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新疆医科大学学报 2023年第10期46卷 1273-1277页

作者：古丽妮尕尔·司马义伊力亚斯·艾萨张金佩刘世玉席庆米娜新疆医科大学基础医学院生物化学教研室乌鲁木齐830017 新疆维吾尔医学专科学校新疆和田848000 新疆医科大学基础医学院生物学教研室乌鲁木齐830017 新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院乌鲁木齐830054

目的探讨自噬相关基因2(Autophagy-related gene 2,atg2)对人骨肉瘤U2OS细胞增殖和迁移的影响。方法蛋白质免疫印迹法鉴定两组细胞,即腺病毒介导CRISPR/Cas9系统靶向剪切AAVS1位点的基因未敲除组(AAVS1细胞)和atg2ab基因双敲除组(atg2... 详细信息

目的探讨自噬相关基因2(Autophagy-related gene 2,atg2)对人骨肉瘤U2OS细胞增殖和迁移的影响。方法蛋白质免疫印迹法鉴定两组细胞,即腺病毒介导CRISPR/Cas9系统靶向剪切AAVS1位点的基因未敲除组(AAVS1细胞)和atg2ab基因双敲除组(atg2ab DKO细胞);细胞划痕实验和Transwell小室法检测两组细胞的迁移能力;CCK-8法和细胞平板克隆形成实验检测两组细胞的增殖能力。结果 atg2ab DKO细胞在24、48及72 h的光密度值(OD值)均较对照AAVS1细胞有所降低,但在72 h时,两种细胞的OD值差异有统计学意义(Patg2ab DKO细胞形成的克隆数量少于对照组AAVS1细胞(6.33±2.31 vs15.00±1.00),差异有统计学意义(Patg2ab DKO细胞创面愈合率(0.22±0.05)%显著低于对照组AAVS1细胞(0.82±0.05)%,差异有统计学意义(Patg2ab DKO细胞穿过Transwell小室的细胞数量显著减少(308.11±64.68 vs 79.78±48.95)(Patg2基因敲除有效抑制U2OS细胞的迁移和增殖等生物学功能,atg2基因可能在人骨肉瘤发展中发挥重要作用。

关键词： atg2 U2OS细胞细胞增殖细胞迁移

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渔业科学进展 2023年第5期44卷 137-152页

作者：祝孟茹问露洁占铭公洁席昌俊闻海波沈怀舜南京农业大学无锡渔业学院江苏无锡214081 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业农村部稻鱼综合养殖生态重点实验室江苏无锡214081

为了解自噬相关基因atg2在克氏原螯虾(Procambarus clarkia)先天免疫中的作用,本研究克隆了克氏原螯虾atg2(Pcatg2)基因全长序列。生物信息学分析显示,Pcatg2蛋白编码序列全长为9966 bp,推测其编码2189个氨基酸。组织定量表达分布显示,P... 详细信息

为了解自噬相关基因atg2在克氏原螯虾(Procambarus clarkia)先天免疫中的作用,本研究克隆了克氏原螯虾atg2(Pcatg2)基因全长序列。生物信息学分析显示,Pcatg2蛋白编码序列全长为9966 bp,推测其编码2189个氨基酸。组织定量表达分布显示,Pcatg2在克氏原螯虾的各个组织中均有表达,其中在肝胰腺中表达最高,在眼柄中表达最低。在白斑综合征病毒(WSSV)感染实验中,Pcatg2基因表达量在不同组织中均呈现显著上调趋势。RNA干扰(RNAi)实验显示,Pcatg2基因沉默后,WSSV在克氏原螯虾体内的增殖明显被抑制,同时,自噬相关基因的表达量上调。透射电镜分析结果显示,在WSSV感染后,Pcatg2基因沉默组中克氏原螯虾肝胰腺组织中的自噬小体多于对照组。本研究结果可为了解克氏原螯虾应对WSSV胁迫下的调控机制提供理论参考。

关键词：克氏原螯虾 atg2 基因克隆 WSSV RNA干扰

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Lipids and membrane-associated proteins in autophagy

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Protein & Cell 2021年第7期12卷 520-544页

作者： Linsen Li Mindan Tong Yuhui Fu Fang Chen Shen Zhang Hanmo Chen Xi Ma Defa Li Xiaoxia Liu Qing Zhong State Key Laboratory of Animal Nutrition Ministry of Agriculture Feed Industry CentreCollege of Animal Science and TechnologyChina Agricultural UniversityBeijing 100193China Key Laboratory of Cell Differentiation and Apoptosis of Chinese Ministry of Education Department of PathophysiologyShanghai Jiao Tong University School of MedicineShanghai 200025China

Autophagy is essential for the maintenance of cellular homeostasis and its dysfunction has been linked to various *** is a membrane driven process and tightly regulated by membrane-associated ***,we summarized membrane lipid composition,and membrane-associated proteins relevant to autophagy from a spatiotemporal *** particular,we focused on three important membrane remodeling processes in autophagy,lipid transfer for phagophore elongation,membrane scission for phago-phore closure,and autophagosome-lysosome membrane *** discussed the significance of the discoveries in this field and possible avenues to follow for future ***,we summarized the membrane-associated biochemical techniques and assays used to study membrane properties,with a discussion of their applications in autophagy.

关键词： autophagy membrane-associated proteins membrane-associated biochemistry assays atg2 ESCRT lipid transfer elongation scission fusion

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突变自噬相关基因atg7/2修复拟南芥热敏感突变体的机理研究

突变自噬相关基因ATG7/2修复拟南芥热敏感突变体的机理研究

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作者：葛晶晶山东师范大学

学位级别：硕士

随着全球气候变暖,植物耐热性研究的意义日益突出。迄今,植物耐热性的重要成果主要来源于对模式植物拟南芥热敏感突变体的研究。本实验室前期研究发现,atg7突变能修复fes1a耐热性缺陷,在此基础上,本课题进行了atg7突变能修复fes1a耐热... 详细信息

随着全球气候变暖,植物耐热性研究的意义日益突出。迄今,植物耐热性的重要成果主要来源于对模式植物拟南芥热敏感突变体的研究。本实验室前期研究发现,atg7突变能修复fes1a耐热性缺陷,在此基础上,本课题进行了atg7突变能修复fes1a耐热性缺陷的机理研究。首先,比较分析了六种拟南芥热敏感突变体的热敏感性,即hot1、apx2、fes1a、hsfa7a、hop1-2-3及hsp70-15。实验结果表明,hot1热敏感性最高,fes1a热敏感性仅次于hot1位居第二,apx2、hsfa7a和hop1-2-3的热敏感性基本相同,但均低于fes1a,共同位居第三,而hsp70-15的热敏感性最低。利用这些热敏感突变体,通过杂交繁育,获得培育atg7和热敏感基因的双突变体。对双突变体的热敏感性测试结果表明,atg7突变不但能修复fes1a耐热性缺陷,而且还能修复hot1、apx2和hsfa7a多种热敏感突变体的耐热性缺陷,说明atg7突变能广泛地修复热敏感突变体。转录组数据表明,与fes1a相比,atg2 fes1a和atg7 fes1a的IAA合成相关的醛氧化酶基因(AAO1)和吲哚乙腈水解酶基因(NIT2)均显著上调,前者介导IAA合成中的TAM途径,后者在IAOX途径中负责将吲哚-3-乙腈(IAN)水解成IAA。此外,实验结果还表明,在热胁迫恢复期fes1a幼苗中IAA含量显著低于atg7 fes1a,外施植物激素IAA能提高fes1a的耐热性。在atg7 fes1a双突变的基础上,利用突变杂交方法,培育了atg7 fes1a aao1和atg7 fes1a nit2三突变体,以期进一步探究atg7突变修复fes1a的耐热性缺陷的机制中所涉及的IAA合成通路。本课题的主要创新点:1、本研究涉及到的热敏感突变体的热敏感性有明显差异;2、atg7突变能修复多种热敏感突变体,植物细胞自噬是植物抗热的不利因素;3、热敏感突变体fes1a中内源激素IAA的含量显著低于atg7 fes1a双突变,自噬导致fes1a突变体IAA含量下降,且外施IAA能部分修复fes1a耐热性缺陷。

关键词：热敏感突变体耐热性 atg2 atg7 IAA

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