检索结果-南通市图书馆

核因子-κb在四逆汤预处理诱导大鼠心肌延迟预适应中的作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国中药杂志 2005年第6期30卷 453-456页

作者：刘颖吴伟康陈晨刘克玄中山大学中西医结合研究所中国人民解放军第421医院检验科广东广州510318

目的:探讨四逆汤能否诱导心肌延迟预适应及其可能机制。方法:SD大鼠分为假手术组、缺血再灌注组、延迟缺血预处理组、四逆汤预处理组。延迟缺血预处理组采用经典大鼠冠脉结扎,缺血5min,再灌5min,反复循环3次,24h后缺血1h,再灌1h。四逆... 详细信息

目的:探讨四逆汤能否诱导心肌延迟预适应及其可能机制。方法:SD大鼠分为假手术组、缺血再灌注组、延迟缺血预处理组、四逆汤预处理组。延迟缺血预处理组采用经典大鼠冠脉结扎,缺血5min,再灌5min,反复循环3次,24h后缺血1h,再灌1h。四逆汤预处理组给予四逆汤灌胃(5g·kg-1·d-1)连续3d,末次灌药24h后缺血1h,再灌1h。以心肌梗死面积为评价指标并测定心肌中超氧化物歧化酶的活性、丙二醛的含量,通过RT PCR检测MnSODmRNA及Cu ZnSODmRNA的表达并利用免疫组织化学染色法检测大鼠心肌NFκb亚单位P65的表达。结果:延迟缺血预处理组及四逆汤预处理组心肌梗死面积明显小于缺血再灌注组,MDA的含量低于缺血再灌注组,SOD活性和MnSODmRNA的表达高于缺血再灌注组,NFκb发生核转位且蛋白表达显著高于缺血再灌注组。缺血再灌注组、延迟缺血预处理组及四逆汤预处理组的Cu ZnSODmRNA表达均下降,3组之间无差异。结论:四逆汤能诱导心肌延迟预适应,其机制可能与NFκb的激活相关。

关键词：四逆汤缺血再灌注心肌延迟预适应缺血预处理大鼠诱导 RT-PCR检测 b亚单位 SOD

RASSF1A基因转染对人肺腺癌细胞株A549增殖的抑制作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中南大学学报（医学版） 2005年第2期30卷 193-196页

作者：邓征浩周建华曹慧秋沈明文继舫中南大学湘雅医学院病理学教研室长沙410078

目的:观察外源性RASSF1A基因对人肺腺癌细胞A549增殖及NF κb亚单位P65表达的影响。方法:利用脂质体转染技术将真核表达重组体pcDNA3. 0 RASSF1A质粒和空载体pcDNA3. 0质粒分别导入A549细胞,经G418筛选后获得稳定转染细胞克隆,Westernbl... 详细信息

目的:观察外源性RASSF1A基因对人肺腺癌细胞A549增殖及NF κb亚单位P65表达的影响。方法:利用脂质体转染技术将真核表达重组体pcDNA3. 0 RASSF1A质粒和空载体pcDNA3. 0质粒分别导入A549细胞,经G418筛选后获得稳定转染细胞克隆,Westernblotting检测RASSF1A基因表达。采用MTT(四甲基偶氮唑盐)法、流式细胞仪分析转染细胞的生物学行为。RT PCR和Westernblotting检测基因转染对P65表达的影响。结果:经脂质体转染和筛选,建立了稳定表达RASSF1A基因的A549细胞系。与未转染组和转染空白载体组比较,转染RASSF1A基因的细胞生长速度明显减慢(P<0. 05),细胞周期中G1 /G0期比例明显增加(P<0. 05),而S期比例减少;转染组细胞核内P65蛋白表达明显降低(P<0. 05),而全细胞P65蛋白及mRNA表达未见明显变化。结论:RASSF1A基因可能通过抑制P65活性而抑制人肺腺癌细胞A549的生长。

关键词：基因转染细胞株A549 RASSF1A基因抑制作用人肺腺癌肺腺癌细胞A549 增殖 blotting Western pcDNA3 真核表达重组体脂质体转染技术四甲基偶氮唑盐流式细胞仪分析 A549细胞系 RT-PCR mRNA表达 P65 生物学行为 b亚单位

幽门螺杆菌表位疫苗的设计、构建、表达及其免疫原性研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

免疫学杂志 2006年第4期22卷 381-383,386页

作者：毛旭虎石云吴超张卫军邹全明第三军医大学医学检验系临床微生物学及免疫学教研室重庆市生物制药工程技术研究中心重庆400038

目的设计幽门螺杆菌(Hp)的表位疫苗并对其免疫原性进行研究。方法将Hp的尿素酶b亚单位的三个Th表位及一个b细胞表位串联,表位之间用两个赖氨酸(KK)间隔,合成全基因,克隆到pET22b载体上,在大肠杆菌bL21(DE3)中表达;表达的重组蛋白经鉴定... 详细信息

目的设计幽门螺杆菌(Hp)的表位疫苗并对其免疫原性进行研究。方法将Hp的尿素酶b亚单位的三个Th表位及一个b细胞表位串联,表位之间用两个赖氨酸(KK)间隔,合成全基因,克隆到pET22b载体上,在大肠杆菌bL21(DE3)中表达;表达的重组蛋白经鉴定纯化后皮下免疫balbc小鼠,检测细胞免疫应答及体液免疫应答。结果克隆表达的重组表位疫苗蛋白纯化后纯度达到95%,经N端测序证实为设计的表位疫苗蛋白,Th表位多肽(U546-561、U229-244、U237-251)、表位疫苗蛋白及rUreb均能够刺激表位疫苗致敏的小鼠淋巴细胞增殖(SI>2),并且此疫苗能够刺激机体产生特异性抗体。结论本研究中表位疫苗的设计方法能够使疫苗中包含的四个表位均发挥功能,并且具有较强的免疫原性,为研究Hp预防性和治疗性疫苗提供实验基础。

关键词：幽门螺杆菌尿素酶 b亚单位表位疫苗

检测肠产毒性大肠埃希菌GM_1-ELISA方法的建立

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华流行病学杂志 2005年第2期26卷 147-148页

作者：李波张锦海重庆三峡中心医院检验科 404000 南京军区联勤部军事医学研究所

肠产毒性大肠埃希菌(ETEC)是重要的致病因子不耐热肠毒素(LT),由一个具有5-腺苷二磷酸二钠盐(ADP)糖基化活性的A亚单位(LTA)和神经结苷脂(GM1)有特异性高亲和力的b亚单位(LTb)构成。

关键词： GM1 大肠埃希菌 LTb 毒性 ELISA方法 LTA 酶联免疫吸附法产毒亲和性 b亚单位

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

早期联合生化检测在异位妊娠中的诊断价值

现代妇产科进展 2007年第9期16卷 693-694页

作者：徐波罗来敏刘新春李莉佘蕴秀上海交通大学附属第六人民医院金山分院妇产科上海201500 上海交通大学附属第六人民医院妇产科

近年异位妊娠(ectopic pregnancy,EP)发病率呈上升趋势,早期诊断异位妊娠对降低死亡率和选择适当的治疗方法对提高患者以后的受孕率非常重要.目前,即使是宫内正常妊娠,在妊娠5周前b型超声诊断亦很难得到明确的妊娠囊图象,EP确诊更难以... 详细信息

近年异位妊娠(ectopic pregnancy,EP)发病率呈上升趋势,早期诊断异位妊娠对降低死亡率和选择适当的治疗方法对提高患者以后的受孕率非常重要.目前,即使是宫内正常妊娠,在妊娠5周前b型超声诊断亦很难得到明确的妊娠囊图象,EP确诊更难以在影像学上得到证据,只能试图通过一些生化检测指标作出判断[1].我们对目前较受关注的异位妊娠早期生化诊断指标,如血β-HCG、孕酮、CA125、白血病抑制因子、血管内皮生长因子等进行了系统分析探讨,以便为异位妊娠的早期诊断提供更多、更可靠的科学依据.

关键词：妊娠异位诊断绒毛膜促性腺激素 b亚单位人孕酮 CAl25 白血病抑制因子血管内皮生长因子

大肠杆菌LTKA63及LTb和霍乱弧菌CTb基因的克隆、表达和鉴定

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

大肠杆菌LTKA63及LTB和霍乱弧菌CTB基因的克隆、表达和鉴定

作者：夏肖萍浙江大学

学位级别：硕士

基因工程疫苗多以单一蛋白作为抗原，其免疫效果常不尽人意，通常需要使用佐剂来提高此类疫苗的免疫效果。霍乱肠毒素b亚单位(CTb)一直是效果较为公认的粘膜免疫佐剂，但近年文献报道重组CTb与抗原混合后诱导S-IgA产生的能力弱或... 详细信息

基因工程疫苗多以单一蛋白作为抗原，其免疫效果常不尽人意，通常需要使用佐剂来提高此类疫苗的免疫效果。霍乱肠毒素b亚单位(CTb)一直是效果较为公认的粘膜免疫佐剂，但近年文献报道重组CTb与抗原混合后诱导S-IgA产生的能力弱或无，但诱导血清IgG作用较强。CTb的佐剂活性主要依赖其与细胞表面神经节苷酯(GM)结合的活性。由于CTb主要通过激活Th2途径发挥其佐剂活性，但Th2途径可产生IL-4，IL-4能选择性地促进IgE合成，因而认为CTb可引起变态反应。大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)是近年报道较多的粘膜免疫佐剂，因其肠毒性而在实际应用中受到限制。LT分子结构与CT类似，一个A亚单位和五个相同的b亚单位组成。A亚单位具有ADP-核糖转移酶活性，是毒素的毒性部位。b亚单位能与哺乳动物细胞表面神经节苷脂GM结合，介导A亚单位进入靶细胞。不少研究结果证实，将LT第63位丝氨酸突变为赖氨酸的突变体(LTK63)的毒性几乎完全消失，但其免疫佐剂活性不变。很多文献报道，单一使用LTKA63或LTb也具有粘膜免疫佐剂活性。LTb的佐剂作用也依赖其与细胞表面神经节苷酯(GM)结合的活性，LTKA63的作用机制尚不清楚，但大部分研究者认为与其ADP-核糖转移酶活性无关。LT主要激活Th1途径，其次是Th2途径，故认为LT一般不引起浙江大学硕士学位论文中艾方要变态反应。令人感兴趣的是，LTKA63和LTb佐剂活性的作用机制不同，两者合用可能有协同效应。综上所述，LTK63、LTKA63或LTb较之CTb更适合作为D服基因工程疫苗的佐剂。实验方法 1．菌株来源及培养大肠杆菌4485株(ECOli 44815)购自中国药品生物制品检定所。将大肠杆菌44815 株接种于Lb琼脂平板上，37oC培养24 h。挑取单个菌落进行革兰染色镜检，若是革兰阴性、中等大小杆菌者，再次转种培养。加热灭活的霍乱弧菌乐74株培养物由浙江省医学科学院何浙生研究员提供。 2．细菌基因组DNA的制备采用常规的苯酚一氯仿法提取大肠秆菌 4481株与霍乱弧菌东 74株培养物的基因组 DNA，经无DNA酶的RNA酶消化后，再用苯酚一氯仿法提取的DNA溶于TE缓冲液中作为PCR的模板，用分光光度法测定DNA的浓度和纯度。 *** 根据报道的 LTA、LTb和 CTb基因序列设计引物，采用 PCR扩增 LTA、LTb和 CTb 基因，浚乙锭预染色的1．5％琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物。 LTA 基因扩增的引物序列：上游了CCG GAT ATC ATG AAA AAT ATA ACT TTC－3’(ECORV)，厂游 5’－CCG CMM TAT TCA TAA TTC ATC CCG－3’(Xhol)。反应体积 100 ql，内含 25 pmol引物、2．5 mol／L dNTP、20 mol／L MgCI，、3．0 U EX Taq酶、100 ng DNA 模板和IXP＊R缓冲液(pH8．8)。P＊R反应参数为：94℃sffi川XI cy。ie;94℃305，50℃ 305，72℃60 S，x10。wies：94℃祁S，5丁C30S，72℃70 S(以后每循环增加105)，X20＊吓1＊S： 720C10min，XI cycle。预期的LTA基因目的扩增片段人小为777hp。 LTb＄1lXllEJ791：x胁上游 5’－CCG pG AAT AAA GTA AAA TA－3’(ECOIU)，卜游5’－CCG CTMGAG CTA GT T TTC CAT ACT GA－3’(Xhol)。反应体积100 HI，内含 25 pmol引物、2．5 mol／L dNTP、20 mol／L MgCI。、30 U EX Taq酶、100 ng DNA模板和 1 XPCR缓冲液(pH88)。PCR反应参数为：94’C5min，XI Cycle;94”C30S，50’C305，72 ～2～一 ’C45S，X10cycles;94’C305，50’C305，72’C505(以后每浙增加SS)，X20cycles;72 C10min，XI cycle。预期的 Lh基因目的扩增片段人小为 375 hP。 CTbgnch上游了－CCGAfATGATTAAATTAAAAThTG－3’(ECOR！)，下游5’－CCG pATATC T TATA ATATT

关键词：大肠杆菌不热肠毒素 A亚单位/b亚单位霍乱弧菌肠毒素 b亚单位基因克隆表达载体/构建重组蛋白/表达 SDS-PAGE 琼脂免疫扩散试验 ELISA

应用纯化抗原检测唾液抗幽门螺杆菌抗体的研究

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

预防医学文献信息 2004年第2期10卷 184-185页

作者：王缚鲲冉向阳张林冯子坛陈兴安黎云王宪灵刘洁东解放军白求恩国际和平医院河北石家庄050082

[目的 ]探讨唾液相关抗体检测的临床意义。 [方法 ]以多株Hp超声上清、重组Hp热休克蛋白A亚单位(rHspA)纯品和重组Hp热休克蛋白尿素酶b亚单位 (rUreb)纯品混合物为抗原 ,采用ELISA方法对 98例患者的唾液和血清同时进行检测。 [结果 ]使... 详细信息

[目的 ]探讨唾液相关抗体检测的临床意义。 [方法 ]以多株Hp超声上清、重组Hp热休克蛋白A亚单位(rHspA)纯品和重组Hp热休克蛋白尿素酶b亚单位 (rUreb)纯品混合物为抗原 ,采用ELISA方法对 98例患者的唾液和血清同时进行检测。 [结果 ]使用rHspA和rUreb混合纯品进行检测 ,特异性和敏感性明显优于Hp超声上清。诊断Hp感染的优劣顺序为血清IgG、唾液IgG、血清IgA、唾液IgA。[结论 ]唾液的抗体检测可用于Hp感染诊断 ,尤其是唾液IgG抗体。

关键词：唾液诊断 Hp感染抗幽门螺杆菌超声抗体抗原检测 b亚单位血清Ig ELISA方法

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

志贺毒素保护性抗原的基因克隆与序列分析

生物技术通讯 2003年第4期14卷 285-287页

作者：邢洪光荫俊王慧侯晓军宋伟军事医学科学院微生物流行病研究所北京100071

根据Genbank报道的志贺毒素A、b亚单位基因序列设计合成两对引物,以Ⅰ型痢疾志贺菌的基因组为模板经PCR扩增获得3条DNA序列,将其分别插入pMD18-T载体,测序证明所获得的3条序列为志贺毒素A、b亚单位基因及其串联片段,与Genbank中相应序... 详细信息

根据Genbank报道的志贺毒素A、b亚单位基因序列设计合成两对引物,以Ⅰ型痢疾志贺菌的基因组为模板经PCR扩增获得3条DNA序列,将其分别插入pMD18-T载体,测序证明所获得的3条序列为志贺毒素A、b亚单位基因及其串联片段,与Genbank中相应序列比较,同源性分别为99.5%、100%和99.8%。通过计算机软件对所推测的氨基酸序列进行了蛋白质参数分析。志贺毒素保护性抗原基因的获得为志贺毒素的免疫学研究准备了必要的材料。

关键词：志贺毒素保护性抗原基因克隆序列分析表达 A亚单位 b亚单位

联合检测血清β-HCG、Prog、CA-125在异位妊娠的诊断和鉴别诊断中的应用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

国际检验医学杂志 2008年第7期29卷 629-629,631页

作者：杨延龙谢明水湖北省随州市中心医院 441300

目的探讨联合检测血清中β-HCG、Prog、CA-125三种物质的浓度含量对异位妊娠的诊断和鉴别诊断的价值。方法通过对100例患者的血清中β-HCG、Prog、CA-125三种物质进行联合检测,比较48h前后各标志物的变化。结果48h后统计发现联合检测血... 详细信息

目的探讨联合检测血清中β-HCG、Prog、CA-125三种物质的浓度含量对异位妊娠的诊断和鉴别诊断的价值。方法通过对100例患者的血清中β-HCG、Prog、CA-125三种物质进行联合检测,比较48h前后各标志物的变化。结果48h后统计发现联合检测血清中β-HCG增长明显低于50%;Prog、CA-125与健康孕妇比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论联合检测β-HCG、Prog、CA-125对异位妊娠者的诊断和鉴别诊断的准确率可以明显提高。

关键词：绒毛膜促性腺激素 b亚单位人 CA-125抗原妊娠异位临床实验室技术