检索结果-南通市图书馆

miR-153-3p靶向结合bcl2基因调控鼻咽癌细胞增殖、凋亡和周期的实验研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

宁夏医学杂志 2023年第5期45卷 385-388,F0002页

作者：李霞穆建梅王志婕闫小会马瑞霞陈晓平宁夏银川市第三人民医院耳鼻咽喉头颈外科宁夏银川750001 宁夏医科大学总医院宁夏银川750004 宁夏银川市第一人民医院宁夏银川750001 上海公利医院上海200120

目的探讨miR-153-3p调控鼻咽癌细胞增殖、凋亡和周期的作用。方法利用生物信息学软件对miR-153-3p的候选靶基因进行预测。实时荧光定量PCR和Western blotting分别检测miR-153-3p对细胞内mRNA和蛋白表达的影响。用密理博MUSETM细胞检测... 详细信息

目的探讨miR-153-3p调控鼻咽癌细胞增殖、凋亡和周期的作用。方法利用生物信息学软件对miR-153-3p的候选靶基因进行预测。实时荧光定量PCR和Western blotting分别检测miR-153-3p对细胞内mRNA和蛋白表达的影响。用密理博MUSETM细胞检测仪对细胞周期和细胞凋亡情况进行检测。用CCK8法和克隆技术形成实验检测细胞增殖能力。结果生物信息学预测结果显示,miR-153-3p与bcl2分子之间存在一个高可信度的结合区。miR-153-3p mimic能上调miR-153-3p的表达,降低bcl2蛋白的表达。与对照组相比,过表达miR-153-3p的6-10B细胞的凋亡明显增加,增殖能力受到显著抑制。结论miR-153-3p通过下调bcl2的表达,能够促进鼻咽癌细胞凋亡,抑制其增殖。

关键词：鼻咽癌 miR-153-3p bcl2基因细胞凋亡和增殖 6-10B细胞

bcl2基因修饰骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤大鼠实验研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

创伤与急危重病医学 2019年第5期7卷 320-322,325页

作者：姜福贵李俊沈成华陈劲松蒋文昊黔东南州人民医院创伤骨科

目的探究bcl2基因修饰的骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植治疗脊髓损伤大鼠的疗效及作用机制。方法分离培养大鼠BMSCs并采用bcl2转染BMSCs建立鼠脊髓损伤模型,随机分为模型组、BMSCs组及bcl2+BMSCs组,另选取36只健康大鼠作为对照组。脊髓损... 详细信息

目的探究bcl2基因修饰的骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植治疗脊髓损伤大鼠的疗效及作用机制。方法分离培养大鼠BMSCs并采用bcl2转染BMSCs建立鼠脊髓损伤模型,随机分为模型组、BMSCs组及bcl2+BMSCs组,另选取36只健康大鼠作为对照组。脊髓损伤1周后对BMSCs组大鼠进行BMSCs移植,对bcl2+BMSCs组大鼠移植经bcl2转染的BMSCs,对照组及模型组大鼠注射等量生理盐水。移植术后,采用Western blot检测不同时间脊髓损伤周边区bcl2表达水平,原位末端标记法(TUNEL)染色检测细胞凋亡情况,免疫组化检测神经丝蛋白200(NF-200)及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达量,HE染色探究大鼠脊髓组织及脊髓神经细胞变化,运动功能评分(BBB)评估各组大鼠运动功能恢复情况。结果细胞移植治疗后,bcl2+BMSCs组大鼠bcl2蛋白相对表达量显著高于其他3组,TUNEL染色阳性细胞数显著低于模型组及BMSCs组,NF-200蛋白阳性面积高于模型组及BMSCs组,GFAP蛋白阳性面积低于模型组及BMSCs组,差异具有统计学意义(Pbcl2+BMSCs组大鼠脊髓组织细胞及脊髓神经细胞状态、BBB评分均优于模型组和BMSCs组。结论bcl2基因修饰BMSCs移植治疗脊髓损伤大鼠,能显著抑制细胞凋亡,促进神经功能恢复,疗效显著。

关键词： bcl2基因骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤

雄激素非依赖性前列腺癌细胞株bcl2和GRB10基因启动子区甲基化研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国微生态学杂志 2013年第4期25卷 381-383页

作者：许刚秦婷婷温州医学院附属第一医院实验诊断中心浙江温州325000

目的探讨基因甲基化在雄激素非依赖性前列腺癌(androgen-independent prostate cancer,AIPC)转化过程中可能的作用。方法采用重亚硫酸盐测序PCR(bisulfite genomic sequencing PCR,BSP)联合TA克隆测序检测雄激素依赖性前列腺癌(androgen-dependent prostate cancer,ADPC)细胞株LNCaP和雄激素非依赖性前列腺癌细胞株LNCaP-AI(androgen independent)中生长因子受体结合蛋白10(growth factor receptor-bound protein 10,GRB10)和B细胞性淋巴瘤/白血病-2基因(B-cell lymphoma/leukaemia-2 gene,bcl2)的甲基化状态。结果 GRB10基因在LNCaP-AI细胞和LNCaP细胞中的甲基化率分别为9.6%、7.4%;bcl2基因在LNCaP-AI细胞和LNCaP细胞中的甲基化率分别为14.7%、25.3%,这两个基因在LNCaP细胞和LNCaP-AI细胞的甲基化率差异无统计学意义(P>0.05)。结论 GRB10和bcl2基因的异常表达与基因甲基化无明显相关,而二者是否参与到前列腺癌激素非依赖性到转化过程以及具体机制有待进一步研究。

关键词：雄激素非依赖性前列腺癌 DNA甲基化 GRB10基因 bcl2基因亚硫酸氢钠修饰PCR TA克隆

沉默bcl2、Bak1基因表达对成骨肉瘤MG-63细胞增殖及成骨能力的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

山东医药 2018年第16期58卷 34-36页

作者：黄宏兴柴爽黄红万雷王吉利广州中医药大学附属骨伤科医院广州510240 广州中医药大学

目的探讨沉默bcl2、Bak1基因表达对成骨肉瘤MG-63细胞增殖及成骨能力的影响。方法收集对数生长期MG-63细胞,随机分为sh bcl2组、sh Bak1组、共转染组和空白对照组。sh bcl2组、sh Bak1组、空白对照组分别单独转染sh bcl2、sh Bak1重组... 详细信息

目的探讨沉默bcl2、Bak1基因表达对成骨肉瘤MG-63细胞增殖及成骨能力的影响。方法收集对数生长期MG-63细胞,随机分为sh bcl2组、sh Bak1组、共转染组和空白对照组。sh bcl2组、sh Bak1组、空白对照组分别单独转染sh bcl2、sh Bak1重组腺病毒和空载腺病毒,共转染组同时转染sh bcl2及sh Bak1重组腺病毒。转染48 h,采用MTT法检测细胞增殖率,对硝基苯磷酸盐法检测碱性磷酸酶(ALP)活性,Western blotting法检测成骨相关蛋白骨形态发生蛋白4(BMP4)、骨桥蛋白(OPN)、Runt相关转录因子2(Runx2)、TNF-α表达。结果 sh bcl2组细胞增殖率、ALP活性及BMP4、OPN、Runx2相对表达量均低于空白对照组,TNF-α相对表达量高于空白对照组(P均2相对表达量均高于空白对照组,TNF-α相对表达量低于空白对照组(P均2、TNF-α相对表达量比较均无统计学差异(P均>0.05)。结论沉默bcl2基因表达可抑制MG-63细胞增殖及成骨能力,沉默Bak1基因则具有相反的作用;bcl2与Bak1共同参与MG-63细胞的凋亡及成骨过程。

关键词：骨质疏松症 bcl2基因 Bak1基因基因沉默重组腺病毒成骨肉瘤MG-63细胞

福辛普利对自发性高血压大鼠心室重塑时左室心肌细胞凋亡和bcl_2及Bax基因表达的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

临床心血管病杂志 2001年第10期17卷 463-465页

作者：黄恺戴闺柱华中科技大学同济医学院心血管病研究所华中科技大学同济医学院附属协和医院心内科武汉430022

目的 :研究福辛普利对自发性高血压大鼠 ( SHR)左室心肌细胞凋亡和 bcl2 、Bax基因表达的影响。方法 :1使用左室重量指数作为大鼠左室重构的指标 ;2使用末端脱氧核苷酸转移酶标记技术和 DNA电泳技术 ,研究心肌细胞凋亡的发生情况 ;3使... 详细信息

目的 :研究福辛普利对自发性高血压大鼠 ( SHR)左室心肌细胞凋亡和 bcl2 、Bax基因表达的影响。方法 :1使用左室重量指数作为大鼠左室重构的指标 ;2使用末端脱氧核苷酸转移酶标记技术和 DNA电泳技术 ,研究心肌细胞凋亡的发生情况 ;3使用核酸原位杂交技术研究左室心肌细胞 bcl2 、Bax基因表达的变化。结果 :1福辛普利使 SHR左室重量指数显著降低 ,由 3 .3 1± 0 .17下降至 2 .5 6± 0 .2 5 ,P 2福辛普利能显著减少左室心肌细胞凋亡的发生〔( 2 14± 2 8)下降至 ( 5 4± 11)个凋亡细胞 / 10 5细胞 ,Pbcl2 基因的表达 ,同时减少 Bax的基因表达。福辛普利使切片的 bcl2 与 Bax基因表达阳性面积百分数之比恢复正常 (均 P bcl2 及 Bax基因表达阳性面积百分数之比恢复正常是其抗细胞凋亡作用的一个机制。

关键词：高血压心室重构福辛普利细胞凋亡 bcl2基因 Bax基因大鼠心肌细胞

培多普利对自发性高血压大鼠心室重塑过程中左室心肌细胞凋亡和bcl_2、Bax基因表达的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

华中科技大学学报（医学版） 2002年第1期31卷 40-43页

作者：黄恺戴闺柱华中科技大学同济医学院心血管病研究所武汉430022

为研究培多普利对自发性高血压大鼠 (SHR)左室心肌细胞凋亡和 bcl2 、Bax基因表达的影响 ,采用 TUNEL技术及 DNA电泳研究心肌细胞凋亡 ;原位杂交研究 bcl2 、Bax基因表达。结果显示 :培多普利 1抑制左室心肌细胞凋亡发生 ,2使 bcl2 / Ba... 详细信息

为研究培多普利对自发性高血压大鼠 (SHR)左室心肌细胞凋亡和 bcl2 、Bax基因表达的影响 ,采用 TUNEL技术及 DNA电泳研究心肌细胞凋亡 ;原位杂交研究 bcl2 、Bax基因表达。结果显示 :培多普利 1抑制左室心肌细胞凋亡发生 ,2使 bcl2 / Bax基因表达比率恢复正常。提示 :培多普利使 SHR心肌 bcl2 / Bax表达比率恢复正常是其抑制心室重塑过程中心肌细胞凋亡的重要机制。

关键词：心室重构培多普利细胞凋亡基因表达 bcl2基因 Bax基因心肌细胞

卵巢上皮癌bcl-2、p53基因与多药耐药的相关研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

实用肿瘤学杂志 2000年第2期14卷 82-84页

作者：钟雪云陈运贤林华欢程兆明暨南大学医学院中山医科大学附属第一医院广东省人民医院

目的探讨卵巢上皮癌bcl—2、p53基因与肿瘤多药耐药的相关关系。方法用免疫组化LSAB法检测70例卵巢上皮癌和15例交界瘤的bcl—2、p53基因水平的表达。结果卵巢癌的bcl—2基因水平呈低表达,浆液性癌、粘液性癌的bcl—2基因表达率分别... 详细信息

目的探讨卵巢上皮癌bcl—2、p53基因与肿瘤多药耐药的相关关系。方法用免疫组化LSAB法检测70例卵巢上皮癌和15例交界瘤的bcl—2、p53基因水平的表达。结果卵巢癌的bcl—2基因水平呈低表达,浆液性癌、粘液性癌的bcl—2基因表达率分别为11％(5/45)和20％(5/25),交界瘤呈阴性反应。p53抑制基因在浆液性癌、粘液性癌和交界瘤的表达率则分别为77％、72％和0％,P—gp基因在卵巢癌呈高表达,上述三类标本的阳性率分别为88％、80％及33％。结论 bcl—2与p53基因水平的表达与肿瘤细胞的多药耐药相关,bcl—2可作为预测肿瘤预后及药物敏感性的重要指标之一。

关键词：卵巢上皮癌多药耐药性 bcl2基因 p53基因

脂质体转染bcl-2反义寡核苷酸G3139在HL-60细胞中的动力学模式

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国药理学通报 2000年第5期16卷 547-550页

作者：朱元贵卓光生陈志哲吕联煌福建医科大学附属协和医院·福建省老年医学研究所福州350001 福建医科大学附属协和医院·福建省血液病研究所福州350001

目的　应用阳离子脂质体介导或直接转染时 ,建立HL 6 0细胞摄入由 5 FITC标记的bcl 2反义寡核苷酸G3139的动力学模式及观察G 3139在细胞内的分布。方法　流式细胞仪测定细胞内的相对平均荧光强度 ,荧光显微镜观察细胞内的荧光分布。... 详细信息

目的　应用阳离子脂质体介导或直接转染时 ,建立HL 6 0细胞摄入由 5 FITC标记的bcl 2反义寡核苷酸G3139的动力学模式及观察G 3139在细胞内的分布。方法　流式细胞仪测定细胞内的相对平均荧光强度 ,荧光显微镜观察细胞内的荧光分布。结果　①脂质体介导转染法显著提高HL 6 0细胞对G 3139的摄入 ,当DOSPER/G 3139(μg/μg)为 2 2 / 1时 ,细胞内相对平均荧光强度可达G 3139直接作用时的 40倍 ,而且HL 6 0细胞对G 3139的摄入跟G3139的浓度和作用时间有关。②细胞内的G 3139可向胞外转运 ,在DOSPER介导转染后 ,胞内荧光强度衰减缓慢 ,t1/ 2 约为 4h ,而G 3139直接作用后 ,t1/ 2 约为 0 5h ;③DOSPER介导转染 6h后 ,细胞内荧光物质主要以明亮的点状聚集在细胞核和部分细胞浆的细胞器中 ,而G 3139直接作用时 ,荧光物质则弥漫分布于胞浆中。结论　DOSPER可以增加G 3139的细胞摄入并改变其胞内分布 ,可能是阳离子脂质体增加bcl 2反义寡核苷酸生物活性的重要原因。

关键词：反义寡核苷酸阳离子脂质体 HL60细胞 bcl2基因

GINS2在早幼粒细胞白血病发生中的作用及其分子机制研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

GINS2在早幼粒细胞白血病发生中的作用及其分子机制研究

作者：张曦重庆医科大学

学位级别：硕士

第一部分干扰GINS2表达对HL60细胞增殖和凋亡的影响目的：探讨干扰GINS2基因表达后对人早幼粒细胞白血病细胞株HL60增殖和凋亡的影响及其机制。方法： RT-PCR分别检测GINS2基因在3株白血病细胞株HL60、U937、THP-1中的表达量。设计并合... 详细信息

第一部分干扰GINS2表达对HL60细胞增殖和凋亡的影响目的：探讨干扰GINS2基因表达后对人早幼粒细胞白血病细胞株HL60增殖和凋亡的影响及其机制。方法： RT-PCR分别检测GINS2基因在3株白血病细胞株HL60、U937、THP-1中的表达量。设计并合成针对GINS2基因的靶向干扰序列，稳定转染高表达该基因的HL60细胞，荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达情况;RT-PCR和Western blot分别检测各组细胞转染后GINS2的mRNA及蛋白水平;MTT法检测细胞的增殖和凋亡情况;流式细胞术分析细胞的凋亡率;Western blot检测凋亡相关蛋白的表达。结果：在3株白血病细胞株中，GINS2的表达量由低到高依次是：THP-1，U937，HL60。干扰质粒转染HL60细胞后，与阴性对照组及未处理组相比，干扰组GINS2的mRNA及蛋白水平均显著降低，且细胞的增殖能力明显受抑。同时，凋亡相关蛋白Bax表达水平显著增高而bcl2显著降低。结论：下调GINS2基因表达后，可通过上调Bax表达，下调bcl2表达来抑制HL60细胞增殖并促进其凋亡。第二部分干扰GINS2表达对HL60细胞周期调控因子的变化及机制目的：观察下调GINS2基因的表达后对人白血病细胞株HL60周期调控因子的变化并探讨其机制。方法：脂质体介导并稳定转染干扰质粒的细胞为干扰组，转染阴性对照质粒的细胞为阴性对照组，只加入脂质体的细胞为空白对照组，未转染的HL60细胞为未处理组。采用集落形成实验测定细胞的增殖水平;流式细胞术分析各组细胞周期;Western blot检测CDK1、CyclinB1等周期调控蛋白的变化;同时采用RT-PCR检测ATM，CHK2,P53等周期调控因子mRNA水平的表达;Western blot检测其蛋白水平的表达情况。结果：和其他3组相比，干扰组细胞G2/M期细胞数明显增加且DNA合成受阻，增殖减慢。与G2/M期相关周期调控蛋白CDK1，cyclinB1的表达随时间变化而明显降低。RT-PCR和western blot均显示和其他三组相比，干扰组细胞ATM,CHK2,P53转录水平和翻译水平显著上调。结论：下调GINS2表达后可抑制HL60细胞DNA复制并影响其G2/M期进程，机制可能与ATM，CHK2,P53等基因有关。第三部分携人GINS2基因重组腺病毒载体的构建及其对HL60细增殖和凋亡的影响目的：使用AdEasy系统构建携带GINS2基因的重组腺病毒载体并进行鉴定，观察上调GINS2表达对HL60细胞增殖及凋亡的影响。方法：以pcDNA3.1-GINS2质粒作为模版，RT-PCR法扩增GINS2基因编码序列全长并克隆入穿梭载体pAdTrace-TO4，经转化、酶切和测序正确后，将产生的重组质粒pAdT-GINS2转化入pAdEasy-1-BJ5183感受态进行同源重组，得到重组子pAdE-GINS2。后将其转染HEK293细胞进行包装，行PCR和荧光显微镜鉴定重组腺病毒Ad-GINS2。待扩增测定滴度后感染人HL60细胞，MTT法检测重组腺病毒感染后HL60细胞的生长情况，集落形成实验测定细胞的增殖情况，流式细胞术检测凋亡细胞个数，PCR和western blot法分别检测凋亡蛋白Bax，bcl2的变化情况。结果：酶切、PCR、测序结果显示GINS2基因克隆入穿梭质粒，并得到重组腺病毒Ad-GINS2;PCR法和荧光显微镜显示包装成功;经三轮高效扩增病毒后病毒滴度达1.35×1012IU/ml，感染HL60细胞后，western blot可检测到GINS2的表达，MTT和集落形成实验结果均表明GINS2过表达后能促进细胞增殖，流式细胞术显示病毒感染细胞后凋亡率明显降低， Western blot显示凋亡蛋白Bax显著降低而bcl2显著升高。结论：成功构建包含GINS2基因的重组腺病毒载体，可通过上调bcl2表达而抑制Bax表达促进HL60细胞增殖，为明确该基因在急性髓细胞白血病发生和发展中的作用机制奠定了一定基础。

关键词： HL60细胞 GINS2基因细胞凋亡 Bax基因 bcl2基因 GINS2 基因 HL60细胞 G2期阻滞白血病 GINS2基因细胞增殖重组腺病毒 HL60细胞