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c肽与胰岛素双标记时间分辨荧光免疫分析法的建立及初步临床应用

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生物化学与生物物理进展 2011年第7期38卷 670-676页

作者：马强李来庆贺安林冠峰邹丽萍李明吴英松南方医科大学生物技术学院抗体工程研究所广州510515 广州市达瑞抗体工程技术有限公司广州510663

建立钐(Sm3+)标记检测c肽(c-peptide)及铕(Eu3+)标记检测胰岛素(insulin)的双标记时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA),并初步尝试检测人血c肽以及胰岛素含量.将抗c肽单克隆抗体(Biodesign No.E54094M)与抗insulin单克隆抗体(BiodesignNo.E86306M)混合包被96孔板,然后用Sm3+标记抗c肽单克隆抗体(Medix No.9103),Eu3+标记抗insulin单克隆抗体(Biodesign No.E86802M),运用双抗体夹心一步法建立c肽/胰岛素双标记时间分辨免疫荧光分析法.结果显示:c肽分析灵敏度为0.2μg/L,线性范围为0.5～22μg/L,平均回收率达到99.6%,分析内和分析间变异系数分别为4.6%～6.0%和5.1%～7.6%.胰岛素分析灵敏度为0.8 mU/L,线性范围为3.6～180 mU/L,平均回收率为99.4%,分析内和分析间变异系数分别为3.7%～6.0%和5.1%～8.0%.c肽/胰岛素双标记检测试剂与PerkinElmer公司对应的单标记进口试剂盒分别同时测定血清样本200份,检测结果高度相关,具有较好的一致性,相关系数分别为0.98与0.99.总之,自建c肽/胰岛素双标记时间分辨荧光免疫分析方法的性能均可以达到临床检测要求,有望替代现有国内外较为昂贵的单标记试剂,可用于胰岛素分泌不足导致的糖尿病诊断及糖尿病的大规模普查筛选.

关键词：双标记时间分辨荧光免疫分析 c肽胰岛素

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c肽与2型糖尿病慢性并发症的相关性

上海医学 2007年第8期30卷 631-632页

作者：顾鸣宇赵立彭永德上海交通大学附属第一人民医院内分泌科 200080

c肽又称连接肽，是胰岛素原转变为胰岛素过程中的裂解产物。长期以来一直认为c肽没有生物活性，只能用于评估糖尿病患者残留的内源性胰岛素分泌功能，但近年来大量的研究显示c肽具有多种生物活性，特别在改善血管及神经功能方面发挥着... 详细信息

c肽又称连接肽，是胰岛素原转变为胰岛素过程中的裂解产物。长期以来一直认为c肽没有生物活性，只能用于评估糖尿病患者残留的内源性胰岛素分泌功能，但近年来大量的研究显示c肽具有多种生物活性，特别在改善血管及神经功能方面发挥着重要作用。本研究旨在了解c肽对于2型糖尿病患者慢性并发症的影响，探索其临床应用的前景。

关键词：糖尿病慢性并发症 c肽 2型胰岛素分泌功能胰岛素原生物活性糖尿病患裂解产物

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重组人胰岛素及c肽的分离纯化

北京化工大学学报（自然科学版） 2006年第5期33卷 30-32,57页

作者：冷雪陈劲春董鹏北京化工大学生命科学与技术学院北京100029

对基因工程构建的含重组人胰岛素和c肽基因的毕赤酵母工程菌进行诱导表达，工程菌用甲醇诱导72h后，离心去除菌体，上清液经中空纤维膜超滤后SP—Sepharose Fast Flow阳离子交换柱层析，0-400mmol／L Nacl梯度洗脱，得到纯度大于92％的... 详细信息

对基因工程构建的含重组人胰岛素和c肽基因的毕赤酵母工程菌进行诱导表达，工程菌用甲醇诱导72h后，离心去除菌体，上清液经中空纤维膜超滤后SP—Sepharose Fast Flow阳离子交换柱层析，0-400mmol／L Nacl梯度洗脱，得到纯度大于92％的重组人胰岛素原。经Lys—c酶和羧肽酶B-酶切后，Sephadex G-25柱分离，得到了重组人胰岛素和c肽。

关键词：重组人胰岛素 c肽毕赤酵母分离纯化

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人胰岛素原c肽单克隆抗体的研究

中国医学科学院学报 1989年第1期11卷 46-51页

作者：吴从愿 N.Yanaihara c.Yanaihara M.Hoshino 协和医院 The National Institute for physiological Sciences Okazaki 444 Japan

半抗原人胰岛素原c肽(HcP)对小鼠的免疫原性,以蛔虫蛋白作为载体远比牛或小鼠清蛋白为高。将NS-1瘤细胞与HcP-蛔虫蛋白结合物免疫的BALB/c小鼠脾细胞融合,获得12种抗HcP McAb,对其中8种的Ig类和亚类,亲和力及特异性等进行了详细鉴定。... 详细信息

半抗原人胰岛素原c肽(HcP)对小鼠的免疫原性,以蛔虫蛋白作为载体远比牛或小鼠清蛋白为高。将NS-1瘤细胞与HcP-蛔虫蛋白结合物免疫的BALB/c小鼠脾细胞融合,获得12种抗HcP McAb,对其中8种的Ig类和亚类,亲和力及特异性等进行了详细鉴定。不同的HcP片段置换反应结果表明,HcP McAb的抗原决定簇分别位于HcP分子的23～31.22～31及1～22氨基酸区。20例正常成人空腹血浆HcP测定值,用兔多克隆抗血清RIA(0.47±0.16pmol/ml)明显高于McAb-1 RIA(0.29±0.13 pmol/ml).

关键词：胰岛素 c肽单克隆抗体放免分析

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压电胰岛素-c肽微阵列免疫传感器研究

高等学校化学学报 2004年第1期25卷 44-49页

作者：张波府伟灵毛琼国张雪汤万里俞凡第三军医大学西南医院检验科重庆400038 中国嘉陵集团生物工程办公室重庆400032 信息产业部电子第26研究所重庆400060

以 AT切型、基频 10 MHz的镀金膜石英晶体作为换能器 ,将抗人胰岛素和 c肽单克隆抗体固定在石英晶体电极表面 ,用 2× 5检测池固定夹具构建一种新型压电胰岛素 - c肽微阵列免疫传感器 .研究了抗体固定方法、抗体工作浓度、固定量、一致... 详细信息

以 AT切型、基频 10 MHz的镀金膜石英晶体作为换能器 ,将抗人胰岛素和 c肽单克隆抗体固定在石英晶体电极表面 ,用 2× 5检测池固定夹具构建一种新型压电胰岛素 - c肽微阵列免疫传感器 .研究了抗体固定方法、抗体工作浓度、固定量、一致性以及传感器的响应参数如检测温度、时间和特异性等的影响 .该微阵列传感器在胰岛素浓度为 2 .5～ 16 0 .0 m IU/ L、c肽浓度为 0 .375～ 12 .0 ng/ m L范围内响应特性良好 ,压电晶体频率偏移值与胰岛素和 c肽浓度呈良好的线性关系 .将此微阵列传感器用于人血清标本的测定 ,结果与放射免疫法符合 ( r为 0 .92和 0 .94 ) .此微阵列传感器具有灵敏度高、特异性好 ,低密度阵列结构 ,检测通量较高 ,不需标记 ,操作简单、能实时在线检测和重复使用等优点 ,能用于临床实验诊断 ,具有临床推广应用价值 .

关键词：压电免疫传感器微阵列胰岛素 c肽糖尿病临床检测

c肽和胰岛素对高糖诱导的内皮细胞凋亡的影响

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中华内分泌代谢杂志 2005年第1期21卷 30-31页

作者：孟东于德民陈樱汪玮琳曲小红尹潍天津医科大学代谢病医院 300070 天津医科大学总医院内分泌科

高糖可导致人脐静脉内皮细胞凋亡,不同浓度的c肽和胰岛素对高糖诱导的内皮细胞凋亡影响程度不同。合理应用c肽可能对糖尿病大血管病变的防治起到有益的作用。

关键词： c肽高糖内皮细胞凋亡胰岛素诱导糖尿病大血管病变人脐静脉内皮细胞

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c肽与血糖比值对糖尿病分型及治疗的意义

中国医科大学学报 2003年第4期32卷 329-330,333页

作者：袁凤山王颖中国医科大学附属第一医院内分泌科辽宁沈阳110001

目的 :探讨c肽与血糖比值 (c/GR)对糖尿病分型及治疗的意义。方法 :对 19例 1型糖尿病和 136例2型糖尿病患者进行空腹和糖负荷后 30 ,6 0 ,12 0 ,180min的血糖和血浆c肽测定 ,将 2型糖尿病患者分为两个亚组 (非胰岛素治疗组和胰岛素治疗... 详细信息

目的 :探讨c肽与血糖比值 (c/GR)对糖尿病分型及治疗的意义。方法 :对 19例 1型糖尿病和 136例2型糖尿病患者进行空腹和糖负荷后 30 ,6 0 ,12 0 ,180min的血糖和血浆c肽测定 ,将 2型糖尿病患者分为两个亚组 (非胰岛素治疗组和胰岛素治疗组 )。动态观察各组糖尿病患者空腹和糖负荷后各时点的c/GR。结果 :1型糖尿病组空腹和糖负荷后各时点的c/GR均显著低于 2型糖尿病组 (P c/GR的变化趋势相同 ,但胰岛素治疗组各时点的比值均显著低于非胰岛素治疗组(P c肽与血糖比值可作为评定胰岛功能指标 ,并且对糖尿病的分型及治疗有指导意义 ,对该值较低的

关键词： c肽血糖比值糖尿病

成年人群血清c肽与胰岛素的相关性及对应值的分析

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中华医学杂志 2023年第15期103卷 1127-1133页

作者：方福生王宁孙菁刘星宇王薇孙般若谷昭艳傅晓敏李红闫双通解放军总医院第二医学中心保健一科北京100853 解放军总医院第二医学中心健康医学科北京100853 解放军总医院第二医学中心内分泌科北京100853 解放军总医院第一医学中心内分泌科北京100853

目的探讨成年人群血清c肽与胰岛素的相关性,建立血清c肽对应的胰岛素值。方法横断面研究。回顾性纳入2017年1月至2021年12月于解放军总医院第二医学中心行健康体检的成年人群的临床资料,根据糖尿病诊断标准将受试者分为2型糖尿病组、糖... 详细信息

目的探讨成年人群血清c肽与胰岛素的相关性,建立血清c肽对应的胰岛素值。方法横断面研究。回顾性纳入2017年1月至2021年12月于解放军总医院第二医学中心行健康体检的成年人群的临床资料,根据糖尿病诊断标准将受试者分为2型糖尿病组、糖尿病前期组和正常血糖组。采用Pearson相关分析、线性回归分析和非线性回归分析等方法探讨血清c肽与胰岛素的相关性,并建立血清c肽对应的胰岛素值。结果共纳入48008名成年受试者,男31633名(65.9%),女16375名(34.1%),年龄(50.1±9.9)岁(18~89岁);其中2型糖尿病组8160例(17.0%),糖尿病前期组13263例(27.6%),正常血糖组26585名(55.4%)。3组血清空腹c肽[FcP,M(Q_(1),Q_(3))]分别为2.76(2.18,3.47)、2.54(1.99,3.21)和2.18(1.71,2.79)μg/L;3组空腹胰岛素[FINS,M(Q_(1),Q_(3))]分别为10.98(7.57,16.09)、10.06(6.95,14.47)和8.43(5.86,12.12)mU/L。FcP与FINS(r=0.82)、餐后2 h c肽(2 h cP)与餐后2 h胰岛素(2 h INS)(r=0.84)均呈正相关(PcP与FINS(R^(2)=0.68)、2 h cP与2 h INS(R^(2)=0.71)均呈线性相关(PcP与FINS(R^(2)=0.74)、2 h cP与2 h INS(R^(2)=0.78)均呈幂函数相关(PcP^(1.32)、2 h INS=1.64×(2 h cP)^(1.60)。多因素线性回归分析显示,在调整相关混杂因素后,FcP是FINS(R^(2)=0.70,PcP是2 h INS(R^(2)=0.73,PcP与FINS、2 h cP与2 h INS均呈幂函数相关。本研究建立血清c肽水平分别对应的胰岛素值。

关键词：糖尿病,2型糖尿病前期 c肽胰岛素相关性成年人

甲状腺功能正常成人血清游离三碘甲状腺原氨酸与c肽胰岛素抵抗指数的相关性

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中华医学杂志 2024年第28期104卷 2626-2631页

作者：王宁王薇刘星宇罗艺孙般若闫双通方福生解放军总医院第二医学中心健康医学科北京100853 解放军总医院第二医学中心保健一科北京100853 解放军总医院第二医学中心内分泌科北京100853

目的探讨甲状腺功能正常成人血清游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)与c肽胰岛素抵抗指数(HOMA2 IR-cP)的相关性。方法横断面研究。回顾性分析2019年1至12月在解放军总医院第二医学中心体检的甲状腺功能正常成人的临床资料。根据HOMA2 IR-cP水... 详细信息

目的探讨甲状腺功能正常成人血清游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)与c肽胰岛素抵抗指数(HOMA2 IR-cP)的相关性。方法横断面研究。回顾性分析2019年1至12月在解放军总医院第二医学中心体检的甲状腺功能正常成人的临床资料。根据HOMA2 IR-cP水平分为HOMA2 IR-cP>2.18组(n=3463)和HOMA2 IR-cP≤2.18(n=8204)组。采用单因素Pearson相关分析及多因素logistic回归分析FT3与HOMA2 IR-cP的相关性,采用交互作用模型分析FT3与相关因素之间的交互作用,采用限制性立方样条图探索连续性变量FT3与HOMA2 IR-cP的剂量-反应关系。结果依据纳排标准共纳入11667名甲状腺功能正常成人,男7756名,女3911名,年龄(50.7±10.0)岁。HOMA2 IR-cP>2.18组男性比例、体质指数、收缩压、糖化血红蛋白、空腹血糖、甘油三酯、血红蛋白、丙氨酸转氨酶、FT3水平显著高于HOMA2 IR-cP≤2.18组(均PcP≤2.18组(均PcP相关(r=0.21,Pc回归分析显示,在调整混杂因素后,FT3与HOMA2 IR-cP存在相关性(P_(趋势)cP均存在相关性(P_(趋势)cP呈线性相关(P_(整体)cP存在相关性。随着FT3水平升高,胰岛素抵抗程度逐渐加重。

关键词：甲状腺素游离三碘甲状腺原氨酸 c肽胰岛素抵抗成人