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骨髓瘤细胞和骨髓间充质干细胞（bmmscs）相互作用过程中对bmmscs生物学特性影响的实验研究

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骨髓瘤细胞和骨髓间充质干细胞（BMMSCs）相互作用过程中对BMMSCs...

作者：张广莲江苏大学

学位级别：硕士

目的：研究多发性骨髓瘤(Multiple myeloma,MM)细胞与人骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,bmmscs)在体外共培养过程中,诱导bmmscs成骨的情况以及相关基因DKK1 Decorin、Collagen1、Smad5的表达情况。探讨体外骨髓瘤细胞能否诱导正常的BMMSC出现类似骨髓瘤病人BMMSC异常,为进一步阐明MM发病机制、探索MM新的临床治疗靶点提供理论和实验基础。方法：1、以分离和培养的正常第3代bmmscs作为研究对象。实验分为2组：①以bmmscs单独培养第5、8、12天组为对照组;②以与U266细胞共培养第5、8、12天三个时间点的bmmscs作为实验组。2、与U266细胞共培养的bmmscs细胞,分别于第5、8、12天倒置显微镜下检测生长状况、形态和细胞数目,比较实验组与对照组bmmscs细胞增殖能力的变化情况。3、分别在bmmscs单独培养及与U266细胞共培养五天后加入用含地塞米松(10- mol／L)、维生素C(0.05g／L)和β-甘油磷酸钠(10mol／L)的L-DMEM成骨条件培养液,诱导bmmscs向成骨细胞(Osteoblasts,OB)分化,于诱导第14天,取bmmscs分别进行碱性磷酸酶(ALP)和AlizarinRed染色以检测bmmscs的OB形成能力。4、在对照组bmmscs及实验组bmmscs第5、8、12天终止培养,提取总RNA,Real-TimePCR法测定bmmscs中DKK1、Decorin、Collagen 1、Smad5 mRNA表达水平,并进行统计学分析。结果： 1.倒置显微镜下观察,实验组及对照组bmmscs形态均以长梭形为主,呈贴壁生长,对照组及实验组bmmscs一般形态无显著差异。在共培养的过程中,bmmscs的增殖能力无显著变化。 2.成骨诱导后的第14天,检测bmmscs成骨能力,经Alizarin Red染色及ALP染色后结果显示：实验组与对照组bmmscs均可在成骨诱导培养过程中向成骨细胞分化,但与U266细胞共培养来源的bmmscs成骨分化潜能较差,矿化基质沉积减少。 ***-PCR结果显示：同对照相比,与U266细胞共培养的bmmscs细胞,其Collagen1、Decorin、DKK1和Smad5的基因表达有显著的变化。(1)Collagenl基因在对照组第5、8、12天表达的相对拷贝数均值分别为50.2382±16.1061、42.2650±9.5823和57.9167±17.0791.实验组第5、8、12天表达的相对拷贝数均值分别为19.8600±6.8429、20.8633±7.6858和15.8267±6.3454,且与对照组比较均显著降低(P均0.05)。结论： 1.与U266细胞共培养的bmmscs细胞,在5、8、12天内形态无显著变化。 2.与U266细胞共培养的bmmscs细胞增殖能力较对照组无显著变化,但其成骨细胞分化形成能力下降。 3.与U226细胞共培养后,bmmscs细胞群体的DKK1基因表达水平上调,Collagenl、Decorin、Smad5基因表达下调,表明在骨髓瘤疾病中骨髓瘤细胞有可能调节bmmscs成骨相关基因表达水,使bmmscs成骨能力下降。 4.U266共培养诱导骨髓微环境中bmmscs生物学特性的改变,可能在一定程度上促进了骨髓瘤病情的

关键词：多发性骨髓瘤 bmmscs 成骨细胞 Decorin DKK1 Collagen1 Smad5

二十碳五烯酸EPA对bmmscs活性及成脂分化能力的影响

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二十碳五烯酸EPA对BMMSCs活性及成脂分化能力的影响

作者：丁锐南方医科大学

学位级别：硕士

一、研究背景骨质疏松症(osteoporosis,OP)患病率逐年升高,在我国的发病率位于慢性疾病的第3位,于心血管疾病、糖尿病之后,严重危害中老年人的身体健康。治疗骨质疏松症的药物在近些年取得了巨大的发展,然而这些药物仍然存在一些问题有... 详细信息

一、研究背景骨质疏松症(osteoporosis,OP)患病率逐年升高,在我国的发病率位于慢性疾病的第3位,于心血管疾病、糖尿病之后,严重危害中老年人的身体健康。治疗骨质疏松症的药物在近些年取得了巨大的发展,然而这些药物仍然存在一些问题有待解决,发现新的方法具有一定的意义。目前大部分的研究认为,骨髓腔脂肪量和骨量之间成反比关系。在骨髓中,骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,bmmscs)扮演着分化为骨髓脂肪细胞和成骨细胞的角色。很多证据证明,抑制bmmscs成脂分化可能有望成为潜在治疗骨质疏松症的方法之一。Omega-3类长链多不饱和脂肪酸被认为在我们人体内具有高度的生物活性。其中,名为二十碳五烯酸(Eicosapentaenoic Acid,EPA)的一种长链多不饱和脂肪酸,其普遍存在于海洋动物和植物体内,被研究发现在很多疾病中展现出潜在的应用价值,其中包括在骨骼健康方面。二、研究目的探讨不同浓度EPA对C57BL/6J小鼠bmmscs活性及成脂分化能力的影响,论述在细胞水平上EPA对骨质疏松症的治疗和预防意义。三、研究内容1、将不同浓度EPA加入到bmmscs中共培养24h,与空白对照组对比,检测其对bmmscs活性的影响。2、采用油红O染色法观察不同浓度的EPA对bmmscs分化为脂肪细胞数量的影响。3、利用光学显微镜观察不同浓度的EPA对bmmscs分化的脂肪细胞内脂滴融合状态的影响。4、采用RT-qPCR法检测不同浓度的EPA对bmmscs成脂分化过程中基因过氧化物酶体激活受体γ(PPARy)及基因CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)表达的影响。5、采用Western-Blot法检测不同浓度的EPA对bmmscs成脂分化过程中PPARy蛋白和脂肪组织脂肪酸结合蛋白(FABP4)表达的影响。四、研究结果1、使用30μM、60μM的浓度EPA处理bmmscs 24h后有明显的促进增殖的作用,具有统计学差异(Pbmmscs活性有明显的抑制作用,具有统计学差异(Pbmmscs成脂分化诱导第7d时,60μM组和空白对照组相比,脂肪细胞数量未见明显差异;而100μM浓度组与空白对照组相比,脂肪细胞数量明显减少。3、在光学显微镜观察下,EPA成浓度依赖式抑制bmmscs分化的脂肪细胞内脂滴的融合。4、对bmmscs成脂诱导第7d时,60μM组和空白对照组相比,PPARy基因的表达显著被抑制(Pbmmscs成脂诱导7d后,60μM组和对照组相比,PPARy蛋白和FABP4蛋白的表达均没有显著性差异;而100μM组和对照组相比,PPARγ和FABP4蛋白的表达均被明显抑制(Pbmmscs成脂诱导分化为脂肪细胞和脂肪细胞内脂滴的融合,为EPA在骨质疏松症的药物研发方面提供新的证据。

关键词：骨质疏松症 EPA bmmscs 成脂分化 PPARγ

Let-7a调控bmmscs细胞聚合体修复颌骨缺损的初步研究

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Let-7a调控BMMSCs细胞聚合体修复颌骨缺损的初步研究

作者：陈萌重庆医科大学

学位级别：硕士

研究背景:肿瘤、外伤、感染、先天畸形等多种原因都可以导致颌骨缺损(Jaw defect),不仅对患者咀嚼、言语等功能造成不良影响,也有损颜面部美观,给患者心理以及社会适应造成障碍,目前临床上修复颌骨缺损主要的方式为骨移植,但效果欠佳、... 详细信息

研究背景:肿瘤、外伤、感染、先天畸形等多种原因都可以导致颌骨缺损(Jaw defect),不仅对患者咀嚼、言语等功能造成不良影响,也有损颜面部美观,给患者心理以及社会适应造成障碍,目前临床上修复颌骨缺损主要的方式为骨移植,但效果欠佳、骨量供不应求且副作用大。因此寻求更佳的修复方式迫在眉睫。Let-7a是micro RNA let-7家族中的一员,目前已得到广泛研究,研究显示其可调控bmmscs的免疫调节功能,但国内外暂无其在调控干细胞成骨分化的报导。研究目的:本实验旨在探索let-7a是否可调控bmmscs细胞聚合体的成骨分化并参与大鼠颌骨缺损后的修复作用。研究方法:***的培养和鉴定及细胞聚合体培养:bmmscs从SD大鼠的骨髓腔中分离,在完全培养基中密度长至80-90%后传代,P3-P5细胞用于鉴定以及后续实验;鉴定包括流式鉴定细胞表面抗原、增殖能力、成脂成骨分化鉴定;细胞聚合体在加入维生素C完全培养基中培养7天后获得,进行大体及HE染色观察。***-7a对于bmmscs细胞聚合体体外成骨分化能力的影响:分为三组(mi、in和nc),分别将一定浓度的let-7a mimic、inhibitor和negative control转染bmmscs细胞聚合体,进行成骨诱导然后进行体外成骨分化的检测,如实时定量RT-PCR、Western blot检测成骨相关基因和蛋白表达、通过ALP染色和活性检测早期成骨分化情况,茜素红染色观察成骨分化晚期矿化结节的形成情况。***-7a对bmmscs细胞聚合体裸鼠皮下异位成骨的调控作用:分为三组(mi、in和nc),将bmmscs培养成细胞聚合体,同法2进行细胞转染,然后将聚合体与HA-TCP结合移植入裸鼠皮下,4w后取材固定,脱钙、切片进行HE染色后观察。***-7a调控bmmscs细胞聚合体参与大鼠颌骨缺损修复:分为四组(mi、in、nc和blank control),将bmmscs培养成细胞聚合体,同法2进行细胞转染,然后将聚合体与HA-TCP结合制成移植物备用。建立大鼠颌骨缺损模型,将移植物植入缺损区,其中blank control组不移植。在1w、4w、6w分别取材固定,进行micro-CT扫描后脱钙、切片染色后观察。研究结果:1.成功提取并完成bmmscs的培养及鉴定;2.成功培养bmmscs细胞聚合体;***-7a mimic、inhibitor和negative control转染bmmscs聚合体后,组间比较Fas m RNA以及蛋白表达量,mi组最低、in组最高;组间比较let-7a的表达量,mi组较其他两组显著上升。提示转染成功且有效。4.转染后组间比较成骨相关基因表达,mi组OCN、OPG、RUNX2的m RNA水平显著上升,OSX、RUNX2蛋白水平显著上升;组间比较ALP染色和活性以及茜素红S染色,发现mi组ALP染色最深及活性最高,in染色最浅,活性最低,提示let-7a可促进体外早期成骨;mi组茜素红染色矿化结节最多,in组矿化结节最少。提示let-7a可促进体外晚期成骨。5.转染后组间比较细胞外基质相关基因表达,mi组Col-1、Fibronectin、Laminin m RNA表达显著上升,mi组Col-1蛋白表达显著增加,integrinβ1蛋白表达对比in组显著增加,提示let-7a促进胞外基质相关基因及蛋白表达水平表达;HE染色组间对比无显著差异,提示let-7a对bmmscs细胞聚合体胞外基质无显著影响。***-7a转染bmmscs聚合体后植入裸鼠皮下,HE染色组间对比,见mi组骨细胞及骨陷窝最多,新生类骨质形成最多,in组效果最少,差异显著;***-7a处理bmmscs聚合体后修复大鼠颌骨缺损,Micro-CT和HE染色组间对比,mi组较其他三组修复完成度最高,在6w时基本完成修复,nc组其次,in组仅高于未植入移植物的blank control组,差异显著。研究结论:Let-7a可以促进bmmscs细胞聚合体体内、外成骨,对细胞聚合体胞外基质相关基因在基因和蛋白水平有一定促进作用,并可以提升原位修复大鼠颌骨缺损的效果,但具体分子机制尚待进一步研究。

关键词： let-7a bmmscs 成骨分化细胞聚合体颌骨缺损

构建miR-378a修饰的bmmscs膜片的成骨和成血管性能的体外实验研究

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构建miR-378a修饰的BMMSCs膜片的成骨和成血管性能的体外实验研究

作者：李君新疆医科大学

学位级别：硕士

目的:通过研究过表达miR-378a基因递送至SD大鼠骨髓间充质干细胞（bmmscs）膜片的可行性及对膜片成骨及成血管分化能力的影响与作用机制,探讨miR-378a作为骨组织工程基因治疗潜在工具的可行性及其对骨缺损修复的影响。方法:分离培养SD大... 详细信息

目的:通过研究过表达miR-378a基因递送至SD大鼠骨髓间充质干细胞（bmmscs）膜片的可行性及对膜片成骨及成血管分化能力的影响与作用机制,探讨miR-378a作为骨组织工程基因治疗潜在工具的可行性及其对骨缺损修复的影响。方法:分离培养SD大鼠bmmscs并鉴定其表型及定向分化能力;预实验摸索慢病毒载体（LV）转染bmmscs的最佳感染条件,选用合适滴度的miR-378a慢病毒载体（LV-miR-378a）和空载慢病毒（LV）感染bmmscs,通过流式细胞术、激光共聚焦显微镜检测慢病毒转染效率;CCK-8法检测慢病毒感染bmmscs后的细胞毒性;然后对转染后的bmmscs进行成膜及成骨诱导培养,分别于3、7、14天时通过倒置显微镜观察膜片形态,进行碱性磷酸酶（ALP）染色和RT-PCR检测,并于14天时进行Western blot检测成骨及成血管相关指标的表达水平。结果:（1）流式和激光共聚焦结果显示:慢病毒转染bmmscs完成后绿色荧光蛋白EGFP表达无明显差异,CCK-8结果提示,与空白组及LV-bmmscs组比较,LV-miR-378a-bmmscs组细胞增殖速度加快;（2）成膜诱导2d、6d时,3组bmmscs膜片镜下的形态学变化无明显差异,3组膜片进行成骨诱导3d、7d、14d后均发生成骨分化现象,ALP染色结果显示,各时间段的LV-miR-378a-bmmscs组黑色沉淀物数量最多、颜色最明显;（3）RT-PCR结果表明,从基因m RNA水平上,与空白组及LV-bmmscs组比较,LV-miR-378a-bmmscs组的成骨及成血管分化相关基因Runx相关转率因子2（Runx2）、I型胶原（COLI）、血管内皮生长因子（VEGF）、血小板衍生生长因子（PDGF）均明显升高（P＜0.001）;（4）Western blot结果表明,在蛋白水平上,LV-miR-378a-bmmscs组膜片可合成更多的Runx2和VEGF蛋白,明显高于空白组（P＜0.01）及LV-bmmscs组（P＜0.001）。结论:过表达miR-378a慢病毒载体可递送至bmmscs膜片中,同时可以在一定程度上增强bmmscs的增殖和bmmscs膜片的骨生成及血管生成能力。

关键词： miR-378a bmmscs 细胞膜片技术成骨成血管骨组织工程

miR-210促进小鼠bmmscs血管内皮生长因子的表达和分泌

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miR-210促进小鼠BMMSCs血管内皮生长因子的表达和分泌

作者：孙世林安徽医科大学

学位级别：硕士

目的研究小分子非编码RNA mi R-210对小鼠骨髓间充质干细胞(bmmscs)表达和分泌血管内皮生长因子(VEGF)的影响,为骨组织工程血管化研究提供实验数据。方法首先体外全骨髓液贴壁法培养小鼠bmmscs,通过构建慢病毒载体Lenti-Lac Z和Lenti-mi... 详细信息

目的研究小分子非编码RNA mi R-210对小鼠骨髓间充质干细胞(bmmscs)表达和分泌血管内皮生长因子(VEGF)的影响,为骨组织工程血管化研究提供实验数据。方法首先体外全骨髓液贴壁法培养小鼠bmmscs,通过构建慢病毒载体Lenti-Lac Z和Lenti-mi R-210,分别转染小鼠bmmscs和人脐静脉内皮细胞(HUVEC);MTT法检测慢病毒载体对小鼠bmmscs增殖情况的影响;Lenti-mi R-210/bmmscs和Lenti-Lac Z/bmmscs于转染慢病毒载体后培养至第7d RT-PCR检测VEGF m RNA基因表达,第14d Western blot检测VEGF蛋白表达;通过PKH26红色荧光染料对Lenti-mi R-210/HUVEC和Lenti-Lac Z/HUVEC进行染色后,进行24h Matrigel成管实验,通过荧光显微镜观察成管效果,统计两组成管长度;构建Hy Stem-HP凝胶缓释系统,agomir-210和agomir-NC与bmmscs复合Hy Stem-HP凝胶后行裸鼠皮下注射,7d后取标本进行10%中性福尔马林固定,脱水后包埋,石蜡切片行CD31免疫荧光染色,检测CD31阳性细胞含量。使使用SPSS13.0软件进行统计分析,实验数据以均数±标准差形式呈现,t检验和方差分析处理实验数据,检验水准取α=0.05。结果全骨髓液培养后5-7d,镜下见部分细胞呈梭形或多角形,散在分布;传代后贴壁细胞呈梭形旋涡状生长,细胞形态随传代培养逐渐一致;mi R-210慢病毒载体转染小鼠bmmscs和HUVEC,当MOI=10时,转染效率最高,MTT法检测病毒对bmmscs增殖无影响,Lenti-mi R-210和Lenti-Lac Z两组细胞培养第7dRT-PCR检测VEGF m RNA基因表达结果,mi R-210促进小鼠bmmscs VEGF的表达(Pbmmscs复合Hy Stem-HP凝胶缓释系统裸鼠皮下注射7d后标本CD31免疫荧光染色结果统计分析显示agomir-210组CD31阳性细胞含量明显高于agomir-NC组,约是agomir-NC组的3倍。结论通过慢病毒载体,转染小鼠bmmscs,过表达目的基因mi R-210后能够有效促进小鼠bmmscs VEGF的表达和分泌,agomir-210 Hy Stem-HP凝胶裸鼠皮下实验表明,agomir-210促进bmmscs微血管的形成。

关键词： miR-210 bmmscs VEGF 基因转染 HyStem-HP水凝胶

犬bmmscs移植治疗犬细小病毒病的临床效果研究

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犬BMMSCs移植治疗犬细小病毒病的临床效果研究

Zmpste24^(-/-)小鼠骨髓间充质干细胞的增殖凋亡及其TRP通道的表达研究

中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十四次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会第二十三次学术研讨会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会第三次学术研讨会、中国兽医病理学家第三次学术研讨会

作者：赵屹钦曾梦颖张迪郭娟陈鹏林榕高洪严玉霖云南农业大学动物医学院

研究目的:通过异体骨髓间充质干细胞(bmmscs)移植治疗建模犬细小病毒病(CPD)犬,治疗前后对病犬进行血常规检查,并通过检测治疗前后细胞因子的变化和病毒载量的变化来评价治疗效果,为bmmscs移植治疗CPD提供科学依据和技术支持。材料方法... 详细信息

研究目的:通过异体骨髓间充质干细胞(bmmscs)移植治疗建模犬细小病毒病(CPD)犬,治疗前后对病犬进行血常规检查,并通过检测治疗前后细胞因子的变化和病毒载量的变化来评价治疗效果,为bmmscs移植治疗CPD提供科学依据和技术支持。材料方法:1.采用密度梯度离心法体外分离幼犬bmmscs,传代培养。取第三代bmmscs,用流式细胞仪检测细胞表面标记CD34和CD44,进行成骨和成脂诱导,采用茜素红染色鉴定骨向分化能力。2.采集疑似CPD犬的血便,处理后接种到猫肾(F81)细胞,细胞病变后进行间接免疫荧光(IFA)和VP2

关键词：犬细小病毒病 bmmscs 健康犬移植治疗临床效果研究

来源： cnki会议评论

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牙体牙髓牙周病学杂志 2016年第2期26卷 63-67,85页

作者：刘窕张辉缪延宇李蓓金岩武俊杰邵金陵(指导) 军事口腔医学国家重点实验室陕西省口腔医学重点实验室第四军医大学口腔医院正畸科陕西西安710032 军事口腔医学国家重点实验室陕西省口腔医学重点实验室第四军医大学口腔医院组织工程研发中心陕西西安710032 西安交通大学口腔医院陕西西安710004

目的:探讨Zmpste24^(-/-)小鼠骨髓间充质干细胞(bmmscs)的增殖凋亡情况及瞬时性受体电位通道(TRP通道)表达水平与野生型(WT)小鼠的区别。方法:体外分离培养4月龄Zmpste24^(-/-)和WT小鼠的bmmscs,经干细胞表面分子鉴定后,分别采用β-半... 详细信息

目的:探讨Zmpste24^(-/-)小鼠骨髓间充质干细胞(bmmscs)的增殖凋亡情况及瞬时性受体电位通道(TRP通道)表达水平与野生型(WT)小鼠的区别。方法:体外分离培养4月龄Zmpste24^(-/-)和WT小鼠的bmmscs,经干细胞表面分子鉴定后,分别采用β-半乳糖苷酶试剂盒检测两种小鼠细胞的衰老情况;流式细胞仪检测小鼠细胞的增殖、凋亡情况;实时定量RT-PCR检测两种小鼠细胞的TRP通道表达水平;激光共聚焦显微镜检测两种小鼠的细胞内Ca2+浓度。结果:Zmpste24^(-/-)和WT小鼠的bmmscs均阳性表达Sca-1,阴性表达CD34、CD45。Zmpste24^(-/-)小鼠bmmscs的衰老细胞数目和凋亡水平明显高于WT小鼠(Pbmmscs的增殖率降低、凋亡率升高可能与其TRP通道高表达、胞内钙离子浓度升高有关。

关键词： HGPS bmmscs TRP通道增殖凋亡

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Periostin对骨质疏松大鼠牙槽骨缺损修复效果的影响

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实用口腔医学杂志 2019年第5期35卷 629-633页

作者：李豆豆周维维曹猛军事口腔医学国家重点实验室口腔疾病国家临床医学研究中心陕西省口腔疾病临床医学研究中心第四军医大学口腔医院正畸科

目的:探究Periostin(POSTN)对骨质疏松大鼠牙槽骨缺损修复效果的影响。方法:PCR检测去卵巢(OVX)SD大鼠骨髓间充质干细胞(bmmscs)内POSTN的表达;上调OVX-bmmscs内POSTN的表达,利用PCR检测细胞成骨分化水平。建立骨质疏松SD大鼠牙槽骨缺... 详细信息

目的:探究Periostin(POSTN)对骨质疏松大鼠牙槽骨缺损修复效果的影响。方法:PCR检测去卵巢(OVX)SD大鼠骨髓间充质干细胞(bmmscs)内POSTN的表达;上调OVX-bmmscs内POSTN的表达,利用PCR检测细胞成骨分化水平。建立骨质疏松SD大鼠牙槽骨缺损模型,在缺损处分别植入OVX-bmmscs细胞膜片、POSTN-OVX-bmmscs细胞膜片或不作处理(对照组)。3、6周后进行Micro-CT扫描和HE染色观察POSTN对牙槽骨缺损的修复效果。结果:OVX-bmmscs内POSTN的表达降低。上调POSTN后,OVX-bmmscs的ALP、OCN和Runx2的mRNA表达水平升高,Sost的mRNA表达水平降低。体内实验证明,POSTN-OVX-bmmscs细胞膜片组可促进骨的再生和血管形成。结论:POSTN可改善去势大鼠bmmscs的成骨能力,有利于绝经后骨质疏松大鼠骨的再生。

关键词： Periostin(POSTN) 骨质疏松 bmmscs 骨再生

自然衰老小鼠骨髓间充质干细胞增龄性改变的研究

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牙体牙髓牙周病学杂志 2014年第4期24卷 187-191页

作者：马洋刘文佳戚朦金岩第四军医大学口腔医院组织工程研发中心军事口腔医学国家重点实验室陕西西安710032

目的:探讨自然衰老小鼠骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,bmmscs)在衰老过程中生物学特点的改变。方法:分离、培养年轻(2月龄)、年老(16月龄)C57/BL6J小鼠的bmmscs,经干细胞表面分子鉴定后,Western Blot检测2组BMM... 详细信息

目的:探讨自然衰老小鼠骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,bmmscs)在衰老过程中生物学特点的改变。方法:分离、培养年轻(2月龄)、年老(16月龄)C57/BL6J小鼠的bmmscs,经干细胞表面分子鉴定后,Western Blot检测2组bmmscs的Tert、Acetyl-P53蛋白表达水平;氧化应激活性氧(ROS)试剂盒检测ROS表达水平;流式细胞仪检测并比较两组细胞的增殖、凋亡状态。结果:年轻、年老小鼠bmmscs阳性表达Sca-1,阴性表达CD34、CD45,符合间充质干细胞表达特性;年老小鼠bmmscs Tert蛋白表达水平明显低于年轻组(Pbmmscs出现增龄性变化,这些变化可能在骨衰老中起着重要作用。

关键词：衰老骨质疏松 bmmscs 端粒 P53 ROS 增殖凋亡

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