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威廉环毛蚓提取物蛋白质含量测定方法研究

中南药学 2024年第4期22卷 1048-1052页

作者：蒋巧萍宇泉霖宋嘉佳李寒冰李敏枫檀世祖王天舒蔡程科北京中医药大学中药学院北京102488

目的建立威廉环毛蚓提取物蛋白质含量测定的最佳方法。方法以氨基酸分析仪测定的威廉环毛蚓提取物中的氨基酸含量为指标,对蛋白质含量检测方法 Lowry法2、改良Lowry法、bca法、Bradford法进行对比评价。结果 Lowry法2、改良Lowry法、... 详细信息

目的建立威廉环毛蚓提取物蛋白质含量测定的最佳方法。方法以氨基酸分析仪测定的威廉环毛蚓提取物中的氨基酸含量为指标,对蛋白质含量检测方法 Lowry法2、改良Lowry法、bca法、Bradford法进行对比评价。结果 Lowry法2、改良Lowry法、bca法、Bradford法测定威廉环毛蚓提取物蛋白质含量(上清液)结果分别为27.03%、45.85%、31.58%、11.11%,威廉环毛蚓提取物蛋白质含量(混悬液)的结果分别为38.44%、52.39%、44.06%、11.56%。采用氨基酸分析仪法测定得到威廉环毛蚓提取物中游离氨基酸含量为4.18%,将威廉环毛蚓提取物蛋白质酸水解之后测定总氨基酸含量为48.53%。结论在威廉环毛蚓提取物样品溶液的处理方式上,与样品上清液相比,样品混悬液的测定结果更接近样品中蛋白质的真实含量。以牛血清白蛋白(BSA)为对照品,相较于Lowry法2、改良Lowry法和Bradford法,bca法更适宜用于威廉环毛蚓提取物中的蛋白质含量测定。

关键词：威廉环毛蚓蛋白质 Lowry法2 改良Lowry法 bca法 Bradford法氨基酸自动分析仪

bca法检测组分百日咳疫苗中间品蛋白含量的可行性评价

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中国生物制品学杂志 2020年第9期33卷 1048-1053页

作者：王丽王吟胡业勤田聪施斌曹璟杨明武汉生物制品研究所有限责任公司湖北武汉430207 中国生物技术股份有限公司北京100029

目的评价bca法检测组分百日咳疫苗中间品蛋白含量的可行性,并进行验证。方法以《中国药典》三部(2015版)Lowry法2的检测结果为对照,对干扰bca法测定组分百日咳疫苗中间品蛋白质含量的物质进行分析,明确干扰物质的限度;对bca法的专属性... 详细信息

目的评价bca法检测组分百日咳疫苗中间品蛋白含量的可行性,并进行验证。方法以《中国药典》三部(2015版)Lowry法2的检测结果为对照,对干扰bca法测定组分百日咳疫苗中间品蛋白质含量的物质进行分析,明确干扰物质的限度;对bca法的专属性、线性范围、重复性、准确性进行验证,并与Lowry法2的检测结果进行比较。结果30%硫酸铵对Lowry法2和bca法测定蛋白质含量有明显干扰,其他缓冲体系均无影响;硫酸铵浓度≤25%时,对Lowry法2检测结果无干扰,低于5%的硫酸铵可通过1 mol/L的盐酸消除,不影响bca法的测定;凯氏定氮法测定结果显示,组分百日咳疫苗中间品中硫酸铵浓度bca法的专属性、线性范围、重复性、准确性均符合验证要求;Lowry法2与bca法检测结果差异无统计学意义(P>0.05)。结论bca法操作简便、快速、准确、高通量,可用于检测组分百日咳疫苗中间品的蛋白含量。

关键词： bca法百日咳组分疫苗蛋白含量质量控制

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bca法在反胶束萃取大豆蛋白中的应用

中国粮油学报 2006年第5期21卷 71-74页

作者：赵晓燕陈复生薛文通中国农业大学食品与营养工程学院北京100083 河南工业大学科研处郑州450052

本文建立了用一种新的方法测定反胶束(如AOT)体系中所萃取大豆蛋白质的方法,即bca(二辛可宁酸)法,经过对照实验,证明该方法的测定结果可靠,与半微量凯式定氮法相比无显著差异,该方法操作简便,结果准确可靠,可替代半微量凯式定氮法。

关键词：反胶束蛋白质半微量凯式定氮法 bca法

bca法测肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌SR膜蛋白浓度

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时珍国医国药 2010年第8期21卷 2124-2125页

作者：叶兆伟李洵王海燕李尽哲承伟信阳农业高等专科学校河南信阳464000 辽宁医学院药学院辽宁锦州121000

目的测定肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌膜蛋白浓度。方法蔗糖梯度离心法对肺动脉平滑肌膜蛋白进行提取;二喹啉甲酸(Bicinchoninic acid,bca)法测定膜蛋白浓度;G-6-Pase定量试剂盒测定平滑肌肌浆网(SR)标志酶G-6-Pase活性。结果经测定MCT... 详细信息

目的测定肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌膜蛋白浓度。方法蔗糖梯度离心法对肺动脉平滑肌膜蛋白进行提取;二喹啉甲酸(Bicinchoninic acid,bca)法测定膜蛋白浓度;G-6-Pase定量试剂盒测定平滑肌肌浆网(SR)标志酶G-6-Pase活性。结果经测定MCT组和对照组G-6-Pase活性分别为(19.5±2.41)IU/g和(18.35±2.21)IU/g,明显高于肺动脉平滑肌组织匀浆G-6-Pase活性(1.23±0.14)IU/g和(1.15±0.17)IU/g;测定波长为595 nm,在0.025～0.5mg/ml时,线性关系良好,r=0.997 6。结论提取的SR有较高纯度;bca法可以用于平滑肌SR膜蛋白浓度的测定。

关键词：野百合碱肺动脉高压 SR bca法

二喹啉甲酸法(bca)分析蛋白多肽的原理、影响因素和优点

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食品与发酵工业 2014年第11期40卷 202-207页

作者：韩富亮袁春龙郭安鹊张予林李运奎西北农林科技大学葡萄酒学院陕西杨凌712100

蛋白多肽的定量分析方法很多,二喹啉甲酸法(bca)是常用的方法之一。食品组成成分复杂,有很多影响bca反应的干扰物。文中对bca法的反应原理、测定方法、影响因素和消除方法,以及bca法的优点进行系统的论述。

关键词： bca法蛋白多肽反应原理影响因素

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一种快速测定污泥滤液中蛋白质含量的方法

给水排水 2022年第S1期48卷 30-33页

作者：李政高健磊闫怡新郑州大学综合设计研究院有限公司郑州450003 郑州大学生态与环境学院郑州450001

在污泥资源化利用领域中,蛋白质测定的bca(蛋白质定量试剂盒)法可简便快速地检测污泥滤液中蛋白质的含量。运用bca法在562 nm波长下,分别测定标准蛋白质溶液与样品溶液的吸光度值,通过测定液中蛋白质浓度与吸光度值成正比关系,经过标准... 详细信息

在污泥资源化利用领域中,蛋白质测定的bca(蛋白质定量试剂盒)法可简便快速地检测污泥滤液中蛋白质的含量。运用bca法在562 nm波长下,分别测定标准蛋白质溶液与样品溶液的吸光度值,通过测定液中蛋白质浓度与吸光度值成正比关系,经过标准曲线的制定,计算样品蛋白液中的蛋白质含量。结果显示,待测溶液中蛋白质浓度在0~1600μg/mL范围标准曲线呈线性关系,回归方程为:Y=1921.5X-212.84,相关系数r=0.9995,平均回收率为98.96%,显色稳定性好。因此bca法可作为检测污泥滤液中蛋白质含量的方法。

关键词： bca法污泥滤液蛋白质快速测定方法

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bca法测定食品中的微量铜

食品科学 2011年第14期32卷 277-280页

作者：刘璇冯志明湖南师范大学化学与化工学院湖南长沙410008

研究bca(2,2'-联喹啉-4,4'-二甲酸二钠盐)与铜的显色反应,建立测量食品微量铜的光度分析方法。在盐酸羟胺存在条件下,pH11.0缓冲介质中,bca试剂与铜在物质的量的比为2:1的条件下反应生成的紫色络合物,λmax=562nm,ε562nm=7.72×103L/(m... 详细信息

研究bca(2,2'-联喹啉-4,4'-二甲酸二钠盐)与铜的显色反应,建立测量食品微量铜的光度分析方法。在盐酸羟胺存在条件下,pH11.0缓冲介质中,bca试剂与铜在物质的量的比为2:1的条件下反应生成的紫色络合物,λmax=562nm,ε562nm=7.72×103L/(mol.cm),铜含量在0～4.8μg/mL内符合比尔定律;经测定茶叶和海带中的铜含量,结果与原子吸收法的测定结果相符。结果表明:该方法稳定准确,可用于食品中微量铜的测定。

关键词：铜测定 bca法分光光度法

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活性污泥胞外聚合物中蛋白质定量方法的评价

环境工程技术学报 2021年第1期11卷 144-150页

作者：杨凯张硕崔康平黑生强吕学敏宋广清张弦黄霞合肥工业大学资源与环境工程学院环境模拟与污染控制国家重点联合实验室清华大学环境学院

胞外聚合物(EPS)中蛋白质的准确定量对研究活性污泥性质具有重要意义。为对EPS中蛋白质定量方法的选择提供依据,系统评价了Modified Lowry法、bca法、Bradford法的测试性能,包括测试范围、准确度、精密度及对EPS中部分组分(Ca^2+、Mg^2... 详细信息

胞外聚合物(EPS)中蛋白质的准确定量对研究活性污泥性质具有重要意义。为对EPS中蛋白质定量方法的选择提供依据,系统评价了Modified Lowry法、bca法、Bradford法的测试性能,包括测试范围、准确度、精密度及对EPS中部分组分(Ca^2+、Mg^2+、还原性糖、腐殖酸)的抗干扰性。结果表明:Modified Lowry法在蛋白质浓度为1~10、10~100 mg/L时与吸光度的线性相关性较好(R2>0.99),bca法和Bradford法的测试范围较Modified Lowry法更宽;Modified Lowry法的准确度和精密度均最高,bca法次之,Bradford法最低;Modified Lowry法受Ca^2+、Mg^2+和还原性糖干扰,bca法受还原性糖和腐殖酸干扰,Bradford法受腐殖酸的干扰。因此,EPS中蛋白质定量方法的选择应从样品性质(蛋白质浓度范围、干扰物质种类及浓度)和测试方法性能(测试范围、准确度、精密度和抗干扰性)2个方面综合考虑。

关键词：胞外聚合物蛋白质定量 Modified Lowry法 bca法 Bradford法

建立稳定表达人有机阴离子转运体OAT1细胞的活性检测方法及抑制剂的筛选

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药学与临床研究 2022年第5期30卷 423-426页

作者：韩学诚唐雪妮夏宗玲南京医科大学附属常州二院药学部常州213003 常州市德安医院药剂科常州213000 苏州大学附属第三医院药学部常州213000

目的:建立稳定表达人有机阴离子转运体OAT1的细胞(hOAT1)中6-羧基荧光素浓度测定的荧光分析方法,并用于hOAT1细胞活性的测定及其抑制剂的筛选。方法:采用荧光分光光度法,检测波长为激发波长485 nm,发射波长520 nm,bca法检测样品蛋白浓... 详细信息

目的:建立稳定表达人有机阴离子转运体OAT1的细胞(hOAT1)中6-羧基荧光素浓度测定的荧光分析方法,并用于hOAT1细胞活性的测定及其抑制剂的筛选。方法:采用荧光分光光度法,检测波长为激发波长485 nm,发射波长520 nm,bca法检测样品蛋白浓度。以6-羧基荧光素的荧光强度对蛋白浓度的比值作为衡量转运体OAT1活性的指标。结果:在hOAT1细胞中,6-羧基荧光素检测浓度的线性范围为0.08~3.2μmol·L^(-1)(r=0.9991),低、中、高浓度6-羧基荧光素溶液测定的日内RSD分别为6.08%、2.66%、0.86%,日间RSD分别为7.83%、3.73%、0.72%,绝对回收率分别为(111.35±9.8)%、(86.61±3.89)%、(100.15±1.10)%。抑制剂筛选结果显示1mmol·L^(-1)缬沙坦、奥美沙坦、厄贝沙坦、替米沙坦、辛伐他汀、瑞舒伐他汀对hOAT1抑制率分别为103.45%、110.34%、93.41%、90.33%、79.84%、95.22%。结论:本方法简单易行,可用于hOAT1细胞活性测定,缬沙坦、奥美沙坦、厄贝沙坦、替米沙坦、辛伐他汀、瑞舒伐他汀对hOAT1存在抑制作用。

关键词： h OAT1细胞 OAT1活性荧光分光光度法 bca法 6-羧基荧光素抑制剂筛选