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TdT在儿童期b-all中的表达特点

上海第二医科大学学报 2004年第6期24卷 436-439,442页

作者：徐翀蒋黎敏李莉沈立松上海第二医科大学新华医院

目的分析末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)在儿童b系急性淋巴细胞白血病(b-all)中的表达特点,并探讨TdT在b-all微小残留(MRD)检测中的意义。方法用TdT/CD10/CD34/CD19四色荧光抗体组合对初发时的白血病细胞进行检测,以3例正常骨髓标本作为对照... 详细信息

目的分析末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)在儿童b系急性淋巴细胞白血病(b-all)中的表达特点,并探讨TdT在b-all微小残留(MRD)检测中的意义。方法用TdT/CD10/CD34/CD19四色荧光抗体组合对初发时的白血病细胞进行检测,以3例正常骨髓标本作为对照,分析TdT在b-all中的表达特点。同时,以能够使白血病细胞在TdT/CD10双参数点图上出现的位置完全不同于TdT+CD19+的正常骨髓细胞分布的位置,作为TdT/CD10/CD34/CD19组合有效并可用于MRD监测的标准。以该组合对病人诱导治疗结束后以及持续治疗过程中的骨髓标本进行监测。结果在70例b-all中,TdT阳性为63例(90.0％)。其中,Common b-all中的TdT阳性例数比例,及TdT阳性表达率都显著高于其它各期;其它各期之间无显著差异。虽然大部分病例的TdT与CD34都呈现较高的阳性表达率,但TdT与CD34阳性表达率之间并无明显的相关性。Pro b-all、Pre b-all和Common b-all之间,平均TdT MFI无显著差异,但三者中除了前两者的平均TdT MFI都显著低于正常骨髓中的TdT+CD19+细胞外,Common b-all的平均TdT MFI与正常细胞无显著差异。所有b-all总的平均TdT MFI显著低于正常细胞。应用TdT/CD10/CD34/CD19抗体组合可在65.7%的b-all病例中进行MRD检测,其有效频率高于其它用于MRD检测的抗体组合。

关键词： TdT 儿童期 b-all 末端脱氧核苷酸转移酶微小残留病基因表达

b-all中CD66c阳性与bCR/AbL融合基因阳性的关联性

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当代医学 2019年第31期25卷 135-136页

作者：叶萍肖作淼吴天恩邱玉梅赣州市人民医院检验科

目的探讨b-all中CD66c阳性与bCR/AbL融合基因阳性的关联性。方法使用流式细胞检测方式检测40例b-all中CD66c阳性及40例bCR/AbL融合基因阳性患者的免疫表现。其中急性b淋巴细胞白血病患者男25例,女15例;年龄16~75岁,中位年龄30岁,bCR/Ab... 详细信息

目的探讨b-all中CD66c阳性与bCR/AbL融合基因阳性的关联性。方法使用流式细胞检测方式检测40例b-all中CD66c阳性及40例bCR/AbL融合基因阳性患者的免疫表现。其中急性b淋巴细胞白血病患者男25例,女15例;年龄16~75岁,中位年龄30岁,bCR/AbL融合基因阳性患者男21例,女19例;年龄15~76岁,中位年龄29岁。使用PCR法检测免疫球蛋白基因重新排列。结果所有患者CD66c阳性及bCR/AbL融合基因阳性中CD38差异具有明显统计学意义(PbCR/AbL融合基因阳性患者中,32例患者表达为CD10^+/CD19^+/CD34^+,27例患者表达为CD10^+/CD34^+/HLA^-DR^+,23例患者表达为CD10^+/CD34^+/CD38^-;40例b-all中CD66c阳性16例D10^+/CD19^+/CD34^+,14例患者表达为CD10^+/CD34^+/HLA^-DR^+,未有患者表达为CD10^+/CD34^+/CD38^-。结论bCR/AbL融合基因阳性患者出现CD34及CD10的阳性率显著高于ball中CD66c阳性患者,而CD38的阳性率未有显著差别。

关键词： b-all 免疫表型 bCR/AbL融合基因阳性

逻辑设门方法在b-all免疫表型检测中的作用

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实验与检验医学 2001年第6期23卷 323-324,334页

作者：陈军浩夏永泉张葵南京大学医学院附属南京鼓楼医院检验科 210008

目的评价逻辑设门白血病细胞方法在b-all免疫表型检测中的应用。方法采用FSC-SSC和CD45-SSC逻辑设门方法识b-all患者白血病细胞,分析其免疫表型,并与CD45-SSC设门方法进行比较。结果逻辑设门法检测白血病细胞阳性细胞百分率高于CD45-SS... 详细信息

目的评价逻辑设门白血病细胞方法在b-all免疫表型检测中的应用。方法采用FSC-SSC和CD45-SSC逻辑设门方法识b-all患者白血病细胞,分析其免疫表型,并与CD45-SSC设门方法进行比较。结果逻辑设门法检测白血病细胞阳性细胞百分率高于CD45-SSC设门法,两种设门方法结果有显著性差异。18例b-all患者中(阳性标本数/总标本数)CD19+100%、CD19+CD10+88.9%、CD34+94.4%、HLA-DR+88.9%。b系伴CD13+变异型33.3%,伴CD33+变异型11.1%。结论逻辑设门方法在b-all免疫表型分析中优于CD45-SSC法。

关键词：流式细胞仪设门 b-all

301例b-all细胞表面抗原检测结果分析

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上海医学检验杂志 2000年第5期15卷 313-314页

作者：倪麟余文红王也飞陈松立上海第二医科大学瑞金医学院医学检验系上海200025

目的探讨 b淋巴细胞相关抗原在急性 b细胞型淋巴细胞白血病 (b- AL L )细胞表面的表达及其与细胞形态和治疗的关系。方法采用 AbC- AP免疫组化法结合选用多种 b淋巴细胞相关抗原的克隆性抗体对 30 1例初发 (b- AL L )患者的白血病细胞... 详细信息

目的探讨 b淋巴细胞相关抗原在急性 b细胞型淋巴细胞白血病 (b- AL L )细胞表面的表达及其与细胞形态和治疗的关系。方法采用 AbC- AP免疫组化法结合选用多种 b淋巴细胞相关抗原的克隆性抗体对 30 1例初发 (b- AL L )患者的白血病细胞进行细胞表面抗原检测。结果 b- AL L患者的白血病细胞 CD19、HL A - DR呈高阳性率表达 ;而 CD2 0的阳性表达率较低。阳性表达率与 FAb分类分型有一定关系。其中 L1 型 CD 10细胞有高表达率近 90 % ;L2 型 CD10细胞表达率为 6 3.5 % ;L3 型细胞则无 CD10阳性表达。结论结果均与 b- AL L中

关键词：急性白血病 b-all 细胞表面抗原治疗

IKZF1编码蛋白IKAROS异常与中国b-all患儿中的表达研究

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IKZF1编码蛋白IKAROS异常与中国B-ALL患儿中的表达研究

2012年江浙沪儿科学术年会暨浙江省医学会儿科学分会学术年会、儿内科疾病诊治新进展国家级学习班

作者：陈静李本尚黄小航上海儿童医学中心血液肿瘤科

IKAROS是在淋巴细胞分化与增殖过程中重要的锌指蛋白转录因子,而在所有IKAROS亚型中,显性负相型(DN型)IKAROS分子:IK4、IK6、IK7等在急性b淋巴细胞白血病患儿中的表达对其预后具有显著不利影响。本研究通过巢式PCR、Sanger测序、TA克隆... 详细信息

IKAROS是在淋巴细胞分化与增殖过程中重要的锌指蛋白转录因子,而在所有IKAROS亚型中,显性负相型(DN型)IKAROS分子:IK4、IK6、IK7等在急性b淋巴细胞白血病患儿中的表达对其预后具有显著不利影响。本研究通过巢式PCR、Sanger测序、TA克隆等方法对2005年1月至2010年9月序贯进入上海儿童医学中心治疗的约138例急性b淋巴细胞白血病患儿的骨髓标本进行IKAROS亚型(特别是IK4、

关键词：淋巴细胞白血病编码蛋白 IKAROS IKZF1 b-all

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CMTM3在b-all中的表达和功能探究

CMTM3在B-ALL中的表达和功能探究

A typical bedside-to-bench investigation of leukemogenic driver MEF2D fusion reveals new targeted therapy in b-cell acute lymphoblastic leukemia

第十二届全国免疫学学术大会

作者：刘媛原婉琼刘琪瑶马大龙韩文玲北京大学医学部免疫学系卫生部医学免疫学重点实验室北京大学人类疾病基因研究中心

研究背景和目的:CMTM,原名CKLFSF,是北京大学免疫学系于2003年首次报道的基因家族。在人类,该家族包括9个基因,即:CKLF和CMTM1-8(原名CKLFSF1-8)。CMTM成员多具有不同的剪接体,对每个基因而言,其中至少一种剪接体的编码产物具有MARVEL... 详细信息

研究背景和目的:CMTM,原名CKLFSF,是北京大学免疫学系于2003年首次报道的基因家族。在人类,该家族包括9个基因,即:CKLF和CMTM1-8(原名CKLFSF1-8)。CMTM成员多具有不同的剪接体,对每个基因而言,其中至少一种剪接体的编码产物具有MARVEL结构域,具有此结构域的蛋白在膜分子转运中具有重要功能。研究发现,CMTM成员对EGFR、bCR、PD-L1等膜分子具有重要调控作用。CMTM3主要定位于细胞质膜及早期内体,通过增强Rab5活性和早期内体融合,促进EGFR内化、降解发挥抑癌功能。Immusort数据库分析提示CMTM3在b-all(b-cell acute lymphoblastic leukemia急性b细胞型淋巴细胞性白血病)患者中表达上调,提示其可能参与b-all的发生、发展。本研究的目的是验证CMTM3在b-all患者和细胞系中的表达;制备稳定敲减CMTM3的b-all细胞系,研究其在b-all中的功能与机制。方法:根据Immusort数据库提示,我们利用q-PCR和Western blot对b-all患者的骨髓细胞和SUP-b15、bV173细胞系进行了表达谱分析;利用慢病毒感染获得稳定敲减CMTM3的b-all细胞系;利用CCK8增殖实验、细胞计数、流式细胞术检测等方法检测敲减CMTM3对细胞增殖和凋亡的影响;通过Western blot探讨其对信号通路的影响。结果:在b-all患者来源的骨髓细胞和细胞系中,CMTM3的表达显著上调;敲减CMTM3明显抑制SUP-b15和bV173细胞增殖,细胞自发凋亡略有增加;p65、p38、Akt、Erk、Iκb等分子的磷酸化水平没有明显变化。结论:CMTM3在b-all中表达上调;敲减CMTM3明显抑制b-all细胞增殖。

关键词： CMTM3 MARVEL b-all 细胞增殖

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blood Science 2022年第3期4卷 161-163页

作者： Hao Zhang Guoyu Meng Shanghai Institute of Hematology State Key Laboratory of Medical GenomicsNational Research Center for Translational Medicine at ShanghaiRuijin HospitalShanghai JiaoTong University School of Medicine and School of Life Sciences and BiotechnologyShanghai JiaoTong UniversityShanghaiChina

b-cell acute lymphoblastic leukemia(b-all)is a malignant tumor originating from b-lineage lymphoid precursor *** incidence of b-all is about 80%in childhood acute leukemia and 20%in *** recent years,with standardized treatment guided by risk stratification,the long-term disease-free survival rate of children is about 80%,while that of adults is less than 40%.However,the specific pathogenesis of the newly identified b-all and the targeted therapy strategies have not been vigorously *** this review,we highlight the recent breakthroughs in mechanistic studies and novel therapeutic options in DUX4-and MEF2D-subtype b-alls.

关键词： b-all DUX4/IGH fusion MEF2D fusion Targeted therapy ZNF384 fusion

1，5-AG对急性b淋巴细胞白血病微环境中巨噬细胞的调控及机制研究

维普期刊数据库评论

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1，5-AG对急性B淋巴细胞白血病微环境中巨噬细胞的调控及机制研究

作者：吴敏山东大学

学位级别：硕士

研究背景急性淋巴细胞白血病是儿童最常见的恶性疾病,虽然随着化疗方案的不断改进,其五年无病生存率可达90%以上,但仍然存在着病因不清、发病机制不明、复发和耐药等问题。巨噬细胞作为肿瘤微环境中的重要组分,可以在肿瘤微环境中各种... 详细信息

研究背景急性淋巴细胞白血病是儿童最常见的恶性疾病,虽然随着化疗方案的不断改进,其五年无病生存率可达90%以上,但仍然存在着病因不清、发病机制不明、复发和耐药等问题。巨噬细胞作为肿瘤微环境中的重要组分,可以在肿瘤微环境中各种信号分子、代谢产物以及免疫细胞的相互作用下抑制M1型的抗肿瘤功能,发挥M2型的促肿瘤功能,给肿瘤细胞营造一个利于生存的环境。目前,已经有许多研究阐明了巨噬细胞在髓系白血病和慢性淋巴细胞白血病微环境中的功能特点。然而,在急性b淋巴细胞白血病(Acute b lymphoblastic leukemia,b-all)中,巨噬细胞对免疫调节功能的影响以及其对白血病细胞的作用仍未得到充分的研究。巨噬细胞可被异常的代谢物激活并发生极化,通过分泌各种细胞因子或介导其他免疫细胞的功能来重塑肿瘤微环境,促进肿瘤细胞的增殖、浸润和转移。我们前期研究通过非靶向代谢组学检测,发现初发b-all患儿外周血中的代谢物1,5-脱水葡萄糖醇(1,5-AG)的水平升高。1,5-AG可驱动糖酵解和活性氧来促进白血病进展,但该代谢物对白血病微环境中其他细胞的影响尚不清楚。本研究计划探索1,5-AG对巨噬细胞的影响来发现其对白血病微环境的调控作用及相关机制。研究目的1.研究1,5-AG对巨噬细胞极化功能的影响,分析1,5-AG刺激后巨噬细胞转录组水平的变化,寻找影响巨噬细胞极化的途径。2.探索1,5-AG如何通过巨噬细胞调控白血病细胞的生物学行为,为阐明白血病的发病机制和发现新的治疗靶点提供实验依据。研究方法1.1,5-AG对巨噬细胞极化功能的影响(1)采用CCK8和流式细胞术检测1,5-AG对巨噬细胞增殖和凋亡的影响。(2)诱导巨噬细胞分别向M1和M2极化,同时给予1,5-AG干预,用PCR和流式细胞术检测1,5-AG在非极化或极化状态下巨噬细胞M1和M2极化标志物的表达情况。(3)通过流式细胞术检测1,5-AG对巨噬细胞的非极化和极化状态下ROS水平的影响。(4)使用转录组测序分析1,5-AG对巨噬细胞的影响,并对差异表达基因和信号通路进行富集分析。(5)构建CXCL14敲低的巨噬细胞,Wb和PCR分别检测CXCL14和M1极化指标的表达水平。(6)通过PCR、Wb和数据库数据分析M1极化刺激对巨噬细胞CXCL14表达的影响。(7)Seahorse检测不同干预下巨噬细胞糖酵解速率的变化。2.1,5-AG通过巨噬细胞调控白血病细胞生物学行为的研究(1)将白血病细胞系THP-1诱导为巨噬细胞,PCR检测巨噬细胞标志物。(2)构建CXCL14敲低的巨噬细胞,用PCR和Wb进行验证并检测M1极化标志物及调控分子的表达水平。(3)构建白血病细胞和巨噬细胞的体外共培养体系,流式细胞术检测不同条件下白血病细胞系HAL-01、Reh和Nalm-6的凋亡水平。(4)构建骨髓单个核细胞和巨噬细胞的体外共培养体系,流式细胞术检测骨髓样本中白血病细胞的凋亡情况,并用PCR对共培养巨噬细胞表型进行检测。(5)PCR检测1,5-AG单独刺激以及共培养环境中HAL-01细胞的CXCR4表达水平。(6)统计结果表示为平均值±标准误,两组之间的差异使用非配对的Student’s t检验分析,三组及多组实验使用One-way或者Two-way ANOVA分析。P值<0.05被定义为有统计学意义。研究结果1.1,5-AG抑制巨噬细胞的M1极化(1)1,5-AG不影响巨噬细胞的增殖和凋亡,抑制LPS诱导的巨噬细胞的M1极化标志物的表达,对静息状态和M2极化的巨噬细胞无显著影响,并且可以减少静息和M1极化状态下ROS的产生。(2)1,5-AG显著上调CXCL14的表达,下调与促炎应答相关信号通路的基因表达。(3)M1极化时CXCL14表达水平降低,敲低CXCL14促进巨噬细胞的M1极化,并且诱导巨噬细胞的糖酵解能力增强。2.1,5-AG通过抑制巨噬细胞M1极化减少白血病细胞凋亡(1)THP-1细胞成功诱导为巨噬细胞,经1,5-AG刺激后高表达CXCL14,并抑制M1极化诱导的相关标志物表达。(2)敲低CXCL14后,THP-1衍生巨噬细胞的M1极化相关指标表达水平升高。(3)成功构建巨噬细胞和白血病细胞共培养体系,添加1,5-AG后,共培养体系中白血病细胞凋亡比例降低,而敲低CXCL14的巨噬细胞可诱导白血病发生凋亡。(4)患者来源的白血病细胞与CXCL14敲低巨噬细胞共培养后凋亡增加,巨噬细胞的极化标志物表达存在差异。(5)单独使用1,5-AG不影响白血病细胞的CXCR4的表达,共培养体系中白血病细胞的CXCR4变化与巨噬细胞的CXCL14变化水平一致。结论1.1,5-AG通过上调巨噬细胞的CXCL14抑制巨噬细胞的向抗肿瘤表型(M1)发生极化。2.M1极化抑制巨噬细胞CXCL14

关键词： b-all 代谢免疫抑制巨噬细胞 CXCL14

长链非编码RNA RP11-69I8.3在急性白血病中的表达及其临床意义

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中国实验血液学杂志 2018年第4期26卷 978-983页

作者：司佳佳王卫敏余丹甘思林仵菲斐孙玲万鼎铭谢新生刘延方王冲孙慧郑州大学第一附属医院血液科河南郑州450052

目的:探讨长链非编码RNA RP11-69I8.3与急性白血病的相关性及临床特征的关系。方法:采用实时荧光定量PCR法检测64例初治急性白血病(32例AML,32例all)及25例all化疗后完全缓解(CR)患者骨髓液及17例对照组志愿者骨髓液中lncRNA RP11-69I8.... 详细信息

目的:探讨长链非编码RNA RP11-69I8.3与急性白血病的相关性及临床特征的关系。方法:采用实时荧光定量PCR法检测64例初治急性白血病(32例AML,32例all)及25例all化疗后完全缓解(CR)患者骨髓液及17例对照组志愿者骨髓液中lncRNA RP11-69I8.3的表达,并分析其与临床特征及预后的关系。结果:与对照组相比,lncRNA RP11-69I8.3在AML组表达无明显差异(P>0.05),在初治all组的表达明显低于正常对照组(P=0.001),在化疗后达CR的all患者组表达明显高于初治患者组(P=0.013);在初治all组中,lncRNA RP11-69I8.3在儿童组较成人组明显低表达(P=0.017),与患者性别、初诊时白细胞计数、血红蛋白水平、血小板计数、乳酸脱氢酶水平、T/b类型、骨髓原始细胞比例、bCR/AbL融合基因表达、WT1基因、染色体核型、预后、是否髓外浸润、1疗程化疗是否缓解、是否复发均无相关性。在26例b-all中,lncRNA RP11-69I8.3的表达与CD10、CD19、CD20等免疫表型均无相关性。结论:lncRNA RP11-69I8.3在初治AML中的表达与对照组无明显差异。在初治all中低表达,在化疗后达CR组all中表达较未治疗时增高。在初治all组中,lncRNA RP11-69I8.3在儿童组中的表达明显低于成人组;在b-all中lncRNA RP11 69I8.

关键词：长链非编码RNA 急性白血病 b-all