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BamHI DNA甲基化酶的纯化及对BamHI限制性核酸内切酶限制作用的保护作用

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微生物学通报 1989年第4期16卷 217-220页

作者：何忠效蒋晞薛继艳郑文尧北京师范大学生化及分子生物学研究室中国科学院微生物研究所

用硫酸铵盐析、磷酸纤维素柱层析和肝素-Sepharose 4B亲和层析从解淀粉芽孢杆菌(Rocllus amyloliquefaciens)纯化了BamHl DNA甲基化酶。并以λDNA为底物,研究了λDNA被BamHl DNA甲基化酶作用后,对BamHl限制性核酸内切酶的切割产生了明... 详细信息

用硫酸铵盐析、磷酸纤维素柱层析和肝素-Sepharose 4B亲和层析从解淀粉芽孢杆菌(Rocllus amyloliquefaciens)纯化了BamHl DNA甲基化酶。并以λDNA为底物,研究了λDNA被BamHl DNA甲基化酶作用后,对BamHl限制性核酸内切酶的切割产生了明显的阻抗作用。

关键词： BamHI DNA 甲基化酶核酸内切酶

限制性内切酶BamHI、EcoRI、PstI的分离纯化

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生物化学与生物物理进展 1981年第6期 63-65页

作者：吴雪孔玉英朱绳祖党进军中国科学院上海生物化学研究所

限制性内切酶是核酸研究工作的重要工具酶,它的纯度直接影响基因分离,基因克隆以及序列分析等实验结果。为了获得品种繁多、纯度达到要求的酶,人们在分离纯化技术上作了不少努力。目前在分离限制性内切酶方法上以

关键词：分离纯化柱层析 EcoRI BamHI PstI 限制性内切酶

北京鸭肝脏线粒体DNA 2.17kb的EcoRI/BamHI片段的分子克隆

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Journal of Genetics and Genomics 1984年第6期 434-441页

作者：赵邦悌朱祯马树义沈同北京大学生物系生物化学教研室中国科学院遗传研究所北京大学生物系生物化学教研室

本文以质粒pAT153为载体,以E.coli SK1592为受体菌,将北京鸭肝脏mtDNA的2.17kb的EcoRI/BamHI限制片段进行了克隆,并对重组质粒作了限制性内切酶分析、Southern吸印与杂交分析。此外,还对重组体的一些性质作了初步研究,并对鸭肝mtDNA的... 详细信息

本文以质粒pAT153为载体,以E.coli SK1592为受体菌,将北京鸭肝脏mtDNA的2.17kb的EcoRI/BamHI限制片段进行了克隆,并对重组质粒作了限制性内切酶分析、Southern吸印与杂交分析。此外,还对重组体的一些性质作了初步研究,并对鸭肝mtDNA的另一个EeoRI/BamHI片段(2.81kb)不能被克隆的原因进行了讨论。

关键词： EcoRI/BamHI DNA 2.17kb 鸭肝 BamHI 重组体重组质粒肝脏线粒体北京鸭分子克隆

pBR 322 DNA的HaeⅢ,BamHI的酶切片段的核苷酸顺序

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生物化学与生物物理进展 1981年第6期 59-61页

作者：王珩甘人宝刘定干李载平中国科学院上海生物化学研究所

DNA是生物体的遗传物质。蛋白质和RNA分子结构信息以及调节基因的信息都编码在DNA的特定核苷酸顺序中。搞清楚蛋白

关键词：酶切片段 BamHI Hae pBR 322 DNA

油桐尺蠖核型多角体病毒的一种对BamHI不敏感的毒株

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微生物学报 1985年第4期 370-371页

作者：丁达明李先强周咏芝中国科学院武汉病毒所

已经分离到一种限制性内切酶不同于油桐尺蠖核型多角体病毒广西株(Buzura suppressariaNuclear Polyhedrosis Virus Guong Xi简称BsNPVGX)的新毒株——广东株(BsNPV GD)。BsNPV

关键词：酶谱内切酶 GD DNA 限制性 BamHI 毒株

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大鼠MK-shRNA腺病毒表达载体的构建

中国实验诊断学 2017年第5期21卷 904-906页

作者：吴晓冬薄立华王小昆朱辉吉林大学中日联谊医院科学研究中心吉林长春130033 吉林大学第一医院神经内科吉林长春130021

Midkine（MK）基因是在1988年日本学者Kadomatsu等发现的一种cDNA克隆。其表达产物在胚胎发育早期至中期时在多种组织中表达,但随着胚胎的发育而逐渐减少,在成体鼠只有肾脏和子宫两个脏器有表达。因为能与肝素结合并相互作用,又被称为... 详细信息

Midkine（MK）基因是在1988年日本学者Kadomatsu等发现的一种cDNA克隆。其表达产物在胚胎发育早期至中期时在多种组织中表达,但随着胚胎的发育而逐渐减少,在成体鼠只有肾脏和子宫两个脏器有表达。因为能与肝素结合并相互作用,又被称为肝素结合生长因子。MK在神经系统的发育生长中有诸多功能,本课题组也已经证明在脑缺血的急性期其表达增高,近年也相继报道MK在多种肿瘤组织中有高表达[4]。

关键词：表达载体 MK-shRNA 腺病毒载体表达产物基因沉默大鼠 BamHI EcoRI 脑缺血测序证明

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原核细胞中人神经生长因子基因的克隆

中国医科大学学报 2003年第2期32卷 97-99页

作者：尹元琴马萍隋承光任常山中国医科大学基因工程研究中心辽宁沈阳110001 中国医科大学附属第一医院肿瘤研究所分子肿瘤研究室

目的:克隆人神经生长因子cDNA,为神经生长因子cDNA的表达作准备。方法:采用大肠杆菌JM 109菌株作为宿主菌,以pUC 118作为克隆载体,使用限制性内切酶BamHI,PstI酶切DNA片段,采用磷酸钙转染法转化细菌,α互补和限制性酶切图谱鉴定转化细... 详细信息

目的:克隆人神经生长因子cDNA,为神经生长因子cDNA的表达作准备。方法:采用大肠杆菌JM 109菌株作为宿主菌,以pUC 118作为克隆载体,使用限制性内切酶BamHI,PstI酶切DNA片段,采用磷酸钙转染法转化细菌,α互补和限制性酶切图谱鉴定转化细菌。结果:βNGF cDNA经BamHI和PstI 双酶切后,经过重组,与载体连接在一起,转化大肠杆菌后,形成了克隆。结论:应用JM 109作为宿主,pUC 118为克隆载体,成功克隆了人神经生长因子cDNA。

关键词：神经生长因子克隆原核细胞 cDNA 限制性内切酶 BamHI 载体

重组斑马鱼Gli2蛋白N端肽段的表达及纯化

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海洋科学集刊 2006年第1期47卷 140-148页

作者：谭训刚张培军杜少军中国科学院海洋研究所 Center

Based on the protein comparison between zebrafish Gli2 and fruit fly C_i and the analysis of hydrophilicity/hydrophobicity of Gli2 protein by computer programmer, the recombination N-terminal partial protein of Gli2 protein was designed.After the DNA fragment encoding the N-terminal part was cloned out by PCR, it was ligated with an expression vector containing His-tag and transformed into BL-21, a bacterial expression strain, to express this protein.After the expression condition was optimized, the protein can be expressed at high level after having been induced for 3 hours when the inducer—IPTG was at 0.6 mmol/L.The protein is soluble in solution, a bacterial protein extraction solution.After the protein solution was diluted in B-per solution, the recombination protein can bind to the Ni-NTA column and be purified highly.

关键词：斑马鱼 Gli2 N端重组蛋白疏水区目标基因 BamHI 电泳纯 pBluescript 蛋白

RESTRICTION ENDONUCLEASE CLEAVAGE MAP OF MITOCHONDRIAL DNA FROM PEKING DUCK LIVER

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Science China Chemistry 1983年第11期26卷 1143-1154页

作者：赵邦悌徐洪基马树义李令媛沈同 Chinese Aeademy of Medieal Sciedees Beijing Peking University Department of Cell Biology Department of Biology Cancer Institute Peking University

Mitochondrial DNA of the liver from Peking duck was cleaved by restricition endonu-cleases EcoRI, BamHI, PstⅠ and BglⅠ into 1, 2, 4 and 5 fragments, respectively, while the BglⅡ was without any cleavage. The restriction map of this mtDNA was constructed by measuring the length of restriction fragments using both electrophoresis analysis and electron microscopy. The position of D-loop and the direction of replication of the mtDNA were also determined.

关键词： mtDNA RESTRICTION ENDONUCLEASE CLEAVAGE MAP OF MITOCHONDRIAL DNA FROM PEKING DUCK LIVER BamHI