基因打靶,建立c -myb+ +及c -myb ES细胞模型的基础上,探讨转录因子c- myb在造血定型和分化中的作用。方法　通过体外ES细胞去除LIF半固体介质EBs的造血分化体系,采用... 详细信息

目的　通过体外胚胎干细胞培养体系对ES细胞进行c- myb等位基因打靶,建立c -myb+ +及c -myb ES细胞模型的基础上,探讨转录因子c- myb在造血定型和分化中的作用。方法　通过体外ES细胞去除LIF半固体介质EBs的造血分化体系,采用甲基纤维素克隆形成分析和real timePcR观察c- myb+ +及c -myb ES细胞,比较分析其不同分化过程及阶段中造血各系形成和相关基因表达变化。结果　c -myb+ +及c -myb ES胚胎体(EBs)大小及形态相似,c -myb+ +ESEBs形成显著多于c -myb 。c -myb+ +组cFU- E出现在第6天,高峰为第8天;c- myb 组也有相似的改变,但其 cFU- E数目少于c -myb+ +。c -myb+ +组cFU- M高峰为第7天;c- myb 也有相似的改变,但其cFU- M数目高于c- myb+ +。c -myb+ +cFU -GM出现在第7天,高峰为第12天,而c -myb 未见cFU -GM形成。real timePcR分析显示,c -myb 及 c- myb+ +β globin,zeta globin,Lys,c- fms基因表达无显著变化。结论　低水平的c -myb不影响祖细胞的扩增,但影响其终末分化。低水平的c -myb表达在造血定型中对红系的发育具有一定的影响,而对巨噬细胞的发育成熟无明显影响。 c -myb的表达水平对造血分化相关基因的表达没有明显的影响。

关键词： c-myb 胚胎干细胞分化造血定型

反流性食管炎、Barrett食管及食管腺癌黏膜组织中c-myb的表达

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南方医科大学学报 2010年第12期30卷 2693-2695页

作者：任春蓉董蕾郭晓燕西安交通大学第二附属医院陕西西安710004

目的探讨反流性食管炎、Barrett食管及食管腺癌黏膜组织中原癌基因c-myb mRNA水平的表达及意义。方法经胃镜取材,采用荧光定量RT-PcR方法检测反流性食管炎、Barrett食管和食管腺癌组织中c-myb基因mRNA水平的表达。结果 c-myb mRNA在正... 详细信息

目的探讨反流性食管炎、Barrett食管及食管腺癌黏膜组织中原癌基因c-myb mRNA水平的表达及意义。方法经胃镜取材,采用荧光定量RT-PcR方法检测反流性食管炎、Barrett食管和食管腺癌组织中c-myb基因mRNA水平的表达。结果 c-myb mRNA在正常对照和反流性食管炎组食管黏膜中呈低表达(1±0.13,1.207±0.1),在Barrett食管与食管腺癌组织中呈明显的高表达(1.389±0.1;2.364±0.12),且从正常食管黏膜→反流性食管炎→Barrett食管→食管腺癌的发生、发展过程中c-myb mRNA的表达呈现渐进性增强。结论 c-myb基因的异常表达与反流性食管炎、Barrett食管和食管腺癌的发生、发展密切相关,c-myb mRNA的表达水平可用作监测Barrett食管和食管腺癌早期发生及干预治疗措施实施的有用指标。

关键词： Barrett食管食管腺癌 c-myb

c-myb对小鼠体外受精的影响及作用机制的分析

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中国应用生理学杂志 2005年第1期21卷 81-85,i003页

作者：吴凌峰郑月慧张静江西医学院生理教研室江西南昌330006

目的 :本文采用免疫组织化学方法观察myb转录因子家族成员c myb蛋白在小鼠精子和卵母细胞卵丘复合物中的分布。方法 :建立小鼠体外受精模型 ,用不同浓度反义c myb寡脱氧核苷酸 (c mybASODNs)与精子、卵母卵丘细胞复合物共孵育观察其... 详细信息

目的 :本文采用免疫组织化学方法观察myb转录因子家族成员c myb蛋白在小鼠精子和卵母细胞卵丘复合物中的分布。方法 :建立小鼠体外受精模型 ,用不同浓度反义c myb寡脱氧核苷酸 (c mybASODNs)与精子、卵母卵丘细胞复合物共孵育观察其对小鼠体外受精率的影响 ,并进一步探讨c mybASODNs对小鼠体外受精率的影响机制。结果 :在颗粒细胞胞核和精子的头部有c myb蛋白分布。c mybASODNs呈剂量依赖性抑制小鼠体外受精率 (小鼠体外受精率在空白组、低、中、高浓度c mybASODNs组、无义tatODNs组分别为 34.97%、30 .89%、2 0 .14 %、16 .6 8%、34.4 7% )。GABA、P4、Verapamil和dbcAMP与c mybASODNs共同作用时 ,GABA、P4、dbcAMP三者均逆转c mybASODNs对受精的抑制作用 ,(小鼠体外受精率在空白组、中浓度c mybASODNs组、GABA、P4、Verapamil和dbcAMP组、分别为 34.81%、2 2 .96 %、4 0 .83%、39.12 %、7.4 6 3%、4 0 .6 1% ) ,GABA、P4、和dbcAMP三者对精子中的c myb蛋白免疫组化染色阳性的细胞百分率无明显影响。Verapamil能抑制小鼠体外受精 ,并协同c mybASODNs的抑制作用 ,且使精子中的c myb蛋白免疫组化染色阳性的细胞百分率明显下降。结论 :c mybA SODNs与受精密切相关 ,Verapamila可能通过调节精子中的c

关键词： c-myb 反义寡脱氧核苷酸体外受精

Distal regulation of c-myb expression during IL-6 induced differentiation in murine myeloid progenitor M1 cells

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Mda-7/IL-24与c-myb在Burkitt淋巴瘤中的表达及其相关性研究

中国生物化学与分子生物学会2016年全国学术会议

作者： Junfang Zhang Bingshe Han Xiaoxia Li Juraj Bies Penglei Jiang Richard P.Koller Linda Wolff Key Laboratory of Aquacultural Resources and Utilization Ministry of Education College of Fishery and Life Science Shanghai Ocean University

The c-myb transcription factor is a major regulator that controls differentiation and proliferation of hematopoietic progenitor cells,which is frequently deregulated in hematological diseases such as lymphoma and *** of the mechanisms regulating the transcription of c-myb gene is challenging since it lacks a typical promoter and multiple factors are *** previous studies identified some distal regulatory elements in the upstream regions of c-myb gene in murine

关键词： c-myb murine myeloid progenitor M1 cells distal regulatory element Hoxa9 PU.1

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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免疫学杂志 2017年第8期33卷 691-696页

作者：马鸣魏思思武一鹏杨兴肖赵连梅王雪晓张璁刘丽华单保恩河北医科大学第四医院检验科石家庄050011 河北医科大学第四医院科研中心石家庄050011 河北医科大学第四医院感染管理科石家庄050011 河北医科大学第四医院生物治疗科石家庄050011

目的深入探讨Burkitt淋巴瘤患者瘤组织中Mda-7/IL-24与c-myb的表达水平、相关性及其临床意义。方法收集65例Burkitt淋巴瘤患者的瘤组织及33例正常淋巴结组织;通过免疫组化及Western blot技术检测各组织中Mda-7/IL-24与c-myb蛋白的表达水... 详细信息

目的深入探讨Burkitt淋巴瘤患者瘤组织中Mda-7/IL-24与c-myb的表达水平、相关性及其临床意义。方法收集65例Burkitt淋巴瘤患者的瘤组织及33例正常淋巴结组织;通过免疫组化及Western blot技术检测各组织中Mda-7/IL-24与c-myb蛋白的表达水平,并对Mda-7/IL-24与c-myb表达水平进行相关性分析;收集患者临床资料,分析瘤组织Mda-7/IL-24及c-myb蛋白表达水平与患者年龄、性别、临床分期、是否骨髓浸润、Ecog评分及IPI指数之间的关系;分析瘤组织Mda-7/IL-24及c-myb蛋白表达水平与患者生存期之间的关系,并制作生存曲线。结果与正常淋巴结组织相比,Burkitt淋巴瘤组织中Mda-7/IL-24的表达水平明显降低,而c-myb的表达水平则明显增高;65例Burkitt淋巴瘤患者瘤组织中Mda-7/IL-24与c-myb蛋白表达水平呈明显的负相关(r=-0.474 9);瘤组织低表达Mda-7/IL-24、高表达c-myb的患者其临床分期晚、易骨髓转移、瘤细胞增殖活性强、IPI积分较高,同时患者生存期较短(Pc-myb的表达水平呈明显负相关,低表达Mda-7/IL-24或高表达c-myb是Burkitt淋巴瘤患者临床预后较差的指标。

关键词： Mda-7/IL-24 c-myb Burkitt淋巴瘤

原癌基因c-erbB_2、c-myb对小鼠卵母细胞体外成熟的影响

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生殖与避孕 2005年第12期25卷 712-715页

作者：郑莉萍吴磊汪小浪郑月慧江西医学院生理教研室南昌330006 江西医学院第一附属医院肿瘤科南昌330006

目的:探讨原癌基因c-erbB2、c-myb对小鼠卵母细胞体外成熟的影响。方法:建立小鼠卵母细胞体外培养模型,用不同浓度反义c-erbB2寡脱氧核苷酸(c-erbB2ASODN)和反义c-myb寡脱氧核苷酸(c-myb ASODN)分别与未成熟卵母细胞共孵育,观察c-erbB... 详细信息

目的:探讨原癌基因c-erbB2、c-myb对小鼠卵母细胞体外成熟的影响。方法:建立小鼠卵母细胞体外培养模型,用不同浓度反义c-erbB2寡脱氧核苷酸(c-erbB2ASODN)和反义c-myb寡脱氧核苷酸(c-myb ASODN)分别与未成熟卵母细胞共孵育,观察c-erbB2ASODN和c-myb ASODN对卵母细胞体外成熟的影响。结果:c-erbB2ASODN和c-myb ASODN均能呈剂量依赖方式抑制24h 卵母细胞的GVBD率和PB1排出率,并显著延迟其成熟的时间,而无义tat寡脱氧核苷酸则无此作用。结论:原癌基因c-erbB2和c-myb均在卵母细胞成熟过程中起着重要的作用。

关键词： c-erbB2 c-myb 卵母细胞反义寡脱氧核苜酸(ASODN) 体外成熟

组蛋白化学修饰改变对c-myb结合的影响及其在职业性苯中毒患者造血损伤中的作用

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中国病理生理杂志 2016年第5期32卷 907-911页

作者：施益芬陈晶晶俞康温州医科大学附属第一医院血液科浙江温州325015

目的:研究职业性苯中毒造血损伤患者中与拓扑异构酶Ⅱα启动子调控因子c-myb结合的组蛋白化学修饰改变,证实组蛋白乙酰化修饰水平改变在职业性苯中毒造血损伤中发挥一定的作用。方法:25例职业性苯中毒再生障碍性贫血患者为病例组,25例... 详细信息

目的:研究职业性苯中毒造血损伤患者中与拓扑异构酶Ⅱα启动子调控因子c-myb结合的组蛋白化学修饰改变,证实组蛋白乙酰化修饰水平改变在职业性苯中毒造血损伤中发挥一定的作用。方法:25例职业性苯中毒再生障碍性贫血患者为病例组,25例正常人为对照组,提取骨髓单个核细胞,用染色质免疫沉淀(ch IP)探讨与c-myb结合的组蛋白乙酰化和甲基化水平的改变,RT-PcR法检测c-myb的mRNA表达水平,组蛋白去乙酰化酶(HDAc)试剂盒检测HDAc活性的变化。结果:与正常对照组相比,职业性苯中毒再生障碍性贫血患者c-myb与乙酰化组蛋白H4、H3结合的水平下降(Pc-myb的mRNA表达水平降低,HDAc活性明显升高,差异均有统计学显著性(Pc-myb可能通过组蛋白乙酰化修饰的改变在职业性苯中毒造血损伤中发挥作用。

关键词：苯 c-myb 组蛋白乙酰化组蛋白甲基化染色质免疫沉淀组蛋白去乙酰化酶