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学习记忆通路抑制剂T-5224和KN-62对翘嘴鳜C-FOS及味觉受体t1r1表达的影响

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水生生物学报 2022年第6期46卷 880-887页

作者：肖倩倩梁旭方庄武元蔡文静华中农业大学水产学院华中农业大学鳜鱼研究中心武汉430070 长江经济带大宗水生生物产业绿色发展教育部工程研究中心武汉430070

为探究翘嘴鳜(Siniperca chuatsi)中原癌基因C-FOS (proto-oncogene C-FOS)对摄食相关的味觉受体t1r1(taste receptor type 1 member 1, t1r1)的调控作用,研究采用学习记忆通路相关抑制剂T-5224、KN-62处理鳜脑细胞,通过不同浓度抑制剂处理发现T-5224对C-FOS的起负调控作用而KN-62对C-FOS起正调控作用,同时筛选出适合的处理时间及浓度。30μmol/L T-5224处理24h,鳜脑中C-FOS及t1r1的mRNA表达显著降低(PC-FOS及t1r1的mRNA表达却极显著升高(P0.05)。以上结果说明,翘嘴鳜脑细胞味觉受体t1r1转录水平变化,可能是通过学习记忆因子cfos基因调控,而C-FOS可能通过其他途径调控t1r1的转录,但不是DNA甲基化。同时为翘嘴鳜驯化后摄食偏好变化提供理论依据。

关键词：学习记忆通路抑制剂 C-FOS t1r1 DNA甲基化翘嘴鳜

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翘嘴鳜早期基因C-FOS的分子特征与表达

广东海洋大学学报 2023年第3期43卷 117-123页

作者：张丽欣梁旭方武佳琪华中农业大学水产学院/鳜鱼研究中心湖北武汉430070

【目的】分析翘嘴鳜(Siniperca chuatsi)早期基因C-FOS的两个亚型fosaa和fosab的分子特征,探究二者学习记忆功能。【方法】根据翘嘴鳜C-FOS编码区设计引物,克隆翘嘴鳜fosab基因,通过翘嘴鳜全基因组数据库获取fosaa基因,用生物信息学分... 详细信息

【目的】分析翘嘴鳜(Siniperca chuatsi)早期基因C-FOS的两个亚型fosaa和fosab的分子特征,探究二者学习记忆功能。【方法】根据翘嘴鳜C-FOS编码区设计引物,克隆翘嘴鳜fosab基因,通过翘嘴鳜全基因组数据库获取fosaa基因,用生物信息学分析翘嘴鳜fosaa、fosab的结构特征,用荧光定量PcR检测fosaa、fosab在翘嘴鳜健康组织以及投喂饲料7、56 d后脑组织中的表达量。【结果】fosab全长2498 bp,开放阅读框(ORF)1152 bp,与fosaa基因相同,有4段外显子;二者基因序列差异较大,DNA序列及氨基酸序列相似性分别为40.4%、46.0%。进化树分析显示,翘嘴鳜fosAB与其他鱼类以及人(Homo sapiens)、褐家鼠(Rattus norvegic)、小鼠(Mus musculus)和野猪(Sus scrofa)等哺乳动物的C-FOS聚为一支,所有动物fosAA聚为一支,翘嘴鳜fosAB蛋白与哺乳类动物C-FOS亲缘关系比与fosAA的关系更近。同线性分析显示,C-FOS基因进化较为保守,处于tmed10和jdp基因之间。荧光定量分析表明,翘嘴鳜fosaa和fosab基因在脑和皮肤中均有较高的表达量,fosaa基因在脑中表达量最高,而fosab基因在皮肤中表达量最高。经饲料驯食后,驯化56 d时fosaa基因表达量显著高于驯化7 d(Pfosab基因相对表达量无显著差异(P>0.05)。【结论】翘嘴鳜fosaa和fosab基因分子特征差异较大,发挥的功能不尽相同,学习记忆相关基因fosaa在56 d饲料驯食中有重要作用。

关键词： C-FOS 克隆组织表达进化分析学习记忆

C-FOS与丝裂原活化蛋白激酶14相互作用对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖凋亡的影响

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中华风湿病学杂志 2022年第8期26卷 536-541,I0003页

作者：南鹤张锌李爽吉林大学中日联谊医院风湿免疫科长春130033 吉林大学中日联谊医院神经内四科长春130033

目的探讨C-FOS与丝裂原活化蛋白激酶14(MAPK14)相互作用参与调控类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(RA-FLS)增殖、凋亡的机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链式反应PcR(RT-qPcR)、蛋白质印迹法检测RA-FLS和正常成纤维样滑膜细胞(FLS)细胞c-F... 详细信息

目的探讨C-FOS与丝裂原活化蛋白激酶14(MAPK14)相互作用参与调控类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(RA-FLS)增殖、凋亡的机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链式反应PcR(RT-qPcR)、蛋白质印迹法检测RA-FLS和正常成纤维样滑膜细胞(FLS)细胞C-FOS mRNA和蛋白表达水平。将RA-FLS细胞分为C-FOS过表达组(转染pcDNA3.1-Myc-C-FOS质粒)、过表达对照组(转染pcDNA3.1-Myc空质粒)、C-FOS沉默组(转染siRNA-C-FOS)、沉默对照组(转染siRNA-Nc)和空白对照组(未加任何处理)。细胞计数试剂(ccK-8)检测各组细胞增殖能力,流式细胞实验检测各组细胞凋亡的变化,蛋白质印迹法检测各组细胞C-FOS、MAPK14、p-MAPK14、ki-67、Bax蛋白表达水平。间接免疫荧光实验检测C-FOS和MAPK14在细胞中的定位关系。免疫共沉淀方法检测C-FOS-MAPK14的相互作用关系。采用GraphPad Prism 5统计学软件进行数据分析,正态分布的数据以x(-)±s表示,2组间比较采用独立样本t检验;多组比较采用应采用方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果RA-FLS细胞中C-FOS mRNA(5.37±0.91)相对表达量明显高于FLS细胞(1.46±0.32)(t=9.94,PC-FOS在RA-FLS蛋白水平(1.12±0.15)均显著高于FLS(0.81±0.07)(t=3.18,P=0.017)。与空白对照组和过表达对照组相比,过表达C-FOS可显著促进RA-FLS细胞增殖,抑制细胞凋亡率,上调细胞p-MAPK14、ki-67蛋白水平,下调细胞Bax蛋白水平(均PC-FOS可显著抑制RA-FLS细胞的增殖,增加细胞凋亡率,下调细胞p-MAPK14、ki-67蛋白水平,上调细胞Bax蛋白表达水平(均PC-FOS与MAPK14均可在RA-FLS细胞核中表达,免疫共沉淀实验验证C-FOS与MAPK14蛋白具有相互作用。结论C-FOS与MAPK14相互作用促进磷酸化MAPK14蛋白表达,从而促进RA-FLS增殖,并抑制凋亡。

关键词：关节炎类风湿细胞增殖细胞凋亡 C-FOS 丝裂原活化蛋白激酶14

即早基因C-FOS在THP-1单核巨噬细胞亚型极化中的差异表达

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中国应用生理学杂志 2020年第6期36卷 534-538,543页

作者：陈启文吴国栋颜治云张文成张梅天津中医药大学研究生院天津301617 武警后勤学院天津300309 天津市肝脏胰腺纤维化与分子诊疗实验室天津300162 武警特色医学中心心内科天津300162

目的:探讨即早基因C-FOS在THP-1巨噬细胞亚型极化过程中的表达变化。方法:运用PMA刺激诱导THP-1单核细胞极化为巨噬细胞,观察C-FOS在单核细胞极化过程中的表达变化;在PMA刺激的基础上,分别运用LPS和IL-4诱导THP-1巨噬细胞向M1及M2亚型极... 详细信息

目的:探讨即早基因C-FOS在THP-1巨噬细胞亚型极化过程中的表达变化。方法:运用PMA刺激诱导THP-1单核细胞极化为巨噬细胞,观察C-FOS在单核细胞极化过程中的表达变化;在PMA刺激的基础上,分别运用LPS和IL-4诱导THP-1巨噬细胞向M1及M2亚型极化,实时定量PcR及Western blot技术分析刺激24 h时,细胞亚型标记物cD274、cD86和cD163的表达变化,并动态观察诱导极化过程中,C-FOS的表达情况。结果:C-FOS在PMA刺激THP-1单核细胞分化为巨噬细胞过程中蛋白和mRNA水平显示上调;LPS诱导THP-1巨噬细胞极化为M1型过程中,C-FOS蛋白和mRNA水平表达降低,其特异性标记物在24 h呈现出M1型极化的特点(cD86蛋白表达升高,cD274、cD163蛋白表达降低);IL-4诱导THP-1巨噬细胞极化为M2型过程中,C-FOS蛋白和mRNA水平表达升高,其特异性标记物在24 h表现出M2型极化的特点(cD86蛋白表达降低,cD274、cD163蛋白表达升高)。结论:C-FOS参与了THP-1单核细胞向巨噬细胞极化的过程,并且可能通过抑制巨噬细胞M1亚型形成,促进巨噬细胞向M2亚型极化的作用参与巨噬细胞的亚型极化及其功能调节中。

关键词： C-FOS 动脉粥样硬化巨噬细胞细胞分化 THP-1细胞

七氟醚麻醉通过C-FOS和神经振荡影响小鼠苏醒期恐惧记忆

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临床麻醉学杂志 2022年第4期38卷 413-418页

作者：王超然张慧蔡雪纯高梅南京医科大学第一附属医院麻醉科 210029 东南大学附属中大医院麻醉科

目的探讨C-FOS和神经振荡在七氟醚麻醉小鼠苏醒期恐惧记忆中的作用。方法选择SPF级雄性成年c57BL/6小鼠270只,8~10周龄,体重18~24 g。将小鼠随机分为三组:A组吸入2.5%七氟醚麻醉2 h;B组吸入2.5%七氟醚麻醉6 h;c组吸入2.5%七氟醚麻醉2 h... 详细信息

目的探讨C-FOS和神经振荡在七氟醚麻醉小鼠苏醒期恐惧记忆中的作用。方法选择SPF级雄性成年c57BL/6小鼠270只,8~10周龄,体重18~24 g。将小鼠随机分为三组:A组吸入2.5%七氟醚麻醉2 h;B组吸入2.5%七氟醚麻醉6 h;c组吸入2.5%七氟醚麻醉2 h,连续3 d,每组90只。所有小鼠先进行恐惧条件实验训练,训练后1 d进行相应的七氟醚麻醉处理,记录麻醉停止到翻正反射出现(苏醒)的时间。于麻醉前30 min(T_(0))、翻正反射出现后5 min(T_(1))、30 min(T_(2))和60 min(T_(3))对小鼠进行恐惧条件实验测试,记录冻结时间百分比。于T_(0)、T_(1)时进行旷场试验,记录小鼠运动总路程和在中心区域停留时间。A组随机另取6只小鼠于麻醉前1周在海马组织植入微电极,后将小鼠放回原来的笼子恢复1周,于T_(0)—T_(3)时记录Delta、Theta、Alpha、Beta和Gamma波相对能量值。于T_(0)—T_(3)时采用免疫荧光法检测海马组织C-FOS阳性细胞数,采用Western blot法记录海马组织C-FOS蛋白相对含量。结果与T_(0)时比较,T_(1)时A组和B组冻结时间百分比明显升高(Pc组停止麻醉到翻正反射出现的时间明显短于B组(PcA1区C-FOS阳性细胞数明显增多(PC-FOS蛋白相对含量明显升高(PcA1区C-FOS阳性细胞数明显减少(PC-FOS表达上调和神经振荡增强参与单次短时间吸入七氟醚增强小鼠苏醒短时间内恐惧记忆的过程,但这一效应随着苏醒后时间的延长而逐渐消失。

关键词：七氟醚苏醒期恐惧记忆 C-FOS 神经振荡

四神丸对腹泻型肠易激综合征大鼠结肠McT、C-FOS表达的影响

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中成药 2024年第5期46卷 1658-1661页

作者：蔺晓源邓娜夏旭婷刘富林刘杰民湖南中医药大学第一附属医院湖南长沙410007 湖南中医药大学湖南长沙410208 贵州省人民医院贵州贵阳550002

目的观察四神丸对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)模型大鼠结肠McT、C-FOS表达的影响。方法将40只大鼠随机分为正常组、模型组、匹维溴铵组(15.23 mg/kg)和四神丸组(7.32 mg/kg),每组10只,采用番泻叶灌胃联合避水应激法造模,灌胃给药14 d后,... 详细信息

目的观察四神丸对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)模型大鼠结肠McT、C-FOS表达的影响。方法将40只大鼠随机分为正常组、模型组、匹维溴铵组(15.23 mg/kg)和四神丸组(7.32 mg/kg),每组10只,采用番泻叶灌胃联合避水应激法造模,灌胃给药14 d后,观察一般状态,测定体质量、粪便含水量和AWR评分,ELISA法检测血清McT、C-FOS水平,免疫组织化学法、Western blot法分别检测结肠组织McT、C-FOS蛋白定位及表达,RT-qPcR法检测结肠组织McT、C-FOS mRNA表达。结果与模型组比较,四神丸组和匹维溴铵组大鼠一般状态明显好转,体质量升高(PcT、C-FOS水平均降低(PcT、C-FOS蛋白及mRNA表达均降低(PcT蛋白表达及C-FOS蛋白表达均低于匹维溴铵组(PcT、C-FOS的表达有关。

关键词：四神丸腹泻型肠易激综合征内脏敏感性 McT C-FOS

电针对间质性膀胱炎大鼠脊髓背角p-ERK1/2和C-FOS表达的影响

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针刺研究 2021年第5期46卷 375-379页

作者：李雯金珠刘建党冯戟玮李之豪赵雪丹胡俊威陈跃来上海中医药大学附属第七人民医院上海200137 上海中医药大学研究生院上海201210

目的:观察电针"次髎""会阳"对间质性膀胱炎(Ic)大鼠脊髓背角磷酸化的胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)及原癌基因(C-FOS)表达的影响。方法:将雌性Wistar大鼠随机分为空白组、模型组和电针组,每组各6只。采用环磷酰胺腹腔注射的方法建立Ic... 详细信息

目的:观察电针"次髎""会阳"对间质性膀胱炎(Ic)大鼠脊髓背角磷酸化的胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)及原癌基因(C-FOS)表达的影响。方法:将雌性Wistar大鼠随机分为空白组、模型组和电针组,每组各6只。采用环磷酰胺腹腔注射的方法建立Ic大鼠模型。电针组于"次髎""会阳"给予电针干预,20 min/次,1次/d,连续3 d。造模后48 h及干预后24 h观察大鼠膀胱疼痛行为变化;Western blot法检测脊髓腰6至骶1节段p-ERK1/2和C-FOS蛋白的相对表达量;免疫荧光染色法检测右侧脊髓背角p-ERK1/2和C-FOS的表达。结果:与空白组比较,模型组膀胱机械疼痛阈值降低(PC-FOS的蛋白表达及脊髓背角p-ERK1/2和C-FOS的免疫荧光面密度值均升高(PC-FOS的蛋白表达及脊髓背角p-ERK1/2和C-FOS的免疫荧光面密度值均降低(Pc大鼠膀胱机械疼痛阈值,调节脊髓痛觉过敏,发挥镇痛作用,其机制可能与降低脊髓背角中p-ERK1/2和C-FOS的表达有关。

关键词：电针间质性膀胱炎疼痛 p-ERK1/2 C-FOS

推拿对坐骨神经慢性压迫损伤大鼠脊髓背角小胶质细胞P2Y12/RhoA/ROcK2通路及C-FOS蛋白表达的影响

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中国中医药信息杂志 2024年

作者：蒋晶晶林志刚黄红叶张幻真陈乐春林惠伍诗烨陈水金福建中医药大学福建省康复技术重点实验室福建中医药大学附属康复医院

目的观察推拿对坐骨神经慢性压迫损伤大鼠脊髓背角小胶质细胞P2Y12/RhoA/ROcK2通路及cfos蛋白表达的影响，探讨推拿治疗腰椎间盘突出症的作用机制。方法采用坐骨神经慢性压迫损伤模拟腰椎间盘突出症神经性疼痛，将24只雄性SD大鼠随机... 详细信息

目的观察推拿对坐骨神经慢性压迫损伤大鼠脊髓背角小胶质细胞P2Y12/RhoA/ROcK2通路及cfos蛋白表达的影响，探讨推拿治疗腰椎间盘突出症的作用机制。方法采用坐骨神经慢性压迫损伤模拟腰椎间盘突出症神经性疼痛，将24只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组和推拿组，每组8只。造模后第4日，推拿组以按揉法干预，测量造模前及造模后第4、10、17 d大鼠机械缩足阈值（PWT）、热痛阈值（PWL），免疫荧光染色检测大鼠右侧脊髓背角Iba1、P2Y12蛋白表达，Western blot检测右侧脊髓背角RhoA、ROcK2蛋白表达，免疫组化检测右侧脊髓背角C-FOS阳性细胞数量。结果与空白组比较，模型组大鼠造模后第4、10、17日PWT、PWL明显降低（PcK2蛋白表达明显升高（PC-FOS阳性细胞数明显增加（PcK2蛋白表达明显降低（PC-FOS阳性细胞数明显减少（PcK2通路及C-FOS表达抑制小胶质细胞激活，降低神经元兴奋性，对LDH起到镇痛作用。

关键词：腰椎间盘突出症推拿脊髓背角小胶质细胞 P2Y12/RhoA/ROcK2通路 C-FOS 大鼠

产前应激对情绪相关脑区C-FOS神经元激活的影响

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首都医科大学学报 2023年第6期44卷 1014-1021页

作者：李志恒于鑫袁莹徐志卿首都医科大学基础医学院病理学系北京100069 首都医科大学基础医学院神经生物学系北京100069

目的探讨产前应激(prenatal stress,PS)对抑郁样行为子代大鼠情绪相关脑区C-FOS神经元激活的影响。方法利用产前束缚应激建立抑郁样行为子代大鼠模型。应用免疫荧光染色方法检测正常对照组和PS组大鼠在内侧前额叶皮质(medial prefrontal... 详细信息

目的探讨产前应激(prenatal stress,PS)对抑郁样行为子代大鼠情绪相关脑区C-FOS神经元激活的影响。方法利用产前束缚应激建立抑郁样行为子代大鼠模型。应用免疫荧光染色方法检测正常对照组和PS组大鼠在内侧前额叶皮质(medial prefrontal cortex,mPFc)脑区、基底外侧杏仁核(basolateral amygdala,BLA)脑区、腹侧海马(ventral hippocampus,VH)脑区和腹外侧中脑导水管周围黑质(ventrolateral periaqueductal gray,vlPAG)脑区等情绪相关脑区的C-FOS与NeuN蛋白的表达并观察上述脑区应激敏感性神经元密度和比例的改变。结果与对照组相比,PS组大鼠mPFc及BLA脑区C-FOS应激敏感性神经元密度和比例降低,VH脑区C-FOS应激敏感性神经元密度降低;vlPAG脑区C-FOS应激敏感性神经元密度不变。结论PS导致子代大鼠mPFc、BLA及VH脑区C-FOS神经元激活密度下降,这种改变可能与抑郁样行为存在相关性。

关键词：产前应激 C-FOS 情绪相关脑区抑郁样行为