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血管紧张素（1-7）对ox-lDl诱导的大鼠主动脉内皮细胞lOX-1、ICAM-1、VCAM-1表达的影响

血管紧张素（1-7）对ox-LDL诱导的大鼠主动脉内皮细胞LOX-1、ICAM...

引用

作者：杜宁辉山西医科大学

学位级别：硕士

目的:动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）是最常见的循环系统疾病之一,也是最常见的危害人类健康的疾病之一,主要特征为血管壁内皮细胞受到损伤导致脂质堆积、趋化炎症细胞聚集。其中氧化低密度脂蛋白（oxidized low-density lipoprote... 详细信息

目的:动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）是最常见的循环系统疾病之一,也是最常见的危害人类健康的疾病之一,主要特征为血管壁内皮细胞受到损伤导致脂质堆积、趋化炎症细胞聚集。其中氧化低密度脂蛋白（oxidized low-density lipoprotein,ox-lDl）是重要的危险因子之一,在内皮细胞功能障碍或受到损伤时ox-lDl可与其表面上的特异性受体血凝素样氧化低密度脂蛋白受体（lectin-like oxidized low-density lipoprotein receptor-1,lOX-1）相结合,诱导泡沫细胞的形成,从而启动动脉粥样硬化斑块的形成与发展。在这个过程中,血管细胞黏附分子-1（vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1）、细胞间黏附分子-1（intercellularcell adhesion molecule-1,ICAM-1）是很重要的两种黏附分子,它们参与多种病理、生理过程,会引起内皮细胞抗凝和抗黏附功能失调,从而加速AS形成。ang-（1-7）是新的肾素-血管紧张素系统成员之一,具有扩管、抗增殖,对心血管系统有着多方面的保护和调节作用。本研究拟在体外培养大鼠主动脉内皮细胞（SVAREC）,通过不同浓度ox-lDl诱导和在ox-lDl基础上加入ang-（1-7）诱导,观察内皮细胞前后增殖情况及lOX-1、VCAM-1、ICAM-1转录水平的动态改变及ang-（1-7）保护内皮细胞的可能机制。为更深入理解AS形成的分子机制以及寻找抗AS药物潜在的分子靶点。方法:1.实验用Cell Counting Kit（CCK-8）检测经ox-lDl组和ox-lDl+ang-（1-7）组处理后SVAREC细胞的增殖情况。2.实验用荧光实时定量聚合酶反应（RT-PCR）法检测经过ox-lDl组和ox-lDl+ang-（1-7）组处理后的SVAREC细胞lOX-1、VCAM-1、ICAM-1m RNA的表达水平。结果:1.用Cell Counting Kit（CCK-8）检测结果显示:①ox-lDl组:加入不同浓度的ox-lDl（加入浓度为10mg/l、20mg/l、50mg/l、100mg/l）和SVAREC细胞分组培养24h,发现其明显抑制SVAREC细胞的生长增殖。在0-100mg/l的浓度范围内,随ox-lDl药物浓度增加,ox-lDl实验组的细胞增殖抑制率逐渐升高,并呈现剂量依赖性关系,与同时间对照组相比较,它们之间的差异有统计学意义（P＜0.05）。②ox-lDl+ang-（1-7）组:实验组在加入终浓度为100mg/l的ox-lDl试剂的基础上,再分别加入ang-（1-7）浓度为10-9mol/l、10-8mol/l、10-7mol/l、10-6mol/l和SVAREC细胞分组培养24h后,随着ang-（1-7）浓度的升高,该组SVAREC细胞的生长抑制率逐渐降低,并呈现剂量依赖性,与同时间对照组相比较,它们之间的差异有统计学意义（P＜0.05）。2.实验用RT-PCR法检测结果显示:①ox-lDl组:加入不同浓度的ox-lDl（加入浓度为10mg/l、20mg/l、50mg/l、100mg/l）和SVAREC细胞分组培养24h后。在0-100mg/l的浓度范围内,随着ox-lDl的浓度升高,lOX-1、VCAM-1、ICAM-1m RNA的表达水平升高,与同时间对照组相比较,它们之间的差异有统计学意义（P＜0.05）。②ox-lDl+ang-（1-7）组:实验组在加入终浓度为100mg/l的ox-lDl试剂的基础上,再分别加入ang-（1-7）浓度为10-9mol/l、10-8mol/l、10-7mol/l、10-6mol/l和SVAREC细胞分组培养24h后,随着ang-（1-7）浓度的升高,随着ang-（1-7）的浓度升高,lOX-1、VCAM-1、ICAM-1m RNA的表达水平明显降低,与同时间对照组相比较,它们之间的差异有统计学意义（P＜0.05）。结论:1.ox-lDl能有效抑制SVAREC细胞生长,而ang-（1-7）能逆转ox-lDl所致的细胞生长抑制。2.ox-lDl能使lOX-1、VCAM-1、ICAM-1m RNA的表达水平升高呈剂量依赖性,ang-（1-7）使lOX-1、VCAM-1、ICAM-1m RNA的表达水平降低并呈剂量依赖性,提示在内皮细胞功能障碍或损伤时,ox-lDl可与其内皮细胞表面的特异性受体lOX-1相结合,促进黏附分子ICAM-1、VCAM-1的表达,从而促进AS的形成,而ang-（1-7）能有效逆转ox-lDl所致内皮损伤,ang-（1-7）可能对内皮细胞具有一定的保护作用。

关键词： ang-（l-7） ox-lDl lOX-1 ICAM-1 VCAM-1

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