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apaap免疫印迹技术对抗副流感病毒1，3型单克隆抗体识别抗原表位的研究

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中国免疫学杂志 1994年第6期10卷 353-355页

作者：张励力韩洪彦段佩若李明刚李成文刘芳中国人民解放军第262医院实验科军事医学科学院微生物流行病研究所

副流感病毒１，３型（ＰａｒａｉｎｆｌｕｅｎｚａＶｉｒｕｓｔｙｐｅ１，３：ＰＩＶ＿１．３）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）应用免疫印迹技术（Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ）识别抗原表位特性。结果表明：ＰＩＶ＿１．３抗原经还原剂处... 详细信息

副流感病毒１，３型（ＰａｒａｉｎｆｌｕｅｎｚａＶｉｒｕｓｔｙｐｅ１，３：ＰＩＶ＿１．３）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）应用免疫印迹技术（Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ）识别抗原表位特性。结果表明：ＰＩＶ＿１．３抗原经还原剂处理后，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ５％～１５％梯度胶电泳，能分辨二十多条清晰的蛋白带。转印后采用碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶复合物（ＡＰＡＡＰ）染色，本底浅，呈玫瑰红色带，优于ＨＲＰ染色结果。ＰＩＶ＿１的５株ＭｃＡｂ：ＩＣ＿５、ＩＨ＿６、ＩＨ＿２、ＩＣ＿１０、３Ｄ＿５分别与６８ｋＤ～５０ｋＤ、６８ｋＤ、５８ｋＤ～２７ｋＤ、５５ｋＤ～５０ｋＤ、５０ｋＤ对应ＰＩＶ＿１的蛋白质抗原表位起反应。ＰＩＶ＿３的６株ＭｃＡｂ：２Ａ＿１０、５Ｇ＿３、２Ｄ＿１１、２Ｅ＿１０、２Ｂ＿１２、４Ｆ＿１２与７０ｋＤ、６８ｋＤ、６０ｋＤ～５０ｋＤ、５５ｋｐ～４０ｋＤ、５５ｋＤ、４０ｋＤ对应的蛋白质抗原表位特异结合，说明ＰＩＶ＿１．３的１１株ＭｃＡｂ同对应抗原表位点的结合分布较广，有利于对ＰＩＶ＿１．３抗原的快速、敏感、特异检测。

关键词： apaap 免疫印迹技术单克隆抗体副流感病毒

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apaap—ELISA试验条件的优选

中国免疫学杂志 1991年第5期7卷 298-302页

作者：卢秀桂白炎彭善云军事医学科学院基础医学研究所北京100850

报导了apaap—ELISA的影响因素,优选了实验最佳条件,在此基础上完成了与传统ELISA的平行对比实验,指出了apaap—ELISA之优缺点,强调了发展和推广该技术急需克服的问题。

关键词： apaap ELISA 试验条件

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apaap桥联酶标技术

第三军医大学学报 1991年第2期13卷 171-172页

作者：李增鹏大坪医院病理科

当前免疫组化技术由于方法上的不断改进和革新,正以惊人的速度向前发展。多年来在实际应用中大多数人都采用辣根过氧化物酶作用于底物呈现颜色,但用碱性磷酸酶、抗碱性磷酸酶(简称apaap)者少有报道。我室在使用该试剂后,经反复试验和对... 详细信息

当前免疫组化技术由于方法上的不断改进和革新,正以惊人的速度向前发展。多年来在实际应用中大多数人都采用辣根过氧化物酶作用于底物呈现颜色,但用碱性磷酸酶、抗碱性磷酸酶(简称apaap)者少有报道。我室在使用该试剂后,经反复试验和对比取得了满意的染色效果。现介绍如下:

关键词： apaap 免疫组化技术染色

抗碱性磷酸酶单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立及其apaap的制备与初步鉴定

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免疫学杂志 1992年第3期8卷 141-144页

作者：欧阳斌刘燕史良如卫生部武汉生物制品研究所武汉430060

本文报道用碱性磷酸酶Sigma Ⅰ型粗酶免疫Balb/c小鼠,采用酶联免疫吸附反应筛选细胞融合后杂交瘤培养上清,最后获7株稳定分泌抗碱性磷酸酶单抗的杂交瘤细胞株,对其中6株进行了特性鉴定。取其中1株AAP1/323腹水制成apaap试剂盒,应用于EL... 详细信息

本文报道用碱性磷酸酶Sigma Ⅰ型粗酶免疫Balb/c小鼠,采用酶联免疫吸附反应筛选细胞融合后杂交瘤培养上清,最后获7株稳定分泌抗碱性磷酸酶单抗的杂交瘤细胞株,对其中6株进行了特性鉴定。取其中1株AAP1/323腹水制成apaap试剂盒,应用于ELISA和免疫组化染色表明:该试剂盒灵敏度高,本底低,无内源性酶干扰现象,对比好,背景清晰,结果容易判断,能满足临床检测的要求。

关键词： AAP apaap 免疫组织化学染色

分泌高效价抗碱性磷酸酶McAb杂交瘤系的建立及其在apaap免疫组化研究中的应用

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中国免疫学杂志 1991年第5期7卷 275-277页

作者：赵宁刘雪松黄传书田方金伯泉薛采芳陈伯虹舒翠玲第四军医大学免疫学教研室西安710032

用碱性磷酸酶长程多途径免疫BALB/C小鼠,采用反向间接ELISA法筛选融合孔上清,获得2株稳定分泌抗碱性磷酸酶McAb杂交瘤细胞株,腹水效价比国外报道高15～30倍,在apaap免疫组化检测CD抗原、病毒抗原、肿瘤抗原以及细菌菌毛抗原等研究中均... 详细信息

用碱性磷酸酶长程多途径免疫BALB/C小鼠,采用反向间接ELISA法筛选融合孔上清,获得2株稳定分泌抗碱性磷酸酶McAb杂交瘤细胞株,腹水效价比国外报道高15～30倍,在apaap免疫组化检测CD抗原、病毒抗原、肿瘤抗原以及细菌菌毛抗原等研究中均获得满意结果。

关键词：单克隆抗体 apaap 杂交瘤

应用碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶(apaap)技术作急性髓性白血病的免疫分型

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国际输血及血液学杂志 1991年第6期 397-398页

作者：应江山

大约20％急性白血病单用形态学和细胞化学不能正确分型。免疫分型检查可弥补上列局限性。作者在常规准备的外周血和骨髓血膜上应用碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶技术和间接免疫荧光法(TF)对31例

关键词：碱性磷酸酶白血病血癌免疫分型 apaap

腺病毒3、7型单抗制备及用于IFA和apaap快速诊断

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单克隆抗体通讯 1993年第4期9卷 68-70页

作者：段佩若张励力韩洪彦张容惠赵华林京李明刚解放军262医院临床实验科北京100080

人类的腺病毒(Adenovirus Adv)至今已发现42个血清型,其中AdV 3、7型在人群中流行最为广泛,是引起婴幼儿肺炎和成人呼吸道感染的重要致病原。Adv肺炎的婴儿,病情重,病死率高,且75％的患儿出现持续高热,具有较强的传染性。为了临床快速... 详细信息

人类的腺病毒(Adenovirus Adv)至今已发现42个血清型,其中AdV 3、7型在人群中流行最为广泛,是引起婴幼儿肺炎和成人呼吸道感染的重要致病原。Adv肺炎的婴儿,病情重,病死率高,且75％的患儿出现持续高热,具有较强的传染性。为了临床快速诊断此病,作者制备出Adv-McAb,运用apaap桥联法和IFA法,同时对180例标本进行抗原检测,获满意效果。

关键词：腺病毒单克隆抗体制备 apaap

应用apaap光镜技术发现两株HFRSV敏感细胞中HFRSV包涵体

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中国病毒学 1991年第3期6卷 197-200页

作者：黄传书金伯泉汪美先刘健赵宁第四军医大学免疫学教研室西安710032 第四军医大学中心实验室

本文应用抗HFRSV McAb的apaap(碱性磷酸酶—抗碱性磷酸酶)免疫组化技术,首次用光镜在HFRSV感染8—14天的Hep-2和wish细胞中查出病毒包涵体,并且根据其位置和形态特征可分为:(1)中央型包涵体;(2)外周型包涵体;(3)脱落包涵体。上述所见包... 详细信息

本文应用抗HFRSV McAb的apaap(碱性磷酸酶—抗碱性磷酸酶)免疫组化技术,首次用光镜在HFRSV感染8—14天的Hep-2和wish细胞中查出病毒包涵体,并且根据其位置和形态特征可分为:(1)中央型包涵体;(2)外周型包涵体;(3)脱落包涵体。上述所见包涵体均在电镜下得到证实。此结果对于了解HFRSV感染细胞后的致病变作用以及研究HFRSV感染细胞包涵体的特征、来源、性质和形成过程具有十分重要的意义。

关键词： HFRSV apaap 包涵体

大鼠McAb在apaap技术检测小鼠T细胞分化抗原中的应用

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单克隆抗体通讯 1990年第1期6卷 55-56页

作者：伊纯德赵宁申小梅刘崟黄传书金伯泉大连沈阳军区军医学校微生物学教研室大连116013 第四军医大学免疫学教研室西安710032 解放军323医院中心实验室

碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶(apaap)免疫组化技术已广泛用于人淋巴细胞分化抗原,病毒抗原的检测。由于目前抗碱性磷酸酶McAb(AAP)是小鼠源性的,因此所用的Ab1都是小鼠源性的,利用兔或羊抗小鼠IgG作为桥抗,形成抗原-Ab1-桥抗-apaap复合物,... 详细信息

碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶(apaap)免疫组化技术已广泛用于人淋巴细胞分化抗原,病毒抗原的检测。由于目前抗碱性磷酸酶McAb(AAP)是小鼠源性的,因此所用的Ab1都是小鼠源性的,利用兔或羊抗小鼠IgG作为桥抗,形成抗原-Ab1-桥抗-apaap复合物,通过底物呈色,显示出抗原阳性的细胞。至今尚未见有大鼠源性McAb在apaap组化技术中应用的报道。本文介绍一种大鼠源性McAb为Ab1,兔抗小鼠γ为桥抗的apaap免疫组化方法。

关键词： T细胞单克隆抗体 apaap