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哮喘小鼠中髓样抑制细胞及arg-1、iNOs的表达

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中国免疫学杂志 2019年第22期35卷 2689-2693页

作者：余孟珠李莉薛菲单文琪吕剑平(指导) 汪雪峰(指导) 江苏大学附属医院儿科镇江212001 江苏大学附属医院中心实验室镇江212001

目的:探讨哮喘小鼠脾细胞中髓样抑制细胞(MDSCs)两个亚群所占有核细胞比例,以及在小鼠中精氨酸酶-1(arg-1)和诱导性一氧化氮合酶(iNOs)的表达水平。方法:将6~8周清洁级BALB/c雄性小鼠随机分为对照组(control)和哮喘组(OVA),给予哮喘组OV... 详细信息

目的:探讨哮喘小鼠脾细胞中髓样抑制细胞(MDSCs)两个亚群所占有核细胞比例,以及在小鼠中精氨酸酶-1(arg-1)和诱导性一氧化氮合酶(iNOs)的表达水平。方法:将6~8周清洁级BALB/c雄性小鼠随机分为对照组(control)和哮喘组(OVA),给予哮喘组OVA致敏和激发,建立哮喘小鼠模型,用PBS代替OVA给予对照组。最后1次激发后24 h内检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数及细胞分类计数;采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定小鼠血清中抗卵清蛋白(OVA)特异性IgE水平;小鼠肺组织HE染色,光镜下观察病理变化;流式细胞术检测小鼠脾细胞中MDSCs两个亚群所占有核细胞比例;用荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测小鼠脾细胞及肺组织中MDSCs产物arg-1、iNOs mRNA的表达水平;用Western blot方法检测小鼠肺组织中MDSCs产物arg-1、iNOs蛋白表达。结果:哮喘组小鼠肺部可见明显的炎性细胞浸润,与对照组相比,哮喘组BALF中细胞总数、嗜酸性粒细胞百分比及血清抗OVA特异性IgE明显增高(P1),而M-MDSC亚群无明显变化(P>0.05);哮喘组小鼠脾细胞及肺组织中arg-1 mRNA表达均增加(Parg-1 蛋白表达增加(Parg-1参与哮喘的发病。

关键词：哮喘髓样抑制细胞 arg-1 iNOs

arg-1及M2-TAM在卵巢浆液性肿瘤中的表达情况及其临床意义

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Arg-1及M2-TAM在卵巢浆液性肿瘤中的表达情况及其临床意义

作者：张洪秀兰州大学

学位级别：硕士

目的：通过检测CD163和CD204在不同卵巢浆液性肿瘤组织和癌旁组织中的表达情况及arg-1在不同卵巢浆液性肿瘤患者血清中的浓度差异,及其之间的相关性,进一步探讨M2-TAM与卵巢浆液性癌发生、发展的相关性及临床意义。方法：用酶联免疫法检... 详细信息

目的：通过检测CD163和CD204在不同卵巢浆液性肿瘤组织和癌旁组织中的表达情况及arg-1在不同卵巢浆液性肿瘤患者血清中的浓度差异,及其之间的相关性,进一步探讨M2-TAM与卵巢浆液性癌发生、发展的相关性及临床意义。方法：用酶联免疫法检测41例卵巢浆液性癌患者、22例良性肿瘤患者、15例正常对照者血清中arg-1的浓度,并通过免疫组化法检测不同卵巢组织中CD163和CD204的表达差异,通过Imagepro plus图像分析软件分析免疫组化的半定量,并结合临床病理因素进行分析。结果：①arg-1在卵巢浆液性癌患者血清中浓度高于良性肿瘤组及对照组,差异具有统计学意义(P值分别为0.000、0.000,P均163在卵巢正常组织及良性肿瘤阳性表达率分别为13.3%、22.7%;卵巢浆液性癌组阳性表达率为61.0%(25/41)。癌症组与良性组及正常组阳性率的差异具有统计学意义(P=0.009)。③CD204在卵巢正常组织及良性肿瘤阳性表达率分别为6.7%、31.8%;卵巢浆液性癌组阳性表达率为68.3%(28/41)。癌症组与良性组及正常组阳性率的差异具有统计学意义(P=0.026)。④CD163及CD204的阳性表达率在卵巢浆液性癌分别为60.1%、68.3%,癌旁组织中二者的阳性表达率分别为30.0%、35.0%。二者在卵巢浆液性癌和癌旁组织中阳性表达率的差异有统计学意义(P均小于0.05)。⑤CD163与CD204的阳性表达率与卵巢浆液性癌患者临床分期、病理分级、有无淋巴结转移有密切关系,各亚组之间阳性表达率差异具有统计学意义(P均小于0.05)。结论M2型肿瘤相关巨噬细胞可能与卵巢浆液性癌的发生与转移有密切关系,并且arg-1可能成为卵巢浆液性癌早期诊断的肿瘤标记物之一。

关键词：卵巢浆液性癌肿瘤相关巨噬细胞 arg-1 CD163 CD204

胶原诱导的关节炎小鼠髓样抑制细胞arg-1、iNOS的mRNA表达

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现代免疫学 2015年第3期35卷 210-213页

作者：王瑞王文红朱波许秋桂熊御云严佳婧舒扬焦志军江苏大学附属医院检验科中心实验室镇江市医学免疫学重点实验室镇江212001 江苏大学医学院病原生物学系镇江212013

探讨胶原诱导的关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)小鼠发病过程中骨髓和脾脏扩增的髓样抑制细胞(myeloidderived suppressor cells,MDSC)产物arg-1、iNOS的mRNA表达水平。应用牛II型胶原免疫DBA/1J小鼠诱导CIA模型,在第一次免疫后的第45天,采用流式细胞术分选小鼠骨髓和脾脏CD11b+Gr-1+的MDSC(纯度>98%),利用定量RT-PCR技术检测MDSC产物arg-1、iNOS的mRNA表达水平。结果发现,脾脏中,CIA小鼠MDSC细胞arg-1mRNA表达低于正常小鼠,而iNOS mRNA表达高于正常小鼠,二者差异均具有统计学意义(P均1)。CIA小鼠的骨髓MDSC细胞arg-1mRNA表达低于正常小鼠,而iNOS mRNA表达高于正常小鼠,但差异均无统计学意义(P均>0.05)。上述结果提示CIA小鼠骨髓和脾脏中的MDSC可能通过产生高水平的iNOS参与CIA的发病。

关键词：胶原诱导的关节炎髓样抑制细胞 arg-1 iNOS

日本血吸虫感染对高脂饮食小鼠肝组织arg-1和Fizz-1表达的影响

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日本血吸虫感染对高脂饮食小鼠肝组织Arg-1和Fizz-1表达的影响

作者：孙科安徽医科大学

学位级别：硕士

目的高脂饮食诱导肥胖C57BL/6J小鼠胰岛素抵抗,探讨日本血吸虫感染对肥胖C57BL/6J小鼠肝脏组织巨噬细胞选择性活化和系统性胰岛素抵抗的影响及可能机制。方法36只雄性C57BL/6J小鼠,随机分为正常对照(normal control,NC;n=12)组、高脂饮... 详细信息

目的高脂饮食诱导肥胖C57BL/6J小鼠胰岛素抵抗,探讨日本血吸虫感染对肥胖C57BL/6J小鼠肝脏组织巨噬细胞选择性活化和系统性胰岛素抵抗的影响及可能机制。方法36只雄性C57BL/6J小鼠,随机分为正常对照(normal control,NC;n=12)组、高脂饮食(high-fat diet,HF;n=12)组及高脂饮食复合日本血吸虫感染(high-fat diet with schistosoma japonicum infected,HSj;n=12)组。HF组经高脂饮食建立肥胖模型,HSj组经高脂饮食及日本血吸虫感染建立肥胖复合血吸虫感染模型。分别在血吸虫尾蚴感染第6周末及12周末时检测空腹血清葡萄糖(fasting peripheral blood glucose,FBG)及血清胰岛素(fasting plasma insulin,FINS)水平,并采用公式计算稳态模型评估的胰岛素抵抗指数(homeostasis model assessment index for insulin resistance,HOMA-IR);普通逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-RCR)和免疫组化法分别检测各组肝脏组织白介素-6(interleukin-6,IL-6)及选择活化型巨噬细胞的特异性标志物精氨酸酶-1(arginase-1,arg-1)、发现于炎症区域(found in inflammatory zone-1,Fizz-1)m RNA和蛋白表达情况。结果感染第6周末,HF组及HSj组小鼠体重较NC组平均体重增加>20%,饮食诱导的肥胖模型造模成功。感染第12周末,HSj组体重均低于HF组(P0.05)。感染第12周末,HF组FBG、FINS及HOMA-IR均显著高于NC组及HSj组(P0.05)。12周HF组HOMA-IR和FINS均显著高于6周(P0.05)。12周HSj组FBG、FINS及HOMA-IR均明显低于6周(Parg-1 m RNA表达低于NC组(Parg-1 m RNA表达由低到高依次为HF组、NC组、HSj组(P0.05),HF组arg-1蛋白的表达高于HSj组(Parg-1蛋白的表达HSj组最高,NC组次之,HF组最少(Parg-1相似。结论高脂饮食可建立C57BL/6J小鼠肥胖模型,该模型具有胰岛素抵抗的特征。肥胖小鼠肝组织中M1型巨噬细胞分泌炎症因子IL-6表达增高,M2型巨噬细胞特异性标志物arg-1和Fizz-1的表达降低,肥胖相关胰岛素抵抗小鼠存在M1型巨噬细胞极化。日本血吸虫感染晚期可以增强肥胖小鼠肝组织M2型巨噬细胞偏移,减轻肝脏的炎症反应(IL-6),改善胰岛素抵抗。

关键词：日本血吸虫 arg-1 Fizz-1 胰岛素抵抗

供肝NK细胞在同种异体器官移植免疫中的作用——供肝NK细胞对移植肝组织arg-1、iNOS蛋白表达的影响

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供肝NK细胞在同种异体器官移植免疫中的作用——供肝NK细胞对移植...

作者：黄永亨中山大学

学位级别：硕士

目的：建立大鼠肝移植急性排斥模型，观察外周血清TGF-β1、IFN-γ分泌水平和移植肝组织内arg-1、iNOS蛋白的表达的变化，探讨供肝NK细胞减轻肝移植术后急性排斥反应的机制。方法：以Lewis大鼠为肝移植供体、BN大鼠为受体，采用改良“... 详细信息

目的：建立大鼠肝移植急性排斥模型，观察外周血清TGF-β1、IFN-γ分泌水平和移植肝组织内arg-1、iNOS蛋白的表达的变化，探讨供肝NK细胞减轻肝移植术后急性排斥反应的机制。方法：以Lewis大鼠为肝移植供体、BN大鼠为受体，采用改良“二袖套”法建立大鼠肝移植模型，并应用Co射线照射清除供体免疫细胞以及经门静脉回输供肝NK细胞等技术，实验设立3个大组：A.急性排斥组(Lewis-BN);B.单纯Co照射排斥组(Lewis-BN+供体Co照射);C. Co照射+供肝NK门静脉回输排斥组(Lewis-BN+供体Co照射+受体门静脉输注供肝NK细胞)。分别于术后第1、3、7天收集外周血清用ELISA法检测TGF-β1和IFN-γ分泌水平，同时切取移植肝行病理学检查，Western Blot法检测移植肝arg-1蛋白和iNOS蛋白的表达。另外设亚组观察移植后自然生存时间。结果：3组间术后急性排斥反应程度和平均生存时间比较有统计学意义：移植术后第7天B组移植肝组织急性排斥反应程度较A组明显加重(RAI：8.50±0.22vs.6.0±0.36, P＜0.05)，平均生存时间B组也较A组明显缩短(13.75±1.532dvs.45±3.396d，P＜0.05)。但是，移植术后第7天C组移植肝组织急性排斥反应程度较B组明显减轻(RAI：7.33±0.21vs.8.50±0.22, P＜0.05),平均生存时间C组也较B组明显延长(26±5.092d vs.13.75±1.532d，P＜0.05)。实验结果提示供肝NK细胞经门静脉回输能减轻肝移植术后排斥反应，延长受鼠生存时间。 ELISA结果显示，术后第7天外周血清TGF-β1分泌水平B组明显低于A组和C组(11.0±0.57vs.28.0±6.08ng/ml，11.0±0.57vs.27.6±1.45ng/ml，P＜0.01)，但外周血清IFN-γ分泌水平B组明显高于A组和C组(383.21±9.82vs.112.76±4.24pg/ml,383.21±9.82vs.213.52±5.78pg/ml，P＜0.01)。实验结果提示，供肝NK细胞门静脉输注能引起移植受鼠外周血TGF-β1分泌水平升高和IFN-γ分泌水平降低，从而影响肝移植免疫反应。术后第7天移植肝组织中arg-1蛋白表达B组明显低于A组(arg-1/actine：0.687±0.04vs.0.487±0.03, P＜0.05)，但移植肝组织iNOS蛋白表达B组明显高于A组(iNOS/actine：0.05±0.01vs.0.23±0.03, P＜0.05);同时，术后第7天移植肝组织arg-1蛋白表达C组高于B组(arg-1/actine：0.487±0.03vs.0.605±0.08，P＜0.05)，移植肝组织iNOS蛋白表达C组低于B组(iNOS/actine：0.23±0.03vs.0.09±0.02，P＜0.05);实验结果提示，供肝NK细胞门静脉输注可能通过调节移植肝组织中arg-1蛋白和iNOS蛋白的表达水平，影响肝移植免疫反应的进程。结论： 1．供肝NK细胞减轻肝移植术后急性排斥反应的过程中，可以引起外周血细胞因子由Th1向Th2类偏移，即外周血IFN-γ和TGF-β1的表达水平可作为急性排斥反应的监测指标;2．供肝NK细胞对移植受体T细胞免疫功能的调节，可能与arg-1蛋白的表达上调和iNOS蛋白的表达下调，进而影响精氨酸的代谢过程有关。

关键词：供肝NK细胞 arg-1 iNOS 急性排斥反应肝脏移植大鼠

arg-1、HepPar-1、GPC3和AFP检测在肝细胞癌诊断中的价值

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诊断病理学杂志 2015年第10期22卷 598-601,605页

作者：成琳黄文斌赵有财赵建华王劲松南京中医药大学附属南京市中西医结合医院病理科南京210014 南京医科大学附属南京医院(南京市第一医院)病理科南京210006

目的观察arg-1、HepPar-1、GPC3和AFP在肝细胞癌中的表达,探讨它们在肝细胞癌(HCC)诊断中的价值。方法应用免疫组化En Vision法检测49例HCC和45例癌旁良性肝组织中arg-1、HepPar-1、GPC3和AFP的表达。结果 1arg-1、HepPar-1、GPC3和AFP... 详细信息

目的观察arg-1、HepPar-1、GPC3和AFP在肝细胞癌中的表达,探讨它们在肝细胞癌(HCC)诊断中的价值。方法应用免疫组化En Vision法检测49例HCC和45例癌旁良性肝组织中arg-1、HepPar-1、GPC3和AFP的表达。结果 1arg-1、HepPar-1、GPC3和AFP在HCC中的阳性率分别为75.5%、49%、69.4%和12.2%,在良性肝组织中的阳性率分别为86.7%、85.7%、0和4.1%,GPC3在HCC组织中的表达显著高于良性肝组织(P1);arg-1在HCC中的阳性率明显高于HepPar-1和AFP(P1,P0.05)。2arg-1和HepPar-1阳性率随着肿瘤分化程度降低而降低,而GPC3和AFP阳性率则随着肿瘤分化程度降低而升高,均无统计学意义(P>0.05)。3 3个指标中,arg-1是HCC最敏感的标记物,而GPC3是HCC最特异的标记物,arg-1和/或GPC3对HCC具有较高的敏感性和特异性。结论 arg-1是一种新的诊断肝细胞癌的标记物,GPC3是一种诊断HCC比较特异的标记物,arg-1和/或GPC3检测对HCC的诊断具有较高的敏感性和特异性。对于低分化HCC,建议行arg-1、HepPar-1、GPC3和AFP等抗体检测可提升诊断的准确性。

关键词：肝细胞癌 arg-1 HepPar-1 GPC3 AFP

温阳定喘汤对哮喘大鼠IL-4及arg-1表达的影响

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中文科技期刊数据库（文摘版）医药卫生 2024年第2期 0147-0150页

作者：赵芮琪李竹英黑龙江中医药大学黑龙江哈尔滨150040 黑龙江中医药大学附属第一医院黑龙江哈尔滨150040

探讨温阳定喘汤对哮喘大鼠BALF中IL-4及大鼠肺组织中的arg-1mRNA水平的影响。方法 Wistar大鼠40只,随机分为空白、模型、布地奈德及中药组各10只,后三组大鼠使用氢化可的松注射液、卵清白蛋白(OVA)及氢氧化铝造为阳虚型哮喘大鼠模型,分... 详细信息

探讨温阳定喘汤对哮喘大鼠BALF中IL-4及大鼠肺组织中的arg-1mRNA水平的影响。方法 Wistar大鼠40只,随机分为空白、模型、布地奈德及中药组各10只,后三组大鼠使用氢化可的松注射液、卵清白蛋白(OVA)及氢氧化铝造为阳虚型哮喘大鼠模型,分别给予生理盐水灌胃治疗、布地奈德雾化治疗以及中药温阳定喘汤灌胃治疗。采用酶联免疫吸附法检测大鼠肺泡灌洗液中IL-4的水平;采用实时荧光定量聚合酶链反应检测大鼠肺组织中arg-1mRNA表达水平。结果与空白组相比,模型组大鼠的肺泡灌洗液中IL-4水平明显升高(P0.05)。与空白组比较,模型组大鼠肺组织中arg-1mRNA表达升高(P0.05)。结论温阳定喘汤可以降低阳虚型哮喘大鼠BALF中IL-4及肺组织中arg-1mRNA水平,发挥缓解气道炎症的作用,其机制可能与调控巨噬细胞M2型极化相关。

关键词：温阳定喘汤支气管哮喘 IL-4 arg-1

复方五凤草液对家兔结核性溃疡iNOS、arg-1的影响

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中医外治杂志 2019年第3期28卷 5-8页

作者：黄子慧余洋钱佳燕朱思洵南京中医药大学附属南京市中西医结合医院

目的:探讨复方五凤草液对结核性溃疡iNOS、arg-1的影响。方法:将42只新西兰家兔随机分为七组:空白组,模型组,复方五凤草液高、中、低剂量组,异烟肼组,亲水性纤维含银辅料组,每组6只,隔天换药,分别于造模后0d、3d、7d、14d、21d观察创面... 详细信息

目的:探讨复方五凤草液对结核性溃疡iNOS、arg-1的影响。方法:将42只新西兰家兔随机分为七组:空白组,模型组,复方五凤草液高、中、低剂量组,异烟肼组,亲水性纤维含银辅料组,每组6只,隔天换药,分别于造模后0d、3d、7d、14d、21d观察创面组织、血清中iNOS、arg-1的变化。结果:①模型组较空白组相比,iNOS持续高表达,arg-1低表达,相比有统计学意义(P1)。②第3天,各组iNOS含量差异无统计学意义(P>0.05);第7天,空白组iNOS含量较前相比明显降低(P14、21天:各组与前一时间点相比iNOS含量均有统计学意义(Parg-1活性检测数值都呈现增高趋势(Parg-1含量差异无统计学意义(P>0.05);治疗第7天,空白组与其他各组相比有统计学意义(P14天,空白组、复方五凤草液高、中剂量组arg-1含量增高,与前一时间点相比有统计学意义(P1天,空白组、复方五凤草液高、中剂量组与其他各组相比arg-1含量增高明显(P1)。结论:结核性溃疡创面迟迟难愈可能与iNOS异常高表达而arg-1低表达相关,复方五凤草液可能是通过抑制iNOS过度表达并促进arg-1表达,从而促进愈合。

关键词：家兔结核性溃疡复方五凤草液 iNOS arg-1

The study on Macrophages polarization in mice infected with Echinococcus Granulosus

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The study on Macrophages polarization in mice infected with ...