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广东医学 2018年第S1期39卷 1-5页

作者：张玉英贾琴吴爽李艳萍广东药科大学人体解剖与组织胚胎学系广东广州510006

目的探讨树突状细胞活化抗原b7-2基因联合双自杀基因Ad-KDR-CD/TK系统对乳腺癌移植瘤的抑制作用。方法将MA782/5S-8102乳腺癌细胞皮下接种于bALb/c小鼠,致瘤后随机分为对照组、Ad-KDR-CD/TK组、Ad-b7-2组、Ad-b7-2联合Ad-KDR-CD/TK组。... 详细信息

目的探讨树突状细胞活化抗原b7-2基因联合双自杀基因Ad-KDR-CD/TK系统对乳腺癌移植瘤的抑制作用。方法将MA782/5S-8102乳腺癌细胞皮下接种于bALb/c小鼠,致瘤后随机分为对照组、Ad-KDR-CD/TK组、Ad-b7-2组、Ad-b7-2联合Ad-KDR-CD/TK组。待移植瘤直径达0.5 cm时,分别在肿瘤局部注射治疗基因14 d,Ad-KDR-CD/TK组和Ad-b7-2联合Ad-KDR-CD/TK组结合连续14 d腹腔注射5-氟胞嘧啶和更昔洛韦;单用Ad-b7-2组和对照组腹腔注射生理盐水。治疗结束后,检测各组小鼠移植瘤的生长情况;TUNEL法检测移植瘤组织中肿瘤细胞凋亡率,并以透射电镜观察细胞凋亡情况;免疫组化法检测新生血管内皮细胞CD34的表达,计算平均微血管密度(MVD)值;免疫组化法检测肿瘤组织中CD8+T表达。结果与Ad-KDR-CD/TK组、Ad-b7-2组、对照组比较,Ad-b7-2联合AdKDR-CD/TK组荷瘤小鼠皮下肿瘤结节的生长明显受到抑制(Pb7-2联合Ad-KDR-CD/TK组瘤体内肿瘤细胞凋亡指数较其他各组均明显增加(P基因系统与b7-2基因治疗小鼠乳腺癌移植瘤,具有直接杀伤肿瘤和增强机体抗肿瘤免疫双重作用。

关键词：乳腺癌自杀基因 b7-2基因小鼠

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EHF疫苗接种者IL-12、sICAM-1、CD28分子及b7-2基因检测

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遵义医学院学报 2005年第2期28卷 105-108页

作者：蒋汉文孙万邦蔡静罗军敏姚新生张亿雄宋明英遵义医学院免疫学教研室贵州遵义563003

目的　探讨EHF疫苗接种机体后细胞免疫应答的机制。方法　EHF双价灭活疫苗接种健康志愿者,采集接种前后静脉血分离血清和淋巴细胞。ELISA法检测免疫前后血清中IL 12、sICAM 1表达水平;IFA测定免疫前后淋巴细胞上CD2 8的表达;PCR SSP检... 详细信息

目的　探讨EHF疫苗接种机体后细胞免疫应答的机制。方法　EHF双价灭活疫苗接种健康志愿者,采集接种前后静脉血分离血清和淋巴细胞。ELISA法检测免疫前后血清中IL 12、sICAM 1表达水平;IFA测定免疫前后淋巴细胞上CD2 8的表达;PCR SSP检测免疫前淋巴细胞的b7 2基因。结果　免疫后血清IL 12、sICAM 1表达水平升高,单因素方差分析有统计学差异;免疫前后淋巴细胞上CD2 8表达,χ2 检验示有显著性差异;PCR SSP方法检测免疫前淋巴细胞b7 2基因阳性5人,其中汉族3人,侗族1人和布依族1人。结论　EHF灭活疫苗接种健康志愿者后,显示机体产生了Th细胞介导的免疫应答。

关键词： EHF疫苗 IL-12 sICAM-1 CD28 b7-2基因

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人b7-2分子和肿瘤特异性TCR对T细胞协同活化的研究

人B7-2分子和肿瘤特异性TCR对T细胞协同活化的研究

引用

作者：刘洪洲广东药学院

学位级别：硕士

目的研究b7-2基因修饰的肿瘤细胞对淋巴细胞的募集作用及对淋巴细胞的活化作用,同时探索b7-2基因修饰肿瘤细胞联合肿瘤特异性T细胞受体(TCR)基因修饰的淋巴细胞的协同抗肿瘤作用。方法克隆b7-2基因,并将其构建在真核表达载体上,然后利... 详细信息

目的研究b7-2基因修饰的肿瘤细胞对淋巴细胞的募集作用及对淋巴细胞的活化作用,同时探索b7-2基因修饰肿瘤细胞联合肿瘤特异性T细胞受体(TCR)基因修饰的淋巴细胞的协同抗肿瘤作用。方法克隆b7-2基因,并将其构建在真核表达载体上,然后利用脂质体法转染肿瘤细胞bel-7402后通过RT-PCR和FCM检测b7-2基因的表达。利用羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)标记转有b7-2基因的bel-7402细胞,同PbMC共孵育后检测CFSE阳性细胞的凋亡率。利用携带肿瘤特异性TCR基因的重组腺病毒Ad-TCRVα12-2/Vβ7.1转染外周血单核细胞(PbMC),同转有b7-2基因的bel-7402细胞共孵育后利用流式细胞仪测定bel-7402细胞的凋亡率。结果b7-2基因转染bel-7402细胞后表达水平显著上调。经b7-2基因修饰的bel-7402细胞和PbMC共培养4h后,凋亡率为12.63%,与对照组(7.53%)比较,细胞凋亡率显著增加(p7.1修饰的PbMC与b7-2基因转染的bel-7402细胞共孵育48h后,b7-2与TCRVα12-2/Vβ7.1联合转染组、b7-2单转组、TCRVα12-2/Vβ7.1单转组和未转染组等4组结合PbMC的bel-7402细胞的阳性率(结合率)分别是24.26%、15.53%、10.13%和5.43%,相邻两组之间的结合率都存在显著差异(pb7-2与TCRVα12-2/Vβ7.1联合转染组的结合率最高。b7-2与TCRVα12-2/Vβ7.1联合转染组结合PbMC的bel-7402细胞的凋亡率是48.40%,和b7-2单转组(36.56%)与TCRVα12-2/Vβ7.1单转组(24.36%)比较,凋亡率都显著增加(pb7-2修饰的肿瘤细胞促进了T细胞的募集和活化。结论b7-2转染肿瘤细胞能增加对淋巴细胞的募集作用和对淋巴细胞的活化作用,并且与TCR修饰淋巴细胞一起能够协同促进募集淋巴细胞,同时增强淋巴细胞对肿瘤的杀作伤用。

关键词： b7-2基因肿瘤细胞腺病毒 T细胞受体活化

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