检索结果-南通市图书馆

腐蹄病c型节瘤拟杆菌纤毛蛋白基因的克隆与序列分析

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特产研究 2002年第1期24卷 23-25页

作者：苗利光王克坚刘艳环陈立志刘晓颖徐敏张洪涛吉林特产高等专科学校吉林吉林132109 中国农业科学院特产研究所吉林吉林132109

提取c型节瘤拟杆菌染色体DNA。用PcR技术从腐蹄病c型节瘤拟杆菌克隆出具有免疫保护性抗原 0 .85kb纤毛蛋白基因 ( pili基因 ) ,将PcR产物pili基因克隆于TE载体 ,在含X - gal和IPTG的AmpLB平板上 ,挑选白色单一菌落进行质粒的筛选 ,用Ec... 详细信息

提取c型节瘤拟杆菌染色体DNA。用PcR技术从腐蹄病c型节瘤拟杆菌克隆出具有免疫保护性抗原 0 .85kb纤毛蛋白基因 ( pili基因 ) ,将PcR产物pili基因克隆于TE载体 ,在含X - gal和IPTG的AmpLB平板上 ,挑选白色单一菌落进行质粒的筛选 ,用EcoR1酶切提取重组质粒 ,琼脂糖凝胶电泳 ,出现一条 0 .85kb的条带 ,从而筛选出TE - pili重组质粒。对 pili基因进行序列测定 ,结果与国外报道的 pili基因序列一致。

关键词：腐蹄病 c型节瘤拟杆菌纤毛蛋白基因基因克隆序列分析反刍动物

腐蹄病c型节瘤拟杆菌纤毛蛋白基因的克隆与表达载体的构建

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动物医学进展 2002年第2期23卷 59-62页

作者：苗利光王克坚刘艳环陈立志刘晓颖徐敏张洪涛吉林特产高等专科学校吉林市132109 中国农业科学院特产研究所吉林市132109

用 PcR技术从腐蹄病 c型节瘤拟杆菌克隆出具有免疫保护性抗原 0 .85kb纤毛蛋白基因 ( pili基因 ) ,利用该基因构建了纤毛蛋白基因表达载体。提取 c型节瘤拟杆菌染色体DNA;用所设计的专一性引物进行 PcR,扩增出 pili基因 ;将 pili基因克... 详细信息

用 PcR技术从腐蹄病 c型节瘤拟杆菌克隆出具有免疫保护性抗原 0 .85kb纤毛蛋白基因 ( pili基因 ) ,利用该基因构建了纤毛蛋白基因表达载体。提取 c型节瘤拟杆菌染色体DNA;用所设计的专一性引物进行 PcR,扩增出 pili基因 ;将 pili基因克隆于 TE载体 ,TE-pili重组质粒 pili基因序列测定结果正确 ,用 Eco R 酶切 ,低熔点胶回收 pili基因片段 ,经 klenow补平后 ,用 T4DNA连接酶将其与中间载体p PLλ连接 ,将 pili基因克隆于 p PLλ载体 ,经Bam H 、Bam H +Hind 、Dral酶切鉴定 pili基因正向插入 p PLλ载体 ;扩增 p PLλ-pili重组质粒 ,用 Bam H 酶切出 2 .1 kb大小片段 ,回收后 ,与 PME2 90表达质粒连接 ,转化宿主细胞PAK/ 2 pfs中 ,对获得的重组质粒用 Bam H 酶切 ,出现 2 .1 kb大小的带。

关键词：腐蹄病 c型节瘤拟杆菌基因克隆载体纤毛蛋白

腐蹄病c型节瘤拟杆菌纤毛蛋白基因工程疫苗对绵羊的免疫试验

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特产研究 2003年第1期25卷 7-9页

作者：刘艳环苗利光陈立志刘晓颖张洪涛王克坚吉林特产专科学校吉林吉林132109 中国农业科学院特产研究所吉林吉林132109

将转化c型节瘤拟杆菌纤毛蛋白基因表达质粒的工程菌PAK/2pfsc在含羧苄青霉素的营养肉汤中表达,用Mgcl2法在培养物上清中提取表达产物(纤毛蛋白)。将表达的纤毛蛋白用弗氏完全佐剂乳化,制成疫苗,疫苗免疫4只健康绵羊,定期采血,用对流免... 详细信息

将转化c型节瘤拟杆菌纤毛蛋白基因表达质粒的工程菌PAK/2pfsc在含羧苄青霉素的营养肉汤中表达,用Mgcl2法在培养物上清中提取表达产物(纤毛蛋白)。将表达的纤毛蛋白用弗氏完全佐剂乳化,制成疫苗,疫苗免疫4只健康绵羊,定期采血,用对流免疫电泳和K凝集试验检测实验绵羊的体液免疫应答及抗体水平。结果发现,免疫后5d即可产生相应抗体,21d后抗体效价达到1∶4000以上。试验表明,腐蹄病c型节瘤拟杆菌纤毛蛋白基因工程疫苗对绵羊具有较好的免疫应答和免疫保护性。

关键词：反刍动物腐蹄病 c型节瘤拟杆菌节瘤拟杆菌纤毛蛋白基因工程疫苗绵羊免疫应答免疫保护性

腐蹄病c型节瘤拟杆菌纤毛蛋白基因工程疫苗对家兔的免疫试验

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动物医学进展 2002年第3期23卷 66-67页

作者：苗利光刘艳环陈立志刘晓颖张洪涛王克坚中国农业科学院特产研究所吉林132109 吉林特产专科学校吉林1321009

将转化 c型节瘤拟杆菌纤毛蛋白基因表达子粒的工程菌 PAK/ 2 pfs c在含羧苄青霉素营养肉汤培养基中培养 ,用 Mg cl2 法在培养物上清中提取表达产物 (纤毛蛋白 )。将表达的纤毛蛋白产物用弗氏完全佐剂乳化 ,制成疫苗。用疫苗免疫 3只健... 详细信息

将转化 c型节瘤拟杆菌纤毛蛋白基因表达子粒的工程菌 PAK/ 2 pfs c在含羧苄青霉素营养肉汤培养基中培养 ,用 Mg cl2 法在培养物上清中提取表达产物 (纤毛蛋白 )。将表达的纤毛蛋白产物用弗氏完全佐剂乳化 ,制成疫苗。用疫苗免疫 3只健康家兔 ,2 1 d后再次接种 ;定期采血 ,用对流免疫电泳和 K凝集实验检测试验家兔的体液免疫应答及抗体水平。结果发现 ,免疫 7d即可产生相应抗体 ,2 1 d后抗体效价达到 80 0 0×以上 ,而且高滴度抗体可维持 6个月以上。试验表明 ,腐蹄病

关键词：腐蹄病 c型节瘤拟杆菌纤毛蛋白基因工程疫苗家兔免疫试验