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Identification of BRAF V600E mutation in odontogenic tumors by high-performance MALDI-TOF analysis

International Journal of Oral Science 2022年第2期14卷 212-219页

作者： Lucrezia Togni Antonio Zizzi Roberta Mazzucchelli Andrea Santarelli Corrado Rubini Marco Mascitti Department of Clinical Specialistic and Dental Sciences Marche Polytechnic Universityvia Tronto 10AnconaItaly Department of Biomedical Sciences and Public Health Marche Polytechnic Universityvia Tronto 10AnconaItaly Dentistry Clinic National Institute of Health and Science of AgingIRCCS INRCAvia Tronto 10AnconaItaly

Odontogenic tumors are rare lesions with unknown etiopathogenesis.Most of them are benign,but local aggressiveness,infiltrative potential,and high recurrence rate characterize some entities.The MAP-kinase pathway activation can represent a primary critical event in odontogenic tumorigenesis.Especially,the BRAF V600E mutation has been involved in 80%–90%of ameloblastic lesions,offering a biological rationale for developing new targeted therapies.The study aims to evaluate the BRAF V600E mutation in odontogenic lesions,comparing three different detection methods and focusing on the Sequenom MassARRAY System.81 surgical samples of odontogenic lesions were subjected to immunohistochemical analysis,Sanger Sequencing,and Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization-Time of Flight mass spectrometry(Sequenom).The BRAF V600E mutation was revealed only in ameloblastoma samples.Moreover,the presence of BRAF V600E was significantly associated with the mandibular site(ρ=0.627;P value<0.001)and the unicystic histotype(ρ=0.299,P value<0.001).However,any significant difference of 10-years disease-free survival time was not revealed.Finally,Sequenom showed to be a 100%sensitive and 98.1%specific,suggesting its high-performance diagnostic accuracy.These results suggest the MAP-kinase pathway could contribute to ameloblastic tumorigenesis.Moreover,they could indicate the anatomical specificity of the driving mutations of mandibular ameloblastomas,providing a biological rational for developing new targeted therapies.Finally,the high diagnostic accuracy of Sequenom was confirmed.

关键词： V600E BRAF specificity

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Super-enhancer receives signals from the extracellular matrix to induce PD-L1-mediated immune evasion via integrin/ BRAF/TAK1/ERK/ETV4 signaling

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Cancer Biology & Medicine 2022年第5期19卷 669-684页

作者： Panpan Ma Xinxin Jin Zhiwei Fan Zhou Wang Suhui Yue Changyue Wu Shiyin Chen Yuanyuan Wu Miaomiao Chen Donghua Gu Siliang Zhang Renfang Mao Yihui Fan Laboratory of Medical Science School of MedicineNantong UniversityNantong 226001China Department of Pathogenic Biology School of MedicineNantong UniversityNantong 226001China Department of Clinical Laboratory Yancheng No.1 People’s HospitalYancheng 224005China School of Life Sciences Nantong UniversityNantong 226001China Department of Dermatology Affiliated Hospital of Nantong UniversityNantong UniversityNantong 226001China The Department of Urology the Second Affiliated Hospital of Nantong UniversityNantong UniversityNantong 226001China The Department of Radiotherapy Oncology Harbin Medical University Cancer HospitalHarbin 150086China Department of Pathophysiology School of MedicineNantong UniversityNantong 226001China

Objective:PD-L1 and PD-L2 expression levels determine immune evasion and the therapeutic efficacy of immune checkpoint blockade.The factors that drive inducible PD-L1 expression have been extensively studied,but mechanisms that result in constitutive PD-L1 expression in cancer cells are largely unknown.Methods:DNA elements were deleted in cells by CRISPR/Cas9-mediated knockout.Protein function was inhibited by chemical inhibitors.Protein levels were examined by Western blot,mRNA levels were examined by real-time RT-PCR,and surface protein expression was determined by cellular immunofluorescence and flow cytometry.Immune evasion was examined by in vitro T cell-mediated killing.Results:We determined the core regions(chr9:5,496,378–5,499,663)of a previously identified PD-L1L2-super-enhancer(SE).Through systematic analysis,we found that the E26 transformation-specific(ETS)variant transcription factor(ETV4)bound to this core DNA region but not to DNA surrounding PD-L1L2SE.Genetic knockout of ETV4 dramatically reduced the expressions of both PD-L1 and PD-L2.ETV4 transcription was dependent on ERK activation,and BRAF/TAK1-induced ERK activation was dependent on extracellular signaling fromαvβ3 integrin,which profoundly affected ETV4 transcription and PD-L1/L2 expression.Genetic silencing or pharmacological inhibition of components of the PD-L1L2-SE-associated pathway rendered cancer cells susceptible to T cell-mediated killing.Conclusions:We identified a pathway originating from the extracellular matrix that signaled via integrin/BRAF/TAK1/ERK/ETV4 to PD-L1L2-SE to induce PD-L1-mediated immune evasion.These results provided new insights into PD-L1L2-SE activation and pathways associated with immune checkpoint regulation in cancer.

关键词： PD-L1 super-enhancer ETV4 ERK αvβ3 integrin BRAF TAK1

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中国晚期非小细胞肺癌BRAF突变诊疗专家共识

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中华肿瘤杂志 2023年第4期45卷 279-290页

作者：中国抗癌协会肺癌专业委员会程颖张力赵媛媛不详吉林省肿瘤医院肿瘤科长春130012 中山大学肿瘤防治中心肿瘤内科广州510060

肺癌是中国发病率和死亡率均排第1位的恶性肿瘤,其中非小细胞肺癌(NSCLC)约占肺癌的85%。BRAF突变在NSCLC患者中的发生率约为1.5%~5.5%,而BRAF V600突变约占所有BRAF突变的30%~50%,BRAF突变患者整体预后较差。目前,关于BRAF突变NSCLC的... 详细信息

肺癌是中国发病率和死亡率均排第1位的恶性肿瘤,其中非小细胞肺癌(NSCLC)约占肺癌的85%。BRAF突变在NSCLC患者中的发生率约为1.5%~5.5%,而BRAF V600突变约占所有BRAF突变的30%~50%,BRAF突变患者整体预后较差。目前,关于BRAF突变NSCLC的临床研究探索越来越多,新药研发层出不穷,但国内尚无BRAF突变NSCLC诊疗相关的规范化共识。中国抗癌协会肺癌专业委员会专家组整合国内外BRAF突变相关的指南共识和现有的临床研究结果,结合我国BRAF突变的NSCLC诊疗经验,制定了中国晚期非小细胞肺癌BRAF突变诊疗专家共识,针对BRAF突变NSCLC的临床评估、诊疗流程、合理用药、不良反应管理等给出了详细建议,旨在为BRAF突变NSCLC的规范化管理和诊疗提供参考意见。

关键词：肺肿瘤非小细胞肺癌 BRAF BRAF V600 BRAF抑制剂丝裂原活化蛋白激酶抑制剂

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Remarkable response of BRAF^(V600E)-mutated metastatic pancreatic cancer to BRAF/MEK inhibition:a case report

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Gastroenterology Report 2022年第1期10卷 615-617页

作者： Hong-Shuai Li Ke Yang Yan Wang Department of Medical Oncology National Cancer Center/National Clinical Research Center for Cancer/Cancer HospitalChinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical CollegeBeijingP.R.China Department of Medical Oncology Cancer Hospital of HuanXingChaoyang DistrictBeijingP.R.China

Introduction Advanced pancreatic ductal adenocarcinoma(PDAC)has very limited treatment options due to few targetable mutations,and chemotherapeutic treatment is currently the mainstay of palliative therapy for PDAC pa... 详细信息

关键词： V600E BRAF adenocarcinoma

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Effect of BRAF mutation on the prognosis for patients with colorectal cancer undergoing cytoreductive surgery for synchronous peritoneal metastasis

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Gastroenterology Report 2023年第1期11卷 492-499页

作者： Zhijie Wu Xiusen Qin Yuanxin Zhang Jian Luo Rui Luo Zonglu Cai Hui Wang Department of General Surgery(Colorectal Surgery) The Sixth Affiliated HospitalSun Yat-sen UniversityGuangzhouGuangdongP.R.China Guangdong Provincial Key Laboratory of Colorectal and Pelvic Floor Diseases The Sixth Affiliated HospitalSun Yat-sen UniversityGuangzhouGuangdongP.R.China Biomedical Innovation Center The Sixth Affiliated HospitalSun Yat-sen UniversityGuangzhouGuangdongP.R.China

Background:KRAS/BRAF mutations(mutKRAS/mutBRAF)are unfavorable prognostic factors for colorectal cancer(CRC)metastases to the liver and lungs.However,their effects on the prognosis for patients with synchronous peritoneal metastasis(S-PM)of CRC after cytoreductive surgery(CRS)and hyperthermic intraperitoneal chemotherapy(HIPEC)are controversial.In the study,we aimed to determine the effects of mutKRAS/mutBRAF on the prognosis for patients with S-PM who received CRS.Methods:A total of 142 patients diagnosed with S-PM between July 2007 and July 2019 were included in this study.The demographics,mutKRAS/mutBRAF status,overall survival(OS),and progression-free survival(PFS)of the patients were evaluated.The Kaplan–Meier method and log-rank test were used to estimate the difference in survival between groups.Results:Among 142 patients,68(47.9%)showed mutKRAS and 42(29.5%)showed mutBRAF.The median OS values were 8.4 and 34.3 months for patients with mutBRAF and BRAF wild-type,respectively(PBRAF as independent predictors for OS.Based on these findings,a nomogram was constructed.The C-index was 0.789(95%confidence interval,0.742–0.836),indicating good predictive ability of the model.Furthermore,the 1-and 2-year survival calibration plots showed good agreement between the predicted and actual OS rates.The area under curves of the 1-and 2-year survival predictions based on the nomogram were 0.807 and 0.682,respectively.Additionally,mutBRAF was significantly associated with lower PFS(PBRAF is an independent prognostic risk factor for S-PM.The established nomogram predicted the OS of patients with CRC having S-PM with high accuracy,indicating its usefulness as a valuable prognostic tool for the designated patient cohort.

关键词： colorectal cancer peritoneal metastasis BRAF prognosis

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磁共振成像检查体素内不相干运动成像及纹理分析对直肠癌BRAF基因突变的预测价值

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中华消化外科杂志 2022年第3期21卷 415-422页

作者：乔树林葛大赫韩祥松穆速李依明商丘市第一人民医院肿瘤放疗科商丘476105 商丘市第一人民医院消化内科商丘476105 商丘市第一人民医院胃肠肝胆科商丘476105 商丘市第一人民医院影像中心商丘476105

目的探讨磁共振成像(MRI)检查体素内不相干运动(IVIM)成像及纹理分析对直肠癌BRAF基因突变的预测价值。方法采用临床诊断性试验研究方法。收集2016年1月至2021年6月商丘市第一人民医院收治的36例直肠癌患者的临床病理资料;男28例,女8例... 详细信息

目的探讨磁共振成像(MRI)检查体素内不相干运动(IVIM)成像及纹理分析对直肠癌BRAF基因突变的预测价值。方法采用临床诊断性试验研究方法。收集2016年1月至2021年6月商丘市第一人民医院收治的36例直肠癌患者的临床病理资料;男28例,女8例;年龄为(50±4)岁。36例患者均经病理学检查确诊,经基因检测后,将12例BRAF基因突变型(均为BRAF V600E突变)设为突变组,24例BRAF野生型设为未突变组。患者术前均行MRI检查,采用Function Tool后处理软件分析得到IVIM相关后处理图。观察指标:(1)IVIM参数及纹理参数观察者一致性检验。(2)两组患者MRI检查IVIM参数比较。(3)两组患者MRI检查纹理参数比较。(4)IVIM参数与纹理参数的诊断效能。采用组内相关系数(ICC)评估参数观察者一致性(ICC>0.80为一致性良好),取ICC>0.80参数的平均值进一步分析。正态分布的计量资料以x±s表示,组间比较采用独立样本t检验;偏态分布的计量资料以M(Q_(1),Q_(3))表示,组间比较采用Mann⁃Whitney U检验。计数资料以绝对数表示,组间比较采用χ^(2)检验。等级资料比较采用非参数秩和检验。采用Logistic回归联合纹理参数,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析预测性能,并计算灵敏度、特异度。结果(1)IVIM参数及纹理参数观察者一致性检验:两名观察者记录IVIM参数表观扩散系数、扩散相关系数、灌注相关扩散系数、灌注相关参数的ICC值分别为0.91、0.90、0.91、0.89。纹理参数中最小值、最大值、第10百分位数、第25百分位数的ICC值均0.80。(2)两组患者MRI检查IVIM参数比较:突变组患者MRI检查IVIM参数中扩散相关系数、灌注相关参数分别为(0.70±0.13)×10^(-3) mm^(2)/s、0.39±0.30;未突变组上述指标分别为(0.79±0.12)×10^(-3) mm^(2)/s、0.17±0.10;两组患者上述指标比较,差异均有统计学意义(t=-2.17、2.46,PBRAF基因突变状态,且将两者联合诊断的预测效能更优。

关键词：直肠肿瘤磁共振成像体素内不相干运动纹理分析 BRAF

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星形细胞瘤伴BRAF p.T599dup突变1例

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中华神经外科杂志 2023年第6期39卷 621-623页

作者：赵静刘峰王之敏张妤干文娟苏州市独墅湖医院(苏州大学附属独墅湖医院)病理科苏州215125 苏州永鼎医院肿瘤外科苏州215200 苏州市独墅湖医院(苏州大学附属独墅湖医院)神经外科苏州215125 苏州市独墅湖医院(苏州大学附属独墅湖医院)放射科苏州215125

鼠类肉瘤病毒癌基因同源物(BRAF)非V600E突变型星形细胞瘤罕见.2022年1月苏州市独墅湖医院(苏州大学附属独墅湖医院)病理科诊断1例BRAF p.T599dup突变型星形细胞瘤患者.患者于神经外科行左侧颞叶肿瘤切除术治疗,肿瘤达全切除,术后患者... 详细信息

鼠类肉瘤病毒癌基因同源物(BRAF)非V600E突变型星形细胞瘤罕见.2022年1月苏州市独墅湖医院(苏州大学附属独墅湖医院)病理科诊断1例BRAF p.T599dup突变型星形细胞瘤患者.患者于神经外科行左侧颞叶肿瘤切除术治疗,肿瘤达全切除,术后患者恢复良好.随访14个月,未见肿瘤复发.

关键词：星形细胞瘤肿瘤切除术 BRAF 肿瘤复发左侧颞叶神经外科病理科全切除

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前列腺多形性巨细胞型腺癌2例临床病理学分析

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中华病理学杂志 2023年第12期52卷 1266-1268页

作者：刘海静郭文阳贺慧颖北京大学医学部基础医学院病理学系北京100191 北京大学第三医院病理科北京100191

目的探讨前列腺多形性巨细胞型腺癌(PGCC)的临床病理及分子特征。方法收集2例前列腺PGCC,复查切片并进行免疫组织化学(IHC)及425基因高通量测序(NGS)检测,同时复习文献,总结其临床病理、IHC及分子特征。结果2例前列腺PGCC患者年龄为55岁... 详细信息

目的探讨前列腺多形性巨细胞型腺癌(PGCC)的临床病理及分子特征。方法收集2例前列腺PGCC,复查切片并进行免疫组织化学(IHC)及425基因高通量测序(NGS)检测,同时复习文献,总结其临床病理、IHC及分子特征。结果2例前列腺PGCC患者年龄为55岁和70岁,组织形态上均可见数量不等多形性巨细胞伴有奇异细胞核(均>50%),伴有高级别经典型腺泡腺癌;IHC只有部分肿瘤性巨细胞表达雄激素受体、NKX3.1、P504s、前列腺特异性抗原(PSA)等前列腺上皮分化的标志物,同时部分细胞表达GATA3。NGS检测到多个基因的致病性/可能致病性变异及融合(TP53变异、BRAF变异、ZSCAN25-BRAF融合),导致TP53及BRAF功能异常,同时检测到SDHA及DNMT3A基因变异,形成截短蛋白,可能参与肿瘤发生发展;例2内分泌治疗后出现雄激素受体拷贝数扩增;微卫星状态分析提示2个病例均为微卫星稳定型,肿瘤突变负荷为低水平。结论PGCC多见于老年男性,形态学表现为在高级别经典型腺泡腺癌中出现多形性奇异核分化,部分前列腺分化标志物表达减少或缺失,具有不同于经典型前列腺腺癌的基因变异,可能影响肿瘤的进展和预后,并为靶向治疗提供了依据。

关键词： GATA3 TP53 内分泌治疗雄激素受体肿瘤性 BRAF 分子特征基因变异

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甲状腺透明变梁状肿瘤的细针穿刺细胞病理学特征

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中华病理学杂志 2022年第12期51卷 1254-1256页

作者：陈翠敏王哲刘军陶丽丽李玉梅尹为华北京大学深圳医院病理科深圳518000 空军军医大学西京医院病理科西安710032 中山大学附属第五医院病理科珠海519000

目的探讨甲状腺透明变梁状肿瘤(HTT)的细针穿刺细胞病理学特征。方法对5例HTT的临床、超声和细针穿刺细胞学形态进行观察, 其中1例制备细胞蜡块, 并行免疫组织化学检测。2例使用即时荧光定量PCR法进行BRAF V600E基因突变检测。结果 5例... 详细信息

目的探讨甲状腺透明变梁状肿瘤(HTT)的细针穿刺细胞病理学特征。方法对5例HTT的临床、超声和细针穿刺细胞学形态进行观察, 其中1例制备细胞蜡块, 并行免疫组织化学检测。2例使用即时荧光定量PCR法进行BRAF V600E基因突变检测。结果 5例患者中女性4例, 男性1例, 发病年龄25~48岁。细针穿刺细胞涂片中可见肿瘤细胞呈放射状、梁状或巢状结构, 肿瘤细胞与红染的玻璃样物质混杂。部分细胞胞质呈丝状, 偶见黄色小体, 细胞核圆形、卵圆形或梭形, 可见多量核沟和核内假包涵体。1例细胞蜡块显示肿瘤细胞呈梁状结构, 与玻璃样物质混合, 细胞特征与涂片类似。Ki-67(MIB-1)免疫细胞化学染色肿瘤细胞呈特征性的膜质着色。2例使用即时荧光定量PCR法检测, 均未发现BRAF V600E基因突变。结论 HTT是一种罕见的甲状腺肿瘤, 细胞形态与其他甲状腺肿瘤有重叠, 在细针穿刺细胞病理诊断中非常容易被误诊。正确诊断的关键在于提高对该肿瘤的细胞病理形态的认识, 制备细胞蜡块并行免疫组织化学检测具有重要的辅助诊断作用。

关键词：细胞蜡块发病年龄甲状腺肿瘤细胞胞质细胞特征病理学特征 BRAF 病理诊断

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CXCR4表达联合BRAF突变分析对筛选皮肤黑色素瘤免疫治疗人群的作用

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复旦学报（医学版） 2023年第1期50卷 71-79页

作者：戴赛林邵甲云雪燕郑洁复旦大学附属肿瘤医院麻醉科-复旦大学上海医学院肿瘤学系上海200032 广东省人民医院麻醉科-广东医学科学院广州510080

目的寻找合适的标志物,联合BRAF突变分析,筛选出适合使用免疫治疗的皮肤黑色素瘤(skin cutaneous melanoma,SKCM)患者,实现精准治疗。方法从癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库中获取SKCM患者(n=470)的数据,根据BRA... 详细信息

目的寻找合适的标志物,联合BRAF突变分析,筛选出适合使用免疫治疗的皮肤黑色素瘤(skin cutaneous melanoma,SKCM)患者,实现精准治疗。方法从癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库中获取SKCM患者(n=470)的数据,根据BRAF突变情况,分为非突变组(n=230)和突变组(n=235)。用R软件的Limma包分析上述两组患者各基因的mRNA表达,使用fold-change和校正后P值筛选出差异表达基因(differentially expressed gene,DEG),通过GO(Gene Ontology)数据库对差异基因进行通路富集分析。然后通过String数据库分析趋化因子受体4(chemokine receptor 4,CXCR4)与IL18和TP53分子的作用关系。此外利用Spearman的相关分析统计微卫星不稳定性(microsatellite instability,MSI)与CXCR4表达的相关性,用Pearson系数描述CXCR4与免疫检查点表达的相关性,同时利用Wilcoxon检验分析BRAF突变组与非突变组之间CXCR4的表达差异。最后,我们采用ggplot2和pheatmap分析了SIGLEC15、TIGIT、CD274、HAVCR2、PDCD1、CTLA4、LAG3和PDCD1LG2这8个基因转录本的表达值,并使用肿瘤免疫功能障碍和排斥(tumor immune dysfunction and exclusion,TIDE)算法预测各组免疫检查点阻断(immune checkpoint blockade,ICB)治疗反应性。结果 BRAF基因在SKCM中广泛突变,其突变引起的差异性表达基因主要集中在IL-18和TP53两个通路。CXCR4是与肿瘤关系最为密切的趋化因子,且与IL18和TP53均有密切关系。SKCM癌组织中CXCR4表达显著升高,且在BRAF突变患者中表达水平更高。进一步分析发现,CXCR4与免疫检查点分子HAVCR2,PDCD1,PDCD1LG2,TIGIT在表达上存在正相关性。结合CXCR4表达与BRAF突变情况,将SKCM患者分为4组:BRAF^(WT)-CXCR4高表达(G1组)、BRAF^(WT)-CXCR4低表达(G2组)、BRAF^(MUT)-CXCR4高表达(G3组)、BRAF^(MUT)-CXCR4低表达(G4组),并从免疫检查点表达、ICB预测评分方面评估CXCR4表达联合BRAF突变分析在免疫治疗预测方面的作用,并筛选出更适合免疫治疗的组别。结果表明,CXCR4低表达且BRAF^(WT)的患者MSI高,免疫检查点分子低表达且TIDE评分低即G2组最适合ICB治疗。结论 CXCR4有望成为监测疗效的潜在生物标志物。CXCR4表达水平联合BRAF突变分析,可为筛选出适合ICB治疗的SKCM患者提供理论基础。

关键词：皮肤黑色素瘤(SKCM) BRAF 趋化因子受体4(CXCR4) 免疫检查站封锁治疗(ICB)

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