检索结果-南通市图书馆

作者：杜启军延边大学

学位级别：硕士

背景：线粒体DNA(mitochodrial,mtDNA)是存在于细胞核外的遗传物质,其存在性是唯一的。现代科技研究后发现,mtDNA与多种肿瘤和多种遗传疾病的发生发展有关。mtDNA atpase6是线粒体基因组中编码复合体V的最大亚基基因,它与mtDNA atpase8... 详细信息

背景：线粒体DNA(mitochodrial,mtDNA)是存在于细胞核外的遗传物质,其存在性是唯一的。现代科技研究后发现,mtDNA与多种肿瘤和多种遗传疾病的发生发展有关。mtDNA atpase6是线粒体基因组中编码复合体V的最大亚基基因,它与mtDNA atpase8共同编码ATP合酶的F0部分。由于线粒体基因组编码的FO对能量的产生有导向作用,因此研究atpase6在乳腺导管癌组织中的突变及表达对了解乳腺导管癌的发生、发展以及肿瘤细胞的能量供应方式有一定的帮助。目的：1)检测浸润性乳腺导管癌mtDNA atpase6的基因突变情况,寻找特异性突变位点;2)检测mtDNA atpase6在浸润性乳腺导管癌中转录水平,探讨其在肿瘤发生、发展中尤其是在能量供应方面的作用。方法：采用聚合酶链反应(PCR)结合基因测序方法,对20例浸润性乳腺导管癌进行mtDNA atpase6基因的测序;采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),检测浸润性乳腺导管癌组织20例,癌旁组织20例的mtDNA atpase6的转录水平,同时用细胞核保守基因β-actin作为定量参考标准,比较mtDNA atpase6在癌组织及癌旁组织中的表达。结果：在20例乳腺导管癌组织的mtDNA atpase6基因中共发现11个碱基序列变异,其中6个为遗传多态性,5个碱基变异属于突变,突变频率达到5或5以上的变异位点3个,即：C8673T、A8729G、T8955C;研究对象中mtDNA atpase6的mRNA表达水平为癌组织atpase6/β-actin为0.732±0.137,癌旁组织atpase6/(3-actin为0.344±0.125,两者相比较有显著性统计学差异p=0.005atpase6的转录水平TNM-Ⅰ期低于TNM-Ⅲ期p6存在高突变位点C8673T、A8729G、T8955C,可能在乳腺导管癌的发生及发展中起着重要作用;2、浸润性乳腺导管癌中mtDNA atpase6的转录水平升高,是肿瘤细胞对能量高需求的一种表现;3、从能量供应角度考虑,mtDNAatpase6的转录水平升高为浸润性乳腺导管癌存在另一种能量供应方式提供依据。

关键词：乳腺导管癌线粒体DNA atpase6 突变表达

阿司匹林对大鼠脑缺血再灌注后线粒体UCP4和atpase6表达的影响

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阿司匹林对大鼠脑缺血再灌注后线粒体UCP4和ATPase6表达的影响

作者：郝君大连医科大学

学位级别：硕士

背景目的:脑缺血再灌注损伤(CI/RP)后,神经元细胞的损伤包括坏死和凋亡两种形式,线粒体作为细胞的“能源中心”,在这两种过程中都起着重要的作用。解偶联蛋白4(UCP4)和atpase6都是存在于线粒体内膜上的离子转运蛋白。UCP4激活后可以使... 详细信息

背景目的:脑缺血再灌注损伤(CI/RP)后,神经元细胞的损伤包括坏死和凋亡两种形式,线粒体作为细胞的“能源中心”,在这两种过程中都起着重要的作用。解偶联蛋白4(UCP4)和atpase6都是存在于线粒体内膜上的离子转运蛋白。UCP4激活后可以使氧化磷酸化与呼吸链解偶联,通过维持线粒体膜电位、调节细胞内Ca2+稳态、减少氧自由基(ROS)生成、影响ATP含量、调节神经元能量等机制起到神经保护作用。atpase6属于ATP合成酶F0复合体,是ATP生成的必要环节,其变化直接影响ATP的合成。阿司匹林(ASA)是经典的抗甾体药物,近年来发现,ASA具有神经保护作用:包括增加ATP产量,抑制谷氨酸释放,改善脑组织的能量代谢,抑制iNOS表达和促进nNOS表达,抑制NF-κB的激活,清除自由基,增强cdk5/P53活性,抑制离子通道,阻止Zn2+内流等。我们以前的研究证明,ASA抑制凋亡途径中的Fasl和caspase-3,上调Bcl-2/bax,抑制炎症反应以及增加脑组织内源性神经营养因子如BDNF、NGF、bFGF、neurgulin等的表达。本实验目的是,观察大鼠脑缺血/再灌注(CI/RP)损伤后线粒体UCP4和atpase6的表达规律及其ASA对其表达的影响,探讨ASA神经保护作用的线粒体机制。方法:采用改良Zea Longa线栓法建立大鼠大脑中动脉(MCA)的CI/RP动物模型。CI/RP后6h,Bederson神经功能缺损评分在1～3分的大鼠为阳性入选标准,其他大鼠排除在外。部分大鼠脑切片行TTC染色,证实模型成功。依照再灌注时间分为A(0h)、B(6h)、C(24h)、D(48h)、E(72h)5个ASA组及相应的对照组(A’～B’)。ASA组于CI/RP术后立即腹腔注射ASA 80mg/kg.d作为干预因素,直至预定的处死时间;对照组腹腔注射等量的赖氨酸溶液。各时间点对实验动物进行神经功能缺损评分,HE染色后光镜下观察缺血后不同时间点梗死侧病理改变,利用免疫组化及免疫荧光法观察UCP4和atpase6的表达情况。结果:CI/RP后ASA组及对照组术后6h开始,大鼠肢体功能均有不同程度的恢复,ASA组肢体功能恢复情况优于对照组,但是只在72h点有显著差异(Patpase6在大脑皮质及海马神经元内广泛表达,定位到线粒体,主要位于神经元胞浆内,在梗死灶周边区可见强阳性细胞及大量阳性细胞聚集。对照组,UCP4于CI/RP后6h在梗死中心区表达最强(Patpase6自缺血2h后就低于正常侧,在各时间点呈明显的下降趋势,CI/RP后24h下降最显著;ASA组,atpase6的变化趋势与对照组相似,但是,各时间点的阳性细胞数均高于相应对照组,24h时最明显,强阳性细胞数最多(Patpase6的含量未见明显影响。结论:1. ASA能够明显改善脑缺血后大鼠的神经功能缺损。2.脑缺血后,线粒体UCP4的表达增加,atpase6的表达呈下降趋势。3. ASA可以增加缺血侧脑组织线粒体内UCP4和atpase6的表达,对非缺血侧脑组织线粒体内UCP4和atpase6表达未见明显影响。4.增加缺血脑组织线粒体UCP4和atpase6的表达可能是ASA神经保护机制之一。

关键词：阿司匹林神经保护解偶联蛋白4 atpase6 线粒体

长爪沙鼠atpase8,atpase6,COX3基因的克隆及序列分析

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中国比较医学杂志 2011年第7期21卷 6-12页

作者：李长龙柯贤福卢领群郭红刚萨晓婴浙江省医学科学院浙江省实验动物中心杭州310013

目的对长爪沙鼠线粒体atpase8,atpase6,COX3基因全序列进行测定,并对其进行鉴定及进化分析。方法根据长爪沙鼠已知基因序列设计引物,采用PCR产物测序法,对目的片段进行测序鉴定。结合已公布啮齿类动物atpase8,atpase6,COX3基因序列,分析其碱基组成、遗传距离、并基于最小进化法和UPGMA法构建系统进化树。结果获得长爪沙鼠线粒体atpase8,atpase6,COX3基因全序列,其与家鼠、小家鼠和仓鼠均具有较高的同源性(76～98%);进化分析结果显示,长爪沙鼠与家鼠、黑家鼠和仓鼠遗传距离较近;碱基G的含量分别为6.9%,10.7%,15.2%,符合mtDNA的特点;A+T含量分别为68.2%,64.1%,59.2%,明显低于G+C含量,符合哺乳动物的特点。结论本研究为首次获得长爪沙鼠atpase8,atpase6,COX3基因全序列,长爪沙鼠与家鼠、黑家鼠和仓鼠具有较近遗传距离,本研究为长爪沙鼠进化研究、线粒体的结构和功能研究奠定基础。

关键词：长爪沙鼠 atpase8 atpase6 COX3 克隆进化分析

氯化镉对小鼠睾丸指数及其线粒体atpase6、D-Loop基因突变的影响

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癌变．畸变．突变 2009年第6期21卷 452-454,459页

作者：楼哲丰管敏强陈忠义曹琼洁阮冬芬金龙金温州医学院生物学实验教学中心浙江温州325027 温州医学院实验动物中心浙江温州325027 温州医学院生命科学学院浙江温州325027

背景与目的:研究氯化镉对睾丸指数及睾丸细胞线粒体atpase6、D-Loop基因突变的影响。材料与方法:取40只体重(19.5±2.5)g的雄性ICR小鼠,随机分为4组,每组10只,分别以1、5、10μmol/kg氯化镉腹腔注射,隔天注射1次,共10次,同时设阴性对照... 详细信息

背景与目的:研究氯化镉对睾丸指数及睾丸细胞线粒体atpase6、D-Loop基因突变的影响。材料与方法:取40只体重(19.5±2.5)g的雄性ICR小鼠,随机分为4组,每组10只,分别以1、5、10μmol/kg氯化镉腹腔注射,隔天注射1次,共10次,同时设阴性对照组(生理盐水)。第21天取小鼠双侧睾丸称重并计算睾丸指数;提取睾丸组织基因组DNA,PCR扩增线粒体atpase6、D-Loop基因,纯化后测序分析基因突变。结果:10μmol/kg氯化镉组睾丸指数显著低于对照组(Patpase6、D-Loop基因的突变。结论:10μmol/kg浓度的氯化镉可致小鼠睾丸指数降低,氯化镉短期处理(21 d内)未能引起小鼠睾丸线粒体atpase6、D-Loop基因突变。睾丸指数与细胞线粒体atpase6、D-Loop基因突变可能不存在相关性。

关键词：氯化镉睾丸指数 atpase6 D-Loop 小鼠

^(60)Coγ射线对人线粒体COXI和atpase6表达水平的影响

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辐射防护通讯 2013年第4期33卷 38-42页

作者：刘红艳刘建功赵佳辉张忠新段志凯中国辐射防护研究院太原030006

目的观察60Coγ射线对人外周血线粒体COXI和atpase6基因和蛋白质水平表达的影响,探讨线粒体编码基因用于辐射生物剂量估算的可行性。方法采用60Coγ射线照射正常人离体外周血,照射剂量率为1.013 Gy/min,剂量分别为0、0.2、0.4、0.6、0.8... 详细信息

目的观察60Coγ射线对人外周血线粒体COXI和atpase6基因和蛋白质水平表达的影响,探讨线粒体编码基因用于辐射生物剂量估算的可行性。方法采用60Coγ射线照射正常人离体外周血,照射剂量率为1.013 Gy/min,剂量分别为0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 Gy,。照后6小时,用RT-PCR技术检测基因的表达水平,用流式细胞仪检测蛋白质的表达水平,分别拟合最佳回归方程,建立剂量-效应曲线。结果(1)0~3.0 Gy,COXI基因表达水平的最佳回归方程为Y=0.629+0.256D(r2=0.920,patpase6基因表达水平的最佳回归方程为Y=0.221+0.805D(r2=0.912,patpase6蛋白质表达水平与照射剂量间的关系不明显,不能拟合出最佳回归方程。结论60Coγ射线照射人离体外周血,随着照射剂量的增加,线粒体COXI的基因与蛋白质表达水平一致,呈增加趋势,且有良好的线性关系,有望用于辐射生物剂量的估算。

关键词：生物剂量计线粒体基因蛋白质细胞色素C氧化酶 atpase6

葱白提取物对非酒精性脂肪肝模型大鼠atpase6、atpase8表达的影响

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天津中医药 2018年第12期35卷 939-942页

作者：郑丁时昭红郭洁张书付丽鹤刘凡涂蓓蕾湖北中医药大学武汉430065 武汉市中西医结合医院武汉430022

[目的]观察葱白提取物对非酒精性脂肪肝(NAFLD)模型大鼠ATP合酶Fo亚基6(atpase6)、ATP合酶Fo亚基8(atpase8)表达的影响,并探讨其作用机制。[方法]将50只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、葱白低剂量组、葱白中剂量组、葱白高剂量组,每... 详细信息

[目的]观察葱白提取物对非酒精性脂肪肝(NAFLD)模型大鼠ATP合酶Fo亚基6(atpase6)、ATP合酶Fo亚基8(atpase8)表达的影响,并探讨其作用机制。[方法]将50只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、葱白低剂量组、葱白中剂量组、葱白高剂量组,每组10只。采用高脂饮食喂养复制NAFLD模型大鼠,造模10周后,给予葱白提取物连续干预4周后,测定血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)的含量;苏木精-伊红(HE)染色法观察肝脏组织结构变化;Real time PCR检测大鼠肝脏组织中atpase6、atpase8 mRNA的表达。[结果]与正常组比较,模型组出现明显肝脂肪变性,血清ALT、AST、TC、TG水平明显升高(Patpase6、atpase8 mRNA的表达明显降低(Patpase6、atpase8 m RNA表达不同程度升高(Patpase6、atpase8 mRNA水平明显升高(Patpase6、atpase8的表达,增加肝线粒体ATP合成有关。

关键词：葱白提取物非酒精性脂肪肝 atpase6 atpase8

急性缺血缺氧大鼠肠上皮细胞线粒体atpase6基因的表达研究

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中国病理生理杂志 2001年第11期 74-74页

历山中国大鲵线粒体片段序列的测定及其遗传差异研究

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大连海洋大学学报 2012年第6期27卷 513-517页

作者：黄立群仪慧兰崔松林郭军山西大学生命科学学院山西太原030006 中国辐射防护研究院山西太原030006 山西省水产科学研究所山西太原030006

对山西历山2尾野生大鲵Andrias davidianus mtDNA中Cyt b和atpase 6基因的部分序列进行了检测,并与GenBank中收集的14尾外地样本进行比较,用Mega 5.0软件对305 bp Cyt b片段和371 bp atpase 6片段进行分析。结果表明:Cyt b片段有10个不... 详细信息

对山西历山2尾野生大鲵Andrias davidianus mtDNA中Cyt b和atpase 6基因的部分序列进行了检测,并与GenBank中收集的14尾外地样本进行比较,用Mega 5.0软件对305 bp Cyt b片段和371 bp atpase 6片段进行分析。结果表明:Cyt b片段有10个不同的单倍型,共检测出14个变异位点,占核苷酸总数的4.58%,其中有12个简约信息位点;atpase 6片段有13个不同的单倍型,检测出30个变异位点,占核苷酸总数的8.09%,其中有18个简约信息位点,Cyt b比atpase 6更为保守,但两序列中碱基组成均表现为鸟嘌呤缺乏(<18.9%),且多数变异发生在密码子第3位。合并序列构建的分子系统树表明,历山大鲵与陕西、四川及部分湖南个体聚为一支,历山大鲵与广西样本的遗传距离最远,与四川、陕西样本的遗传距离较近。

关键词：中国大鲵历山地区 Cyt b atpase6 mtDNA

乳源免疫调节肽（PGPIPN）防治酒精性脂肪肝的研究

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乳源免疫调节肽（PGPIPN）防治酒精性脂肪肝的研究

作者：杨浩然安徽医科大学

学位级别：硕士

目的研究乳源免疫调节肽（PGPIPN）对酒精性脂肪肝（AFL）动物及细胞模型的防治作用，探讨乳源免疫调节肽对酒精性脂肪肝的保护作用及可能的机制。方法 1.体内实验 60只昆明种雄性小鼠，随机均分为对照组、模型组、护肝片（0.3g/kg）组... 详细信息

目的研究乳源免疫调节肽（PGPIPN）对酒精性脂肪肝（AFL）动物及细胞模型的防治作用，探讨乳源免疫调节肽对酒精性脂肪肝的保护作用及可能的机制。方法 1.体内实验 60只昆明种雄性小鼠，随机均分为对照组、模型组、护肝片（0.3g/kg）组、PGPIPNⅠ组、Ⅱ组和Ⅲ组。采用梯度酒精灌胃的方法建立小鼠酒精性脂肪肝（AFL）模型,造模的同时给予药物干预，共12周。实验结束后，处死小鼠，收集血清和肝脏。测定小鼠肝指数(LI)、脾指数(SI)、血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白（LDL-C）及高密度脂蛋白（HDL-C）和肝组织中甘油三酯（TG）、丙二醛（MDA）含量，超氧化歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）含量和三磷酸腺苷(ATP)含量;常规HE染色和特染油红O染色观察肝组织脂肪变性情况。RT-PCR测各组小鼠肝组织atpase6、ACC、PPAR-γ mRNA表达;Western Blot检测各组小鼠肝组织PPAR-γ、ACC蛋白的表达水平。 2．体外实验培养人永生化的正常胎肝LO2细胞株，建立酒精损伤细胞模型。采用MTT法筛选酒精诱导LO2脂肪变性的适宜浓度(0.15%、0.3%、0.6%、1.2%、2.4%、4.8%)，选择最适浓度的PGPIPN对其进行干预，光学显微镜观察不同组别油红O染色情况，全自动生化仪检测细胞培养基中ALT、AST酶泄露量，以及各组细胞内TG水平。结果 1、PGPIPN对AFL动物模型的影响：PGPIPN各剂量组均能明显降低AFL小鼠LI和SI水平、血清中ALT和AST的活性，减少血清中TG、TC、LDL-C及HDL-C和肝组织中TG、MDA含量，升高SOD和GSH-PX活性;同时，病理组织学检查结果显示，PGPIPN各剂量组小鼠肝脏中小泡性脂肪变性程度明显减轻。与对照组比较，模型组atpase6、PPAR-γ mRNA表达降低，ACC表达增强;与模型组比较，PGPIPN各剂量组atpase6、PPAR-γ mRNA表达升高，ACC表达减弱。与对照组相比，模型组PPAR-γ蛋白表达显著增强，ACC表达减弱;与模型组相比，PGPIPNⅠ组PPAR-γ蛋白表达显著减弱，ACC表达增强。（P＜0.01or P＜0.05） 2、PGPIPN对乙醇损伤LO2细胞的影响：MTT结果显示在一定浓度范围PGPIPN能改善体外LO2细胞的AFL损害。用MTT法筛选出乙醇浓度0.6%为最适浓度。与模型组比较，PGPIPN各剂量组脂肪变性面积随给药浓度的增加而减小;ALT、AST、TG含量均减少。（P＜0.01or P＜0.05）结论 1、PGPIPN可通过提高机体抗氧化能力抵抗AFL所致的氧化应激，维持线粒体的正常功能;抗氧化活性是PGPIPN发挥拮抗AFL的机制之一。 2、PGPIPN抗酒精性脂肪肝的作用可能与其显著减弱atpase6、PPAR-γ mRNA和PPAR-γ的蛋白水平，以及增强ACC mRNA与蛋白的表达水平有关。 3、PGPIPN对AFL的发生发展有一定的干预作用，对其有一定的防治功效。

关键词：乳源免疫调节肽酒精性脂肪肝脂质过氧化肝脏脂肪变性小鼠 LO2细胞 atpase6 ACC PPAR-γ